微生物学基础实验

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微生物学实验ppt课件

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器材与试剂的选用原则
03
如无菌操作、适用性、经济性等
02
细菌形态与结构观察
细菌培养及形态特征
01
02
03
细菌培养方法
包括需氧培养、厌氧培养 和兼性厌氧培养等,不同 种类的细菌需要不同的培 养条件。
细菌菌落特征
观察细菌在固体培养基上 形成的菌落,了解其形状、 大小、颜色、透明度等特 征。
细菌细胞形态
05
微生物代谢活性测定
生长曲线测定方法
直接计数法
通过显微镜直接观察并计数微生物数量,适用于较大微生物如细 菌、酵母菌等。
比浊法
利用微生物生长引起培养液浊度变化来测定生长曲线,操作简便 但易受杂质干扰。
平板菌落计数法
将待测样品稀释后涂布于固体培养基表面,培养后计数形成的菌 落数,适用于可形成菌落的微生物。
原理
病毒必须寄生在活细胞内才能增 殖,通过提供适宜的细胞环境, 使病毒在细胞内复制并产生子代
病毒。
病毒检测技术及应用
免疫学方法
利用抗原抗体特异性结合的原理,通过酶联免疫吸附试验 (ELISA)、免疫荧光技术等检测病毒抗原或抗体。
分子生物学方法
基于病毒核酸的特异性,利用PCR、实时荧光定量PCR等技术扩增 并检测病毒核酸。
微生物学实验ppt课件
contents
目录
• 实验基础知识 • 细菌形态与结构观察 • 真菌形态与结构观察 • 病毒培养与检测技术 • 微生物代谢活性测定 • 微生物遗传与变异研究 • 微生物生态学及环境因子影响研究
01
实验基础知识
微生物学概述
类生活中的作用:如 生态平衡、发酵工业 等
生理生化鉴定
利用真菌的生理生化特性,如营养需 求、代谢产物等,进行进一步的分类 鉴定。

微生物学实验

微生物学实验
操作图示:
称量---溶解----调节pH值----过滤---分装及包扎----灭菌----灭菌后试管 摆放斜面、倒平板
(2) 高压蒸汽灭菌
一般培养基用0.1Mpa,121.5℃,15~30min 实验步骤:
加水
装待灭 菌物品
加盖
加热
灭菌时间到后 断电源
压力降为零 开箱取物
摆斜面
倒平板
将菌液分离样品摇匀,用无菌移液管取1 ml的菌液移至无菌培养 皿中,然后将融化,凉至50℃左右的培养基,在每个培养皿内各倒入 约15 ml,摇匀,凝固,制成平板。
微生物学实验
基础综合实验一
2. 器皿的清洗包装及干热灭菌 3. 实验室环境和人体表面微生物的检查 4. 无菌接种技术
培养基配方: 蛋白胨 1g
琼脂 水
2g 100ml
牛肉膏蛋白胨固体培养基:加1.5-2%琼脂 400ml 牛肉膏蛋白胨培养基:液体培养基 200ml
(1)培养基的配制:
先将试管贴好标签。注明培养基名称,组别,日期。标签粘贴位置 在离管口1/3管身处。 注意:标签用铅笔书写,以防高温灭菌时蒸汽模糊字迹。
气、硬币等 (3)培养:37 ℃培养24h-48h
4. 微生物接种技术
常用的几种方法如下:
斜面接种 液体接种 平板接种
1)斜面接种示意图
2)平板划线法:
将菌液分离样品摇匀,以无菌操作用接种环直接取试管中待分离纯化的菌 液,将接种环通过稍打开皿盖的缝隙(约30℃)伸入平板,将菌液点种在平板边 缘一处,取出接种环,烧去多余的菌种,在平板边缘空白处接触一下使接种环冷 却,然后从接种有菌的部位在平板上自左向右轻轻划线,划线时平板面与接种环面 成30-40℃,以手腕力量在平板表面轻巧滑动划线,接种环不要嵌入培养基内划破培 养基,线条要平行密集,充分利用平板表面积,注意勿使前后两条线重叠,划线完 毕,关上皿盖.灼烧接种环,待冷却后放置接种架上。

微生物学实验报告

微生物学实验报告

微生物学实验报告微生物学实验报告实验目的:观察和学习微生物在不同条件下的生长和繁殖特性。

实验原理:微生物是一类非常小型的生物体,包括细菌、真菌、病毒等。

它们广泛存在于自然界中的土壤、水体和空气中。

微生物可以通过分裂、繁殖等方式进行增殖,并且受到温度、pH值、营养条件等环境因素的影响。

实验材料:培养皿、琼脂、试管、移液器、细菌液等。

实验步骤:1. 准备好所需的培养皿,将琼脂均匀地倒入各个培养皿中。

2. 将培养皿放入高压锅中进行高压灭菌处理,以杀死培养皿中的病原体。

3. 等待琼脂冷却固化后,将培养皿倒置放置。

4. 使用无菌手术针,从微生物液体中获取一定量的微生物液体。

5. 将微生物液体均匀地涂抹在琼脂培养皿上。

6. 使用无菌眼刷将一部分涂抹的微生物液体划线,以便观察微生物的生长情况。

7. 将培养皿放入恒温箱中进行培养,并设置不同的温度、pH 值、营养条件等。

8. 每隔一段时间,观察培养皿上微生物的生长情况,并记录下来。

实验结果和分析:根据观察和记录的结果,我们发现微生物在不同条件下的生长速度和繁殖能力是有差异的。

在适宜的温度、pH值和营养条件下,微生物的生长速度相对较快,生物量也相对较高。

而在不适宜的条件下,微生物的生长速度会减慢或停止,甚至会死亡。

实验结论:微生物的生长和繁殖特性与环境条件密切相关。

适宜的温度、pH值和营养条件可以促进微生物的生长和繁殖,而不适宜的条件会影响微生物的生长。

因此,在实际应用中,我们需要根据微生物的需求条件来选择合适的培养条件,以提高微生物的生长和繁殖能力。

实验总结:通过本次实验,我们进一步了解了微生物在不同条件下的生长和繁殖特性。

微生物的生长和繁殖受到温度、pH 值、营养等环境因素的影响,这是我们在环境控制和微生物培养中需要注意的因素。

掌握微生物的生长和繁殖特性,有利于我们更好地应用微生物技术,并解决一些与微生物相关的问题。

兽医基础实验报告答案

兽医基础实验报告答案

实验名称:兽医微生物学基础实验实验日期:2023年10月15日实验目的:1. 掌握兽医微生物学的基本技术和细菌检验的基本程序。

2. 熟悉各种生理生化试验的原理及试验方法。

3. 认识并掌握微生物实验常用仪器的使用及培养基制备的原则和方法。

实验材料:1. 营养肉汤、血琼脂平板、麦康凯平板、普通琼脂、三糖铁层琼脂等培养基。

2. 细菌样本、病毒样本、真菌样本。

3. 光学显微镜、接种环、培养皿、酒精灯、试管等实验器材。

实验步骤及结果:一、细菌分离培养1. 将细菌样本接种于营养肉汤中,37℃恒温培养24小时。

2. 将培养后的营养肉汤涂布于血琼脂平板上,37℃恒温培养24小时。

3. 观察菌落特征,挑取典型菌落进行纯化培养。

结果:观察到血琼脂平板上有红色、透明、边缘整齐的菌落,为典型细菌菌落。

二、细菌鉴定1. 观察菌落形态,记录菌落大小、形状、颜色、边缘等特征。

2. 进行革兰氏染色,观察细菌革兰氏染色结果。

3. 进行生化实验,包括糖发酵实验、氧化酶实验、过氧化氢酶实验等。

结果:1. 菌落大小约为1-2mm,圆形,光滑,边缘整齐,为革兰氏阳性菌。

2. 革兰氏染色结果为革兰氏阳性。

3. 糖发酵实验结果为葡萄糖、乳糖发酵阳性,氧化酶实验、过氧化氢酶实验均为阴性。

三、病毒分离培养1. 将病毒样本接种于鸡胚中,37℃恒温培养48小时。

2. 观察鸡胚死亡情况,取死亡鸡胚胚液进行病毒分离。

结果:观察到鸡胚死亡,取胚液进行病毒分离。

四、病毒鉴定1. 进行血凝试验,观察红细胞凝集情况。

2. 进行血凝抑制试验,观察红细胞凝集抑制情况。

结果:血凝试验结果为阳性,血凝抑制试验结果为阳性。

五、真菌鉴定1. 将真菌样本接种于普通琼脂平板上,25℃恒温培养5天。

2. 观察菌落特征,记录菌落大小、形状、颜色、边缘等特征。

结果:菌落大小约为5-10mm,圆形,绒毛状,白色,边缘整齐,为真菌菌落。

实验总结:本次实验通过对细菌、病毒、真菌的分离培养、鉴定,掌握了兽医微生物学的基本技术和细菌检验的基本程序。

微生物学实验(详细介绍)

微生物学实验(详细介绍)
.
(2)镜检: 1)毛霉和黑根霉的孢子的形状、颜色、大 小、孢子囊、中轴体的形状,有无假根和葡 萄菌丝。 2)黑曲霉的分生孢子的形状、颜色、大小、 顶囊的形状、小梗排列隔膜。 3)青霉的分生孢子的形状、颜色、大小、 小梗的排列方式,菌丝的隔膜。
.
(3)将观察结果绘图,并注意各部分名称。
霉菌的静孢子 左:毛霉的孢子囊;中:孢子囊壁破裂,露出静 孢子;右:囊轴
旋仔细地从上到下进行观察。
.
厚标本和薄标本
4 - 5 um
2um
.
基础知识
三、 实验步骤
• (一) 显微镜的使用 • 1. 观察前的准备工作 • (1)观察者要养成显微镜镜检的工作习惯,观察时要
双眼同时睁开,一边观察一边进行记录或描绘。 • (2)观察时所用的材料、药品和各种器具要预先准备
好。 • (3)显微镜在使用之前应检查一下它的各个部件是否
.
五、记录实验结果
• 绘图
.
六、 思考题
• 1.使用油镜时,为使么选用香柏油或液体石蜡作 为物镜与玻片间的介质?其他液体行吗?
• 2.油镜用毕后,为什么必须把镜油擦净?用过多 的二甲苯或用酒精擦镜有什么危害?
• 3.什么是物镜的同焦现象?他在显微镜观察中有 什么意义?
• 4.观察时为什么要用左眼,并且两眼都应睁开?
.
四、显微镜保养和使用中的注意事项
1.不准擅自拆卸显微镜的任何部件,以免损坏。 2.镜面只能用擦镜纸擦,不能用手指或粗布,以
保证光洁度 3.观察标本时,必须依次用低、中、高倍镜,最
后用油镜。当目视接目镜时,特别在使用油 镜时,切不可使用粗调节器,以免压碎玻片 或损伤镜面。 4.拿显微镜时,一定要右手拿镜臂,左手托镜座 ,不可单手拿,更不可倾斜拿。 5.显微镜应存放在阴凉干燥处,以免镜片滋生霉 菌而腐蚀镜片。

微生物学实验报告

微生物学实验报告

微生物学实验报告微生物学实验报告引言微生物学是一门研究微小生物的科学,它涉及到微生物的分类、结构、生理、生态以及与人类和环境的相互作用等方面。

本实验旨在通过观察和分析微生物的生长特性,了解微生物的繁殖规律和影响因素。

实验方法1. 实验材料准备我们选择了常见的细菌和酵母菌作为实验材料。

实验中使用的培养基包括富含营养的琼脂培养基和含有特定营养物质的选择性培养基。

实验器材包括培养皿、试管、移液管等。

2. 实验步骤首先,我们将培养皿分成不同的区域,分别涂抹不同的微生物样本。

然后,将培养皿放入恒温培养箱中,控制温度和湿度,观察微生物在不同条件下的生长情况。

接下来,我们将微生物样本接种到含有特定营养物质的选择性培养基上,观察其生长情况,以了解微生物对不同营养物质的需求。

实验结果在琼脂培养基上,我们观察到细菌和酵母菌在适宜的温度和湿度条件下迅速生长。

细菌呈现出白色或黄色的菌落,而酵母菌则呈现出乳白色的菌落。

在选择性培养基上,我们发现不同微生物对营养物质的需求有所不同。

例如,某些细菌只能在含有特定氨基酸的培养基上生长,而在其他培养基上则无法繁殖。

讨论与分析微生物的生长受到多种因素的影响,包括温度、湿度、营养物质等。

在实验中,我们控制了温度和湿度,使其处于适宜的范围,从而促进微生物的生长。

此外,我们还观察到微生物对不同营养物质的需求不同,这与微生物的代谢特性有关。

不同微生物的代谢途径和需求差异导致它们对不同营养物质的利用能力不同。

微生物的快速繁殖和适应性使其在自然界中起到重要的作用。

它们参与了有机物质的分解和循环,维持了生态系统的平衡。

此外,微生物还可以用于生物工程和医学领域。

例如,利用细菌进行基因工程,可以生产出许多重要的药物和化学物质。

然而,微生物也可能对人类和环境造成危害。

某些微生物会引起传染病,给人类的健康带来威胁。

此外,微生物还可能对环境产生负面影响,例如导致水体富营养化和生态系统的破坏。

结论通过本次实验,我们深入了解了微生物的生长特性和影响因素。

微生物学实验

微生物学实验

微生物学实验微生物学实验是研究微生物的生长、活动和相互作用的一种科学实验。

通过实验可以了解微生物的生理特性和遗传特性,探究微生物与环境的关系,以及微生物对人类健康和环境的影响。

本文将介绍微生物学实验的常见内容和方法,并举例说明其应用。

1. 常见(1)微生物的培养与分离:将微生物样品接种于培养基上,提供适宜的环境因素使其生长繁殖。

利用孵育箱或培养皿进行培养,观察微生物的孢子、菌丝和菌落等形态特征,通过分离与鉴定,确定微生物的种类和数量。

(2)微生物的生长曲线:利用培养皿或发酵罐等装置,监测微生物在不同时间内的生长情况,绘制生长曲线。

通过分析曲线上的不同阶段,了解微生物的生长特性,包括潜时期、对数期、平稳期和死亡期等。

(3)微生物的代谢分析:通过测定微生物培养过程中的代谢产物,如酸、气体、酶等,分析微生物的代谢途径和代谢产物对生物工艺和环境的影响。

常用的方法包括气相色谱、质谱和高效液相色谱等技术。

(4)微生物的遗传分析:通过构建基因工程菌株或利用遗传标记技术,研究微生物的基因表达、突变和遗传传递等现象。

例如,利用PCR技术检测微生物的特定基因序列,分析其在不同环境条件下的表达水平。

2. 微生物学实验方法(1)杀菌与消毒:在进行微生物实验前,需要对实验器材、培养基和试剂等进行杀菌和消毒处理,以防止外源菌的污染。

常用的方法有高温高压灭菌、酒精喷雾消毒和过滤器材消毒等。

(2)无菌技术:在进行微生物的培养和分离实验时,需要避免外界细菌的污染。

常用的无菌技术包括细菌装液的操作在无菌台上进行,采用无菌培养皿、培养基和工具,以及穿戴无菌手套等措施。

(3)微量液体处理:有些微生物实验需要处理微量的液体,如微生物菌液的接种、稀释和移液等。

在这种情况下,需要使用微量吸管、微量移液器和微量离心机等微量操作工具,保证实验的准确性和可重复性。

(4)统计分析:微生物学实验的数据分析通常需要进行统计处理,以确定实验数据的可靠性和显著性差异。

微生物学实验指导-华南师范大学生命科学学院

微生物学实验指导-华南师范大学生命科学学院

温度低于饱和蒸气的温度。灭菌锅内留有不同分量空气时,压力与温度的关系见(表 2—3)
温度/℃
时间/h
干热
4
130-140
湿热 105.3
3
表 2-2 干热温热穿透力及灭菌效果比较
透过布层的温度/℃
灭菌
20 层
10 层
100 层
86
72
70.5
不完全
101
101
101
完全
表 2—3 灭菌锅留有不同分量空气时,压力与温度的关系
自控高压蒸气灭菌锅(autoclave)的使用可参照厂家说明书。
图 2—2A 卧式灭菌锅
图 2—2B 手提式灭菌锅
1. 安全阀; 2.压力表; 3.放气阀; 4.软管; 5.紧固螺栓; 6.灭菌桶; 7. 筛架; 8.水
(三)器材 牛肉膏蛋白胨培养基,培养皿(6 套一包),手提式高压蒸气灭菌锅等。 (四)操作步骤 1.首先将内层锅取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。 切勿忘记加水,同时水量不可过少,以防灭菌锅烧干而引起炸裂事故。 2.放回内层锅,并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤,以免防碍蒸气流通而影响灭 菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与锅壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。 3.加盖,并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧 相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。 4.用电炉或煤气加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气 完全排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸气压力增加到逐渐上升。当锅内压力升到所需 压力时,控制热源,维持压力至所需时间。本实验用 0.1Mpa,121.5℃,20min 灭菌。 灭菌的主要因素是温度而不是压力。因此锅内冷空气必须完全排尽后,才能关上排气阀, 维持所需压力。 5.灭菌所需时间到后,切断电源或关闭煤气,让灭菌锅内温度自然下降,当压力表的 压力降至“0”时,打开排气阀,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品。 压力一定要降到“0”时,才能打开排气阀,开盖取物。否则就会因锅内压力突然下降, 使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口,造成棉塞沾染培养基而发生 污染,甚至灼伤操作者。 6.将取出的灭菌培养基,需摆斜面的则摆成斜面,然后放入 37℃温箱培养 24h,经检 查若无杂菌生长,即可待用。 (五)实验报告 l.结果

微生物学实验

微生物学实验

显微镜计数:每个计数室选5个中格4个角各1个和 中央1个计数;
计算
总菌数 (个/ml)
=
X1 + X2 + X3 + X4 + X5 5
× 25(16) ×104×稀释倍 数
清洗血细胞计数板:用水冲净;后用吹风机吹干;放 入计数板盒中; 切勿用硬物洗刷
38
注意事项
1 取样前;必须将菌悬液摇匀; 2 计数室内不可有气泡; 3 凡压在中格线上的菌体;切莫四边全计; 常只计上方和右边两条线上的; 4 计数时;遇出芽的酵母菌;芽体大小达到母 细 胞直径的一半时计为2个;
实验一 显微镜油镜的使用和细菌 的三种基本形态观察
一 实验目的
1 学习并掌握油镜的基本原理和使用方法;
2 观察和识别细菌的三种基本形态;
1
二 基本原理
1 增加照明强度
在油镜与载玻片之间加入与玻片的折射率相仿的 镜油;使进入物镜的光线不会由折射或反射造成损失; 基本上全进入镜头;结果提高了照明强度;使图像更加 清晰;
29
放线菌和真菌形态
放线菌
酵母菌
青霉菌
黑曲霉菌
30
根霉菌形态
根霉菌无性孢子和有性孢子
31
32
实验报告 绘细黄链霉菌 红酵母菌 产黄青霉菌和黑
曲霉菌的形态图;
33
实验四 微生物显微镜直接 计数法
一 实验目的
1 明确血细胞计数板计数的原理 2 掌握血细胞计数板进行微生物计数的方法;
34
二 基本原理
1 标本:细菌三型玻片; 2 试剂:香柏油 镜头清洗液V乙醚:V酒精=7:3; 3 器具:显微镜有油镜 擦镜纸 玻璃棒等;
4
四 实验步骤

微生物学实验

微生物学实验



消毒与灭菌的主要方法

加热法 过滤法


照射法
化学药品
加热法

干热灭菌

火焰灼烧灭菌:接种环、接种针、 金属用具、无菌操作时在火焰上短 暂灼烧瓶口等 热空气灭菌:玻璃器皿

加热法--湿热灭菌

高压蒸汽灭菌

高压蒸汽灭菌锅 15-30min 培养基、工作服、橡皮物品、玻璃 器皿等


2.增加显微镜的分辨率
油镜的使用方法

1.准备工作(复习)

显微镜的放置 光源的调节 目镜的调节 聚光器的调节
油镜的使用方法

2.显微观察

低倍镜观察 高倍镜观察 油镜观察

寻找观察目标
在观察目标区域滴加香柏油,仔细微 调,认真观察
油镜的使用方法

3.显微镜使用完毕的处理
升温
恒温
降温 开箱取物:温度未降至70℃前勿开箱,防爆
高压蒸汽灭菌

一、目的要求:

1.了解高压蒸汽灭菌的基本原理及应用 范围。

2.学习高压蒸汽灭菌的基本方法。
高压使水的沸点增高,产生超过100℃的 高温蒸汽,导致菌体蛋白质凝固变性 水蒸气的穿透性强 湿热的蒸汽有潜热

二、基本原理


高压蒸汽灭菌
常压蒸汽灭菌

某些不适宜高压蒸汽灭菌的培养基 不具备高压蒸汽灭菌条件的 仅能杀死大多数微生物、可用常压 间歇灭菌法
加热法--湿热灭菌

煮沸消毒法

注射器、解剖器械等 10-15 min可杀死细菌所有营养体、 部分芽孢

超高温杀菌

微生物学实验

微生物学实验

微生物学实验实验一实验室环境和人体表面微生物的检查实验二油镜的使用和细菌的简单染色实验三细菌的革兰氏染色和芽孢染色实验四微生物大小的测定和酵母菌死活细胞的鉴定实验五培养基的配制与消毒灭菌实验六土壤微生物的分离纯化与鉴定实验七食品微生物检验 (一)细菌总数测定实验八食品微生物检验(二)大肠菌群数测定实验九大肠杆菌生长曲线的测定实验十IMViC与硫化氢试验实验一、实验室环境和人体表微生物的检查1.一、目的:1.比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量与类型;2.观察不同类型微生物的菌落形态特征;3.体会无菌操作的重要性。

2.二、原理:1.微生物无孔不入,无处不在。

2.微生物→营养琼脂平板→菌落或菌苔。

(37 ℃倒置培养24 h)3.描述:菌落的大小、表面光滑或粗糙、干燥或湿润、隆起或扁平、边缘整齐或锯齿状、菌落透明或不透明、颜色以及质地均匀与否、疏松或紧密等,以便检查环境中细菌的类?秃褪 俊?4.细胞、放线菌、酵母菌和霉菌四大类型都可能存在,本实验重点观察细菌。

3.三、器材:1.培养基:营养琼脂平板(牛肉膏蛋白胨培养基)2.器具:无菌水、灭菌棉签、接种环(针)、酒精灯等。

4.四、步骤:1.标记。

组号/姓名、日期、样品来源。

2.接种。

3.倒置培养,37℃ 24 h4.观察结果。

5.五、结果6.样品来源菌落数菌落类型特征描写本实验室(流动空气30 min)1 大小形态干湿扁/隆透明度颜色边缘23接种室(不流动空气30min)洗手前洗手后头发屑指甲垢实验台门把1.六、思考题:1.人多的实验室与少人走动的实验室比较,平板上的菌落数和菌落类型有区别吗?试解释。

2.通过本实验,在防止培养物的污染和防止细菌的扩散方面,你有何体会?3.4.实验二油镜的使用和细菌的简单染色一、实验目的1、学习和掌握油镜的原理和使用技术。

2、学习微生物涂片、染色的基本技术,掌握细菌的简单染色法。

二、实验原理1.油镜使用原理:光镜的几种物镜中以油镜的放大倍数最大,尤其适用于微生物学研究。

微生物学实验报告

微生物学实验报告

微生物学实验报告实验名称:微生物生长曲线测定实验目的:通过测定微生物的生长曲线,了解微生物的生长规律和生长速率。

实验步骤:1. 准备培养基:根据实验需要选择合适的培养基,如大肠杆菌的培养基为LB培养基。

按照要求加入适量的培养基粉末到烧杯中,加入适量的蒸馏水溶解均匀。

2. 灭菌处理:将培养基倒入试管中,用塞子盖紧试管口,放入高压锅中进行高压灭菌处理,时间和温度根据不同的菌种和培养基选择。

3. 填充试管:将灭菌好的试管取出,用火焰燃烧灭菌的酒精灯瓶口;将培养基倒入试管中,约填充1/3试管高度。

4. 接种菌液:将待测菌种培养物挑捞一部分,移入培养基中,以避免杂菌的污染。

5. 标记试管:在试管上标明菌种名称和接种时间。

6. 培养条件:将接种好的试管放入恒温摇床中,控制温度和摇床的摇动速率,以提供合适的培养条件。

7. 观察记录:每隔一定时间间隔,取出试管,观察并记录微生物的生长情况,如菌落的大小、菌液的浑浊度等。

8. 绘制生长曲线:根据实际观察记录,绘制微生物的生长曲线图。

实验结果和讨论:根据观察和实际测定,可以得到微生物的生长曲线。

典型的微生物生长曲线包括潜伏期、指数期、平稳期和衰退期。

在潜伏期,微生物适应环境,准备生长,菌落数量和菌液浑浊度变化不大。

潜伏期的长度取决于微生物的生长速率和菌种类型。

在指数期,微生物开始快速增长,菌落数量呈指数增长,菌液浑浊度明显上升。

在平稳期,微生物的生长速率逐渐减缓,菌液浑浊度趋于稳定。

在衰退期,微生物的生长速率减缓,菌落数量开始减少,菌液逐渐变清。

通过绘制微生物的生长曲线,可以了解微生物的生长规律和生长速率。

这对于微生物学的研究和应用具有重要的指导意义。

实验结论:通过测定微生物的生长曲线,我们可以得到微生物的生长规律和生长速率。

不同微生物在不同的培养条件下生长曲线可能会有所差异,因此在实际应用中需要根据具体的情况进行调整和优化。

微生物的生长规律可以为微生物学的研究和应用提供理论依据。

微生物学基本实验方法和诊断

微生物学基本实验方法和诊断

五、鲎试验(Limulus test, LT)
鲎试验是利用鲎试剂能与微量内毒素反应形成固态 凝胶来检测内毒素的试验。 鲎试剂是鲎血液中的变形细胞溶解物(Limulus amebocytes lysate,LAT),为白色粉末,易溶于 水和生理盐水中。鲎试剂中含C因子、B因子、凝固 酶原和凝固蛋白原等几种参与级联酶反应的成分。 在一定条件下,微量的内毒素即能激活鲎试剂溶液 中的C因子,活化C因子激活B因子,活化B因子使凝 固酶原转变为凝固酶,凝固酶使凝固蛋白原转变成 凝固蛋白,最终导致凝胶的形成。
培养基的种类—按用途分类
(3)鉴别培养基:在培养基中加入特定的底物 和指示剂,即为鉴别培养基。鉴别培养基用来 作细菌的生化试验,以便鉴定细菌,因此这类 培养基是临床细菌检验常的培养基。如糖发酵 培养基、克氏双糖铁培养基(KIA)、动力-吲 哚-尿素(MIU)培养基等。
培养基的种类—按用途分类
(4)选择培养基:在培养基中加入某种化学物质 或抗生素,以抑制某些细菌种类生长,有助于需要 的细菌种类生长。此类培养基主要用于从含菌种类 (主要是正常菌群)较多的标本(如粪便)中分离 培养专性病原菌。如胆盐培养基、SS琼脂、麦康凯 琼脂、中国兰琼脂、伊红-美兰琼脂用于从粪便中 分离培养志贺菌和沙门菌;庆大霉素琼脂、碱性琼 脂用于从粪便中分离培养霍乱弧菌。 (5)特殊培养基:包括培养细菌L型的培养基,培 养厌氧菌的厌氧培养基。这类培养基用于培养营养 要求和生长条件较特殊的细菌。
细菌L型检查
(一)培养基:培养细菌L型的培养基需 具有丰富的营养和高渗生长条件。培养基 常以心脑浸液及牛肉浸液为基础,加入 1~2%蛋白胨、5%NaCl(使致高渗), pH7.6~7.8、1%琼脂,高压蒸汽灭菌后制 备成固体培养基,必要时高压蒸汽灭菌后 待至60℃左右加入20%无菌马、羊或人血 浆,制备成固体培养基。

微生物学实验

微生物学实验


接观察法
微生物学实验
示气生菌丝、孢子 丝(直)及孢子(球形)
示气生菌丝、孢子 丝(螺旋状)及孢子 (椭圆形) 示菌丝断裂、柱形 或球形孢子
第8页
试验三 酵母菌形态观察及细胞 计数
• 目标要求: • 观察并掌握酵母菌菌落特征、个体形态
及生殖方式。
基本原理: 见试验教程 P.26试验3-1, P.97 试验8-1
微生物学实验
第16页
试验考查
(1)怎样从菌落特征上识别四类菌? (2)四类菌在制片上有何特点?
微生物学实验
第17页
试验五 培养基配制与灭菌
目标要求: • 1. 学习和掌握分离四类菌惯用培养基配制方法。 • 2. 学会四类菌稀释分离和计数时所用物品灭菌
前后准备工作。 • 3. 了解试验室惯用消毒灭菌方法,掌握高压蒸
试验一 细菌形态观察
• 目标要求:见试验教程 P.16试验二-1 • 基本原理:见试验教程P.16 试验二-1
微生物学实验
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试验内容
• 1.试验室环境及体表微生物检验(检验手 指、头发、钱币等携带微生物情况4人一 个培养皿)
• 2.统计三种细菌菌落特征 • 3.绘制三种细菌个体形态图,并对革蓝氏
微生物学实验
第25页
试验七几个细菌生理生化反应 试验
目标要求:见试验教程 P85 ,P88
基本原理:见试验教程 P85 ,P88
微生物学实验
第26页
• 试验 • 试 验
菌 种
淀粉水解 油脂水解
枯草芽孢 杆菌
金黄色葡 萄球菌
EMB
葡萄糖发酵
甘露醇发酵
微生物学实验
金黄色葡 萄球菌
•试 验

基础生物学实验(微生物学部分)_ 微生物基本实验操作技术篇_ 无菌操作技术_

基础生物学实验(微生物学部分)_  微生物基本实验操作技术篇_  无菌操作技术_

基础生物学实验微生物学部分1 倒平板技术宦海霞原理倒平板就是火焰旁,将三角瓶中已融化的琼脂培养基倒入无菌培养皿中,然后置水平位置待凝,凝固后即成无菌培养基平板(简称平板),完成此操作的过程称为倒平板。

实验目的及原理*010203培养基其他:酒精灯,打火机,标签纸,记号笔等。

无菌培养皿若干套实验材料1右手持瓶,保持瓶口处于酒精灯火焰旁的无菌操作区域内并面向火焰。

迅速倒出瓶内融化的培养基液至无菌培养皿内。

一般倒入量为12~15ml 。

融化培养基,可用微波炉融化,也可用沸水浴融化或压力锅融化等左手取培养皿,用食指和拇指开启培养皿成一缝,恰好能让三角瓶口伸入。

倒无菌平板⏹持皿法倒无菌平板 ⏹叠皿法清洁桌面,正式倒平板前须清理与清洁台面,以减少台面尘埃,降低平板污染的概率。

盖上培养皿盖,置水平位置冷凝42方法和步骤567注意事项用于倒平板的培养基一定要彻底融化,否则会再所倒的平板培养基表面出现未融化的琼脂块。

倒平板时的培养基温度不能过高(50~60℃为宜),否则会在皿盖内侧或凝固的平板表面形成许多冷凝水,不利于单菌落的形成。

在无菌操作倒平板过程中,切忌用手抓、握三角瓶的瓶口处,以防灼热的瓶口烫伤手指,同时,手指上的微生物也会污染瓶口,进而严重污染培养基。

谢谢您的观看基础生物学实验微生物学部分2 平板划线技术张曈实验原理实验原理1 平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。

一般是将混杂在一起的不同种微生物戒同种微生物群体中的不同细胞,通过在分区的平板表面上作多次划线稀释,形成较多的独立分布的单个细胞,经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。

通常认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。

在实验中,我们将平板分成A、B、C、D 4个面积不同的小区进行划线,A区面积最小,作为待分离菌的菌源区,B和C区为经初步划线稀释的过渡区,D区则是关键的单菌落收获区,它的面积最大,出现单菌落的概率也最高。

因此,这4个区的面积安排应做到D>C>B>A。

2024年微生物学实验教案(多场合)

2024年微生物学实验教案(多场合)

2024年微生物学实验教案一、教案背景与目标微生物学作为生命科学领域的重要组成部分,在研究微生物的结构、功能、遗传和生态等方面具有重要作用。

本教案旨在通过实验操作,让学生深入了解微生物的基本特性,掌握微生物学实验的基本技能,培养其实验操作能力和科学思维能力。

二、教学内容与实验项目1.微生物的形态观察(1)光学显微镜的使用与维护(2)细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态观察2.微生物的染色技术(1)革兰氏染色法(2)芽孢染色法(3)抗酸染色法3.微生物的纯培养技术(1)无菌操作技术(2)接种与分离技术(3)纯培养的鉴定与保存4.微生物计数与生长曲线测定(1)显微镜直接计数法(2)平板计数法(3)生长曲线的测定5.微生物的生理生化实验(1)碳源利用实验(2)氮源利用实验(3)维生素需求实验(4)酶活性实验6.微生物的分子生物学实验(1)DNA提取与纯化(2)PCR扩增技术(3)基因克隆与表达三、教学安排与课时分配1.微生物的形态观察(2课时)2.微生物的染色技术(4课时)3.微生物的纯培养技术(6课时)4.微生物计数与生长曲线测定(4课时)5.微生物的生理生化实验(6课时)6.微生物的分子生物学实验(6课时)四、教学方法与手段1.讲授与演示:教师通过讲解、演示实验操作,使学生了解实验原理、方法和操作步骤。

2.实践操作:学生在教师指导下进行实验操作,培养实验技能。

3.小组讨论:学生分组进行实验数据的分析与讨论,培养团队协作和科学思维能力。

4.考核评价:通过实验报告、操作考试和理论知识考试,全面评价学生的学习效果。

五、教学资源与设施1.教材:选用权威、实用的微生物学实验教材。

2.实验室:配备光学显微镜、PCR仪、电泳仪、恒温培养箱等实验设备。

3.试剂与耗材:提供细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等微生物菌株,以及实验所需试剂和耗材。

4.网络资源:利用网络平台,提供实验课件、教学视频等辅助教学资源。

六、教学效果与反馈1.学生能熟练掌握微生物学实验的基本技能,具备独立进行实验操作的能力。

最新微生物学基础实验PPT课件

最新微生物学基础实验PPT课件

实验完毕后的处理
1)观察完毕,关闭电源,下降载物台,将油镜头转出,将浸过液 体石蜡的镜头用干净的擦镜纸将镜头擦2-3次至干净。注意擦镜 头时向一个方向擦拭。 2)观察完毕,擦净标本玻片上的石蜡油。 3)将各部分还原,将显微镜用专用套罩好,以免沾污灰尘。 4)观察完毕,将所观察的长有菌落的培养皿盖好放于以原处。。
微生物的形态观察(一)
注意事项
显微镜观察细菌涂片(细菌三型涂片、枯草杆菌涂片)
使用油镜: 低倍镜(10× ) (100× )
高倍镜(40× )
油镜
显微镜观察放线菌、曲霉示菌丝及孢子、匍枝根霉、
有隔菌丝与无隔菌丝等装片时:
低倍镜(10× )
高倍镜(40× )
用油镜观察时,观察完毕应将镜头、玻片标本上的液 体、实验原理、涂片观察结果绘图、菌落观察结果填 表。 观察平皿的培养基上生长的各种微生物的菌落,简单分类,详细 记录其特征填入下表。细菌、真菌、放线菌,以下以细菌为例记 录指标。
细菌、真菌、放线菌等菌落观察记录指标
(注意选取单个菌落,进行目测观察,描述菌落特征) 1)大小:大、中、小、针尖状,可用米尺测量菌落的直径(mm). 2)颜色:黄、浅黄、乳白、灰白、红、粉红等。 3)干湿:干燥、湿润、粘稠。 4)质地:腊状、液滴状、皱褶状。 5)形态:圆形、不规则、同心圆状、丝状、假根状、棉絮状、网 状、疏松或紧密、同心轮纹、放线状的皱褶等。 6)表面:扁平扩展或蔓延生长、隆起、凹、凸、脐状、凸脐状、 乳头状、褶皱凸面。 7)透明:透明、半透明、不透明。 8)边缘:整齐、不整齐、圆锯齿状、裂叶、不定形、边缘波状。
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实验完毕后的处理
1)观察完毕,关闭电源,下降载物台,将油镜头转出,将浸过液 体石蜡的镜头用干净的擦镜纸将镜头擦2-3次至干净。注意擦镜 头时向一个方向擦拭。 2)观察完毕,擦净标本玻片上的石蜡油。 3)将各部分还原,将显微镜用专用套罩好,以免沾污灰尘。 4)观察完毕,将所观察的长有菌落的培养皿盖好放于以原处。。
细菌三型涂片、枯草杆菌涂片;放线菌装片;匍枝根 霉装片、有隔菌丝及无隔菌丝装片、曲霉示菌丝和孢 子装片; 普通光学显微镜、擦镜纸、液体石蜡 已经长好菌落的培养皿;
实验主要内容
观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的菌落 ,并对所观 察的菌落特征进行描述,记录各指标填入表格; 在油镜下(100× )观察细菌三型涂片、枯草杆菌涂 片。绘图。 在10 ×或40 ×物镜下观察放线菌装片;匍枝根霉装 片、有隔菌丝及无隔菌丝装片、曲霉示菌丝和孢子装 片,并绘图。
孢子的形状、颜色、细胞数目、排列方式、产生方式等 也是霉菌鉴定的重要特征。根霉的营养菌丝体可产生匍 匐菌丝与假根,根霉的孢子囊内生孢子。曲霉的顶囊着 生分生孢子,顶囊是从特化了的菌丝细胞——足细胞垂 直生出。
细菌的基本形状有球状、杆状、螺旋(弧状)状三种, 分别称之为球菌、杆菌、螺旋(弧)菌。
芽孢是芽孢细菌典型特征。
微生物学基础实验
指导教师:王海丽
微生物的形态观察(一)
实验目的及要求
强化对细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的菌落特征及常 见细菌形态的认识 。
实验原理
微生物的菌落及个体形态特征是辨认、鉴别菌种的重要 依据。正确区分四大类微生物的菌落是分离、鉴定、培 养微生物的基础。
霉菌的菌丝分有隔膜菌丝与无隔膜菌丝两种。ຫໍສະໝຸດ 短杆菌细菌




单球菌


双球菌
螺旋菌
杆菌
四大类微生物菌落的区分
各种类型的霉菌菌落
各种类型的细菌菌落

种 类
四大类微生物区分要
型 的


线
菌 菌 落
菌落形态: 1)若菌落表面湿润:
薄而小——细菌
厚而大——酵母菌
各 种 类 型
2)若菌落表面干燥:
密而小——放线菌 松而大——霉菌






实验试剂材料
实验报告
实验目的要求、实验原理、涂片观察结果绘图、菌落观察结果填 表。 观察平皿的培养基上生长的各种微生物的菌落,简单分类,详细 记录其特征填入下表。细菌、真菌、放线菌,以下以细菌为例记 录指标。
细菌、真菌、放线菌等菌落观察记录指标
(注意选取单个菌落,进行目测观察,描述菌落特征) 1)大小:大、中、小、针尖状,可用米尺测量菌落的直径(mm). 2)颜色:黄、浅黄、乳白、灰白、红、粉红等。 3)干湿:干燥、湿润、粘稠。 4)质地:腊状、液滴状、皱褶状。 5)形态:圆形、不规则、同心圆状、丝状、假根状、棉絮状、网 状、疏松或紧密、同心轮纹、放线状的皱褶等。 6)表面:扁平扩展或蔓延生长、隆起、凹、凸、脐状、凸脐状、 乳头状、褶皱凸面。 7)透明:透明、半透明、不透明。 8)边缘:整齐、不整齐、圆锯齿状、裂叶、不定形、边缘波状。
注意事项
显微镜观察细菌涂片(细菌三型涂片、枯草杆菌涂片)
使用油镜: 低倍镜(10× ) (100× )
高倍镜(40× )
油镜
显微镜观察放线菌、曲霉示菌丝及孢子、匍枝根霉、
有隔菌丝与无隔菌丝等装片时:
低倍镜(10× )
高倍镜(40× )
用油镜观察时,观察完毕应将镜头、玻片标本上的液 体石蜡油用干净的擦镜纸擦干净。
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