交叉配血不合分析体会

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交叉配血不合分析体会

发表时间:2013-03-05T15:26:36.217Z 来源:《中外健康文摘》2012年第51期供稿作者:李银环[导读] 凝聚胺交叉配血技术,是利用低离子强度的介质,减少红细胞周围的阳离子云,以促进红细胞抗原与血清或血浆中抗体结合。

李银环(辽宁省凌源市中医院检验科辽宁凌源 122500)

【中图分类号】R457 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)51-0076-02 【摘要】对18名受血者与献血者交叉配血出现假阳性进行分析探讨。

【关键词】凝聚胺实验交叉配血

凝聚胺试验除对罕见不规则抗体抗k敏感性低以外,对大多数血型系统检测敏感度高,不但能检出完全抗体,而且能检出大多数的不完全抗体,凝聚胺法灵敏度是其他方法的上百倍,而且具有方法快速、灵敏、结果准确可靠等优点[1,2]。因此被国内各家医院广泛应用。但用此法做交叉配血时也有假阳性的结果,给输血工作带来困难和麻烦。笔者从事临床输血工作多年,对受献血者血样用凝聚法作交叉配血试验,共发现不合18例,本文现就不合进行总结如下。

原理:凝聚胺交叉配血技术,是利用低离子强度的介质,减少红细胞周围的阳离子云,以促进红细胞抗原与血清或血浆中抗体结合。再加入凝聚胺溶液,使红细胞之间产生非特异性凝聚,此凝集是可逆的。最后再加入悬浮液,悬浮液中的负电荷能中和凝聚胺上的正电荷,使正常的红细胞非特异性的凝集散开,结果为阴性,而红细胞被相应的抗体致敏,就会被凝集胺凝结,凝集就不会散开,结果为阳性。

1 材料与方法

1.1 试剂珠海贝索生物技术有限公司生产的BASO-Polybrene试剂(低离子溶液LIM,凝聚胺溶液Polybrenereaget,悬浮液resuspending)。

1.2 材料我院临床病例18例,其中肺内感染3例,外伤5例,消化道出血3例,肾病透析3例。

1.3 方法取两支试管,标明主次,在主侧管内加献血者3%-5%细胞悬液1滴和受血者血清2滴;次侧管加受血者3%-5%细胞悬液1滴和献血者血清2滴。然后向各管内加入LIM 0.65ml,混合均匀,再向各管内加入凝聚胺溶液2滴,混合均匀,3400转/分离心10秒,倒掉上清液,使管底残留约0.1ml液体,轻轻摇动试管并肉眼观察管底红细胞是否凝集,如不凝需重新操作。最后各管加入悬浮液2滴,轻轻摇动试管混合同时观察结果。若凝集在60秒钟内散开,说明此凝集是非特异性聚集,配血结果相合;若凝集不散开,说明此凝集是红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合。为慎重起见,此结果须在显微镜下观察。

2 结果

2.1 3例肺内感染患者冷凝集引起的假阳性

这几名患者在做交叉配血的过程中未发现什么异常,只是在最后加入悬浮液时,主侧管出现弱阳性,重复试验和多加两滴悬浮液都不能散开,最后将试管放在37 ℃水浴中,凝集散开了。经确认,受血者血清中含有冷凝集素。遇到此种情况可在最后滴入Resusperding液时,把试管放入37 ℃水浴中,轻轻摇晃试管使冷凝集散去,并在60秒内观察结果。输血对策是用降低自身抗体作用,血液加温输注,结果未见输血反应。

2.2 4例纤维蛋白丝网罗粘附红细胞造成的假阳性

此类假阳性的的标本多为离血不彻底,血清未自然析出,加悬浮液后肉眼观察凝集不散开,显微镜下可见片状,易与真凝集区分。为慎重起见,只须将标本放置于37 ℃ 20 min~30 min,待血清自然析出,再进行配血实验,此凝集很快排除。

2.3 5例外伤患者标本外观上无可见异常,进行交叉配血时,加入凝聚胺试剂离心后,也出现红细胞凝聚,但再加入悬浮液后,凝集不散开,重新复查血型,无误,显微镜下仔细观察,此凝集为串钱状凝集,并非真凝集,真凝集红细胞成块状,结合的比较紧密,查阅病历得知,这些患者治疗过程中都用过6%低分子右旋糖酐,经查实资料,将患者血清用生理盐水作适当稀释(1∶1)后,再进行交叉配血实验,此种凝集现象即会消失。这5例患者我们都这样处理,输注同型血液未发生输血反应。

2.4 3例患者加入凝集胺后,红细胞不出现非免疫性的凝集,再多加入几滴凝聚胺试剂也不能出现凝集。与临床联系,此患者都用了止血敏药物,经资料查询,止血敏药物在水溶液中带有负电荷,能升高红细胞膜表面的Zete电位,更增加了细胞之间的排斥力。只有等药物过了半衰期后才能排除此干扰。立即与临床联系,停药2d~3d后重新取血样,再次交叉配血,无此现象发生,顺利输血。

2.5 3例肾病患者在进行配血时,加入凝集胺后,均不出非免疫性的可逆性聚合,但都得多加几滴后,才出现聚合,与临床联系都用了肝素。资料查明,肝素在水溶液中具有强负电荷,能与部分阳离子联合生成络合物,肝素与血标本中带正电荷的纤维蛋白原和血浆球蛋白联合,是红细胞膜表面的负电荷不再受纤维蛋白原和血浆球蛋白等大分子作用,增加红细胞相互之间的排斥力,最后使得红细胞可逆聚合反应受到抑制。

3 讨论

在实际工作中,对于配血阳性的结果要慎重,排除假阳性干扰。能顺利排除和避免这些干扰,使输血更加安全。对于冷凝集,纤维蛋白等干扰都比较好解决,止血敏、肝素右旋糖酐等药物均能影响凝聚胺交叉配血,患者如用这些药物,在凝聚胺交叉配血时,当加入凝聚胺离心后,主测管即出现不凝集现象,而导致试验失败。止血敏是消化道出血常用药物,在今后的配血中,应加注意因止血敏在体内的维持有效时间为4~6h,因此可在药物有效期后抽标本。肝素则是常用的检验标本抗凝剂,在交叉配血的标本中应避免使用。因凝聚胺试剂具有中和肝素的作用,若遇到用肝素治疗过患者的标本,配血时可加大凝聚胺的用量。右旋糖酐易引起假凝集,用等倍盐水稀释,在显微镜下观察,区分真凝集还是假凝集。以确保安全输血。

参考文献

[1]赵修凤,尤崇革.凝聚胺检测技术在交叉配血中的应用.兰州医学院学报,2003,29(4):4445.

[2]马利平,张建国.凝聚胺试验在交叉配血中的应用.济宁医学院学报,2005,28(2):62.

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