常用免疫组化试剂介绍

常用免疫组化试剂介绍

一、用于鉴别诊断

(一)上皮源性：

1. 细胞角蛋白/cytokeratin.CK：

目前，商品化的细胞角蛋白有20多种，不同的分子量代表不同类型的上皮标志。通常将CK分为两大类型：Ⅰ型（低分子量）；Ⅱ型（高分子量）。理论上讲，大多数单层上皮表达低分子量的CK；复层上皮多表达高分子量的CK；移形上皮（膀胱）和假复层上皮（呼吸道的被覆上皮）既表达低分子量的CK，也表达高分子量的CK。

在癌组织中，低分子量的CK多在腺癌中表达，高分子量的CK多在鳞癌中表达。目前为止，未发现任何一种上皮只含有一种CK，某些上皮可含2-10种不同分子量的CK。因此，目前试图应用单一的CK免疫表型来确定某种特定的上皮性肿瘤是不可能的。同样，应用CK来区别腺癌、类癌和间皮瘤也是困难的。因此，CK的免疫组化结果判断是一个较为复杂的问题，在应用这类标记物作为腺癌和鳞癌的鉴别应特别注意。有必要时，应联合用多种CK加以综合判断。

CK的阳性表达还包括有间变癌、双向分化的滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉瘤、胸腺瘤等。

CK的阴性表达有：副节瘤单向分化的滑膜肉瘤、软骨（肉）瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤（除特殊类型外）。

在判断CK免疫组化结果时应注意几点：

（1） CK的单克隆抗体优于多克隆抗体；

（2） CK常出现斑点状的假阳性反应，应注意识别；

（3）虽然大多数CK多在胞浆表达，但CK17多在胞核表达；

（4）绝大多数CK抗体需用胰酶消化，可增加阳性表达率和染色强度；（5）部分非上皮性肿瘤（平滑肌肉瘤）可见有CK表达，在诊断时应注意；

（6）淋巴结、扁桃体和脾组织中的滤泡外的网织细胞含有CK8和18以及desmin,在判断淋巴结转移癌和肌源性肉瘤转移时应根据组织学综合判断。

2.上皮膜抗原（epithelial membrane antigen/EMA）：

EMA是上皮细胞分泌的一种乳脂小球膜糖蛋白，广泛存在于人体各种上皮细胞中（也存在于间皮细胞、浆细胞、组织细胞和T细胞淋巴瘤中），其分布与角蛋白相似，但对内脏腺上皮优于细胞角蛋白，尤其是分化差的癌EMA有时可呈强阳性表达。

EMA可作为上皮源性肿瘤的常用标记物。EMA阳性表达的肿瘤有鳞癌、胃肠道腺癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤、滑膜肉瘤、甲状腺乳头状癌、上皮样肉瘤等。

在判断EMA免疫组化结果时应注意几点：

（1） EMA虽然是上皮细胞非常敏感的标记，但一些非上皮性肿瘤（如浆细胞、组织细胞和T细胞淋巴瘤）也可阳性表达。因此在癌和其他间叶性肿瘤鉴别时不能作为唯一的参考标记；

（2） EMA对内脏上皮源性肿瘤的敏感性优于体表上皮源性肿瘤，因此在腺癌中的表达明显高于鳞癌。

3.桥粒蛋白：是上皮细胞特有的结构，是一种广谱的上皮性标记。鳞癌、腺癌、移形细胞癌、未分化癌和间皮瘤、尤文氏肉瘤表达。

在判断桥粒蛋白免疫组化结果时应注意几点：

（1）桥粒蛋白也可在心肌、脑膜瘤、卵巢的颗粒细胞瘤和淋巴结的网织细胞中表达；

（2）甲状腺间变癌阳性表达率低；

（3）冰冻切片效果优于石蜡切片。

（二）间叶源性肿瘤的标记

1.波形蛋白Vimentin：

是一种52-58的胞浆蛋白。主要分布于间叶细胞及其起源的肿瘤，是间叶细胞及其肿瘤的特异性标记。横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤和非肌源性软组织肿瘤如纤维肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、恶纤组、精原细胞瘤、雪旺氏瘤和骨肿瘤Vimentin是一个关键标记。此外，血管球瘤、颗粒细胞肌母细胞瘤、淋巴瘤、白血病和恶黑等均可有Vimentin表达。在判断Vimentin免疫组化结果时应注意几点：

（1）部分肿瘤（如间皮瘤、滑膜肉瘤、乳腺癌、肺腺癌等）除Vime ntin（+）表达外，可同时又有cytokeratin的表达。应结合其组织学形态加以诊断。

（2）福尔马林固定的组织标本，vimentin 假阴性并不少见，冰冻切片酒精固定的组织可提高其敏感性和可靠性；

（3） vimentin不能单独用于软组织肿瘤的诊断，多提倡与其他特异性标记物联合使用。

2.结蛋白desmin：

是一种分子量为50-55ku的细胞浆蛋白，胚胎和成人横纹肌或平滑肌及其肿瘤均可表达。子宫、皮肤、胃肠道及其他部位的平滑肌多呈（+）表达。现已发现desmin在良性肿瘤的阳性率和染色强度明显高于恶性肿瘤；高分化的平滑肌肉瘤和染色强度明显高于低分化的平滑肌肉瘤。 Suster报道5例皮肤是上皮性平滑肌肉瘤均为（-），而actin 和v imentin均为（+）反应。因此目前认为，多应用配套抗体，即与其他肌源性抗体联合应用，不能只根据desmin (-)来排除平滑肌肉瘤的诊断。

在判断desmin免疫组化结果时应注意几点:

（1）非常原始的肌源性肿瘤常不表达 desmin;

（2）某些非肌源性肿瘤也有desmin 表达，如纤维肉瘤、恶纤组、腺泡状软组织肉瘤和个别腺癌

（3）常规福尔马林固定、石蜡包埋的低分化横纹肌肉瘤可能表现假（-）结果；

（4） desmin不能用于区别横纹肌肉瘤还是平滑肌肉瘤；

（5）血管平滑肌不表达desmin。

3.肌动蛋白Actin：

是一种具有收缩能力的微丝蛋白，几乎分布于所有的肌型细胞，根据其结构形式的不同，至少有6种不同的类型，即横纹肌型、心肌型、

平滑肌型（两种）和非肌源型（两种）。目前商品化的Actin包括有肌肉型（HHF35），在心肌、平滑肌和横纹肌细胞及其肿瘤中均有表达，尤其在低分化的横纹肌肉瘤和平滑肌肉瘤中的表达，其敏感性和特异性均比desmin高;Actin肌源节型，主要用于横纹肌及其肿瘤的诊断；Actin平滑肌型（Smooth Muscle），主要用于平滑肌及其肿瘤（肉瘤）的诊断。

在判断 actin免疫组化结果时应注意几点：

（1）三种在肌源性肿瘤的诊断意义上，尚不能作为一个独立的诊断指标，因为三者之间存在交叉反应；

（2）一些非肌源性肿瘤也可有Actin（+）表达，如皮肤、口腔、喉、涎腺肿瘤以及星形细胞瘤等；

（3）部分器官和组织的非肌上皮细胞也有Actin（+）表达，如肺、食管、胃、十二指肠、膀胱的上皮细胞和肝脏、肾、胎盘以及胰岛细胞等；

（4） HHF35也可标记肌上皮细胞，但其敏感性和特异性均不如平滑肌型actin；

（5）福尔马林固定的组织，部分病例可有一些非特异性染色。

4.肌红蛋白myoglobin：

myoglobin被认为是存在于正常横纹肌和横纹肌肿瘤中的一种分子量为17.8ku的胞浆蛋白，可作为横纹肌肉瘤的特异性标记。

在判断myoglobin免疫组化结果时应注意几点：

（1）虽然myoglobin有较高的特异性，但要注意其假（+）反应，尤