样本采集规范

样本采集规范

●接到手术信息后，通知负责医生与样本提供者签写知情同意书

并留取样本提供者的术前配对血（抗凝、非抗凝血各一管，每管3～5ml），放置4℃冰箱并通知生物样本库人员来取。

●提前30分钟内进入手术室准备样本交接。

●样本离体后在最短时间完成样本交接，填写样本交接单，将样

本即刻转移到样本取材室进行采集。

●手术切除样本应在离体后30min内完成样本采集。

●依据科研需求，样本采集包括正常组织（＞癌灶周围3cm）、

癌旁（癌灶周围3cm内）和癌灶。样本采集顺序为“正常→癌旁→癌灶”，每个位置采集不少于3块，每块应≥0.5cm3或300mg或1×107细胞。采集部位应与石蜡切片相一致。癌灶、癌旁、正常组织分别置于-80℃2管、液氮2管、RNAlater 1管保存。

●采集石蜡样本应≥0.5x0.5x0.2cm，样本和福尔马林的比例为1:8。

●保存RNA需用RNA later，组织体积与RNA later之比≥1:5。

●电镜样本采集将组织样本修成1mm3大小组织块，即刻投入4℃

固定液。样本和电镜保存液比例≥1：10。

●样本的配对血（抗凝、非抗凝各一管）应在离体后尽快分离，

2000r/m离心10分钟，离心后取上清液（血清、血浆）各五管保存，每管200～500μl，如果不够分5管则应保证每管最少200μl。

●将抗凝管上清液取走后，剩余血细胞加入人淋巴细胞分离液

2000r/m离心10分钟，洗脱后，1000r/m离心5分钟重复两次，用移液枪吹打贴壁细胞进行细胞计数分管，保证每管淋巴细胞数应不小于1x107个。根据科研需求，如需保证细胞活性，应加入冷冻保护剂，进行梯度降温后保存。

●根据研究需要，采集治疗过程中和治疗后的空腹外周静脉血，

术后1周、2周、1个月各取一次，肿瘤患者术前血液样本采集应在放/化疗前进行。