空气微生物监测标准操作规程

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空气微生物监测标准操作规程

1. 目的:正确进行空气微生物监测

一、采集指征:

1.医院感染监控重点科室,每月常规监测。

2.发生医院感染暴发流行时。

二、采集方法:平板暴露法

1.采样时间:在消毒处理后、操作前进行采样。

2.采样高度:与地面垂直高度80~150cm。

3.布点方法:室内面积≤30㎡,设内、中、外对角线3点,内、外点布

点部位距墙壁1m处;室内面积>30㎡,设4角及中央5点,4角的布点

部位距墙壁1m处。

4.采样方法:将普通营养琼脂平板(直径9cm)放在室内各采样点处,

采样高度为距地面1.5m采样时将平板盖打开,扣放于平板旁,暴露5min,

盖好立即送检。

三、平板暴露法结果计算公式:将平板置37℃温箱内培养24h计数菌落。

空气细菌菌落总数(CFU/m3)=50000N/(A×T)

式中 A为平板面积(cm2);

T为平板暴露时间(min);

N为平均菌落数(cfu)。

四、结果判定

Ⅰ类区域:细菌总数≤10cfu/m3(或0.2cfu/平板),未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌

为消毒合格;

Ⅱ类区域:细菌总数≤200cfu/m3(或4cfu/平板),未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为

消毒合格;

Ⅲ类区域:细菌总数≤500cfu/m3(或10cfu/平板),未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌

为消毒合格;

五、注意事项

1.采样前,关好门、窗,在无人走动的情况下,静止10min进行采样。

2.平皿应新鲜透亮,在保质期内。

2.目的:正确进行物体表面微生物监测

一、采集指征

1.医院感染监控重点科室,每月常规监测。

2.发生医院感染暴发流行时。

二、采集方法

1.采样时间:在消毒处理后4h内进行采样。

2.采样面积:被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面≥100cm2,取100cm2。

3.采样方法:用5cm×5cm的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,采样面

积≥100cm2,连续采样4个,用浸有蒸馏水的无菌棉拭子1支(最好用

浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子),在规格板内横竖往返均匀涂

擦各5次,并随之转棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投入5ml含

蒸馏水的试管中(最好是含相应中和剂的无菌洗脱液试管内),立即送检。

4.门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。

三、结果计算方式:物体表面细菌菌落总数检查:0.5ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,放35℃温箱内培养24~48h计数菌落。

(cfu/cm2)=平板菌落数×采样液稀释倍数/采样面积(cm2)

四、结果判断:

Ⅰ、Ⅱ类区域工作人员:细菌总数≤5cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。

Ⅲ类区域:细菌总数≤10cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。

Ⅶ类区域工作人员:细菌总数≤15cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。

母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌为消毒合格。

3.目的:正确进行医务人员手的微生物监测

一、采集指征

1.医院感染监控重点科室,每月常规监测。

2.发生医院感染暴发流行时。

二、采集方法

1.采样时间:在接触患者或从事医疗活动前进行采样。

2.采样面积及方法:被检人五指并拢,将浸有蒸馏水的无菌棉拭子1支在

双手曲面从指根到指端来回涂擦各两次(一只手涂擦面积约30cm2),并

随之转动采样棉拭子,剪去手接触部位,将棉拭子放入装有5ml采样液

的试管内送检。采样面积按平方厘米cm2计算。

三、结果计算方式:0.5ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,放35℃温箱内培养24~48h计数菌落。

手细菌菌落总数(cfu/cm2)=平板上菌落数×采样液稀释倍数30×2

四、结果判断

Ⅰ、Ⅱ类区域工作人员:细菌总数≤5cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。

Ⅲ类区域:细菌总数≤10cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。

Ⅶ类区域工作人员:细菌总数≤15cfu/cm2,并未检出致病菌为消毒合格。

母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的医护人员手不得检出沙门菌为消毒合格。

4.目的:正确进行医疗用品的微生物监测

一、采集指征

1.医院感染监控重点科室,每月常规监测。

2.发生医院感染暴发流行时。

二、采集方法

1.采样时间:在消毒或灭菌处理后,存放有效期内采样。

2.采样量及采样方法:可用破坏性方法取样的医疗用品,如输液(血)器、

注射器和注射针等均参照《中华人民共和国药典》2000年版二部附录中

“无菌检查法”规定执行。对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品,

可用浸有无菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样,被采

表面<100 cm2,取全部表面;被采表面≥100 cm2,取100 cm2。

3.无菌检查:参照《中华人民共和国药典》2000年版二部附录中“无菌检

查法”。

三、结果计算方式:1ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,放37℃温箱内培养24~48 h计数菌落。

物体表面细菌菌落总数(cfu/ cm2)= 平板上菌落数×采样液稀释倍数×采样面积(cm2)

四、结果判断标准:

进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜的医疗用品必须无菌。

接触粘膜的医疗用品细菌菌落总数≤20 cfu/g或100 cm2, 不得检出病原微生物。

5.目的:正确进行血液和腹膜透析所用的水及透析液的微生物学监测

一、采集指征

1.医院感染监控重点科室,每月常规监测。

2.发生医院感染暴发流行时。

二、采集方法

采样点:透析用水出口(自来水经过过滤、软化、活性炭吸附、去离子逆渗透等步骤处理后的出口)、透析液出口(即透析结束时透析液离开透析器的出口)。如疑有透析液污染或严重感染病例,应增加采样点,如原水口、透析液配比机、反渗水出口、贮水罐出口、透析液进口等。

三、培养结果计算方式:取透析用水或透析液1ml放入灭菌平皿内,用普通营养琼

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