霉菌酵母菌检测方法国标
化妆品中霉菌和酵母菌检测方法
霉菌和酵母菌检测1范围本规范规定了化妆品中霉菌和酵母菌数的检测方法。
本规范适用于各种化妆品中霉菌和酵母菌的总数测定。
2定义本规范采用下列定义。
霉菌和酵母菌总数是指化妆品检样在一定条件下培养后，1g或1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落总数，藉以判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。
本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性，在虎红培养基上，置28℃培养72h，计算所生长的霉菌和酵母菌数。
3仪器和设备3.1恒温霉菌培养箱：28℃。
3.2振荡器。
3.3天平。
3.4三角瓶。
3.5试管。
3.6试管架。
3.7平皿：直径90mm。
3.8刻度吸管：1mL、2mL、10mL。
3.9量筒。
3.10酒精灯。
3.11高压灭菌器。
4培养基和试剂4.1生理盐水4.2虎xx(xxxx)培养基成分：蛋白胨5g葡萄糖10g磷酸二氢钾1g硫酸镁(含7H2O)0.5gxx20g虎红溶液100mL(四氯四碘荧光素)蒸馏水1000mL氯霉素100mg制法：将上述前5种成分加入蒸馏水中溶解后，再加入虎红溶液。
分装后，103.43kPa(15lb)20min高压灭菌。
另用少量乙醇溶解氯霉素，过滤除菌后，加入培养基中，若无氯霉素，可用链霉素代替，每1000mL培养基加链霉素30mg。
5操作步骤5.1样品稀释：用灭菌吸管吸取1:10稀释的检液2mL，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1mL。
另取1mL注入到9mL灭菌生理盐水试管中(注意勿使吸管接触液面)，更换一支吸管，并充分混匀，制成1:100检液。
吸取2mL，分别注入到两个灭菌平皿内，每皿1mL。
如样品含菌量高，还可再稀释成1:1000，1:100，……等，每种稀释度应换1支吸管。
5.2取1:10的检液2mL分别注入2个灭菌平皿内，每皿1mL（若菌量较多时可顺序再做10倍稀释），另取1个灭菌空平皿（作空白对照），每皿分别注入融化并冷至45℃左右的虎红培养基约15mL，充分摇匀。
霉菌、酵母菌总数测定(培训用)
3.6 ×103 CFU/g
标准值 查看“产品标准值”表，填写
单项检验结论
符合（或不符合）
备注
检验人员：填写准考证号
检验日期：填写考试当天日期
关于实测结果的填写
若所有稀释度平板上的菌落数都为“0”，则实测结果为 ＜1×最低稀释倍数计算。
若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内 （10~150CFU），计算两个平板菌落数的平均值，再将 平均值乘以相应的稀释倍数，作为每克中菌落总数结果。Βιβλιοθήκη 固体10mL
样
品
10-
1
吹吸50次， 1mL
10-
2
吹吸5次， 1mL
10-
3
吹吸5 次，
1mL
1mL
灭 菌 蒸 馏 水
25g+225m L灭菌蒸馏水
10-1
-1
-2
-3
空白
-1
-2
-3
空白
提示：样品加入稀释液管后，要先吹吸， 后取1mL样液加入培养皿。
在培养皿中加入孟加拉红培养基（15~20mL），轻摇 培养皿，使试样与培养基混匀。
固体样品存放罐
固体样品称量
用镊子取酒精棉擦手，点燃酒精灯； 打开稀释瓶盖，放在天平上，等显示屏上的数字稳定
后，按“去皮”键，当数字显示为“0”时，开始称量。
去 皮 键
取（带上试管架）： 装有灭菌蒸馏水的锥形瓶1个 装有9mL 灭菌蒸馏水的试管3支 空试管1支
从培养皿筒中取出培养皿。
培
养
取出
皿
筒
培 养 皿
在培养皿上编号
提示：培养皿上的标记为稀释倍数。
固体样品：稀释倍数为10-1、10-2、10-3
霉菌、酵母检验
霉菌、酵母菌检验（一）实验原理霉菌和酵母菌菌数的测定是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g 或1mL检样中所含的霉菌和酵母菌菌落数（粮食样品是指1g粮食表面的霉菌总数）。
（二）实验器材1.培养基：马铃薯－葡萄糖－琼脂培养基马铃薯（去皮切块）300 g葡萄糖20.0 g琼脂20.0 g氯霉素0.1 g蒸馏水1000 mL制法：将马铃薯去皮切块，加1000mL蒸馏水，煮沸10 min－20 min。
用纱布过滤，补加蒸馏水至1000 mL。
加入葡萄糖和琼脂，加热溶化，分装后，121 ℃灭菌20 min。
倾注平板前，用少量乙醇溶解氯霉素加入培养基中。
2.器皿：已灭菌的平皿（9套/组），1mL吸管（6支/组），试管（15×150）（6/组），三角锥瓶500mL、三角锥瓶500mL（内装蒸馏水250mL），10mL吸管。
3.其他：牛皮纸或报纸，酒精灯，棉花，高压蒸汽菌锅，电烘箱，线绳，毛刷等。
（三）操作步骤1.检验程序2.操作要点1）采样选取有代表性的样品并避免采样时的污染。
2）样品处理（1）以无菌操作称取检样25mL，放入含有225mL灭菌水的玻塞三角瓶中，振摇30 min，即为1:10稀释液。
（2）用灭菌吸量管吸取1:10稀释液10mL，注入试管中，另用带橡皮乳头的1mL 灭菌吸量管反复吹吸50次，使霉菌孢子充分散开。
（3）取1mL 1:10稀释液注入含有9mL灭菌水的试管中，另换一支1mL灭菌吸量管吹吸5次，此液为1:100稀释液。
（4）按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL灭菌吸量管。
3）接种培养根据对样品污染情况的估计，选择3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿，然后将凉至45 ℃左右的培养基注入平皿中，待琼脂凝固后，倒置于25－28℃温箱中，3d后开始观察，共培养观察5d。
4）计算方法通常选择菌落数在10－150之间的平皿进行计数，一个稀释度使用两个平板，采用两个平板的平均数；选择稀释度也选择平均菌落数在10－150之间的稀释度，菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克（或毫升）检样中所含霉菌和酵母数。
霉菌和酵母菌检测
霉菌和酵母菌检测方法
GB 4789.15-2010
一、稀释
1、无菌吸管吸取25ml样品至装有225ml无菌蒸馏水的无菌锥形瓶中，充分混
匀。
2、吸取1ml混匀的样品，缓慢注入装有9ml稀释液的无菌试管中（枪头不要
接触液面），混匀。
3、按步骤2制备10倍系列稀释样品，每次更换无菌枪头。
4、根据估计，选择合适的2~3个样品匀液，吸取1ml至无菌平皿，每个梯度
做两个平皿，同时用1ml稀释液做空白对照。
5、将15~20ml冷却至46℃左右的马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基倾注平皿，转动
混匀。
二、培养
1、琼脂凝固后倒置28℃±1℃培养5d，观察记录。
三、计数
1、选择菌落数在10~150之间的平皿，根据菌落形态分别计算霉菌和酵母数。
霉菌蔓延生长整个平板记录多不可计。
菌落数应采用两个平皿的平均数。
四、报告
1、计算两个平皿菌落的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数计算。
2、若所有平皿菌落数均大于150，则对稀释度最高的平皿进行计算，其他平皿
可记录为多不可计，结果按最高稀释倍数计算结果报告。
3、若所有平皿菌落数小于 10，则对稀释度最低的平皿进行计算。
4、若所有平皿均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释度计算，如为原液，
则以小于1计算。
5、小于100菌落数时，四舍五入原则取两位有效数字。
大于或等于100菌落
数时，第三位四舍五入原则，取前两位，剩余位数为0。
6、空白对照有菌落生长，结果无效。
GB 4789.15霉菌和酵母计数
培养过头的酵母菌落
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培养过头的霉菌菌落
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培养 过头的 霉菌 菌落
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霉菌和酵母计数
稀释平板法最常用于食品样 品的检验。样品处理等方法见国家 标准，与细菌的菌落总数计数方法 大致相同。事实上，可以在进行菌 落总数计数的同时，进行霉菌和酵 母总数的检验。两者之间的差异为 稀释液、培养基和培养温度的不同。
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食品安全国家标准 食品微生物学检验
霉菌和酵母计数
National food safety standard Food microbiological examination: Enumeration of moulds and yeasts
6.3 取1 mL1:10稀释 液注入含有9 mL灭
菌水的试管中，另 换一支1 mL灭菌吸 管吹吸5次，此液为 1:100稀释液。
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5 操作步骤
5.1 样品的稀释
5.1.4 按5.1.3操作程 序，制备10倍系列稀 释样品匀液。每递增 稀释一次，换用1次1 mL无菌吸管。
霉菌和酵母计数
实验时手脚要快，动作宜轻， 培养过程中观察平板时，动作稍重， 生长快速的霉菌孢子就会在培养基 内扩散，导致二次污染，结果异常。 一般以第五天的读数为最终计数。 但观察应持续七天。
霉菌酵母菌检测方法国标
霉菌酵母菌检测方法国标
根据国家标准GB 4789.15-2016，食品实验室检测霉菌酵母菌的方法包括以下步骤：
1. 倾注培养法：使用无菌吸管吸取25mL样品至盛有225mL无菌稀释液（蒸馏水或生理盐水或磷酸盐缓冲液）的适宜容器内（可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）或无菌均质袋中，充分振摇或用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液。
取1mL 1:10样品匀液注入含有9mL无菌稀释液的试管中，另换一支1mL无菌吸管反复吹吸，或在旋涡混合器上混匀，此液为1:100的样品匀液。
按此操作制备10倍递增系列稀释样品匀液。
每递増增稀释一次，换用1支1mL无菌吸管。
选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于2个无菌平皿内。
同时分别取1mI无菌稀释液加入2个无菌平皿作空白对照。
置水平台面待培养基完全凝固。
2. 镜检：挑取有代表性的菌落做镜检，要慎之又慎。
不同的形态的菌落做镜检，如使用倾注法，同一种酵母可能会出现不同的形态。
因此，挑取有代表性的菌落做镜检，我们要慎之又慎。
不则可能会做重复工作或漏检。
霉菌和酵母计数
霉菌和酵母计数1、原理、定义、目的：霉菌和酵母数的测定是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1ml检样中所的霉菌和酵母菌落数（粮食样品是指1g粮食表面的霉菌总数）。
霉菌和酵母数主要作为判定食品被污染程度的标志，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
本方法适用于所有食品。
2.仪器设备与器具：参照大肠杆菌群的检测标准。
3.试剂：3.1 霉菌和酵母菌培养基的配置：3.1.1 称取30g虎虹琼脂培养基加入蒸馏水1000ml，摇动灭菌。
3.1.2 以棉塞或硅胶塞，牛皮纸包封好瓶口，3.1.3 置于高压杀菌釜内，以116℃30分钟灭菌。
3.1.4 取出培养基自然冷却至不烫手后（约45℃）备用。
3.2稀释液：8.5g氯化钠溶于1000ml蒸馏水中，高压灭菌121℃、15分钟。
4.测定方法：4.1.检样稀释及培养：4.1.1以无菌操作将检样25g（ml）放于含有225 ml灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内（瓶内预放置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳体内，经充分震摇或研磨成1：10的均匀稀释液。
4.1.2用1 ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1 ml，注入含有9ml灭菌生理盐水的试管内，用定量加液器在试管内鼓气三至四次使其混合均匀，作成1：100的稀释液。
4.1.3另取1ml灭菌吸管，按上述操作依次作10倍递增稀释液，每递增一次，换用一支1 ml灭菌吸管。
4.1.4根据食品卫生标准要求或对污染情况的估计，选取三个适宜稀释度，分别在10倍递增的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1 ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度做二个平皿。
4.1.5培养皿上分别注明样品编号，稀释度等。
4.1.6稀释液移入平皿后，注入冷却到45℃虎红琼脂约15 ml，水平徐徐震摇，使培养基检液混合均匀后，同时将虎红琼脂培养基倾入加有1 ml稀释液的灭菌平皿内做空白对照。
4.1.7待虎红琼脂凝固后，翻转平板，置25至28℃培养箱中培养3天后观察，共培养观察五天。
菌落总数、霉菌和酵母菌总数等微生物检验方法
菌落总数、霉菌和酵母菌总数等微生物检验方法下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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霉菌及其酵母菌
1、样品的稀释培养
（1）以无菌操作将检样25mL(或25g)放于含
有225mL灭菌蒸馏水的三角瓶中，振摇30min，
即为1：10稀释液。
（2）用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1mL，
沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌蒸馏水的试管内，
振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。
（3）另取1mL灭菌吸管，按上项操作顺序，
制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换
用1支1mL灭菌吸管。
（4）根据标准要求或对污染情况的估计，选
择3个适宜稀释度，分别在制10倍递增稀释的
同时，以吸取该稀释度的吸管移取1mL稀释液
于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿。
及时将15mL～20mL 冷却至46℃的马铃薯-葡 萄糖-琼脂或孟加拉红培养基(可放置于 46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿，并转 动平皿使其混合均匀。 待琼脂凝固后，将平板倒置，28℃±1℃培养 5d，观察并记录。
制片镜检观察，可见分生孢子梗很粗糙。顶囊 呈烧瓶形或近球形。分生孢子在小梗上呈链状着 生，分生孢子的周围有小突起、球形、粗糙。 制片镜检观察，可见分生孢子梗很粗糙。顶囊呈 烧瓶形或近球形。分生孢子在小梗上呈链状着生 ，分生孢子的周围有小突起、球形、粗糙。
二、黄曲霉毒素检测方法
可归纳为化学方法、生物学方法和免疫学方法 三大类。 1、生物学方法 1. 抑菌试验 通过平皿中抑菌圈大小来衡量AFT含量 2. 荧光测定法 将待检菌株接种于培养基中，28—30 ℃培养48 ～72h，产生的毒素便浸入培养基中，在紫外灯光 下照射培养基会呈现出特异的荧光。此法操作简便 对AFT最低检出量为5pg/mL(拷贝数/毫升)。 3. 动物试验 大白鼠试验法、鸡胚试验、鸭雏试验
食品微生物能力验证霉菌酵母菌计数—检验方法比较
食品微生物能力验证霉菌酵母菌计数—检验方法比较霉菌酵母菌在自然界中分布极广，种类繁多，食品中易受到不同程度的污染。
食品中霉菌酵母菌的增殖一般会导致营养价值下降、酸败变味或外观恶化等，影响货架期及口感，若霉菌、酵母菌含量较高，且日摄入量较多，会影响人体肠胃内的微生物平衡，甚至造成肠胃不适，可能引起疾病发生。
霉菌对干食品的最大风险主要是在适宜的条件下(产毒株、数量、温度、湿度、水分活度等），能产生霉菌的有毒代谢产物—霉菌毒素，引起过敏反应等各种急、慢性中毒及可能的致癌作用。
因此，人们愈来愈重视食品中霉菌及酵母菌污染对人体造成的危害。
在我国国家部分食品产品及卫生标准中，把霉菌和酵母菌作为常见指示菌进行监测和控制，如饮料、坚果制品、米面制品、糕点类等食品。
霉菌和酵母的检测被列入国标4789 系列食品安全微生物常规检测项目之一 , 霉菌酵母菌的检验方法看似简单，但由于食品种类繁多成分复杂，食品中存在的霉菌种类较多，对环境温湿度及营养成分的要求有所不同，要在同等条件下把所有的霉菌培养出来，反映出样品的真实情况，实属不易，且霉菌前期生长速度缓慢，后期菌丝急剧增加，特别是毛霉的蔓延，给霉菌和酵母菌的同时计数带来一定的困难，如何能更准确、快速提离食品中霉菌检测数目是食品卫生部门面临的一个严峻问题。
能力验证是利用实验室间的比对判定实验室的特定校准、检测能力，以考察实验室检验能力的外部质量活动,组织方提供试验的样本，一般会考虑增加检测难度。
为了更准确更全面得出能力验证结果，本实验室综合了多种方法进行同步检测，主要是考虑霉菌、酵母菌总数检测是通过平板中生长的菌落数目直接计数推算，培养基的质量和培养方式直接影响了检测的结果，因此，选择两种常用的霉菌酵母培养基，采用正置和倒置培养法进行试验，比较分析不同培养基、不同培养方式对霉菌酵母菌计算结果的差异，进而得出较为准确的试验结果进行上报。
2 材料与方法2.1 样品能力验证样品：中国检验检疫科学研究院测试评价中心提供，样品编号为15-G068。
霉菌酵母菌检验
用灭菌吸量管吸取1∶10稀释液10mL，注入试管中，另用带橡皮乳头的1mL灭菌吸量管反复吹吸50次，使霉菌孢子充分散开。
取1mL1∶10稀释液注入含有9mL灭菌水的试管中，另换一支1mL灭菌吸量管吹吸5次，此液为1∶100稀释液。
（3）如大于或等于100时，则报告前面两位有效数字，第三位数按四舍五入计算。
（4） 称重检样以克CFU/g为单位报告，体积取样以毫升CFU/ml为单位报告
三、霉菌直接镜检计数法
（1）流程
取样→称样→稀释→调节视野→涂片→观察→记录→计算 4步骤
（2）检样制备
取定量检样，加蒸馏水稀释至折光指数为1.344～1.3460（即浓度为7.9～8.8％）。用糖度计或折光仪测定折光指数或浓度，如果折光指数过大或过小，须加水或样品，直至配成标准样液，才能进行检验。
菌落计数
根据试验结果，报告检测结果试样中酵母菌数是微生物指标≤20cfu/ml产品合格
（注：可编辑下载，若有不当之处，请指正，谢谢!）
霉菌数（％）＝ ×100％
举例：记录的阳性视野数，片1为15，片2为16，
则样品的霉菌数为： 样品霉菌数（％）＝ ×1/2×100％＝31％
（9）注意事项
部颁标准为阳性视野不超过40％，在国际贸易中，合同上无要求时按部颁标准执行，合同上有要求时按合同执行;每抽取一罐样品制两个片子，每片观察50个视野，如果超过标准指标，应该继续制片，但片子数量不得少于3片即150个视野，如果计测结果相近时，可取其平均值;如对抽样结果有异议，应加倍抽样。全部合格，作为合格处理，其中有一罐不合格，该批作为不合格处理。
霉菌酵母菌检测方法国标
霉菌酵母菌检测方法国标摘要：1.霉菌和酵母菌的基本概念2.霉菌和酵母菌在食品中的作用3.霉菌和酵母菌检测的必要性4.霉菌和酵母菌检测的方法5.我国相关的国家标准6.结论正文：一、霉菌和酵母菌的基本概念霉菌和酵母菌是真菌中的一大类，它们广泛分布于自然界并可作为食品中正常菌相的一部分。
霉菌通常是多细胞，呈圆形、卵圆形、腊肠形或杆状，可以形成疏松的绒毛状的菌丝体。
而酵母菌则是单细胞真菌，具有球形或卵圆形的形态。
二、霉菌和酵母菌在食品中的作用霉菌和酵母菌在食品中发挥着重要的作用。
它们可以被用于加工一些食品，如用霉菌加工干酪和肉，使其味道鲜美；还可以利用霉菌和酵母菌酿酒、制酱。
此外，它们还在食品、化学、医药等工业领域中具有广泛的应用。
三、霉菌和酵母菌检测的必要性尽管霉菌和酵母菌在食品中有许多积极作用，但在某些情况下，它们也可能导致食品腐败变质。
因此，对食品中的霉菌和酵母菌进行检测是非常必要的。
这可以帮助确保食品的质量和安全，以及避免可能的健康问题。
四、霉菌和酵母菌检测的方法霉菌和酵母菌检测的方法包括显微镜观察、培养基法、酶底物法、免疫学方法等。
其中，显微镜观察是一种常用的方法，可以直接观察到霉菌和酵母菌的形态和数量。
培养基法则是通过提供适当的营养条件，使霉菌和酵母菌在培养基上生长，然后进行计数。
五、我国相关的国家标准我国关于霉菌和酵母菌检测的最新国家标准是GB 4789.15—2010 食品微生物学检验霉菌和酵母计数。
这个标准详细规定了试剂、仪器和具体操作步骤等内容，为食品生产企业提供了明确的检测依据。
六、结论霉菌和酵母菌在食品中既有积极作用，也可能带来负面影响。
因此，对食品中的霉菌和酵母菌进行检测是非常必要的。
通过采用显微镜观察、培养基法、酶底物法、免疫学方法等检测方法，可以有效地确保食品的质量和安全。
图解GB 4789.15霉菌和酵母计数
GB 4789.15－2016霉菌和酵母计数野兽食品伙伴网应用概况1标准修订2标准详解3质控要求4CONTENTSPART 1霉菌和酵母概况Overview of mould and yeastNational Food Safety Standard Food Microbiological Examination病毒原核生物原生生物真菌植物动物生物六界分类法真菌（菌物）已发现七万多种大型真菌是各类蕈类，小型真菌包括霉菌和酵母。
与动物、植物主要的区别是，真菌有细胞壁，主要成分为甲壳素（几丁质）。
相对于低等的细菌来说，霉菌和酵母生长缓慢，竞争力较弱，故只能在不利于细菌的环境中形成优势。
霉菌和酵母基本特性少数对人类有益，绝大多数不造成直接危害，但可导致食品的腐败变质，极少数能够致病或产生真菌毒素，危害极大。
细胞较大，代谢能力比细菌强100倍以上，故标准限量更严格。
危害生长水活度细菌0.90酵母0.87霉菌0.70卫生学意义霉菌和酵母计数主要用于判定样品被真菌污染程度，也可用于监测样品中真菌的性质和繁殖动态，进行样品的卫生学综合评价。
Mould and YeastPART 2检验方法标准修订Revision of Inspection Method Standard National Food Safety Standard Food Microbiological ExaminationGB 4789.15－84卫生部食品卫生监督检验所归口并负责起草。
主要起草人：罗雪云GB/T 4789.15－2003起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。
主要起草人：罗雪云、李风琴、李玉伟GB 4789.15－94卫生部食品卫生监督检验所归口并负责起草。
主要起草人：罗雪云GB 4789.15－2010未公布检验方法标准制修订GB 4789.15－2016起草单位：国家食品安全风险评估中心。
主要起草人：李凤琴、韩小敏、江涛、赵熙等参考国内外标准情况GB 4789.15－2010主要的技术性变化，就是培养温度从25℃～27℃修改为28℃。
细菌、霉菌、酵母菌检查标准操作规程
细菌、霉菌、酵母菌检查标准操作规程细菌、霉菌、酵母菌检查是微生物学实验室常用的一项技术，用于确定食品、饮料、药品、环境样品等中是否存在这些微生物。
细菌、霉菌、酵母菌都是常见的微生物，它们在生物学和工业上具有重要的作用。
本文将以标准操作规程的形式详细介绍细菌、霉菌、酵母菌检查的步骤和要求。
一、实验前准备1.环境准备：实验室环境要保持清洁、无尘、无飞虫等干扰因素，确保实验的准确性。
2.器材准备：准备好必要的实验器材，包括培养基、试剂、仪器设备等。
3.样品准备：样品应遵循卫生标准及实验要求，确保样品的可靠性和代表性。
二、样品处理1.样品消毒：将样品进行适当的消毒处理，以消除外源性微生物的干扰。
2.预培养：将样品接种到含有适宜培养基的试管中，进行预培养，以增加微生物的数量。
三、分离与纯化1.罩口接种：将样品中微生物接种到含有相应培养基的平板上，通过罩口接种的方式，避免次生污染。
2.培养条件：根据微生物的特性，设置适宜的培养温度、时间和培养基组成等条件，促进微生物的生长。
3.单菌分离：观察接种后的菌落形态和特征，选取单菌落转接到新的培养基上，以实现纯化。
四、鉴定与检测1.形态观察：观察菌落形态、边缘、颜色、透明度等特征，与已知细菌、霉菌、酵母菌的特征进行比对。
2.生理生化试验：通过一系列的生理生化指标和试验，如盖氏染色、革兰氏染色、培养基反应等，对菌株进行进一步鉴定。
3.分子生物学检测：采用PCR、序列比对等分子生物学技术，对菌株进行分子水平的鉴定。
五、结果处理与分析1.定量分析：根据菌落的数量和菌落形状比例，计算并报告样品中细菌、霉菌、酵母菌的数量。
2.图像记录：对鉴定结果进行拍照记录，确保结果的真实性和可追溯性。
六、质量控制1.消毒控制：实验室应定期对实验环境进行消毒处理，保持无菌状态。
2.正负对照：每次实验都应设置正、负对照，确保实验结果的准确性和可靠性。
3.重复实验：对怀疑结果的样品可以进行重复实验，验证结果的可靠性。
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霉菌酵母菌检测方法国标
（实用版4篇）
目录（篇1）
1.霉菌和酵母菌的基本概念
2.霉菌和酵母菌在食品中的作用
3.霉菌和酵母菌检测的必要性
4.霉菌和酵母菌检测的方法
5.我国相关的国家标准
6.检测霉菌酵母菌的操作步骤
正文（篇1）
一、霉菌和酵母菌的基本概念
霉菌和酵母菌是真菌中的一大类，它们广泛分布于自然界并可作为食品中正常菌相的一部分。
霉菌通常是多细胞，呈圆形、卵圆形、腊肠形或杆状，能够形成疏松的绒毛状的菌丝体。
而酵母菌通常是单细胞，呈圆形、卵圆形或杆状。
霉菌和酵母菌在食品加工、酿酒、制酱等方面具有重要作用。
二、霉菌和酵母菌在食品中的作用
霉菌和酵母菌在食品中扮演着重要角色，如用霉菌加工干酪和肉，使其味道鲜美；还可利用霉菌和酵母菌酿酒、制酱。
此外，它们在食品、化学、医药等工业领域也有广泛应用。
然而，在某些情况下，霉菌和酵母菌可能会导致食品腐败变质。
三、霉菌和酵母菌检测的必要性
为了确保食品安全，检测食品中的霉菌和酵母菌成为了必要的措施。
通过检测，可以有效预防食品腐败变质，保障消费者的健康。
四、霉菌和酵母菌检测的方法
目前，检测霉菌和酵母菌的方法有多种，如血球计数板法、稀释涂布平板法等。
这些方法在实验室中广泛应用，有助于准确判断食品中霉菌和酵母菌的数量。
五、我国相关的国家标准
我国对霉菌和酵母菌的检测制定了一系列国家标准，如 GB 4789.15—2010 食品微生物学检验霉菌和酵母计数。
这些标准为食品检测提供了技术指导，确保检测结果的准确性和可靠性。
六、检测霉菌酵母菌的操作步骤
1.准备工作：进入无菌室前应用肥皂洗手，然后用 75% 酒精球棉将手擦干净。
进入无菌间必须穿的专用工作服、帽及拖鞋、口罩，应放在无菌室缓冲间，工作前经紫外线消毒后使用。
2.试剂和仪器准备：使用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌，打开包装未使用的试剂要标明开启日期和失效日期。
3.样品处理：取洁净的血球计数板一块，在计数室上盖上一块盖玻片。
将酵母菌液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴 (不宜过多)，使菌液沿两玻片间自行渗入计数室，勿使产生气泡，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌液。
4.计数：静置约 5 分钟，先在低倍镜下找到计数室后，再转换高倍镜观察计数。
计数时用 16 中格的计数板，要按对角线方位，取左上、左下、右上、右下的 4 个中格 (即 100 小格) 的酵母菌数。
如果是 25 中格计数板，除数上述四格外，还需数中央 1 中格的酵母菌数 (即 80 小格)。
5.计数结果处理：每个样品重复分数 2-3 次 (每次数值不应招差过大，否则应重新操作)，取其平均值，按下述公式计算出每毫升菌液所含酵母菌细胞数。
每毫升菌液含菌数=每小格酵母细胞数×4000×稀释倍数。
6.血球计数板用后，在水龙头上用水柱冲洗干净，切勿用硬物洗刷。
目录（篇2）
1.霉菌和酵母菌的基本概念
2.霉菌和酵母菌在食品中的作用
3.霉菌和酵母菌检测的必要性
4.霉菌和酵母菌检测的方法
5.我国相关的国家标准
6.结论
正文（篇2）
一、霉菌和酵母菌的基本概念
霉菌和酵母菌是真菌中的一大类，它们广泛分布于自然界并可作为食品中正常菌相的一部分。
霉菌通常是多细胞，呈圆形、卵圆形、腊肠形或杆状，可以形成疏松的绒毛状的菌丝体。
而酵母菌则是单细胞真菌，具有球形或卵圆形的形状。
二、霉菌和酵母菌在食品中的作用
霉菌和酵母菌在食品中扮演着重要的角色。
它们可以被用于加工一些食品，如用霉菌加工干酪和肉，使其味道鲜美；还可利用霉菌和酵母酿酒、制酱。
此外，它们在食品、化学、医药等工业领域也有广泛应用。
三、霉菌和酵母菌检测的必要性
尽管霉菌和酵母菌在食品中有许多有益的作用，但在某些情况下，它们也可能导致食品腐败变质。
因此，对食品中的霉菌和酵母菌进行检测是非常必要的。
这可以帮助确保食品的质量和安全，以及避免因食品腐败变质而引发的健康问题。
四、霉菌和酵母菌检测的方法
霉菌和酵母菌检测的方法包括显微镜观察、培养基法、酶联免疫法、PCR 法等。
其中，显微镜观察是一种常用的方法，通过观察样品中的菌体形态和结构，可以初步判断是否存在霉菌和酵母菌。
培养基法是一种常用的分离和计数方法，通过将样品在含有特定抗生素的培养基中培养，可以筛选出霉菌和酵母菌，并进行计数。
五、我国相关的国家标准
我国关于霉菌和酵母菌检测的最新国家标准是 GB 4789.15—2010
食品微生物学检验霉菌和酵母计数。
这个标准规定了检测食品中霉菌和酵母菌的具体操作步骤、试剂和仪器等要求。
六、结论
霉菌和酵母菌检测是确保食品质量和安全的重要手段。
通过对食品中的霉菌和酵母菌进行检测，可以有效避免因食品腐败变质而引发的健康问题。
目录（篇3）
1.霉菌和酵母菌的基本概念
2.霉菌和酵母菌在食品中的作用
3.霉菌和酵母菌检测的必要性
4.霉菌和酵母菌检测的方法
5.我国相关国标简介
6.检测实例
正文（篇3）
一、霉菌和酵母菌的基本概念
霉菌和酵母菌是真菌中的一大类，它们在自然界中广泛分布，并可作为食品中正常菌相的一部分。
霉菌通常是多细胞，呈圆形、卵圆形、腊肠形或杆状，可以形成疏松的绒毛状的菌丝体。
而酵母菌则通常是单细胞，
呈圆形、卵圆形或杆状。
霉菌和酵母菌在食品、化学、医药等工业领域都有广泛应用。
二、霉菌和酵母菌在食品中的作用
在食品中，霉菌和酵母菌具有一定的营养价值和风味。
例如，在制作干酪和肉制品时，利用霉菌加工可以使产品味道更加鲜美。
同时，霉菌和酵母菌在酿酒、制酱等方面也具有重要作用。
然而，在某些情况下，霉菌和酵母菌可能会导致食品腐败变质。
三、霉菌和酵母菌检测的必要性
为了保证食品安全，检测食品中的霉菌和酵母菌成为了必要的措施。
通过检测，可以有效预防食品腐败变质，确保食品的品质和安全。
四、霉菌和酵母菌检测的方法
目前，检测霉菌和酵母菌的方法有多种，包括显微镜观察法、血球计数板法、酶底物法等。
其中，血球计数板法是一种常用的方法，其具体操作步骤如下：
1.取洁净的血球计数板一块，在计数室上盖上一块盖玻片。
2.将酵母菌液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴。
3.静置约 5 分钟，待菌液自行渗入计数室。
4.在低倍镜下找到计数室，再转换高倍镜观察计数。
5.按照一定的公式计算每毫升菌液所含酵母菌细胞数。
五、我国相关国标简介
我国关于霉菌和酵母菌检测的最新国标是 GB 4789.15—2010《食品
微生物学检验霉菌和酵母计数》。
该标准规定了检测霉菌和酵母菌的试剂、仪器和具体操作步骤。
六、检测实例
假设我们需要检测某食品中的霉菌和酵母菌数量，可以按照以下步骤进行：
1.采集食品样本。
2.将样本处理成适宜的形态。
3.使用血球计数板法进行检测。
4.计算每毫升菌液所含酵母菌细胞数。