多功能净化柱和免疫亲和柱工作原理-黄曲霉毒素检测
多功能净化柱和免疫亲和柱工作原理-黄曲霉毒素检测
多功能净化柱和免疫亲和柱工作原理（黄曲霉毒素检测）PriboFast 系列多功能净化柱分为柱压型（带玻璃试管）和推杆型（针筒式）两种，以极性、非极性及离子交换等基团组成填充剂，可选择性吸附样液中的脂类、蛋白质类等杂质，毒素不被吸附而直接通过，其操作更为简便，不需要进行活化、淋洗和洗脱操作，只需要直接上样，30秒钟即可完成整个净化过程，效果理想，可同时净化多种毒素，降低检测成本，有效提高检测效率，稳定性强，回收率高，适用于食品、粮食饲料、饮料、中药材等多种复杂样品。
同时我们还提供多毒素符合免疫亲和柱。
PriboFast®免疫亲和柱利用抗原抗体特异性可逆结合的原理, 将抗体与凝胶共价结合，然后填充柱子。
将样品提取溶液过免疫亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,最后用洗脱缓冲液洗脱抗原,从而得到纯化的抗原。
其提纯效率很高,适用于各类复杂样品包括食品、饲料等多种基质。
整个纯化过程30分钟左右B 添加义项 ?文案，原指放书的桌子，后来指在桌子上写字的人。
现在指的是公司或企业中从事文字工作的职位，就是以文字来表现已经制定的创意策略。
文案它不同于设计师用画面或其他手段的表现手法，它是一个与广告创意先后相继的表现的过程、发展的过程、深化的过程，多存在于广告公司，企业宣传，新闻策划等。
基本信息中文名称文案外文名称Copy目录1发展历程2主要工作3分类构成4基本要求5工作范围6文案写法7实际应用折叠编辑本段发展历程汉字"文案"(wén àn)是指古代官衙中掌管档案、负责起草文书的幕友,亦指官署中的公文、书信等;在现代，文案的称呼主要用在商业领域，其意义与中国古代所说的文案是有区别的。
在中国古代，文案亦作" 文按 "。
公文案卷。
《北堂书钞》卷六八引《汉杂事》:"先是公府掾多不视事，但以文案为务。
"《晋书·桓温传》:"机务不可停废，常行文按宜为限日。
黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书
苏微黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书【产品用途】黄曲霉毒素B1（AFB1）免疫亲和柱适合于和AFB1酶免分析试剂盒、HPLC或液质结合使用，定量检测AFB1。
用该免疫亲和柱净化样品，提高了样品的纯度。
纯化后的样品可用不同的分析方法测定。
【适应范围及产品性能】用于定性、定量检测谷物、粮油、饲料等样本中AFB1时的样本前处理。
柱吸附能力：≥50ng/支，≥100ng/支（可根据要求选择相应柱容量）；回收率：75%~90%。
柱内凝胶：Protein A琼脂糖凝胶特点：载量大，单抗定向偶联，易洗脱，回收率高。
【测定原理】本产品测定的基础是抗原抗体反应，黄曲霉毒素B1（AFB1）单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上，样品中的AFB1经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢通过AFB1免疫亲和柱，在免疫亲和柱内，AFB1与抗体结合，洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。
最后采用甲醇洗脱AFB1，然后进行相关分析。
【产品组成】标准品（选配）；25支/盒；1mL柱管/支；说明书1份；【所需材料】（不提供）（1）设备及器皿耗材：天平、粉碎机、离心机、高速均质器（18000r/min~22000 r/min）；量筒、50mL玻璃漏斗、微量移液器（100μL~1000μL）、定量滤纸、玻璃微纤维滤纸（直径11cm，孔径1.5μm）、20mL玻璃注射器等。
（2）试剂：甲醇（色谱级）、pH7.4磷酸盐缓冲液（PBS）、pH7.0磷酸盐缓冲液（PBS）、吐温-20、蒸馏水或去离子水。
【样品制备及净化】（1）谷物、花生及其制品----准确称取25.0g粉碎的样品，加入5.0g氯化钠，----与125.0mL甲醇-水溶液（7+3）混合，以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min，----用定量滤纸过滤，----准确移取15mL滤液并加入30mL水稀释，用玻璃微纤维滤纸过滤，至滤液澄清，备用。
----准确移取15.0mL混合液进行过亲和柱。
多功能净化柱在食品和饲料中毒素检测的应用
除快检产品外，目前针对毒素检测常用的前处理产品是免疫亲和柱，其特点是特异性强，利用抗原抗体的特异性结合达到目标物富集再洗脱的效果。
但如果我的样品比较多，希望方法上操作更简单，时间上更快且可定量计算怎么办？今天小编就给大家介绍一下专为食品和饲料中毒素检测而生的多功能净化柱，通过一步30s 完成净化，满足您的实验需要。
那对于多功能净化柱，您了解多少？跟着小编来学一学吧！01产品基本原理是什么？以极性、非极性及离子交换等基团组成的填充剂，可选择性吸附样液中的脂类、蛋白质类等杂质，毒素不被吸附而直接通过从而达到分离纯化效果。
02产品怎么选择？基于原理，我们的产品均是根据检测的目标物来进行相应的命名，所以您只需要以检测物来选择就可以。
举例您要同时检测黄曲霉毒素（B、G、M）、呕吐毒素、玉米赤霉烯酮，可以选择我们对应规格的CNW 301多功能净化柱即可。
而多功能净化柱的外观形式通常有柱塞型（带试管）和推杆型（针筒式），分别是正向挤压和针筒推的方式，除了与各人使用习惯有关，当样品量比较少时可选择小体积推杆型的，结合以上2点您可完美选择所需要的产品。
03如何操作？以柱塞型226黄曲霉毒素净化柱为例：步骤1：向试管中加入5m L 样品提取液步骤2：将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中，并向下压净化柱至试管底端Tip：按压过程中请留意不要过度用力，正常下压至底部即可。
若按压压力过大使得气体压力太大，导致橡胶塞回弹，液体会进入试管造成漏液现象。
步骤3：将净化柱上部净化后的样品提取液倒出至样品瓶或EP管中Tip：净化后上层液体请及时转移，不宜长时间浸泡在管子中以免使得杂质再次进入净化液造成净化不彻底。
步骤4：取2m L 净化提取液，氮吹至干，用1m L 或0.5m L 初始流动相复溶，过微孔滤膜，上机分析Tip：CNW 多功能净化柱是基于液相方法开发应用，适用于大部分客户实验室，同样液质也完全满足。
操作示意图04产品适用标准上海安谱实验科技股份有限公司，于1997年组建成立，总部位于上海，目前拥有500多位员工，2018年销售额超过5亿人民币；是中国领先的实验用品供应链管理服务商；目前公司已是集研发、生产与销售以及客户供应链管理为一体的综合性企业；主要产品包括化学试剂、标准品、气相色谱相关耗材、液相色谱相关耗材、样品前处理产品、实验室通用耗材、小型仪器等。
免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱法检测蜚蠊中的黄曲霉毒素
２０２０年第３７卷第５期［作者简介］ 周颖，女，主管药师，研究方向：药品安全性和质量控制研究。
Ｅ ｍａｉｌ：ｚｙａｙｄ＠１２６ ｃｏｍ［通讯作者］ 昝珂，男，副研究员，研究方向：中药质量控制研究。
Ｅ ｍａｉｌ：６２０６３１０＠ｑｑ ｃｏｍ；马临科，男，副主任中药师，研究方向：中药标准及质量控制研究。
Ｅｍａｉｌ：ｍａｒｌｉｎｋ７８＠１２６ ｃｏｍ免疫亲和柱净化 柱后光化学衍生 高效液相色谱法检测蜚蠊中的黄曲霉毒素周颖１，祝清岚１，马临科１ ，昝珂２（１ 浙江省食品药品检验研究院，国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室，浙江杭州３１００５３；２ 中国食品药品检定研究院，北京１０００５０）［摘要］ 目的：建立检测蜚蠊中黄曲霉毒素Ｂ１、Ｂ２、Ｇ１和Ｇ２的免疫亲和柱净化 柱后光化学衍生 高效液相色谱法。
方法：样品经过７０％甲醇溶液匀浆提取，用水稀释后经免疫亲和柱富集净化，经Ｃ１８色谱柱分离，以甲醇、乙腈和水为流动相，柱后光化学衍生，荧光检测器进行检测。
结果：在优化的条件下，黄曲霉毒素Ｂ１、Ｂ２、Ｇ１和Ｇ２线性关系良好，检出限分别为０ ０４，０ ０８，０ ０３和０ ０８μｇ·ｋｇ－１，平均加标回收率为８２ ０％～９０ １％。
结论：该方法快速、准确、灵敏度高，可用于蜚蠊黄曲霉毒素的检测。
［关键词］ 蜚蠊；黄曲霉毒素；光化学衍生；高效液相色谱［中图分类号］ Ｒ２８２ ７４ ［文献标志码］ Ｂ ［文章编号］ ２０９５－３５９３（２０２０）０５－０３５８－０４ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＡｆｌａｔｏｘｉｎｓｉｎＰｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａｂｙＩｍｍｕｎｏａｆｆｉｎｉｔｙＣｏｌｕｍｎａｎｄＨｉｇｈＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＣｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈＰｏｓｔ ｃｏｌｕｍｎＰｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌＤｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎＺＨＯＵＹｉｎｇ１，ＺＨＵＱｉｎｇ ｌａｎ１，ＭＡＬｉｎ ｋｅ１ ，ＺＡＮＫｅ２ ［１ ＺｈｅｊｉａｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，ＮＭＰＡＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＱｕａｌｉｔｙＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＺｈｅｊｉａｎｇＨａｎｇｚｈｏｕ３１００５３，Ｃｈｉｎａ；２ ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００５０，Ｃｈｉｎａ］［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１，Ｂ２，Ｇ１ａｎｄＧ２ｉｎＰｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａｂｙｉｍｍｕｎｏａｆ ｆｉｎｉｔｙｃｏｌｕｍｎａｎｄｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｐｏｓｔ ｃｏｌｕｍｎｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅｓａｍｐｌｅｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈ７０％ｍｅｔｈａｎｏｌａｎｄｐｕｒｉｆｉｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏａｆｆｉｎｉｔｙｃｏｌｕｍｎ ＴｈｅｐｕｒｉｆｉｅｄｌｉｑｕｉｄｗａｓｓｅｐａｒａｔｅｄｂｙｕｓｉｎｇＣ１８ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｃｏｌｕｍｎａｎｄｑｕａｎｔｉｆｉｅｄｗｉｔｈｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎａｆｔｅｒｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｕｎｄｅｒｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ，ａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１，Ｂ２，Ｇ１ａｎｄＧ２ｓｈｏｗｅｄａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ Ｔｈｅｌｉｍｉｔｓｏｆｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗｅｒｅ０ ０４μｇ·ｋｇ－１ｆｏｒａｆｌａｔｏｘｉｎＢ１，０ ０８μｇ·ｋｇ－１ｆｏｒａｆｌａｔｏｘｉｎＢ２，０ ０３μｇ·ｋｇ－１ｆｏｒａｆｌａｔｏｘｉｎＧ１，０ ０８μｇ·ｋｇ－１ｆｏｒａｆｌａｔｏｘｉｎＧ２Ｔｈｅｍｅａｎｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｓｏｆｆｏｕｒｋｉｎｄｓｏｆａｆｌａｔｏｘｉｎｗｅｒｅ８２ ０％－９０ １％ Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓｒａｐｉｄ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄａｃｃｕｒａｔｅ，ａｎｄｃａｎｓａｔｉｓｆｙｔｈｅｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｏｆｍｕｌｔｉ ｍｙｃｏｔｏｘｉｎａｎａｌｙｓｉｓｉｎＰｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａ．［ＫｅｙＷｏｒｄｓ］ Ｐｅｒｉｐｌａｎｅｔａａｍｅｒｉｃａｎａ；Ａｆｌａｔｏｘｉｎｓ；Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ；ＨＰＬＣ 自然界存在的真菌毒素达２００种以上，其危害性排在首位的是黄曲霉毒素（ａｆｌａｔｏｘｉｎ，ＡＦＴ）［１］。
免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生高效液相色谱法检测粮油中黄曲霉毒素
１ 材料 与方 法
１１ 仪 器 与 试 剂 ．
Ｈ １０ Ｐ １０型 高 效 液相 色 谱 仪 ； １ Ｔ ８型 高速 搅 拌 均 质 器 ； ＭＴ 一 ８ ０ Ｎ ２ ０ Ｄ型 氮 吹仪 ； 化学 衍 生池 （ 光 中检 维康 公 司 ） 和
２ 结果 与讨 论
２１ 免 疫 亲 和 柱 的 应 用 ［ ．
１ ． 提 取 与 净 化 ４
准确 称取 ２． ５０ｇ粮 、 样 品 于 ２ ０ 油 ５ ｍＬ均 质 杯 中 ， 人 加
５ｇ氯 化钠 、２ １５ｍＬ甲醇一 （ 水 体积 比为 ７ ： ， 速均 质 ０３ 高 ０） ２ｍ ｎ 用槽 纹 滤纸 过 滤到 干净 的烧 杯 中 。取 ２ Ｌ滤液 ， ｉ， ０ｍ 加 入 ２ ０ｍＬ水 稀 释 混 匀 ． 玻 璃 纤 维 滤 纸 过 滤 。取 滤 液 用 ｌ ．以 １ ２滴／ ０ｍＬ ～ ｓ的速率将 其通 过 Ａ ａ ｅ Ｐ免疫 亲 和 ｉ ｒ Ｔｓ
亲 和 柱 吸 附 的 杂 质 洗 脱 ， 后 再 用 极 性 强 的 溶 剂 （ 常 用 最 通
甲醇 （ 谱 纯 ）Ａｂ （ ｌ ２Ｇｌ Ｇ ） 准 品 ；ｉ ｌ ｉ 色 ； Ｔｓ Ｂ 、 、 和 ２标 Ｂ Ｓｍｐｉ － ｃ
ｔ ８ ｙ １５型纯 水机 制备 的超 纯水 。
１ ． 色谱 条 件 ２
免 疫 亲 和 柱净 化 一 柱后 光 化 学 衍 生 高效 液 相 色 谱 法 具 有 简 便 、 速 、 化效 果 好 的特 点 ， 近年 的文 献 中多 有 报 快 净 在
道 ． 目前 尚 未形 成 国标 方法 ， 于取 得认 证 资 格 的第 三 但 对 方 检 测 实 验 室 而 言 ， 在 本 实 验 室 采用 该 方 法 必 须 进 行 要 验 证 实验 。
免疫亲和柱净化-HPLC柱后光化学衍生技术同时检测何首乌中的4种黄曲霉毒素
940 引言何首乌始载于《开宝本草》，为我国较为常用的中草药材之一，在全国各地均有分布，广东、湖南、河南和广西是其栽培品的主要几大产区。
何首乌中包含有二苯乙烯类、蒽醌类、黄酮类、磷酯类、酚类及鞣质类等131种化合物[1]。
最近的研究表明，二苯乙烯类化合物可以作为抗衰老和抗动脉粥样硬化因子，减少脑病理萎缩，促进学习和记忆[2]；含蒽醌的组分对心肌提供了剂量依赖性的保护缺血-再灌注损伤，并减少脑缺血引起的梗死体积[3]。
早在2010年，何首乌及其制作方法被中国药典收录，何首乌也被广泛用作补药和泻药，以治疗失忆症、高脂血症和便秘[4]。
何首乌经炮制后，极其容易发霉而变质，不仅其药效受到影响，发霉后会产生黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，均是致癌物质，严重影响身体健康。
世界卫生组织已将黄曲霉毒素（Aflatoxin）释质谱（HPLC-IDMS）[15]、高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）[16]、高效液相色谱-高分辨质谱（HPLC-HMRS）[17]和免疫亲和柱-高效液相色谱法（HPLC-IAC）等[18]。
使用酶联免疫吸附法和免疫亲和柱-荧光分光光度法对其进行检测时，样品中的某些结构类似物也会被抗体吸附而产生荧光，造成假阳性[19]。
Arroyo-Manzanares等[20]提出了一种HPLC-MS/MS方法测定黄曲霉毒素，以水/丙酮/乙腈（30：35：35，v/v/v）为萃取溶剂，萃取后测定干血斑或干血清斑中的黄曲霉毒素，取得了很好的结果，检测限为0.05至0.1 ng/mL。
免疫亲和色谱法（Immunoaffinity Chromatography，IAC）基于抗体-抗原的特异性吸附原理进行选择性分离，方法的准确性和灵敏度都很高[22]，是检测黄曲霉毒素的最佳方法之一。
发展何首乌中的致癌物质黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的高效、准确检测方法至关重要。
由于Afla Bl和Afla Gl荧光强度相对较弱，通常需96公司、吐温-20采购自梯希爱（上海）化成工业发展有限公司（货号T0543）；超纯水（自制）。
[整理]2015版新药典黄曲霉毒素检测方案
![[整理]2015版新药典黄曲霉毒素检测方案](https://img.taocdn.com/s3/m/fd5a6912ba68a98271fe910ef12d2af90242a8ee.png)
2015年药典黄曲霉毒素测定法本法系用高效液相色谱法测定药材及制剂中的黄曲霉毒素（以黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2总量计），除另有规定外，按下列方法测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水（40:18:42）为流动相，流速0.8mL/min；采用柱后衍生法检测:光化学衍生法：光化学衍生器（254nm. PriboFast-KRC光化学柱后衍生器.Pribolab-MDU光化学柱后衍生器）；以荧光检测器检测，激发波长λex =360nm(或365nm)，发射波长λem =450nm。
两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
混合对照品溶液的制备：精密量取黄曲霉毒素混合标准品（黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标示浓度分别为1.0μg/m L、0.3μg/m L、1.0μg/m L、0.3μg/m L、）0.5mL，置10mL于量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。
精密量取储备液1mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。
(Pribolab STD#1082-2 AFT混合标准品：AFT B1和AFT G1：1.0μg/mL，AFT B2和AFT G2：0.3μg/mL ）供试品溶液的制备：1. 取供试品粉末约15g(过二号筛)，精密称定，加入氯化钠3g，置于均质瓶中，精密加入精密加入70%甲醇溶液75mL，高速搅拌2分钟（搅拌速度大于11,000r/min,®他物质萃取时间要求不一的需求，通过特殊结构设计实现在短时间内对真菌毒素等物质的高效粉碎、萃取，保证检测结果的准确性和精确度。
粉碎样品在不锈钢杯中通过电机旋转驱动刀同时进行劈裂、碾碎、掺合等过程。
使物料搅拌粉碎,转速高达22000以上,全金属机身和不锈钢杯子,抗有机溶剂的腐蚀,可以实现在2-3分钟高效实现真菌毒素的均质、萃取等关键环节。
优点：高速震荡3分钟即可完成整个真菌毒素及其他物质的萃取过程；●转速两档可调，低速12000r/min，高速22000r/min；●全金属机身，不锈钢材质，抗有机溶剂腐蚀；●可广泛应用于食品检验、科学研究、医学治疗、化工制药等行业；●本机构造方面均合于无菌操作的要求；●通过CE认证。
黄曲霉M1检测方案2
黄曲霉毒素M1检测方案方案一、免疫亲和层析净化高效液相色谱法（GB 5413.37-2010第二法）一、原理：亲和柱内含有的黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体交联在固体支持物上，当试样通过亲和柱时，抗体选择性的与黄曲霉毒素M1(抗原)键合，形成抗体—抗原复合体。
用水洗柱除去柱内杂质，然后用洗脱剂洗脱吸附在柱上的黄曲霉毒素M1，收集洗脱液。
用带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定洗脱液中黄曲霉毒素M1含量。
二、所需仪器1、高效液相色谱仪（配荧光检测器—具有365 nm激发波长、435 nm发射波长，在适当的色谱条件下能够测定0.02 ng 的黄曲霉毒素M1(相当于5倍噪音)）2、离心机（转容50ml角转子，转速10000r/min）3、氮吹仪4、固相萃取装置（带真空系统）5、水浴锅（温控30℃±2℃，50℃±2℃；温范25℃~60℃）6、天平：感量为0.01 g7、PH计：精度0.018、旋转蒸发仪（奶油样品制备）9、紫外分光光度计（标液浓度的校正，波长范围为200nm~400nm）三、试剂及耗材1、黄曲霉毒素M1免疫亲和柱2、黄曲霉毒素M1标准品3、反相色谱柱C18 4.6*250 加有反相色谱材料的保护柱5、移液管：1ml, 2ml, 50ml6、烧杯：50ml, 250ml7、分液漏斗：250ml（干酪和奶油样品制备）8、容量瓶：100ml9、一次性注射器：10ml, 50ml10、针式过滤器（水系）0.22um，Φ1311、乙腈(CH3CN)：色谱醇12、甲醇：分析醇13、三氯甲烷：分析醇14、石油醚：分析醇15、带刻度的磨口锥形玻璃试管：5 mL、10 mL、20 mL16、离心管：50ml四、操作方法依据GB 5413.37-2010第二法方案二、酶联免疫吸附法（可定性、定量检测牛乳及其他乳制品等样本中的黄曲霉毒素M1）一、原理标准溶液和样品试液加入各自板孔，游离的黄曲霉毒素M1与微孔中包被的黄曲霉毒素M1抗体结合，没有结合的物质在洗涤中被清除。
多功能净化柱和免疫亲和柱工作原理
PriboFast桔青霉素免疫亲和柱25T
IAC-070-3
PriboFast黄曲霉毒素,赭曲霉毒素复合免疫亲和柱25T
IAC-140-3
PriboFast黄曲霉毒素,玉米赤霉烯酮,赭曲霉毒素复合免疫亲和柱25T
IAC-124-3
PriboFast黄曲霉毒素,玉米赤霉烯酮,赭曲霉毒素复合免疫亲和柱25T
PriboFast®免疫亲和柱利用抗原抗体特异性可逆结合的原理,将抗体与凝胶共价结合，然后填充柱子。将样品提取溶液过免疫亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,最后用洗脱缓冲液洗脱抗原,从而得到纯化的抗原。其提纯效率很高,适用于各类复杂样品包括食品、饲料等多种基质。整个纯化过程30分钟左右。
产品名称/规格
IAC-014-3
PriboFast玉米赤霉烯酮免疫亲和柱25T
IAC-020-3
PriboFast呕吐毒素免疫亲和柱25T
IAC-030-3
PriboFast赭曲霉毒素免疫亲和柱25T
IAC-040-3
PriboFast伏马毒素免疫亲和柱25T
IAC-050-3
PriboFastT-2毒素免疫亲和柱25T
M2007
适用单端孢霉烯族毒素
PriboFast260多功能净化柱25T
M2600
黄曲霉毒素,玉米赤霉烯酮
PriboFast160 多功能净化柱25T
M1600
黄曲霉毒素,玉米赤霉烯酮
PriboFast200 多功能净化柱25T
M2000
呕吐毒素 雪府镰刀菌烯醇
PriboFast270 多功能净化柱25T
产品编号
针对毒素
PriboFast226多功能净化柱25T
黄曲霉毒素总量免疫亲和柱说明书 (四合一)
苏微黄曲霉毒素总量（B1、B2、G1、G2）免疫亲和柱说明书1、用途：免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2, 从而对黄曲霉毒素样品起到特异性的纯化作用, 过柱净化后的样品液可直接用于高效液相色谱进行黄曲霉毒素含量的检测。
亲和柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的, 以改善信噪比，可提高检测方法的准确度。
2、产品性能柱吸附能力：≥100ng/支；回收率：75%~90%。
3、测定原理：测定的基础是抗原抗体反应，抗体连接在柱体内，样品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2经过提取、过滤、稀释，然后缓慢的通过黄曲霉毒素总量免疫亲和柱，免疫亲和柱中抗体与毒素结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。
用乙腈洗脱黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，然后注入到分析仪器中用于检测。
4、包装组成：标准品（选配）；20支/盒，3mL柱管/支说明书1份；5、需要的材料但盒中不提供：5.1设备----HPLC----气控操作架----空气泵----天平----组织匀浆机（或摇床）----粉碎机----分样筛----100mL/10mL量筒----50mL漏斗----针筒----快速定性滤纸----微纤维滤纸（Whatman 934-AH）----样品瓶----转接头（配3ml免疫亲和柱使用）5.2 试剂----甲醇，氯化钠，乙腈，蒸馏或去离子水。
6、注意事项：----黄曲霉毒素可致癌，应戴手套操作。
----使用过的容器及黄曲霉毒素溶液最好用次氯酸钠溶液（5%,V/V）浸泡过夜。
----不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
----2~8℃储存，不得冻存。
----使用前，免疫亲和柱需回至室温（22~25℃）7、样品处理：方法：适用于玉米、花生或中药等样品----玉米花生或中药等样品粉碎，过2mm分样筛；----25g过筛粉碎的样品加入5g 氯化钠与125mL 60%甲醇-水溶液混匀；----高速匀浆1min（或用摇床剧烈振荡20min），用快速定性滤纸过滤；----用20mL蒸馏水稀释10mL滤液，再用微纤维滤纸过滤；----取15mL上样检测。
总黄曲霉毒素免疫亲和柱
总黄曲霉毒素免疫亲和柱总黄曲霉毒素（Aflatoxin B1，AFB1）是一种由黄曲霉菌（Aspergillus flavus）和黄曲霉素菌（Aspergillus parasiticus）产生的一种强烈致癌的化合物。
该化合物在人类和动物体内会引起多种癌症，如肝癌、食管癌、胃癌等。
因此，检测和去除环境和食品中的总黄曲霉毒素对于保障人类健康至关重要。
为了检测和去除总黄曲霉毒素，研究人员开发了多种方法，其中之一就是使用总黄曲霉毒素免疫亲和柱。
这种免疫亲和柱是通过利用特异性抗体对总黄曲霉毒素进行捕捉，从而实现检测和去除的目的。
总黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备过程通常包括以下步骤：首先，需要获得针对总黄曲霉毒素的特异性抗体。
这可以通过免疫小鼠（如小鼠、兔子等）或体外合成的方法获得。
然后，将抗体与固相材料（如琼脂糖、硅胶等）结合，形成免疫亲和柱。
接下来，将待测样品加入免疫亲和柱中，允许总黄曲霉毒素与抗体结合。
最后，用适当的缓冲液洗脱并收集样品，得到含有总黄曲霉毒素的纯净溶液。
总黄曲霉毒素免疫亲和柱的检测原理是基于特异性抗体与总黄曲霉毒素的亲和作用。
一旦待测样品中存在总黄曲霉毒素，它们会与免疫亲和柱中的抗体结合。
通过洗脱的步骤，可以将结合的总黄曲霉毒素从样品中分离出来，从而完成检测过程。
除了检测相关，总黄曲霉毒素免疫亲和柱还可以用于去除总黄曲霉毒素。
已经结合总黄曲霉毒素的免疫亲和柱可以用于净化食品和饲料，去除其中的毒素。
这是因为抗体与毒素之间的结合力较强，可以有效地捕捉和去除总黄曲霉毒素。
总的来说，总黄曲霉毒素免疫亲和柱是一种有效的工具，可以用于检测和去除环境和食品中的总黄曲霉毒素。
通过结合特异性抗体和固相材料，免疫亲和柱可以捕捉和去除总黄曲霉毒素。
然而，需要注意的是，免疫亲和柱的制备过程较为繁琐且耗时，因此需要进行全面的实验准备和操作。
对于总黄曲霉毒素的免疫亲和柱的研究和应用仍在不断发展中。
随着技术的不断进步，相信将有更多的改进和创新，提高总黄曲霉毒素的检测和去除效果，进一步保障人类的健康安全。
免疫亲和柱 柱容量 afb1
免疫亲和柱柱容量 afb1免疫亲和柱（Immunaffinity Column）是一种常用的柱层析技术，用于富集和纯化特定的分子或化合物。
本文将以AFB1（黄曲霉毒素B1）为例，介绍免疫亲和柱的原理、应用和优势。
AFB1是一种由黄曲霉菌产生的黄曲霉毒素，对人和动物具有较高的毒性。
由于其对人体健康的潜在危害，监测和分析AFB1在食品和环境样品中的含量变得尤为重要。
传统的分析方法包括高效液相色谱（HPLC）和气相色谱（GC），但这些方法需要复杂的前处理步骤和昂贵的设备，且分离效果有限。
而免疫亲和柱作为一种快速、高效的富集和纯化技术，被广泛应用于黄曲霉毒素的检测和分析。
免疫亲和柱的原理是利用特定的抗体与目标分子之间的高度选择性结合。
在免疫亲和柱中，固定化的抗体通过特异性结合与目标分子相互作用，从而将目标分子从复杂的样品基质中富集出来。
免疫亲和柱的填料通常是以高纯度的抗体固定在固定相上，形成高效的亲和层析柱。
使用免疫亲和柱进行AFB1的富集和纯化，通常包括以下步骤：首先，将样品与免疫亲和柱进行接触，使目标分子与柱上的抗体结合。
随后，通过洗脱步骤将非目标分子洗去，使得目标分子得以富集。
最后，从柱上洗脱目标分子，用于进一步的分析和检测。
免疫亲和柱在AFB1的分析中具有许多优势。
首先，免疫亲和柱具有高度的选择性和特异性，可以有效地富集和纯化目标分子，减少样品基质的干扰。
其次，免疫亲和柱具有较高的富集效率和灵敏度，可以在短时间内获得较低浓度的目标分子。
此外，免疫亲和柱操作简便，无需复杂的前处理步骤，适用于不同类型的样品。
然而，免疫亲和柱也存在一些局限性。
首先，柱容量是免疫亲和柱的重要参数之一，它决定了柱富集目标分子的能力。
较低的柱容量可能导致目标分子无法完全富集，影响后续的分析结果。
其次，免疫亲和柱的使用寿命有限，经过多次使用后，抗体的活性和选择性可能会下降，影响分析结果的准确性。
总结而言，免疫亲和柱是一种重要的分离和纯化技术，在AFB1等目标分子的富集和纯化中具有广泛的应用前景。
免疫亲和柱技术及其在黄曲霉毒素等检测中的应用
➢操作步骤——
均质样品
• 盖上搅拌杯的盖 子，高速均质12 分钟
• 也可以置于锥形 瓶中，在摇床上 振动30分钟左右
粗滤与稀释
• 将均质液通过槽 纹滤纸过滤，准 确移取15毫升滤 液并加入30毫升 水稀释
• 将免疫亲和柱 连接于玻璃注 射器下，准确 移取15毫升样 品提取液注入 玻璃注射器中
免疫亲和柱技术及其在黄曲霉毒素检测中的应用
黄曲霉毒素
免疫亲和柱技术在黄曲霉毒素中的应用
•黄曲霉毒素
黄曲霉毒素(Aflatoxin，A)是黄曲霉和寄生曲霉所产生的一组结
构类似的有毒代谢产物，其基本结掏为二呋喃环和香豆素。现已
分离出 AFB 1 ，AFB 2 ， AFG 1 ， AFG 2 ， AFB 2a ， AFG 2a ， AFM 1， AFM 2，AFP 1 等 18 种之多，其中以 AFB 1 的毒性和致 检癌测性标准最：强我。国现对已食证品实中有的A1F7B种1衍的限生量物标．准 其（G中B最276重1-要20的05）包括是：B花1、生、B1、 玉G米1、、G花2生、油M及1等其5制种品，的 被AFWBH1O≤划20为μgⅠ/kgA；类大致米及癌其物他。食用黄油曲的霉AF污B 染1 ≤1范0μ围g/k：g；玉 粮米食、、豆谷类物、、发酵花食生品、的 粮AF食B 1饲≤5料μg、/kg植；物婴儿油代、乳辣品不椒得等检作出。物我。国也规定牛乳
2.3 抗体与基体偶联
基体在与抗体偶联之前，需要进行活化。一般是在基体骨架 上引入亲电基团，然后与间隔分子或抗体上的亲核基团共价结 合，需要说明的是在小配体的亲合色谱中，常在基体和配体之 间插入一个间隔臂，以减小空间位阻的影响。
常用的活化试剂包括溴化氰、环氧氯丙烷和维生素H酰肼等 抗体与活化基体的偶联方式有随机偶联与定向偶联两种。
泰乐祺科技-黄曲霉毒素分析方法汇总
泰乐祺科技－黄曲霉毒素分析方法汇总一、多功能净化柱＋KRC光化学柱后衍生法1、简介多功能净化柱是由多种固相复合填料不仅包括大分子物质，更重要的是含有多种活性亲脂性（非极性）和带电（极性）物质，用来吸附各种酯类，叶黄素，化学物质，碳水化合物和蛋白质等干扰物。
多功能净化柱＋KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast 226/260多功能净化柱可以将黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2很好的分离出来，用HPLC/FLD＋KRC柱后衍生系统可以有效的测定黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2含量。
2、多功能净化柱特点：多功能净化柱可以简化样品提取、净化步骤，无需清洗和洗提。
可以实现多种毒素检测，有效降低检测成本；HPLC＋FLD+KRC衍生化，可以有效提高检测灵敏度，实现较低的检测限(黄曲霉毒素B1 0.05ppb)。
光化学衍生操作简便，无需使用衍生试剂（通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂，分析成本高，操作麻烦，仪器故障率较高）一步法净化，回收率高达90％左右。
广泛适用于各类农产品：谷物、淀粉、动物饲料、食品、坚果、棉籽等。
3、多功能净化柱/KRC衍生法操作步骤简介：提取样品：研磨粉碎、称重25g样品；用乙腈/水（84/16 V/V）混合样品，高速均质 1 分钟。
过滤：提取的样品定量滤纸过滤，收集滤液；取4－6ml滤液快速通过多功能净化柱PribofastM226 或Pribofast M260收集过柱溶液，直接用于HPLC检测，KRC衍生化后直接记录黄曲霉毒素浓度。
二、免疫亲和柱＋KRC光化学柱后衍生法1.简介Pribofast黄曲霉毒素总量免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的毒素，从而对毒素样品起到非常针对性的纯化作用，然后用HPLC/FLD＋KRC柱后衍生系统可以有效的测定黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2浓度，提高检测的准确性和灵敏度。
2.免疫亲和柱/KRC衍生法特点：特异性很强使得样品净化效果极佳；使用免疫亲和柱操作架可以使样品净化快速，提高检测效率高 HPLC＋FLD+KRC柱后衍生化，有效提高检测灵敏度，实现较低的检测限 (黄曲霉毒素B1 0.05ppb)。
免疫亲和柱净化-液相色谱串联质谱法检测乳及乳粉中的黄曲霉毒素M1
１ ． ３ ． ６ 质谱 条 件 表 ２ 离子 选 择 参 数 表
１ ． ２ ． ４乙酸 铵
１ ． ２． ５ Ｋ２ ＨＰ Ｏ４
１ ． ２． ６ ＫＨ２ Ｐ Ｏ４
１ ． ２ ． ７磷酸缓冲 溶液 ： 称取 ５ ２ ． ７ ｇ Ｋ ２ Ｈ Ｐ Ｏ ４ ， 备注：ａ 代表定量离子 ３ ０ ． ２ ｇＫ Ｈ２ Ｐ Ｏ４ ， 溶于 ５ ０ ０ｍＬ中，用 ｌ Ｍ 氢氧 １ ． ４ 检 测 方 法 化钠或盐酸溶液调节 Ｐ Ｈ＝ ７ ，水定 容至 １ Ｌ。 称取 ２ Ｏ ｇ（ 精确至 Ｏ ． ０ ｌ ｇ ）试 样 （ 或 ｌ ０ ｇ １ ． ２ ． ８黄 曲霉毒素 Ｍ－ 标准品：纯度＞ ９ ８ ％。 固体试样 ，加 １ ０ ｍＬ水 溶解 ）于 ５ ０ ｍＬ离心 图 １黄曲霉毒素 Ｍ ， 色谱峰 （ Ｍ Ｒ Ｍ模式 ） １ ． ２ ． ９免疫 亲 和 柱 ： Ｎｅ ｏ Ｃ ｏ ｌ ｕ ｍｎ 黄 曲霉 毒 管 中 ，加 入 ５ ｇ Ｎａ Ｃ １ ，２ ０ ｍＬ 乙腈 超 声 提 取 我 们 选 择 了 来 自不 同地 区 和 不 同批 号 的 素 （ ０ １ ／ ０ ８ ） 。 １ ０ ｍｉ ｎ ，４ ０ ０ ０ ｒ ｐ ｍ离心 ５ ｍｉ ｎ ，取 上 清 溶 液 ， １ ． ２ ． １ ０ １ Ｏ ％乙腈水溶液：在 ４ ５ ０ ｍＬ水 中 几 种 常 见 乳 制 品 的 阴性 样 品 进 行 添 加 测 定 。 称质量五等分 ，取一份加入 ４ ０ ｍＬ磷酸缓冲 加入 ５ ０ｍＬ乙腈 ，混匀 。 结果 如 表 ３所 示 。 溶液 ，混 匀 。４ ０ ０ ０ ｒ ｐ ｍ 离 心 ５ｍｉ ｎ ，取 上 清 待 １ ． ２ ． １ １ ５ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ乙酸铵 水溶液 （ 含０ ． １ ％ 净化 。 甲酸 ） ：称 取 Ｏ ． ３ ８ ５ ｇ乙 酸铵 ，溶 于 １ ０ ０ ０ ｍＬ 黄 曲霉毒素 免疫亲和柱 ，去掉柱子的顶 水中，加入 ｌ ｍＬ甲酸 ，混匀 ，超声 ３ ０ｍｉ ｎ 。 表 ｌ几种乳制 品黄 曲霉毒素 Ｍ 。 残留量测定结果 （ ｎ ＝ ３ ）
免疫亲和柱净化-HPLC柱后光化学衍生荧光法测定花生饮料中的黄曲霉毒素B1
收稿日期：2019-11-26作者简介：邹沫君（1987—），女，工程师，硕士，研究方向为食品安全检测。
E-mail ：****************摘要：建立了免疫亲和柱净化-光化学衍生高效液相色谱荧光法测定花生饮料中黄曲霉毒素B 1含量的方法。
试样经乙腈-水溶液（体积比80∶20）提取，免疫亲和柱富集和净化后，采用Thermo Syncronis C 18色谱柱（250mm×4.6mm ，5μm ），以甲醇-水（体积比55∶45）为流动相，等度洗脱，荧光检测器检测（Ex ：360nm ，Em ：440nm ）。
结果表明：黄曲霉毒素B 1检出限为7.54×10-3μg/kg ；标准曲线的线性范围为0.1~20.0ng/mL （r =0.9999）；3个不同水平的加标平均回收率为96.88%～98.82%，RSD 值为0.85%～1.07%。
10批试样中黄曲霉毒素B 1测定值为0～2.09μg/kg ，均无过量残留。
该方法具有操作简便、灵敏度高、重现性佳等特点，适用于花生饮料中黄曲霉毒素B 1的检测。
关键词：免疫亲和柱；高效液相色谱；光化学衍生；花生饮料；黄曲霉毒素B 1Determination of Aflatoxin B 1in Peanut Beverage by HPLC-FLD with Photochemical Derivatizationafter Immunoaffinity Column PurificationZOU Mo-jun 1，CHEN Cheng 2（1Leshan Center for Food and Drug Control ，Leshan 614000，China ；2Shandong Highspeed Sichuan Industrial Operation Company ，Leshan 614000，China ）Abstract:A method was developed for determination of aflatoxin B 1in peanut beverage by HPLC-FLD with photochemical derivatization after immunoaffinity column purification.In the experiments ，the samples were extracted by acetonitrile-water （80∶20v/v ），then the extract was purified by immunoaffinity column ，and aflatoxin B 1was separated by reversed-phase HPLC ，and then quantified with fluorescence detection （Ex ：360nm ，Em ：440nm ），and the separation was performed on a Thermo Syncronis C 18Column （250mm×4.6mm ，5μm ）with isocratic elution of methanol-water （55∶45v/v ）.The detection limits were 7.54×10-3μg/kg for AFT B 1.The calibration curve of AFT B 1was achieved in the concentration range of 0.1～20.0ng/mL （r =0.9999）.The recovery of AFT B 1spiked to peanut beverage was within 96.88%～98.82%and the relative standard deviations were between 0.85%to 1.07%.10samples measured value is 0～2.09μg/kg for AFT B 1，and all samples have no excessive additives.The method is simple and convenient ，good reproducibility ，suitable for AFT B 1determination in peanut beverage.Key words:immunoaffinity column ；high performance liquid chromatography ；photochemical derivatization ；peanut beverage ；aflatoxin B 1中图分类号：TS207.3文献标志码：A文章编号：1007-7871（2020）04-0030-05黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒的代谢产物，它们具有很强的致癌性，主要存在于谷物、花生、坚果、棉籽、饲料、植物油以及动物组织和血液中。
中检食安：黄曲霉毒素B1B2G1G2M1M2免疫亲和柱
黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2/M1/M2免疫亲和柱【用途】免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素，从而对样品起到非常针对性的净化作用，过柱净化后的样品液可直接用于HPLC 分析。
亲和柱与HPLC 配合使用可达到快速测定的目的，以改善信噪比，可提高检测方法的准确度。
本亲和柱可用于样品中黄曲霉毒素(B1、B2、G1、G2、M1、M2)的样品提取、净化。
【原理】测定的基础是抗原、抗体反应，抗体连接在柱体内，样品中的黄曲霉毒素经过提取、过滤、稀释，然后缓慢的通过黄曲霉免疫亲和柱，在免疫亲和柱内毒素与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。
用甲醇洗脱黄曲霉毒素，然后注入到分析仪器中用于检测。
【柱容量及规格】柱容量：AFB1------300ngAFB2------300ngAFG1------300ngAFG2------300ngAFM1------100ngAFM2------100ng规格：1ml------25/50支装3ml------25/50支装【包装组成】每一个盒中包括各种规格黄曲霉毒素免疫亲和柱及1 份说明书。
【设备及耗材】（需要的材料但包装中不提供）----HPLC----衍生装置：如光化学衍生器、电化学衍生器、碘衍生装置----气控操作架----空气泵----天平----高速均质器（最高转速≥10,000r/min）或摇床----粉碎机----高速冷冻离心机（乳品检测用，可设置10℃，7,500r/min）----恒温培养箱或水浴锅（乳品检测用，可设置35℃～37℃）----分样筛：1mm 孔径----量筒：100mL/10mL----漏斗：50mL----注射器：10 mL/20mL----移液器或移液管：1mL----均质杯（或250mL 具塞锥型瓶）----样品瓶----快速定性滤纸----离心管：50ml（乳品检测用）----微纤维滤纸（Whatman 934-AH【贮藏条件及有效期】贮藏条件：2～8℃。
黄曲霉毒素b1免疫亲和柱
黄曲霉毒素b1免疫亲和柱黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1, AFB1）是由黄曲霉（Aspergillus flavus和Aspergillus parasiticus）等霉菌产生的一种有毒物质，其分子式为C17H12O6，分子量为312.3 g/mol，结构中有两个羟基、一个醛基和一个延伸的侧链结构。
黄曲霉毒素B1在高温高湿的环境下容易形成，常存在于生长于土壤和植物表面的黄曲霉菌中，例如腰果、棉花、稻谷、花生、大豆、玉米等植物中。
其毒性非常强，对人、动物和某些禽鸟都有毒害作用。
长期摄入或接触黄曲霉毒素B1的人和动物将会导致慢性中毒，并可能引发肝癌等重疾。
目前，对黄曲霉毒素B1的检测和分析已成为食品安全和动物养殖领域的一个热点问题。
传统的检测方法包括高效液相色谱法、气相色谱法、荧光分析法、酶联免疫法等，但这些方法需要昂贵的设备、复杂的试剂和专业的技术，且需要耗费较长的时间。
因此，研究发展一种简单、快速、高效的检测方法势在必行。
近年来，利用免疫亲和柱检测黄曲霉毒素B1的方法受到了广泛关注，该方法利用特异性抗体对黄曲霉毒素B1进行识别和分离，具有灵敏度高、重复性好、操作简便等优点。
其中，黄曲霉毒素B1免疫亲和柱是一种基于免疫亲和技术的检测手段，专门用于检测食品、饲料中的黄曲霉毒素B1。
黄曲霉毒素B1免疫亲和柱的工作原理是利用免疫亲和作用：将黄曲霉毒素B1与特异性抗体固定在免疫柱上，样品中的黄曲霉毒素B1与抗体发生特异性结合，其他物质则被快速洗脱，最终通过洗脱产物的吸收值或荧光强度等定量分析黄曲霉毒素B1的含量。
黄曲霉毒素B1免疫亲和柱的制备工艺和方法具有一定的技术难度，主要分为固相法和液相法两种。
固相法是将黄曲霉毒素B1固定在固相载体（如聚丙烯、硅胶等）上，再通过共价键或物理吸附的方式将抗体与固相载体结合，最终形成具有特定抗体亲和性的黄曲霉毒素B1免疫亲和柱。
液相法是将黄曲霉毒素B1修饰为衍生物（如半胱氨酸衍生物等），然后将抗体固定在固相载体上，最后通过液相方式将修饰后的黄曲霉毒素B1与抗体进行结合，形成黄曲霉毒素B1免疫亲和柱。
黄曲霉毒素分析方法——
黄曲霉毒素分析方法——-免疫亲和净化柱/UVE法一、免疫亲和净化柱/UVE法简介：利用德国LCTech品牌AflaCLEAN 净化柱可以将黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2专一分离出来，然后用HPLC/FLD分别测定黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2。
二、免疫亲和净化柱/UVE法特点：专用AflaCLEAN 净化柱使得样品制备与提取简单快速，成本低灵敏—HPLC可至30ppt—200ppt(黄曲霉毒素B1)。
简便实用，衍生化没有衍生试剂消耗（通常柱后衍生均需要使用衍生试剂，分析成本高，操作麻烦，仪器故障率较高）回收率高三、免疫亲和净化柱/UVE法操作步骤简介：1、提取样品：研磨、称重50g样品；用甲醇/水（80/20 V/V）混合物将样品高速混匀 1 分钟。
2、过滤：将提取的样品滤膜过滤，然后再过0.4 μm滤膜。
3、吸附、淋洗：将滤液2 ml加到 8ml PBS 缓冲液（pH 7.2）后，通过AflaCLEAN 净化柱，流速不大于1 mL/min；用10ml水清洗亲合柱；用甲醇1ml 两次将黄曲霉毒素从亲合柱上淋洗下来，并收集于HPLC进样小瓶中。
4、测定：HPLC直接进样，在经过柱分离后，被UVE衍生化，被荧光检测器记录各种黄曲霉毒素的浓度。
四、UVE™和 HPLC参数UVE™波长：254 nmHPLC-柱： 150 x 4.6 mm; C-18洗提液: 水 / 乙腈 / 甲醇 (60 / 15 / 30 // v / v / v)流量：1.0 mL/min柱温： 30 °C进样体积： 20 – 100 μLλ-激发波长： 365 nmλ-发射波长： 440 nm五、主机配置德国LCTech公司 UVE™主机，配有1ml反应池，9v 紫外灯254nlUVE™主机黄曲霉素免疫亲和AflaCLEAN净化柱黄曲霉素 ELISA试剂盒以下为德国LCTech公司黄曲霉素相关产品订购信息：以下为德国LCTech公司黄曲霉素相关产品订购信息：。
MS-Clean黄曲霉毒素M1免疫亲和柱
MS-Clean黄曲霉毒素M1免疫亲和柱
MS-Clean黄曲霉毒素M1免疫亲和柱
概要：
黄曲霉毒素M1属于黄曲霉毒素的一种。
哺乳类动物摄入被黄曲霉毒素B1污染的饲料或食品后，通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1。
黄曲霉毒素M1的危害主要表现为致癌性和致突变性，对人及动物肝脏组织有破坏作用，可导致肝癌甚至死亡。
由于黄曲霉毒素M1对人类的健康构成了很大威胁，世界各国对该物质在乳及乳制品中的存在均有严格的限量标准。
测定原理：
此免疫亲和柱以抗体-抗原特异性反应为基础，含有和黄曲霉毒素M1抗体结合在一起的凝胶。
上样时，经提取、过滤、稀释后的样品缓慢地通过黄曲霉毒素M1免疫亲和层析柱，在柱内黄曲霉毒素M1与抗体结合，其他物质不会结合而直接流出。
此后洗涤免疫亲和柱，完全除去未结合的其他物质。
最后加入甲醇-乙腈混合液，将黄曲霉毒素M1释放并洗脱，再注入到分析仪器中进行检测。
适用范围及用途：
黄曲霉毒素M1免疫亲和柱适用于基质复杂、限量要求低的样品中黄曲霉毒素M1检测的净化。
可以进行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA等定量分析，适合乳及乳制品等样品。
液相色谱测定条件：
流动相：乙腈：水 = 25:75
流速：1 mL/min
进样量：20-500 uL
色谱柱：C18，4.6x250mm
荧光检测波长：发射波长360nm;激发波长430nm
用进样器吸取黄曲霉毒素M1标准工作溶液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值（峰高或峰面积），得到黄曲霉毒素M1标准溶液的高效液相色谱图。
产品参数及规格：
如果需要购买免疫亲和柱，欢迎搜索摩尔科学。
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多功能净化柱和免疫亲和柱工作原理
（黄曲霉毒素检测）
PriboFast 系列多功能净化柱分为柱压型（带玻璃试管）和推杆型（针筒式）
两种，以极性、非极性及离子交换等基团组成填充剂，可选择性吸附样液中的
脂类、蛋白质类等杂质，毒素不被吸附而直接通过，其操作更为简便，不需要
进行活化、淋洗和洗脱操作，只需要直接上样，30秒钟即可完成整个净化过程，效果理想，可同时净化多种毒素，降低检测成本，有效提高检测效率，稳定性强，回收率高，适用于食品、粮食饲料、饮料、中药材等多种复杂样品。
同时
我们还提供多毒素符合免疫亲和柱。
PriboFast®免疫亲和柱利用抗原抗体特异性可逆结合的原理, 将抗体与凝胶共价结合，然后填充柱子。
将样品提取溶液过免疫亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,最后用洗脱缓冲液洗脱抗原,从而得到纯化的抗原。
其提纯效率很高,适用于
各类复杂样品包括食品、饲料等多种基质。
整个纯化过程30分钟左右。