96孔板铺板转置图
3D细胞培养【范本模板】
3D多细胞肿瘤球的培养原创2017-04—20医生科研助手3D多细胞肿瘤球是在体外应用组织培养方法使肿瘤细胞以多细胞集聚体的形式生长成为具有三维结构的球体。
与传统的2D贴壁细胞培养模型相比，3D多细胞肿瘤球可以通过模拟三维细胞网络、细胞与基质、细胞与细胞之间的相互作用,从而更加贴近肿瘤组织中相应的病理生理特征.因此，3D多细胞肿瘤球培养模型已经逐渐应用于干细胞培养和分化、癌症研究、药物和毒性筛选及组织工程等特定应用中。
虽然3D多细胞肿瘤球模型具有更显著的实体肿瘤生理相关性，但是与2D贴壁细胞培养模型相比，获得大量相对统一的3D多细胞肿瘤球模型需要一系列的培养过程和表征手段。
本文利用Liquid Overlay的制备方法,以乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF—7为模型制备3D多细胞肿瘤球并采用倒置显微镜、激光共聚焦显微镜和环境扫描电镜对其进行详细表征.1实验前准备工作1。
提前24 h取12 mL DMEM和RPMI 1640完全培养基（含10%FBS，下同）于50 mL离心管内，置于4℃冰箱中预冷;2。
将分装好的Matrigel基质胶提前24 h从-20℃放入4℃，使其融化成液体状态;3。
将无菌的1 mL移液器枪头放入无菌50 mL离心管内，置—20℃冰箱预冷。
2琼脂糖包被96孔板1. 准确量取6 mL RPMI 1640培养基（或DMEM培养基）于2个10 mL的注射玻璃瓶内,加入90 mg琼脂糖，盖塞后放入80℃的水浴锅内加热溶解30 min；2。
加热结束后，将注射瓶放入灭菌锅内，115℃灭菌30 min；3。
灭菌完成后，迅速取出注射瓶放入超净台内。
将注射瓶内的琼脂糖溶液倒入无菌的加样槽中，用多通道移液器以每孔60 μL的量加入96孔板内。
注意：由于琼脂糖溶液在室温时会凝固，因此从灭菌锅内取出琼脂糖溶液后一定要快速转移至超净台内并迅速加入至96孔板中。
此外，为保证加样时琼脂糖不冷却，需要同时灭菌加样槽和100 μL的移液器枪头。
培养皿培养瓶种类选择及规则尺寸说明
28
8 21 49 55 25 75 19 37.5
5.0
3.0 5.0 10.0 10.0 5.0 15~30 4.0 10.0
7×106
2.0×106 5.2×106 12.2×106 13.7×106 5×106 2×107 3×106 cm旋转培养瓶
78
430167
430293 430599 431110 431112
规格：100mm；高度：20mm；生长面积：55cm2
规格：100mm；高度：20mm；生长面积：55cm2 规格：150mm；高度：25mm；生长面积：148cm2 规格：245mm(方形)；高度：25mm；生长面积：500cm2 规格：245mm(方形)；高度：25mm；生长面积：500cm2
225cm矩形斜颈透气盖45ml细胞培养选择哪种器皿培养器皿底面积cm加培养液量ml可获细胞量96孔培养板03201101051012孔培养板4520106孔培养板962525104孔培养板28507103020106cm培养皿215052109cm培养皿491001221010cm培养皿551001371025cm塑料培养瓶255051075cm塑料培养瓶75153021025cm玻璃培养瓶1940310100cm玻璃培养瓶375100610250cm玻璃培养瓶781502102500cm旋转培养瓶700100250251024孔板使用方法pll100200l200l即可铺板2h后吸出pll回收pbs冲洗2次晾干备用或不晾干直接用
700
15.0
100~250
2×107
2.5×108
24孔板使用方法
PLL 100-200μl（200μl）即可，铺板2h后，吸出PLL（回收）， PBS冲洗2次，晾干备用或不晾干直接用。加培养液量1ml ，注意 调整细胞密度。 25cm2（5ml）→（1:2）50cm2（10ml）——（1:3）75cm2（15ml） 2cm2（1ml）→1/25——1/40总细胞悬液
细胞铺板的方法
细胞铺板的方法说实话细胞铺板这事，我一开始也是瞎摸索，走了不少弯路呢。
我刚开始做的时候，那叫一个手忙脚乱，完全不知道从哪下手。
我先跟你说一下那个细胞悬液的准备吧。
这就像是做菜先准备食材一样。
你得把细胞从培养瓶里消化下来，我第一次弄的时候，消化酶的量就没控制好，放多了吧，细胞就容易被损伤，放少了呢，又消化不下来。
所以这个消化酶的量得通过多次尝试才能掌握。
我试过不同浓度的消化酶，还记录了每种浓度下细胞消化的时间和效果。
比如说，我发现%的胰蛋白酶，对于我的那种细胞，在37度下消化大概两分钟就比较合适，能让细胞比较好地从瓶壁脱落，而且细胞损伤比较小。
接下来就是要把消化下来的细胞均匀地分到各个孔板里了。
我试过直接用移液器加细胞悬液到孔板，但是很容易造成细胞不均匀分布。
这就好比你给地里种菜撒种子，要是直接一股脑儿倒，那肯定参差不齐。
后来我学了一个办法，就是在加细胞悬液的时候，要缓慢地沿着孔壁加，并且一边加一边轻轻晃动孔板，这样细胞就能比较均匀地散开了。
还有那个细胞的密度，我一直把握不好。
有时候铺得太密了，细胞之间挨得紧紧的，得不到足够的营养就长得不好。
太稀了呢，又觉得浪费了孔板的空间，做实验的数据也不准确。
我也是经过好多次尝试，根据不同的实验和细胞类型，才大概知道合适的细胞密度是多少。
像如果做短期的细胞增殖实验，我这个细胞每平方厘米铺个5000个左右就挺合适。
铺板完成后，我也没闲着，得小心翼翼地把孔板放到培养箱里，这就像把宝贝放到安全的地方一样。
这个移动的过程也要轻，不然的话细胞就又不均匀了。
在培养过程中，我也得时刻关注细胞的状态，看有没有污染之类的问题。
有一次我没注意，就有细菌污染了细胞，那一整板就白费了，特别心疼。
后来我就知道在把新铺好板的细胞放进培养箱之前，一定要好好检查一下周围的环境是否干净，操作有没有遵循无菌原则。
反正细胞铺板就是个熟能生巧的事儿，我还在不断摸索呢，你们要是做的话，也别怕犯错，多做几次就有经验了。
ExpiCHO 表达系统 实验方案 24 孔和 96 孔深孔板 以及微型生物反应器说明书
应用指南 ExpiCHO表达系统ExpiCHO 表达系统24 孔和 96 孔深孔板以及微型生物反应器的实验方案Gibco™ ExpiCHO™表达系统将高表达的 CHO 细胞系及优化的培养基和转染试剂相结合，它们协同作用，滴度较 Gibco™FreeStyle™ MAX CHO 表达系统高 160 倍，较 Gibco™ Expi293™表达系统高 4 倍。
ExpiCHO 表达系统的超高产量 (某些蛋白可达 1–3 g/L) 使您可以减小表达规模，与其他瞬时表达技术相比，大大节约了成本。
我们在此介绍了减小系统规模至 24 孔和 96 孔深孔板以及微型生物反应器的实验方案。
96 孔深孔板中的转染材料• Axygen™ 存储微孔板，圆底，96 孔深孔 (Corning，货号：PDW20CS)• AeraSeal™粘性微孔板盖膜，无菌 (E&K Scientific，货号：T896100-S)• Thermo Scientific™紧凑型数字微孔板振荡器 (Thermo Fisher Scientific，货号：88880023) 或其他 3 mm 轨道的微孔板振荡器注：本实验方案需要使用轨道轨道振荡器；直线反应板振荡器无法充分混匀，不适用于表达实验方案。
常规传代1. 按照 ExpiCHO 试剂盒实验方案，传代并扩增ExpiCHO-S™ 细胞，直至细胞密度达到约 4–6 x 106个活细胞/mL。
第 –1 天：分种细胞2. 转染前一天 (第 –1 天)，按照 ExpiCHO 试剂盒实验方案，分种 ExpiCHO-S 细胞至最终密度为 3–4 x 106个活细胞/ mL，使细胞过夜生长。
第 0 天：转染3. 按照 ExpiCHO 试剂盒实验方案，使用新鲜的 ExpiCHO™表达培养基稀释细胞至 6 x 106个活细胞/mL。
4. 96 孔深孔板 (96DWB) 中每孔分装 0.8 mL 细胞用于转染。
C6细胞24孔板生长曲线,96孔板MTT实验设计
24孔板生长曲线绘制：将培养瓶中的细胞弃旧培养液→用3 ml PBS清洗3遍→1 ml胰酶液37℃消化1min→吹打两次收集细胞至离心管中→离心去上清液→2 ml 10% FBS培养液重悬细胞→计数计算、均匀接种细胞（1 ml，2000个/孔）→（每天计数3个孔）吸弃就培养液，用1 ml PBS清洗2遍，200微升胰酶消化2min →PBS吹打2次收集细胞，计数96孔板MTT实验步骤操作：操作步骤1. 接种细胞：用0.08%胰蛋白酶消化单层培养细胞，用含10%胎牛血清的PMI1640培养液配成单个细胞悬液，以每孔103～104个细胞接种于96孔培养板中，每孔体积200ul。
2. 培养细胞：将培养板移入CO2孵箱中，在37℃、5% CO2及饱和湿度条件下培养。
（培养时间取决于实验目的和要求）3. 呈色：每孔加入MTT溶液（5mg/ml）20ul，37℃孵箱中继续孵育4h，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液。
对于悬浮生长的细胞，需离心（1000rpm，5min），然后弃去孔内培养液。
每孔加入150ul DMSO，振荡10min，使结晶物充分溶解。
4. 比色：选择490nm波长，在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收值，记录结果。
以时间为横轴，光吸收值为终轴绘制细胞生长曲线。
（五）、注意事项1．选择适当的细胞接种浓度。
在进行MTT试验前，对每一种细胞都应测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，然后确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间。
2．避免血清干扰，一般选小于10%胎牛血清的培养液进行试验。
3．设空白对照，与试验平行设不加细胞只加培养液的空白对照孔。
最后比色时，以空白孔调零24孔板直径为15.6mm，培养底面积为1.9cm2，孔高2cm。
实验时每孔所加细胞数目及细胞液的体积依你具体实验目的不同可不同。
一般细胞悬液至少需覆盖孔底，总液量不宜超过2mL(约1/2孔高）。
要使加板均匀最关键的是在加样前细胞要充分混匀、分散；其次在加样时要垂直缓慢注入，使细胞悬液由中央向四周蔓开，避免加样时液体在孔内形成涡流及气泡的产生。
96孔板的介绍
不常用96孔板介绍我们在平时实验中，最多应用96孔板，无非是96孔PCR板、细胞培养板和ELISA板，这些常见的我就不一一介绍；今天和大家一起了解一些，比较不常用的96孔微孔板，了解了以后也许能应用上。
有什么问题可交流；QQ：1294004728首先介绍相关参数：96孔聚苯乙烯微孔板*U型底微孔底为圆形，适用于进行凝聚实验；无死角，适用于移取液体；直径：6.94mm,孔高：10.3mm, 板高：14.2mm总体积：323 μl ;工作体积：40-280 μl*V 型底微孔底部为V型，适用于精准取样；适用于存储微量样品。
直径：6.18mm,孔高：10.8mm, 板高：14.1mm总体积：324 μl ;工作体积：40-200 μl*平底底部是水平的，光透底部不会发生偏折，适用于精密光学实验（底部读取信号）；口直径：6.96mm,底直径：6.39mm;孔高：10.9mm, 板高：14.6mm总体积：382 μl ;工作体积：25-340 μl ;底面积：32mm2.*平底/独立柱状孔与孔之间距离大些，独立分开，能最大程度地减少交叉污染；口直径：6.96mm,底直径：6.58mm;孔高：10.9mm, 板高：14.4mm总体积：392 μl ;工作体积：25-340 μl ;底面积：34mm2.* μClear®(软）底为透明，底部厚度为190μm+20μm，自发荧光极小，在激发波长470nm----590nm之间，最大自发荧光值是10100RFU；适用于荧光显微镜技术，偏振光透过板子时只有极少部分去偏振化。
*白色板主要用于自发光分析检测，底物显色（如双荧光素酶报告基因分析）；*黑色板主要用于荧光检测分析，观察带荧光蛋白标签细胞（如绿色荧光检测分析）；*LUMITRACTM 是白色微孔板，主要用于自发光检测分析；*FLUOTRACTM 是黑色微孔板，主要用于荧光检测分析；LUMITRACTM200，FLUOTRACTM200 中结合力板，聚苯乙烯微孔板中结合力比高结合力表面更疏水，故更适用于无极性的蛋白质和多肽，在ELISA实验中具有高度一致性和可重复性。
磁珠法仪器操作说明书
步骤一：在软件操作主界面，点击“进入方法库”按钮， 进入方法库界面，选中实验方法； 步骤二：点击“编辑实验方法”按钮，进入实验方法编辑界面； 步骤三：对步骤编号、孔位、运行类型、振荡时间、分离时间、振荡幅度以及振荡强度等
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ETP-300 核酸提取仪操作指南
参数，按照实验需求，设定适合实验需求的运行参数；
4.仪器主机
7.磁棒
8.加热体
9.实验盒定位销
B 接口
11.220V 电源插口
备注：上图为 ETP-300 的操作仓，此型号仪器为四列磁棒（标注 7）；
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ETP-300 核酸提取仪操作指南
四．仪器安装
4.1 仪器主机安装 仪器拆除外包装，将仪器搬至仪器工作台，拆除磁棒套固定螺丝，插上主机电源线。仪器
4．环境 核酸提取仪在如下所述的环境下安装、使用： 环境温度：室温； 相对湿度：20-80% ； 额定电压：AC210-240V 50Hz； 额定电流：8A； 额定功率：1750W。
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三．仪器结构
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ETP-300 核酸提取仪操作指南
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1.仪器显示屏
2.仪器样品室门
3.仪器显示屏电源开关
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ETP-300 核酸提取仪操作指南
一．仪器简介
核酸提取仪基于纳米磁珠分选技术，集富集、清洗、洗脱于一体，操作系统采用全过程自 动化控制，通过特异性吸附，轻松实现自动选择性的萃取，在固相萃取分析领域，提供强有力 的工具。
核酸提取仪采用大屏幕、触摸式显屏，全自动化操作，全中文操作系统。拥有最优化设计 的萃取容器和磁棒，适用于各类纳米级磁性材料的提取，仪器内置安全联锁开关，运行状态下 样品舱门一旦打开，仪器自动中断运行。
iCycler iQ荧光定量PCR仪的操作说明
iCycler iQ TM荧光实时多波长PCR检测系统操作说明iCycler iQ TM Multi-ColorReal Time PCR Detection SystemOperating InstructionsCatalog Number170-8740如与英文版说明书有不符之处以英文版说明书为准2．iCycler iQ TM荧光实时多波长PCR检测系统操作速成2.1 简介：iCycler iQ TM荧光实时多波长PCR检测系统可以最多一次检测96个样品，且每个样品中同时可以检测4个不同波长的荧光信号。
也就是说，只要标记不同荧光探针，iCycler可以对同一个孔中两种以上的PCR产物（最多四种）同时进行实时分析。
这样对多重PCR反应或使用内对照（Internal Control）定量的PCR 反应的检测就十分方便。
在反应过程中，不同的荧光信号通过与其匹配的不同波长的滤光镜组来检测。
比如，在一个反应管中同时有四种荧光探针共存，分别标记了FAM、HEX、Texas Red®和Cy TM5，在收集其荧光信号数据的时候，必须同时使用FAM滤光镜组、HEX滤光镜组、Texas Red滤光镜组和Cy5滤光镜组。
所有的收集的信号由iCycler的软件进行分析整理，在PCR反应结束后，该软件可以显示其各自的荧光曲线和标准曲线，并得到这四种荧光探针分别对应的靶DNA的定量结果。
在每次使用iCycler进行PCR荧光定量实验之前，系统必须获得孔间差异因子（Well Factor）和纯染料校准（Pure Dye Calibration）的数据。
系统通过这些数据来区分不同的荧光信号，矫正孔间的误差。
本章节将详细的介绍这两者的调节方法。
您在使用本仪器前请先仔细阅读本章的内容，这将有助于您能够快速地完成实验并获得理想的实验数据。
2.2：iCycler操作速成1.开机前先让摄象系统预热30分钟。
接通iCycler的电源，并连上电脑，打开iCycler的软件。
96孔板层析预装柱
96孔板层析预装柱嘿，说起96孔板层析预装柱，很多人一听这名字就有点蒙圈，啥是层析？啥是预装柱？别担心，今天咱就来聊聊这事儿，保证让你明白个明明白白，顺便还不至于头晕脑胀。
先说说96孔板，听起来像啥高科技产品，其实它就是一块有96个小孔的小板子。
这些小孔可不是随便做的，它们的作用可大了，主要用于实验室里的样品分配，尤其是在做一些分析或者分离工作时。
就像咱们平时用的冰箱，不管你是想放酱油还是放果酱，空间大了，你就能方便地收纳和分类。
同样的道理，96孔板让你在进行化学实验时，可以一板搞定，不用到处找容器，节省了不少麻烦。
那这96孔板上装了啥呢？咱今天的主角——层析预装柱。
你别看这名字听起来有点严肃，实际就是个技术性玩意儿。
层析，简单来说，就是利用不同物质的性质差异来进行分离的过程。
就拿咱常见的茶叶、油和水来说，茶叶泡水后，油是浮在上面的。
这就是一个层析的例子。
通过这种方法，咱可以把混合物里的成分分开，精细到每个小分子，简直像变魔术一样。
再说回96孔板层析预装柱。
这东西怎么用呢？其实挺简单的。
把需要分离的样品滴到96孔板的每一个小孔里，层析预装柱就开始“发挥作用”了。
它里面预先装好了一些分离材料，这些材料根据样品的不同性质，帮忙把混合物里的成分分离开来。
比方说，混合物里的某些成分可能会先被吸附住，其他的则继续流下去。
就这么着，一次实验下来，咱们就能拿到几种分离开的成分，干净又精准。
你可以把它想象成一个筛子，不同大小的颗粒经过筛子后就会被分开，最后留下来的是各自需要的部分。
不过，话说回来，虽然这个过程听起来像是走进了高大上的科学实验室，但其实它给咱们普通人带来的好处还真不少。
你想啊，在日常生活中咱们接触到很多化学产品，药物、化妆品，甚至是食品，背后都有这类层析技术的身影。
它帮助科研人员搞清楚每种成分的比例，确保这些产品的安全性和有效性。
你用了的那瓶护肤品，它的成分是不是安全有效，可能就得靠层析技术来验证。
【整理总结】最全面的MTT大汇总（站在丁香园里许许多多巨人的肩膀上）
【整理总结】最全面的MTT大汇总（站在丁香园里许许多多巨人的肩膀上）相关疾病：•肿瘤•水疱这段做MTT走了不少弯路，后来看了园子里有许许多多的建议和指导，再做时结果好了很多，心里很是感激，于是把众多的帖子进行了总结，希望对后来者有所帮助！同时感谢各位前辈的良帖！！MTT大汇总实验前应明确的问题1.选择适当的细胞接种浓度。
一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。
但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。
这样，才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。
否则细胞数太多敏感性降低，太少观察不到差异。
2.药物浓度的设定。
一定要多看文献，参考别人的结果再定个比较大的范围先初筛。
根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。
切记！否则，可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。
3. 时间点的设定。
在不同时间点的测定OD值，输入excel表，最后得到不同时间点的抑制率变化情况，画出变化的曲线，曲线什么时候变得平坦了（到了平台期）那个时间点应该就是最好的时间点（因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显）。
4.培养时间。
200ul的培养液对于10的4～5次方的增殖期细胞来说，很难维持68h，如果营养不够的话，细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止，影响结果，我们是在48h换液的。
5.MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数。
做MTT时，尽量无菌操作，因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。
6.理论未必都是对的。
要根据自己的实际情况调整。
7.实验时应设置调零孔，对照孔，加药孔。
调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。
对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜，不同的是对照孔加溶解药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。
96孔板定位夹具及其进样装置设计
96孔板定位夹具及其进样装置设计李晶;李冬梅;李增【摘要】在很多自动化生物实验中,都需要用到96孔板来承载液体样本,然后进样装置吸取样本到后端组件去处理和分析.设计一种96孔板定位夹具来保证96孔试剂板安装方便并精确定位,进样装置通过高精度三维机构移动来实现96孔板每一个样本的精准吸取,并有效避免样本之间交叉污染.【期刊名称】《机电工程技术》【年(卷),期】2019(048)006【总页数】3页(P24-25,188)【关键词】96孔板;定位夹具;进样装置;交叉污染【作者】李晶;李冬梅;李增【作者单位】广东顺德工业设计研究院广东顺德创新设计研究院,广东佛山528311;广东顺德工业设计研究院广东顺德创新设计研究院,广东佛山 528311;广东工业大学机电工程学院,广东广州 510006【正文语种】中文【中图分类】TG750 引言现有市场上，96孔PCR试剂板运用最广泛，已成为有一定标准的产品[1-2]。
96孔板选用光学透明纯聚苯乙烯材质，采用特殊工艺加工而成，其内分布12列8行的孔，间隔为9 mm。
三个顶角设计成倒角，防止放错方向，其外形如图1所示。
图1 96孔板三维图1 96孔板定位夹具设计96孔PCR板先存放96个液体样本，然后把锡纸通过封膜机热压密封在PCR板上，然后将孔板放入定位夹具中以保证后续自动化进样精确，这需要定位夹具设计时满足以下三个要求：（1）96孔板相对于定位夹具要完全精准定位；（2）96孔板的放入和取出要方便，易操作；（3）定位夹具便于打开，并能随时停止。
本夹具设计如图2和图3所示，图2为96孔定位夹具结构图，图3为其爆炸图，上盖板和支撑架通过两个阻尼合页连接，此阻尼合页为外购塑料件，可以根据实际需求调整其阻尼大小，上盖板最大可以旋转180h，并由于阻尼合页的阻尼作用，使上盖板可以克服自身重力停在任何位置。
当上盖板和支撑架完全闭合时，需要膨胀开关锁锁紧，由于开关磁铁（钕铁硼磁铁）固定在上盖板上，此时开关电路板上的霍尔开关传感器可以感应到开关磁铁的磁信号，表明上盖板已盖好，并发送信号给上位机然后进行下一步操作。
96孔板固定蛋白的方法
96孔板固定蛋白的方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：96孔板固定蛋白实验是一项常见的生物化学实验，用于研究蛋白质与其他生物分子之间的相互作用。
本文将介绍一种简单而有效的方法来制备并固定96孔板中的蛋白，以帮助研究人员顺利完成相关实验。
1. 准备工作：首先准备好96孔板、蛋白溶液、PBS缓冲液、交联试剂（如甲醛）、1% BSA 溶液、以及其他必要的实验试剂。
保证所有试剂和设备都是干净无污染的。
2. 固定蛋白：将96孔板中的每个小孔用PBS缓冲液洗涤一次，去除不必要的杂质。
然后将蛋白溶液加入到每个小孔中，使得蛋白均匀地覆盖在孔底表面上。
3. 交联固定：将准备好的交联试剂（如甲醛）加入到蛋白溶液中，进行交联固定。
交联试剂可以使蛋白与孔板表面结合更紧密，提高固定效果。
注意避免过度交联，以免影响蛋白的功能。
4. 洗涤步骤：将固定好蛋白的96孔板用PBS缓冲液洗涤数次，去除未结合的蛋白和交联试剂。
洗涤后用吸头或吸水纸将孔板上的液体吸除，避免残留的缓冲液对后续实验造成干扰。
5. BSA 阻断：将1% BSA 溶液加入到每个小孔中，进行蛋白的阻断处理。
BSA 可以减少非特定结合，提高实验的特异性。
时间可以根据具体实验需要调整，通常需要30分钟至1小时。
6. 最后洗涤：使用PBS 缓冲液对孔板进行最后的洗涤，去除未结合的BSA 溶液。
确保洗涤干净后，可以进行后续的实验操作。
通过以上步骤，我们可以成功地固定蛋白在96孔板中，为后续的生化实验提供了可靠的基础。
在进行实验过程中，需要注意实验条件的控制，确保实验结果的准确性和可靠性。
希望这份方法可以帮助更多的研究人员顺利完成96孔板固定蛋白的实验工作，为科学研究的进展做出贡献。
第二篇示例：96孔板是在生物实验中常用的一种工具，用于同时进行多个样品的处理和分析。
固定蛋白在96孔板上进行实验，可以方便高通量的样品处理和分析。
本文将介绍一种固定蛋白在96孔板上的方法，以供参考。
培养板
(五)96孔板细胞接种换液和收集细胞问：最近我用96孔培养板培养肿瘤细胞，结果细胞长得不是很理想，不是长得不均匀，就是每个孔细胞生长速度不一样。
另外，镜下观察细胞轮廓很不清晰，怎么调焦距效果都不好。
（板子是刚拆封的。
）不知道怎么回事？答：You should make sure that you triturate the cells very well. If the cells tend to form clumps，use a pasteur pipet and pass the cells several times. Then count the cell using Trypan Blue. Plate 1-5*10^4 per well，depending on your desired density. Usually，only the 60 wells in the middle should be used for plating cells. Wells on the edge will have a decreased volume of media，so you should not add any cells in there，but you still need to put media or H2O inside those 36 wells.首先你要尽可能把消化细胞消化成单个细胞（不要成团），反复吹打，掌握好时间（不同的细胞要摸索的），种细胞时要均匀的吸取，清清的吹打一遍再吸取细胞，这样也许会解决您的问题。
我以前也是出现这样问题。
后来就很好了！！种到96孔板的细胞一定要消化成单个细胞，建议用EDTA和胰酶消化。
加血清后反复吹打。
细胞量尽量少一点。
我一般在铺板时都是用八排枪加样的，感觉效果还不错。
首先如楼上所说要把细胞消化的恰到好处，背着光看瓶底细胞都下来后再对着瓶壁吹打几次即可。
高产高质的KingFisherFlex96孔深孔板工艺流程
高产高质的KingFisher Flex 96孔深孔板工艺流程SP&A Application laboratory, Thermo Fisher Scientific, Vantaa, Finland翻译：公杰赛默飞世尔科技KingFisher Flex磁珠处理设备是一台在96孔板中完成如蛋白、核酸等样品制备的自动化纯化仪。
为进一步强化KingFisher Flex处理样品的能力，我们开发并优化了适用于KingFisher Flex的深孔板。
以下将介绍关于磁珠回收效率，以及用Thermo Scientific 96深孔板进行RNA纯化的相关分析。
简介：KingFisher Flex应用一项先进的专利技术，通过转移磁珠的方法更有效、更具重复性的从各种各样的原始样品中纯化蛋白质、核酸以及细胞等。
目的分子经过结合、清洗直至最后的洗脱等自动化流程，最后从磁珠洗脱下来的纯化样品用于其他多种类型的后续分析。
KingFisher Flex 的96孔布局兼容PCR板的整板提取，同时，KingFisher 96孔板和96孔深孔板可以满足20-1000μl样品的处理。
为加强KingFisher Flex处理样品的能力，我们开发了96 孔深孔板，称之为96 DW Plate。
在本文的应用中，我们以Total RNA纯化为例，详细阐述了96 DW Plate 在KingFisher Flex应用中的优点，以及96 DW Plate在磁珠回收率上显而易见的优越性。
该数据在KingFisher Flex的早期机型--KingFisher 96上得到验证。
96 DW Plate与特制的96 DW磁头套、96 DW 磁头以及96 DW加热块配套使用。
所有液体体积以及磁头运动都针对96 DW Plate以及板底高度进行优化。
如果使用其他型号的96孔板，可能因孔容积和板底高度的偏差而导致意外的液体溢出。
如果在纯化过程中需要加热操作，则加热块会抬升至板底部对板内样品进行加热。
FACSAria流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法的优化和应用
FACSAria流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法的优化和应用刘锡娟;丁慧荣;张宏【期刊名称】《生物学通报》【年(卷),期】2010(45)3【摘要】对FACSAria流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法进行优化和应用.通过对液流的调节,获得较稳定的分选设定值;在96孔微孔板盖上分选肉眼可见液滴,确定分选液滴在96孔微孔板每孔相对应的盖上的位置;分选结束后,计数单个细胞存在的细胞孔数;分选细胞培养7 d后.记录单个细胞存在孔数及单克隆形成的数量.结果5个细胞形成的液滴即肉眼清晰可见:96微孔板有单个细胞的孔数为80～90个,单个细胞获得率为83.3%～93.7%,培养7 d后.有活细胞存在的孔数为5～38孔,即单克隆形成率为6.3%～42.2%.分选前在96孔微孔板板盖上分选肉眼可见液滴的简单方法使得对液流位置的判断直观可见;流式细胞仪96孔微孔板单细胞分选是一种简单易行,准确有效地获得单个细胞和单克隆的方法.【总页数】5页(P51-55)【作者】刘锡娟;丁慧荣;张宏【作者单位】北京大学临床肿瘤学院、北京肿瘤医学暨北京市肿瘤防治研究所中心实验室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京,100142;北京大学临床肿瘤学院、北京肿瘤医学暨北京市肿瘤防治研究所中心实验室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京,100142;北京大学临床肿瘤学院、北京肿瘤医学暨北京市肿瘤防治研究所中心实验室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室,北京,100142【正文语种】中文【中图分类】Q2-33【相关文献】1.第三代流式细胞分选仪及96孔板分选单个细胞的方法及参数优化 [J], 闵智慧;程韵枫2.自制鞘液在FACSAriaⅢ流式细胞仪分选CD3+CD4+淋巴细胞中的应用 [J], 杨继辉;牛楠;宋佳卉;赵巍3.流式细胞仪MoFlo Astrios EQ96孔板单细胞分选方法的条件优化 [J], 张小翠;符蓉;赵犇鹏4.FACSAriaⅢ流式细胞仪分选小鼠肺脏自然杀伤细胞方法的建立与评价 [J], 户乃丽;徐晓雪;邹林樾;田蜜5.BD FACSAria Ⅲ流式细胞分选仪的常见故障分析 [J], 任晓越;李敬贤;熊缨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
基于SolidWorks 96孔薄膜热封板温度场模拟与优化设计
基于SolidWorks 96孔薄膜热封板温度场模拟与优化设计魏银文;朱磊;高贯虹
【期刊名称】《包装工程》
【年(卷),期】2013(34)17
【摘要】针对生化分析领域96孔样品池薄膜热封的热封板温度场分布问题,运用SolidWorks三维软件进行建模,并运用插件Simulation对其施行有限元分析和优化设计。
首先,对现有的薄膜热封板进行了建模仿真分析,其次经过实验验证,得出模拟数据与实测数据吻合,说明该模拟仿真的思路和方法适合于优化此类非等温平板的传热问题的。
最后通过对热封板中的电热丝不同排布及不同排布方式中电热丝绕行间距的调整,使得优化设计方案达到热板表面最大温差在±1℃以内。
【总页数】4页(P9-11)
【关键词】薄膜热封;有限元分析;优化设计;电热丝;SolidWorks仿真
【作者】魏银文;朱磊;高贯虹
【作者单位】常州大学;常州福生生物技术有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】TB484
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