MPT-NAG测定N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的应用价值
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定试剂盒(MPT法)产品技术要求利德曼
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）测定试剂盒（MPT法）适用范围：本产品用于体外定量测定人尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的含量。
1.1 规格试剂1（R1):2×45mL、试剂2（R2): 2×15mL；校准品（选配）：1×2mL；质控品（选配）：1×2mL。
1.2 组成试剂盒由试剂、质控品（选配）和校准品（选配）组成。
试剂1(R1)：柠檬酸缓冲液（PH=4.5），200mmol/L。
试剂2(R2)：6－甲基－2吡啶－N－乙酰－1－硫代－β－D－氨基葡萄糖苷，6mg/dl。
校准品：冻干品，含NAG：（100～200）IU/L、磷酸盐缓冲液：50mM、乳糖：5％、酶稳定剂：1％。
质控品：冻干品，含NAG：（5～25）IU/L、磷酸盐缓冲液：50mM、乳糖：5％、酶稳定剂：1％。
2.1 外观液体双试剂：R1：无色澄清液体；R2：无色或淡黄色液体。
校准品：冻干品，溶解后为无色液体。
质控品：冻干品，溶解后呈黄色匀质液体。
2.2 装量:不得低于标示体积。
2.3 溯源性：根据GB/T 21415及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，该校准品溯源至Inner standard。
＜1.5ABS ( 1cm；340nm；37℃)。
2.4 空白吸光度： A（空白）2.5 灵敏度：浓度为100IU/L时，吸光度变化△A/min＞0.01 ABS。
2.6 线性：测定结果在(0,200]IU/L范围内r≥0.996；测定结果(5,200] IU/L 时相对偏差应≤15%，测定结果(0,5] IU/L时绝对偏差应<0.75 IU/L。
2.7 精密度：用（5～12）IU/L和（15～25）IU/L的样本各重复检测10次，其变异系数CV<5%。
2.8 批间差：取三个批号试剂，分别测定浓度接近正常值上限的样本，每个批号测3次，不同批号之间测定结果的相对极差应<10%。
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒(MPT底物法)产品技术要求zhongshengbeikong
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒（MPT底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清或尿液中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶含量。
1.1规格液体双剂型试剂1（R1）：60mL×2，试剂2（R2）：20mL×2；试剂1（R1）：60mL×1，试剂2（R2）：20mL×1；试剂1（R1）：45mL×2，试剂2（R2）：15mL×2；试剂1（R1）：30mL×2，试剂2（R2）：10mL×2；选配校准品：1mL×1；选配质控品（2个水平）：1mL×2。
1.2规格划分说明根据净含量划分规格。
1.3主要组成成分试剂盒由试剂1（R1）液体、试剂2（R2）液体、校准品液体（选配）和质控品液体(选配）组成。
1.3.1 试剂1（R1）液体：柠檬酸缓冲液 0.1mmol/L1.3.2试剂2（R2）液体：MPT-NAG 50mmol/L1.3.3 校准品液体：人血清：10U/L～80U/L（每批定值）1.3.4质控品液体：人血清定值范围：水平1：10U/L～50U/L；水平2：50U/L～150U/L。
（每批定值）2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足：a)试剂1（R1）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；b)试剂2（R2）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；c)校准品应为无色至浅黄色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
d)质控品应为无色至浅黄色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2 试剂空白吸光度和试剂空白吸光度变化率在波长340nm处（320～360nm）（光径1cm），试剂空白吸光度（A）应≤0.4000。
试剂空白吸光度变化率（△A/min）应≤0.0200。
2.3准确度测定N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶纯品，回收率应在80%～120%范围内。
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定试剂盒(MPT底物法)产品技术要求sainuopu
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）测定试剂盒（MPT底物法）适用范围：用于体外定量测定人体尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的活性。
1.1试剂盒包装规格试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×54ml，试剂2：2×18ml；试剂1：3×39ml，试剂2：3×13ml；试剂1：4×54ml，试剂2：4×18ml；试剂1：2×300ml，试剂2：1×200ml；试剂1：2×30ml，试剂2：2×10ml。
校准品（选配，冻干品）：1×1ml；1×2ml。
质控品（选配，冻干品）：1×1ml；1×2ml。
1.2试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：无色或淡黄色液体。
校准品：冻干品，溶解后为无色至黄色液体。
质控品：冻干品，溶解后为无色至黄色液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于1.5。
2.3.2试剂空白吸光度变化率在37℃、340 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（△A/min）应不大于0.05。
2.4 分析灵敏度测定活性为100U/L样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.01。
2.5 线性范围在（0，200）U/L线性范围内，线性相关系数r应不小于0.996。
在（20，200）U/L范围内的线性相对偏差应不大于±15%；在（0，20] U/L范围内的线性绝对偏差应不大于±3U/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定标准操作程序
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定标准操作程序1.摘要N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测主要用于肾脏疾病、肝硬化和慢性活动性肝炎的诊断。
2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测尿液中NAG的浓度。
3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定NAG浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）试剂盒采用的是速率法。
5.原理26N---O---β−+−→−DN NAG-H-氨基葡萄糖苷乙酰硫代吡啶甲基巯基吡啶氨基葡萄糖-甲基-乙酰62--2--N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)催化底物6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)水解产生6-甲基-2-巯基吡啶(MPT)和N-乙酰-氨基葡萄糖，MPT在340nm附近有吸收峰，所以，可以通过监测340nm附近的吸光度变化值计算样本中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力。
6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：柠檬酸缓冲液、Tris6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷、防腐剂7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用上海科华公司提供的K校准因子对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：上海科华公司提供的生化质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
N—乙酰—β—D—氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒(MPT底物法)产品技术要求深圳市新产业生物
医疗器械产品技术要求编号：2.性能指标2.1外观a)试剂盒各组分应齐全、完整；无液体渗漏；包装标签应清晰、准确、牢固。
b)R1、R2 试剂瓶内的试剂应为清澈透明液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。
2.2装量试剂装量应符合表 1 的要求。
表 1 装量要求试剂组分数量（瓶）每瓶装量R1 3 ≥ 60 mLR2 1 ≥ 60 mLR1 3 ≥ 60 mLR2 1 ≥ 60 mL校准品 1 ≥ 1 mLR1 1 ≥ 60 mLR2 1 ≥ 20 mLR1 1 ≥ 60 mLR2 1 ≥ 20 mL校准品 1 ≥ 1 mLR1 2 ≥ 30 mLR2 2 ≥ 10 mL R1 2 ≥ 30 mL R2 2 ≥ 10 mL 校准品 1 ≥ 1 mL2.3空白吸光度试剂盒测试纯化水，在37℃、主波长340 nm、副波长405nm、1cm 光径条件下，空白吸光度≤0.400 Abs。
2.4空白吸光度变化率试剂盒测试纯化水，空白吸光度变化率≤0.020Abs/min。
2.5分析灵敏度试剂盒测试活性浓度为50 U/L 的被测物时，吸光度变化率≥0.010 Abs/min。
2.6线性区间试剂盒线性在[0.3，200] U/L 区间内，应符合如下要求：a) 线性相关系数(r)≥0.9900；b) [0.3，12] U/L 区间内，线性绝对偏差在±1.2U/L 范围内；(12，200] U/L 区间内，线性相对偏差在±10%范围内。
2.7精密度2.7.1重复性试剂盒测试活性浓度在（12±2.4）U/L 和（30±6）U/L 范围内的样本时，所得结果的变异系数CV≤5%。
2.7.2批间差试剂盒测试活性浓度在（12±2.4）U/L 和（30±6）U/L 范围内的样本时，批间相对极差R≤10%。
2.8准确度a)单个样本回收率在90%～110%范围内；b)两个样本回收率与平均回收率的差值在±10% 范围内；c)比例系统误差﹤10%。
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定试剂盒(MPT法)产品技术要求百奥泰康
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)测定试剂盒（MPT法）适用范围：该产品用于体外定量测定人尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的活性。
1.1 产品规格1.2 组成成分1.2.1 试剂组成试剂1：柠檬酸缓冲液（PH=4.5），200mmol/L试剂2：6－甲基－2吡啶－N－乙酰－1－硫代－β－D－氨基葡萄糖苷，6mg/dL。
1.2.2 校准品的组成冻干品，含NAG（30IU/L）、磷酸盐缓冲液（50mM）、乳糖（50g/L）。
定值范围为：20-50U/L。
1.2.3质控品的组成冻干品，含NAG（10IU/L）、磷酸盐缓冲液（50mM）、乳糖（50g/L）。
定值范围为：5-25U/L。
2.1 外观液体双试剂：试剂1：无色至淡黄色液体；试剂2：无色至淡黄色液体。
校准品：冻干品，溶解后为无色至淡黄色液体。
质控品：冻干品，溶解后呈黄色匀质液体。
2.2 装量不得低于标示体积。
2.3 空白吸光度空白吸光度应≤1.02.4 空白吸光度变化率空白吸光度变化率应≤0.05。
2.5 灵敏度浓度为100IU/L时，吸光度变化（△A/min）应≥0.01 。
2.6 线性：在(0,200.0]IU/L线性范围内，线性相关系数r 应≥0.990；在(0,50]IU/L范围内绝对偏差不超过5IU/L；在(50,200]U/L范围内的相对偏差不超过±10%。
2.7 精密度：变异系数CV应≤5%。
2.8 批间差：不同批号之间测定结果的相对极差应≤10%。
2.9 准确度回收试验：回收率在90%-110%之间。
2.10 质控品赋值有效性测定值在质控靶值范围内。
2.11瓶间重复性（均一性）校准品、质控品瓶间重复性CV≤5%。
2.12校准品溯源性根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。
功能性食品添加剂 N-乙酰-D-葡糖胺的理化性质
功能性食品添加剂 N-乙酰-D-葡糖胺的理化性质
赵黎明;夏文水
【期刊名称】《食品与生物技术学报》
【年(卷),期】2002(021)004
【摘要】N-乙酰-D-葡糖胺是一种具有多种生理活性和功能性质的重要氨基糖.实
验研究了NAG的一些重要理化性质和加工稳定性,为NAG在食品中的应用提供理论依据.结果表明,NAG易溶于水,微溶于乙醇;NAG晶体在120 ℃、6 h下保留率
大于98%,性质稳定;在100 ℃、6 h、pH 3.0～8.5的条件下,NAG水溶液稳定性好,pH超过8.5则保留率大大降低,并伴有颜色变化;NAG在牛奶杀菌条件下性质稳定;NAG不具有吸湿性和保湿性.
【总页数】5页(P357-361)
【作者】赵黎明;夏文水
【作者单位】江南大学,食品学院,江苏,无锡,214036;江南大学,食品学院,江苏,无锡,214036
【正文语种】中文
【中图分类】Q532.3
【相关文献】
1.比色法测定N-乙酰葡糖胺和N-乙酰半乳糖胺 [J], 陈祥娥（编译）;樊志萍（校）
2.PMP柱前衍生化法测定N-乙酰-D-甘露糖胺和N-乙酰-D-葡萄糖胺 [J], 陈鹏远;朱蕾;谢锋;尚广东
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4.壳聚糖及N-乙酰-D-葡糖胺在食品工业中的应用前景广阔 [J], 孙华林
5.转化N-乙酰-D-葡糖胺产油真菌的筛选 [J], 吴思国;赵鑫;胡翠敏;张素芳;华艳艳;赵宗保
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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)检测
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）检测
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（Soil N-acetyl-β-D-glucosidase, S-NAG）是一种酸性水解酶，主要分布于土壤微生物的溶酶体中，其活性变化与机体某些病理状态密切相关。
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶的测定原理：S-NAG分解对硝基苯β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性。
迪信泰检测平台采用生化法，可高效、精准的检测土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性变化。
此外，我们还提供其他土壤酶类检测服务，以满足您的不同需求。
生化法测定土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关参数（中英文）
3. 图片
4. 原始数据
5. 土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶活性信息。
21-资料3：NAG综述资料2
料目录N-乙酰-Β-D-氨基葡糖糖苷酶测定试剂盒（比色法）综述资料 (1)1.产品的预期用途 (1)1.1产品预期用途 (1)1.2 与预期用途相关的临床适应症背景情况 (1)2. 产品描述 (2)2.1产品的技术原理 (2)2.2 主要原材料的来源及制备方法 (2)2.3主要生产工艺过程 (3)2.3.1生产配方及生产工艺流程图 (3)2.3.2生产操作步骤与工艺技术要求 (5)2.4 质控品、校准品的制备方法及溯源（定值）情况 (5)3. 有关生物安全性方面说明 (5)3.1 各原料的生物安全性评价 (6)3.2 N-乙酰-Β-D-氨基葡糖糖苷酶测定试剂盒（比色法）的生物安全性评价 (6)4. 有关产品主要研究结果的总结和评价 (6)4.1主要研究结果的总结 (6)4.2产品性能的评价 (7)4.3临床试验评价 (7)5. 其他 (7)5.1 同类产品在国内外批准上市的情况 (7)5.2 相关产品所采用的技术方法及临床应用情况 (8)5.3 申请注册产品与国内外同类产品的异同 (10)6. 结论 (10)7. 主要参考文献 (10)附件..校准品溯源资料附件1..校准品标准物质证书附件2..校准品的配置操作规程附件..校准品稳定性研究附件..干扰实验研究料1.产品的预期用途1.1产品预期用途本试剂盒主要是用于检测人体尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）的活性。
临床上主要用于辅助评价肾小管损害。
1.2 与预期用途相关的临床适应症背景情况NAG又称尿酶，是广泛分布于人体各组织细胞中的溶解体水解酶，与黏多糖类及糖蛋白代谢有关。
在近曲小管上皮细胞和前列腺中含量较高。
NAG分子量约为14kD，正常情况下，血清中NAG不能通过肾小球滤过从尿中排泄。
故尿中的NAG主要来自肾近曲小管上皮细胞，此酶在尿中稳定，成人尿中正常参考值范围为0.3-12U/L（各医院的测试方法不同，参考值不完全相同）。
尿中NAG的升高是肾脏疾病的早期表现，是肾小管损伤的敏感指标。
诊断试剂系列新品原料推荐-体外诊断试剂系列原料推荐
体外诊断试剂系列原料推荐1、CNP-AFU和M-G-CNP-AFU应用于原发性肝癌检测原发性肝癌（PHC）是我国常见的恶性肿瘤之一，是一种恶性程度高、进展快、预后差、侵袭性强的恶性肿瘤，其死亡率在消化系统恶性肿瘤中列第3位，仅次于胃癌和食管癌。
早诊断、早治疗，是延长生存期、降低死亡率的关键。
甲胎蛋白（AFP）是诊断PHC的重要指标，但30%～40%的PHC患者AFP阴性，因此寻找更特异、敏感的肿瘤标志物和诊断方法是研究肝癌的重要课题。
α-L-岩藻糖苷酶(α-L-Fucosidase, AFU)是一种溶酶体酸性水解酶，存在于人体肝、胰、脑、肺、肾纤维细胞等溶酶体内，以肝肾含量最高，它主要水解含有岩藻糖的脂质，粘蛋白及粘多糖. 正常组织糖苷酶的释放率变化很小(孕妇除外)，从而使血清糖苷酶维持在一定范围内. 血清AFU水平测定以往主要用于该酶缺陷引起的岩藻糖酶缺陷病. 近年来发现肝癌患者血清AFU水平有别于其他肝胆疾病，呈显著性升高，在动物实验中观察到morris鼠肝癌组织中AFU活力较正常肝脏高7倍，可作为一项肝癌非特异性标志物用于本病的诊断，其阳性率为73.9%～81%，特异性为90%. 在AFU阳性与阴性肝癌患者中，AFU阳性率之间无明显差异。
检测原理：2-氯-4-硝基苯基-α-L-岩藻糖苷（2-Chloro-4-nitrophenyl-Alpha-L- Fucopyranoside, CNP-AFU）被样本中的α-L-岩藻糖苷酶作用水解产生2-氯-4-硝基苯（CNP）, 或者MG-2-氯-对硝基苯酚-α-L-岩藻糖苷(M-G-CNP-AFU)被样本中的α-L-岩藻糖苷酶的作用，水解产生MG和CNP。
测定CNP的吸光度的增加量即可以得到AFU的活性。
CNP-α-L-Fucoside＋H2O →CNP＋α-L-岩藻糖或MG-CNP-α-L-Fucoside＋H2O →M＋G＋CNP＋α-L-岩藻糖（1）、性质稳定，溶解性好，配成溶液后稳定性；（2）、操作简单、省时，无需逐个测样品空白，也不必碱化呈色；（3）、有足够的灵敏度，可支持临床检出其相应的目标物；（4）、有较高的准确性和精密度。
NAG N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒(速率法)
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒（速率法）说明书【产品名称】通用名称：N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒（速率法）英文名称： N-acetyl-β-D-glucosaminidase Assay Kit （NAG ）【包装规格】R 1：2⨯40ml R 2：2⨯10ml 、R 1：2⨯60ml R 2：2⨯15ml 、R 1：2⨯20ml R 2：2⨯5ml ，校准 品（选配）：1⨯1ml 、质控品（选配）：1⨯1ml 。
【预期用途】用于临床实验体外定量分析人尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的活力。
临床上主要用于辅助评价肾小管损害。
【检验原理】采用6-甲基-2-巯基吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（MPT-NAG ）为基质。
此基质在样品中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG ）的作用下，分解生成6-甲基-2-巯基吡啶（MPT ）。
通过测定MPT 在340nm 处吸光度的增加速度可求得NAG 的活力。
NAGMPT-NAG+ H 2O MPT+ N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖（NAG 糖苷）【主要组成成份】由试剂R 1、试剂R 2和校准品、质控品组成。
试剂R 1：磷酸氢二钠缓冲液；试剂R 2：磷酸氢二钠缓冲液，6-甲基-2-巯基吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷（MPT-NAG ）。
校准品:N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（ NAG ）、磷酸氢二钠；质控品：磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶注：校准品浓度具体见每批瓶标签，校准品可溯源至Roche 参考品；质控品浓度具有批特异性，见瓶标签；不同批号试剂盒中各组分不可以互换。
【储存条件及有效期】试剂和校准品、质控品在2℃～8℃无腐蚀性气体中避光储存，若无污染，可稳定至失效期，有效期为365天。
试剂开瓶后2℃～8℃可稳定15天。
质控品复溶后在2～8℃条件下可稳定1周。
【适用仪器】日立7170、奥林巴斯AU640、贝克曼LX-20全自动生化分析仪。
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒(MPT底物法)产品技术要求beijian
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定试剂盒（MPT底物法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清或尿液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的活性。
1.1 规格具体产品规格见下表:1.2 组成成分试剂1：柠檬酸缓冲液 200mmol/L试剂2：MPT-NAG 6.34g/L2.1 外观2.1.1 外包装完整无破损；2.1.2 试剂1：无色澄清透明无杂质液体；2.1.3 试剂2：无色澄清透明无杂质液体。
2.2 净含量净含量不低于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在波长340nm、37℃条件下，试剂空白吸光度不大于0.5。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率在波长340nm、37℃条件下，试剂空白吸光度变化率不大于0.01。
2.4 线性2.4.1 线性范围[10.0,200.0]U/L，相关系数r≥0.990。
2.4.2 线性偏差(30.0,200.0]U/L线性范围内，相对偏差不超过±10%；[10.0,30.0]U/L线性范围内，绝对偏差不超过±4.5U/L。
2.5 分析灵敏度检测浓度为40.0U/L的样本时，吸光度变化率不小于0.008。
2.6 重复性检测高、低浓度的血清样本或质控品，重复测试20次，CV≤10%。
2.7 批间差用三个不同批号的试剂测试（20.0±5.0）U/L的同一样本，重复测试3次，相对极差R≤10%。
2.8 准确度回收率在90%～110%范围内。
2.9 稳定性原包装试剂2～8℃避光储存，有效期12个月。
效期后1个月内产品符合2.3、2.4和2.8的要求。
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶同工酶等电聚焦测定及初步临床应用
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶同工酶等电聚焦测定及初步临
床应用
张楚
【期刊名称】《临床检验杂志》
【年(卷),期】1990(000)002
【摘要】无
【总页数】1页(P61)
【作者】张楚
【作者单位】无
【正文语种】中文
【相关文献】
1.以2-甲氧基-4-(2'-硝基乙烯基)酚-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷为底物测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活性 [J], 周午琼;王向阳
2.中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及性质的初步研究 [J], 黄小红;陈宏惠;黄一帆
3.精液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的测定及其临床应用 [J], 张愔;王诗瑾;孙改河
4.急性脑血管疾病患者尿中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷同工酶的变化 [J], 张愔;吴银萍
5.日本沼虾(Macrobrachium nipponense)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶初步纯化及部分性质 [J], 黄小红;王寿昆;黄一帆;陈宏惠
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自动分光光度法测定尿N—乙酰—β—D—氨基葡萄糖苷酶
自动分光光度法测定尿N—乙酰—β—D—氨基葡萄糖苷酶
靳仙宝;姜新民;等
【期刊名称】《上海医学检验杂志》
【年(卷),期】1993(008)001
【摘要】N-乙酰-B-D-氨基葡萄糖苷酶(N-Acetyl-B-D-glucosaminidase NAG EC3、2、1、30)在肾近曲小管上皮细胞中含量丰富。
测定尿NAG对各种肾疾患、肾移植排异反应。
【总页数】3页(P25-27)
【作者】靳仙宝;姜新民;等
【作者单位】山东省千佛山医院，济南250014;山东省千佛山医院，济南250014【正文语种】中文
【中图分类】R446.122
【相关文献】
1.肾结石动态检测尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶和尿微量白蛋白尿的意义 [J],
刘济存
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断中的价值 [J], 柴学峰;王国君;朱宏伟;李华;王国萍
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用VRA-GlcNAc为底物测定N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶
用VRA-GlcNAc为底物测定N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶【摘要】目的应用VRA-GlcNAc为底物建立检测NAG活力的方法，用于尿液NAG活性测定。
方法对离子强度、pH值、底物浓度等最佳反应条件及各种实验参数进行研究。
用该法在日立7180全自动生化分析仪上进行性能分析并测定多种肾病尿样NAG活性，结果该法最低检出限 1.5 U/L，线性范围可达200U/L(r=0.9979)，批内CV为＜4％，批间CV＜6％,回收率为101.2％。
结论本法灵敏度高，结果准确，试剂稳定，适用于全自动生化分析仪操作。
【关键词】VRA-GlcNAc；N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶；动力学法N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)是一种位于溶酶体内的酸性水解酶，尿中NAG主要来源于肾近曲小管上皮细胞，当近曲小管上皮细胞受损时，尿NAG活性将显著升高且早于其他尿酶，对肾小管损害的早期诊断有较大价值［1］，且NAG上升程度与肾小管损伤程度成正比。
［2］可作为早期诊断肾损害的尿标志性蛋白［3］。
本文基于NAG催化VRA-GLCNAC生成红色VRA产物，经反复试验确定最佳实验条件，建立检测尿NAG活力的动力学分析法，该法用于尿NAG活力测定，均获得满意结果。
1 材料与方法1.1 试剂和仪器(1)试剂1(R1)：柠檬酸缓冲液150mmol/L、VRA-GlcNAc1.0g/L、稳定剂适量。
(2)试剂2(R2)：pH碳酸钠缓冲液3 讨论近年来，随着对NAG的研究不断深入，其检测方法也在不断发展。
主要有荧光分光光度法和可见分光光度法。
前者因所需仪器价格昂贵，且对底物溶液配制的要求较高而不宜用作一般医院常规检验；后者试剂稳定性欠佳，难以满足临床检验要求,目前都采用PNP-NAG和CNP-NAG、MNP-NAG作底物建立的方法[4-5],这些方法由于在液体状态下不稳定，造成试剂浪费严重，临床难于推广。
本文以VRA-GLCNAC底物建立的NAG测定试剂优点在于试剂在液体状态稳定性好，该方法最低检出限为1.5 U/L，线性范围可达200U/L，批内CV＜4％，批间CV＜6％,回收率为101.2％。
尿液ｄ—葡萄糖苷酶的测定及其应用
尿液ｄ—葡萄糖苷酶的测定及其应用
李可能;魏明亮
【期刊名称】《上海医学检验杂志》
【年(卷),期】1990(005)001
【摘要】尿标本经葡聚糖凝胶G-25滤过处理。
滤过液中的α-葡萄糖苷酶水解麦芽糖生成葡萄糖,用葡萄糖氧化酶法测定其生成量。
以pH 7.0的Tris-HCl缓冲液终止α-葡萄糖苷酶活性。
此法酶活性在115单位时,60分钟内,酶活性单位与酶作用时间以及标本稀释均呈直线关系,64例健康人随意尿酶活力
(X±SD)17.07±6.56u/gCr;肾脏病患者明显升高(P<0.001)。
【总页数】3页(P31-33)
【作者】李可能;魏明亮
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R446.122
【相关文献】
1.尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶自动化测定 [J], 顾华庆;徐炜烽;戴强
2.尿液β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活力测定的对比分析 [J], 王丽;康淑霞;陶丽岚;王风超
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[J], 陆富安
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Ｉ， 他 条 件 不 变 。 对 ４ Ｌ ＮＡＧ 标 准 酶 进 行 测 定 ， ｐ 其 ５Ｕ／ 在 Ｈ
４６ 酶促反应速率最大 。 ．时
取 浓 度 为 ５Ｕ／ 的质 控 品 作 为样 品 ， 复 Ｌ 重
测 定 １ 次 ， 出 标 准 差 Ｓ 以 ３ 为 最 低 检 测 限 ， 果 为 Ｏ 求 ， 结
・
２ １ ・ ０２
堕 医学与临床 ２ １ 年 ８ ０１ 月第 ８ 卷第 １ 期 Ｉ ｂＭｅ ｌ ， ｕｕｔ ０ １Ｖ １ ， ｏ１ ｄＣｉ Ａ ｇ ｓ ２１ ，ｏ． Ｎ ．６ ６ ａ ｎ ８ 最 大 吸 收峰 ， 定 样 本 在 ３ ０ｎ ｌ 成 ， 受 尿液 颜 色 干 扰 。 该 测 ４ ｉ 完 Ｔ 不 测 定 １ Ｏ名 体 检 健 康 者 尿 液 样 本 ， ６ ０ 男 Ｏ名 ，
４ ８ ５ ０ ５ ２和 ５ ４的柠 檬 酸 一 酸 氢 二 钠 缓 冲 液 ２ ０ ｍｍｏ／ ． 、． 、． ． 磷 ０ ｌ
上 皮细胞受损 时 ， 中 Ｎ 尿 ＡＧ 活 性 将 显 著 升 高 且 早 于 其 他 尿
酶 ， 肾小 管 损 害 的 早 期 诊 断 有 较 大 价 值 ｌ ， ＮＡＧ 上 升 程 对 １且 ］
Ｎ 乙 酰一— Ｉ 基 葡 萄 糖 苷 酶 （ 一 ＢＩ 氨 ） ＮＡＧ） 一 种 位 于 溶 酶 体 内 是
的 酸 性 水 解 酶 ， 对 分 子 质 量 为 １０× １。 存 在 于 所 有 组 织 相 ４ ０， 中 。尿 中 ＮＡＧ主 要 来 源 于 肾近 曲小 管 上 皮 细胞 ， 近 曲小 管 当
度 与 肾 小 管 损 伤 程 度 成 正 比ｌ 。可 作 为 早 期 诊 断 肾 损 害 的 尿 ＿ ２ ］
标 志 性 蛋 白ｌ 。本 文 基 于 ＮＡＧ 催 化 水 解 ６甲基 ２硫 代 吡 啶一 ３ ］ 一 一 Ｎ 乙 酰一－ Ｉ 基 葡 萄 糖 苷 （ Ｔ Ｎ ＢＩ 氨 ） ＭＰ — ＡＧ） 成 无 色 的 ６ 甲基 一一 生 ２ 硫 代 吡 啶 （ Ｔ ， 反 复 试 验 确 定 了 最 佳 实 验 条 件 ， 立 起 简 ＭＰ ） 经 建 便 、 敏 、 定 的 检 测 体 液 中 ＮＡＧ 活 力 的紫 外 动 力 学 分 析 法 ， 灵 稳
各 种 实验 参 数 进 行 研 究 。 用该 法测 定 了 多种 病 尿 样 中 ＮＡ 活 活性 。结 果 该 法 最低 检 出 限 为 １ ５Ｕ／ 线 性 范 围 Ｇ ． Ｌ， 可 达 ２ ０ Ｕ／ （ 一０ ９ ８９ ， 内 Ｃ 为 ＜３ ， 间 Ｃ ％ ５ ， 收 率 为 １ １ ３ 。 结 论 本 法 灵敏 度 高 ， 性 、 密 ５ Ｌ ｒ ． ９ ） 批 Ｖ 批 Ｖ 回 Ｏ ． 线 精 度 好 ， 果 准 确 ， 操 作 简便 快 速 ， 用 于 全 自动 生 物 化 学 分 析 仪 操 作 。 结 且 适
单 位 ， 称 Ｕ／ 简 Ｌ。 １ ３ ２ 实 验参 数 反 应类 型 ．． 速 率 法 ， 长 为 ３０ｎ 主 ） ４ ５ 波 ４ ｍ（ ／ ０
ｎ 副 ） 反 应 温 度 ： ７℃ ； 剂 １用 ２ ０ｔ 试 剂 ２用 ６ Ｌ； ｍ（ ； ３ 试 ４ Ｌ， ＊ Ｏ“
别 为 ５Ｕ／ 和 ２ ０ Ｕ／ 标 本 １份 。 然 后 将 两 份 标 本 按 Ｌ ５ Ｌ
人 ［］ 董 绍 良 ， 述 枚 ， 政 贤 ． 儿 内科 学 ［ 北 京 ： 民卫 ５ 陈 何 小 Ｍ］ 生 出版 社 ， ０ ４ ２ ６ ２０ ：７．
［］ 翟 燕 ． 清 特 异 性 抗 体 检 测 在 肺 炎 支 原 体 感 染 早 期 诊 断 ４ 血 意 义 ［］ 中华 儿 科 杂 志 ，９ ３ ３ ２ ：０ ． Ｊ． １ ９ ，１（） １ １ （ 收稿 日 ： １ ０ ４ 期 ２ １２ ） ０ ２
映 酶 量 的 多 少 。 所 以 试 剂 ２中 ＭＰ ＿ ＡＧ 的 浓 度 确 定 为 ＴＮ
７ｇ Ｉ。 ／
１１ 试剂和仪器 ．
液 ２ ０ｍｍｏ／ ｐ ． ±０ ０ ） 表 面 活 性 剂 １ｇＩ， 定 剂 和 ０ ｌ Ｌ（ Ｈ ４ ６ ． ５ 、 ／ 稳 防腐 剂 适 量 。 （ ） 剂 ２ Ｒ ） 柠 檬 酸 一 酸 氢 二 钠 缓 冲 液 ２试 （２： 磷
每 份 样 品重 复测 定 ３次 ， 均 值 ， 得 回 收 率 分 别 为 １３ ２ 、 取 所 ０ ．
１ １ ５ 、 ９２ ， 均 回 收率 １ １３ 。 ０ ． ９ ． 平 ０ ． ２８ 线性试验 ． 根 据 ＮＣ ｋ （ Ｐ ． ） 评 估 方 案 ， 浓 度 分 Ｃ Ｓ Ｅ ６Ｐ 的 取
１ｕ ｌＬ 的 ＭＰ — Ｇ 发 生 转 变 为 １Ｕ 的 ＮＡＧ 酶 量 为 １ ｍｏ／ Ｔ ＮＡ 个
２ ７ 回收 试 验 ．
在 ｌ份 样 品 中分 别 加 入 低 、 、 ３个 浓 度 的 中 高
ＮＡＧ 质 控 品 ， 同时 样 品 中加 入 相 同体 积 的蒸 馏 水 做 基 础 样 本 ，
检 验 医 学 与 临床 ２ １ 年 ８月 第 ８卷 第 １ ０１ ６期
Ｌ ｂＭ ｅ ｌ ， ｇ ！ ａ ｄｅｉ ｎ
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２Ｏ１ ・ １
Ｉ］ 熊正东． 儿肺炎支原体感染 的治疗［］实用儿科 杂志 ， － ３ 小 Ｊ．
１９ ， （） ２ ５ ９ ３ ８ ３ ：０ ．
方 法 最 低 检 出 限 为 １ ５ Ｕ／ 线 性 范 围 可 达 ２ ０ ｕ／ ｒ ． Ｉ， ５ ｉ（ 一
【 键 词 】 甲基一一 代 吡啶 一 乙酰 口Ｄ 氨 基 葡 萄 糖 苷 ； Ｎ 乙酰一— － 基 葡 萄糖 苷 酶 ； 紫 外 动 力 学 法 关 ２硫 Ｎ一 一－ ｐＤ 氨 Ｄ Ｉ１ ．９ ９ ｊｉ ｎ １７ －４ ５ ２ １ ． ６０ ５ 文 献 标 志 码 ： 文 章 编 号 ：６ ２９ ５ （ ０ １ １－０ １０ Ｏ ：０ ３ ６ ／．ｓ ． ６ ２９ ５ ．０ １ １ ． ５ ｓ Ｂ １ ７ －４ ５２ １ ） ６２ １－２
ＭＰ — Ｔ ＮＡＧ 测 定 Ｎ一 乙酰一一 一 基葡 萄 糖 苷 酶 的 应 用 价值 ＩＤ 氨 ３
余 长福 （ 江省温 州 市瓯 海 区第 三人 民 医院检 验科 浙 ３ ５１ ） ２ ０ ４
【 要 】 目的 应 用 新 型 底 物 ６ 甲基 ２硫 代 吡 啶 一 乙酰一 ） 基 葡 萄糖 苷 （ Ｔ ＮＡＧ） 立检 测 Ｎ 乙酰一— 摘 一 Ｎ Ｉ 氨 ＿ ＭＰ — 建 一 ｐ Ｉ 氨 基 葡 萄 糖 苷 酶 活 力的 紫外 动 力 学新 方 法 ， 于 尿 液 中 ＮＡＧ 活 性 测 定 。方 法 基 于 ＮＡ 催 化 水 解 对 硝 基 苯一 ） Ｉ 用 Ｇ Ｎ 乙酶一 一 氨 基 葡 萄 糖 苷 生 成 有 色的 对 硝 基 酚 这 一 反 应 ， 缓 冲 液 离 子 强 度 、 Ｈ 值 、 物 浓 度 等 最 佳 反 应 条 件 及 对 ｐ 底
２ ０ Ｕ／ ５ Ｌ。
统计软件 。
２ 结 果
２ １ 吸 收 光谱 在 本 实 验 条 件 下从 ３ ０ ４ Ｏｎ 范 围 内 测 定 标 ． ０ ～ ５ ｍ 准 溶 液 的 吸 光 度 ， 知 ６甲 基 ２巯 基 吡 啶 最 大 吸 收 波 长 为 得 一
３ ４０ ｎｍ
２９ 最低检测 限 ．
２ ２ 最 适 缓 冲离 子 强 度 的 选 择 ．
分 别 配 制 ５ 、 ０ 、５ 、 ０ ０ １０ １ ０ ２ ０
和 ２ ０ｍｍ ｌＬ的 柠 檬 酸一 酸 氢 二 钠 缓 冲 液 ， 他 条 件 不 变 。 ５ ｏ／ 磷 其 分 别 测 试 同 一 份 样 品 （５Ｕ／ ） ４ Ｌ 。酶 反 应 速 率 随 缓 冲 液 浓 度 的 增 加 而 增 高 ， 当 浓 度 大 于 ２ ０ｍｍｏ／ 时 ， 反 应 速 率 反 而 但 ０ ｌＬ 酶 降 低 。这 是 缓 冲 液 浓 度 太 大 反 而 抑 制 了 ＮＡＧ 酶 的活 性 ， 而 从 导 致 反 应 变 慢 。 因 此 ， 择 柠 檬 酸一 酸 氢 二 钠 浓 度 ２ ０ 选 磷 ０ ｍｍｏ／ 为 最 佳 缓 冲液 和 最 佳 浓 度 。 ｌＩ作 ２ ３ 最 适 ｐ 值 的 选 择 分 别 配 制 ｐ ． 、 ． 、 ． 、 ． 、 ． Ｈ Ｈ４ ０ ４ ２ ４ ４ ４ ６
２ ０ ｍｍｏ／ （ Ｈ ４ ６ ． ５ 、 Ｔ ＮＡＧ ７ｇ Ｌ、 定 剂 和 防 ０ ｌＬ ｐ ． ±０ ０ ） ＭＰ — ／ 稳
腐 剂适 量 。 （ ） ３ ＮＡＧ酶 标 准 酶 和质 控 品 ， 由浙 江 伊 利 康 生 物 技 术 公 司 提供 。所 有 检 测 在 Ａ ０ Ｕ４ ０全 自动 生 物 化 学 分 析 仪 上
２ ４ 底 物 浓 度 选 择 在 其 他 条 件 不 变 的情 况 下 ， 试 剂 ２中 ． 将
ＭＰ － ＡＧ 浓 度 分 别 调 整 至 ５ ７ ９ｇ Ｌ， 别 测 定 高 、 、 ３ ＴＮ 、 、 ／ 分 中 低
（ ） 剂 １ Ｒ ） 柠 檬 酸 一 酸 氢 二 钠 缓 冲 １试 （１： 磷 种 浓 度 的 质 控 品 。结 果 显 示 试 剂 ２中 ＭＰ — Ｔ ＮＡＧ 浓 度 为 ７ｇ ｉ 底 物 浓 度 与 酶 反 应 速 度 的 反 应 曲 线 尾 部 已 趋 于 平 坦 ， ／ 时 说 明 反 应 速 度 已到 最 大 值 ， 定 此 处 的反 应 速 度 ， 能 准 确 反 测 最
１： 、 １ ３： 、 １ １： 、 ２ １： 、 ４ ０： ０ ４： 、 １ ２： 、 １ １： 、 ３ １： 、 １的 比 例 混
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