酶的相关实验ppt课件
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《酶的特性实验》课件
加强数据处理培训
为了提高数据处理的准确性,建议在实验前增加数据处理方面的培训,让学生熟悉数据处 理的流程和方法。
鼓励全员参与
为了提高实验效果,建议鼓励所有同学参与到实验中,让他们多动手操作,提高实验兴趣 和参与度。同时,老师也应关注学生的参与情况,及时给予指导和帮助。
THANKS
感谢观看
数据处理的准确性需提高
在数据处理过程中,部分同学出现了误差,导致实验结果分析不准确。 今后应加强数据处理方面的培训,提高数据处理的准确性。
03
部分同学参与度不高
在实验过程中,部分同学处于观望状态,没有真正参与到实验中。今后
应鼓励这些同学多动手操作,提高他们的实验兴趣和参与度。
改进建议
增加实验时间
为了让学生有足够的时间进行实验操作和数据处理,建议增加实验时间,确保学生能够充 分完成实验任务。
培养实验技能
实验过程中,学生将学习如何进行实 验操作,包括实验器材的使用、实验 步骤的执行和实验数据的记录等。
实验原理
酶是生物体内的一种蛋白质,具有催 化作用,可以加速化学反应的速率。
在本实验中,我们将通过比较不同酶 对同一底物的催化效果,来验证酶的 特性。
酶的特性包括专一性、高效性、温和 性和可调节性。这些特性使得酶在生 物体内发挥着重要的生理功能。
实验步骤
准备实验器材和试剂
包括试管、滴管、量筒、底物 溶液、酶溶液等。
设定实验组和对照组
设置不同浓度的酶溶液作为实 验组,以无酶溶液作为对照组 。
开始实验
将底物溶液分别加入到实验组 和对照组中,观察并记录反应 现象和数据。
分析数据
根据实验数据,分析酶的特性 ,得出结论。
02
CATALOGUE
为了提高数据处理的准确性,建议在实验前增加数据处理方面的培训,让学生熟悉数据处 理的流程和方法。
鼓励全员参与
为了提高实验效果,建议鼓励所有同学参与到实验中,让他们多动手操作,提高实验兴趣 和参与度。同时,老师也应关注学生的参与情况,及时给予指导和帮助。
THANKS
感谢观看
数据处理的准确性需提高
在数据处理过程中,部分同学出现了误差,导致实验结果分析不准确。 今后应加强数据处理方面的培训,提高数据处理的准确性。
03
部分同学参与度不高
在实验过程中,部分同学处于观望状态,没有真正参与到实验中。今后
应鼓励这些同学多动手操作,提高他们的实验兴趣和参与度。
改进建议
增加实验时间
为了让学生有足够的时间进行实验操作和数据处理,建议增加实验时间,确保学生能够充 分完成实验任务。
培养实验技能
实验过程中,学生将学习如何进行实 验操作,包括实验器材的使用、实验 步骤的执行和实验数据的记录等。
实验原理
酶是生物体内的一种蛋白质,具有催 化作用,可以加速化学反应的速率。
在本实验中,我们将通过比较不同酶 对同一底物的催化效果,来验证酶的 特性。
酶的特性包括专一性、高效性、温和 性和可调节性。这些特性使得酶在生 物体内发挥着重要的生理功能。
实验步骤
准备实验器材和试剂
包括试管、滴管、量筒、底物 溶液、酶溶液等。
设定实验组和对照组
设置不同浓度的酶溶液作为实 验组,以无酶溶液作为对照组 。
开始实验
将底物溶液分别加入到实验组 和对照组中,观察并记录反应 现象和数据。
分析数据
根据实验数据,分析酶的特性 ,得出结论。
02
CATALOGUE
实验酶的专一性 ppt课件
酶的专一性
课堂目标
1.掌握酶的专一性
2.以唾液淀粉酶的专一性为例淡谈本实 验的原理
3.以严谨的科学态度进行实验操作,准 确记录。并对结果进行讨论分析,完成 实验报告
2020/12/15
1
酶的专一性
• 实验原理
• 唾液淀粉酶可将淀粉水解成麦芽 糖及少量葡萄糖,二者均属还原性糖 ,能使班氏试剂中的二价铜离子还原 成一价铜离子,生成砖红色的氧化亚 铜沉淀。而蔗糖不能被此种酶水解, 也不具有还原性,故不能与班氏试剂 发生颜色反应。
2020/12/15
2
精品资料
• 你怎么称呼老师?
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你 是否会认为老师的教学方法需要改进?
• 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我 笨,没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
• 观察结果并记录。
2020/12/15
7
实验报告 1.在表中填写实验结果,对原因作简单解释
管号Biblioteka 结果123
与分析
颜色?沉淀?
原因
2020/12/15
8
思考題
试以唾液淀粉酶为例,解释“酶的绝 对专一性”
2020/12/15
9
2020/12/15
4
试剂
1.1%淀粉溶液
2.1%蔗糖溶液
3.pH6.8缓冲液
4.班氏试剂
5.稀释唾液的制备
用水漱口以清除口腔食物残渣,然后
再含一口蒸馏水作咀嚼动作,使唾液充分
分泌。1分钟后,把口中的水吐入烧杯中(
重复多次)。再用滤纸稍加稀释过滤后待用
课堂目标
1.掌握酶的专一性
2.以唾液淀粉酶的专一性为例淡谈本实 验的原理
3.以严谨的科学态度进行实验操作,准 确记录。并对结果进行讨论分析,完成 实验报告
2020/12/15
1
酶的专一性
• 实验原理
• 唾液淀粉酶可将淀粉水解成麦芽 糖及少量葡萄糖,二者均属还原性糖 ,能使班氏试剂中的二价铜离子还原 成一价铜离子,生成砖红色的氧化亚 铜沉淀。而蔗糖不能被此种酶水解, 也不具有还原性,故不能与班氏试剂 发生颜色反应。
2020/12/15
2
精品资料
• 你怎么称呼老师?
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你 是否会认为老师的教学方法需要改进?
• 你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式? • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我 笨,没有学问无颜见爹娘 ……”
• “太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早……”
• 观察结果并记录。
2020/12/15
7
实验报告 1.在表中填写实验结果,对原因作简单解释
管号Biblioteka 结果123
与分析
颜色?沉淀?
原因
2020/12/15
8
思考題
试以唾液淀粉酶为例,解释“酶的绝 对专一性”
2020/12/15
9
2020/12/15
4
试剂
1.1%淀粉溶液
2.1%蔗糖溶液
3.pH6.8缓冲液
4.班氏试剂
5.稀释唾液的制备
用水漱口以清除口腔食物残渣,然后
再含一口蒸馏水作咀嚼动作,使唾液充分
分泌。1分钟后,把口中的水吐入烧杯中(
重复多次)。再用滤纸稍加稀释过滤后待用
酶ppt课件-ppt课件
2.酶催化作用的机理:降低化学反应的活化能。
2.酶的催化机理
酶促反应:受酶催化的化学反应。 底 物: 受酶催化而发生化学反应的分子。
1948年,德国有机化学家Fisher提出锁钥学说
下图是人体内某个化学反应的示意图。
图中的哪个英文字母代表酶? A
酶——生物催化剂
酶有什么独特的特点呢? 酶的专一性
酶
与体外的燃烧相比,想一想在常温、 常压下,体内的燃烧为什么能够顺利 而快速地进行呢?
酶
一、酶的发现
18世纪之前,人们一直认为鸟类的胃只能磨碎 食物,不能分解食物中的有机物。
1773年,意大利科学家斯帕兰札尼做了一个巧妙 的实验:将肉块放入金属笼内,然后让鹰把小笼子吞 下去.过一段时间后,他把小笼子取出来,发现笼内的 肉块消失了。
从这个实验中能得出什么结论?
胃具有化学性消化的作用
一、酶的发现
1. 1773年意大利斯帕兰札尼实验,其巧妙之处在哪里?这个实 验说明了什么? 巧妙之处:把肉放在小笼内,避免发生物理
消化;本实验说明胃中发生化学性消化。
2、1857年,法国微生物学家巴斯德通过显微镜观察,提 出酿酒中的发酵是由于酵母细胞的存在,没有活细胞的参 与,糖类是不可能变成酒精的。德国化学家李比希却坚持 认为引起发酵的是酵母细胞中的某些物质,与酵母菌的活 动无关。两种观点争论不下。
酶的化学本质是蛋白质。
4、20世纪80年代以来,美国科学家切赫和奥特曼发现 少数RNA也具有催化作用.
极少数酶的化的一类具有生物催化作用
的有机物。
产生及作用部位: 活细胞产生
作用于细胞内,细胞外,或者体外
生理作用: 生物催化作用 化学本质: 有机物 大部分酶是蛋白质,也有少数是RNA。
酶的作用和本质课件ppt.ppt
想一想
化学课上学过的过氧化氢可以在什 么条件下分解?
皮肤不小心出现伤口时,用双氧 水(H2O2)消毒时在伤口处会产生 大量气泡是为什么呢?
实验探究
比较过氧化氢在不同条件下的分解
2H2O2
Fe3+ H2O2酶 2H2O + O2
1、常温下反应
加入试管直接观察
2、加热
水浴加热
3、Fe3+做催化剂 滴加FeCl3溶液 4、过氧化氢酶 土豆匀浆
怎样比较不同条件下的分解速率? 观察气泡的多少; 卫生香复燃的程度;
步骤
1
试管编号
2
3
4
H2O2浓度
一 剂量
反应 二 条件
剂量
3% 3%
3%
2mL 常温
2mL 2mL
90℃
FeCl3 溶液
2滴
3%
2mL 肝脏研
磨液
2滴
无 少量 较多 大量 三 结果
不复燃 不复燃 复燃 剧烈燃烧
结果讨论
1、常温下1号试管无气泡,加热 下2号试管出现少量气泡,这一现 象说明什么? 加热能促进过氧化氢分解
2、在细胞内的化学反应,能通过 加热来提高反应速率吗? 不能,温度过高会使生物死亡
结果讨论
3、3号和4号试管未经加热, 但也有大量的气泡产生,这说 明什么?
Fe3+和过氧化氢酶都能加快 过氧化氢分解,起支 试管中的反应速率快?这说明 什么? 4号;
过氧化氢酶比Fe3+的催化效 率高的多
2、3号4号两支试管的唯一区别是催化剂不 同,如果两试管的温度也不同,能不能说 酶的催化效率高于无机催化剂?
对照原则:对照组、实验组
原则:
单一变量原则: 除自变量外其他条件完全相同
化学课上学过的过氧化氢可以在什 么条件下分解?
皮肤不小心出现伤口时,用双氧 水(H2O2)消毒时在伤口处会产生 大量气泡是为什么呢?
实验探究
比较过氧化氢在不同条件下的分解
2H2O2
Fe3+ H2O2酶 2H2O + O2
1、常温下反应
加入试管直接观察
2、加热
水浴加热
3、Fe3+做催化剂 滴加FeCl3溶液 4、过氧化氢酶 土豆匀浆
怎样比较不同条件下的分解速率? 观察气泡的多少; 卫生香复燃的程度;
步骤
1
试管编号
2
3
4
H2O2浓度
一 剂量
反应 二 条件
剂量
3% 3%
3%
2mL 常温
2mL 2mL
90℃
FeCl3 溶液
2滴
3%
2mL 肝脏研
磨液
2滴
无 少量 较多 大量 三 结果
不复燃 不复燃 复燃 剧烈燃烧
结果讨论
1、常温下1号试管无气泡,加热 下2号试管出现少量气泡,这一现 象说明什么? 加热能促进过氧化氢分解
2、在细胞内的化学反应,能通过 加热来提高反应速率吗? 不能,温度过高会使生物死亡
结果讨论
3、3号和4号试管未经加热, 但也有大量的气泡产生,这说 明什么?
Fe3+和过氧化氢酶都能加快 过氧化氢分解,起支 试管中的反应速率快?这说明 什么? 4号;
过氧化氢酶比Fe3+的催化效 率高的多
2、3号4号两支试管的唯一区别是催化剂不 同,如果两试管的温度也不同,能不能说 酶的催化效率高于无机催化剂?
对照原则:对照组、实验组
原则:
单一变量原则: 除自变量外其他条件完全相同
酶(生物化学)PPT课件
详细描述
酶的活性中心是酶分子中具有特定空间结构的区域,能够与底物特异结合,并 通过催化反应将其转化为产物。活性中心的氨基酸残基通常是高度保守的,对 酶的催化活性至关重要。
酶的专一性
总结词
酶的专一性是指一种酶只能催化一种或一类化学反应的性质 。
详细描述
酶的专一性是酶的重要特性之一,它决定了酶在生物体内的 功能。一种酶通常只能催化一种或一类化学反应,这是因为 酶的活性中心具有特定的空间结构和化学环境,只能够与特 定的底物结合并催化相应的反应。
食品保鲜
酶可用于食品保鲜,如抑制果蔬 中酶的活性,延缓成熟和腐烂过 程;也可用于食品中农药残留的
降解。
功能性食品开发
酶可用于开发功能性食品,如通 过酶促反应生产低糖、低脂或高
纤维食品。
酶在环保领域的应用
有毒有害物质降解
酶可用于降解有毒有害物质,如重金属离子、有机溶剂和农药等, 降低其对环境和生物体的危害。
的诊断。
药物生产
酶可用于药物的生产和制造过程中, 如抗生素、激素和蛋白质药物等, 通过酶促反应提高生产效率和纯度。
生物治疗
酶在某些生物治疗过程中起到关键 作用,如基因疗法和细胞疗法中, 酶可促进特定基因的表达或改变细 胞代谢。
酶在食品工业中的应用
食品加工
酶在食品加工过程中起到重要作 用,如淀粉的改性、蛋白质的水 解和油脂的加工等,可改善食品 的口感、营养价值和加工性能。
计算机辅助设计
计算机辅助设计是一种利用计算 机模拟技术来预测和优化酶性能
的方法。
通过计算机模拟,可以预测酶的 催化机制、反应路径和动力学行
为,从而指导酶的优化设计。
计算机辅助设计与其他技术结合, 如量子化学计算和分子动力学模 拟,可进一步提高酶优化效率。
酶的活性中心是酶分子中具有特定空间结构的区域,能够与底物特异结合,并 通过催化反应将其转化为产物。活性中心的氨基酸残基通常是高度保守的,对 酶的催化活性至关重要。
酶的专一性
总结词
酶的专一性是指一种酶只能催化一种或一类化学反应的性质 。
详细描述
酶的专一性是酶的重要特性之一,它决定了酶在生物体内的 功能。一种酶通常只能催化一种或一类化学反应,这是因为 酶的活性中心具有特定的空间结构和化学环境,只能够与特 定的底物结合并催化相应的反应。
食品保鲜
酶可用于食品保鲜,如抑制果蔬 中酶的活性,延缓成熟和腐烂过 程;也可用于食品中农药残留的
降解。
功能性食品开发
酶可用于开发功能性食品,如通 过酶促反应生产低糖、低脂或高
纤维食品。
酶在环保领域的应用
有毒有害物质降解
酶可用于降解有毒有害物质,如重金属离子、有机溶剂和农药等, 降低其对环境和生物体的危害。
的诊断。
药物生产
酶可用于药物的生产和制造过程中, 如抗生素、激素和蛋白质药物等, 通过酶促反应提高生产效率和纯度。
生物治疗
酶在某些生物治疗过程中起到关键 作用,如基因疗法和细胞疗法中, 酶可促进特定基因的表达或改变细 胞代谢。
酶在食品工业中的应用
食品加工
酶在食品加工过程中起到重要作 用,如淀粉的改性、蛋白质的水 解和油脂的加工等,可改善食品 的口感、营养价值和加工性能。
计算机辅助设计
计算机辅助设计是一种利用计算 机模拟技术来预测和优化酶性能
的方法。
通过计算机模拟,可以预测酶的 催化机制、反应路径和动力学行
为,从而指导酶的优化设计。
计算机辅助设计与其他技术结合, 如量子化学计算和分子动力学模 拟,可进一步提高酶优化效率。
酶联免疫吸附实验ppt课件
作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标点。通 过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。 3、若标本OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后 重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。 4、试剂盒灵敏度:最小可测人TNF-a达4pg/ml。
19
20
第四.五部分: 注意事项(1)
1、手工洗板时,甩尽孔内液体,每孔加洗涤 液350μl,静止30秒后甩尽液体,在厚迭吸 水纸上拍干,洗4次。
23
工作液 100ul/孔,封住板孔, 37℃孵育60分钟。
16
第四.三部分: 实验方法和步骤
9、洗板4次。 10 、除空白孔外,加入1:100稀释的酶结合
工作液(100 ul/孔).封住板孔, 37℃孵育30分 钟. 11 、洗板4次. 12、各孔加入显色剂100 ul/孔,避光37℃孵育 10-20分钟。 13、各孔加入终止液100ul/孔,混匀后即刻测 A450值(5分钟内)。15ຫໍສະໝຸດ 第四.三部分: 实验方法和步骤
5、从密封袋中取出所需板条,其它板条密封放回 4℃
6、除空白孔外,分别将不同浓度标准品/标本100ul/ 孔加入板条的相应孔中,标准品和标本应作双复 孔或三复孔。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵育 90分钟。
7、洗板4次。 8、除空白孔外,加入1:100稀释的生物素化抗体(2a)
• 2、将浓缩洗涤液(4)用双蒸水稀释(1:20)。未 用完的放回4℃。
• 3、标准品:以标准品/标本稀释液(1b)1.0ml复溶冻 干标准品(1a), 静置15分钟后混匀,按说明稀释至 所需浓度,再进行倍比稀释至所需浓度。未用完 的复溶标准品放入-20℃保存, 稀释的标准品不应 重复使用。
• 4、可根据实际情况,将标本做适当倍数稀释(可 做预实验,以确定稀释倍数)。
19
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第四.五部分: 注意事项(1)
1、手工洗板时,甩尽孔内液体,每孔加洗涤 液350μl,静止30秒后甩尽液体,在厚迭吸 水纸上拍干,洗4次。
23
工作液 100ul/孔,封住板孔, 37℃孵育60分钟。
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第四.三部分: 实验方法和步骤
9、洗板4次。 10 、除空白孔外,加入1:100稀释的酶结合
工作液(100 ul/孔).封住板孔, 37℃孵育30分 钟. 11 、洗板4次. 12、各孔加入显色剂100 ul/孔,避光37℃孵育 10-20分钟。 13、各孔加入终止液100ul/孔,混匀后即刻测 A450值(5分钟内)。15ຫໍສະໝຸດ 第四.三部分: 实验方法和步骤
5、从密封袋中取出所需板条,其它板条密封放回 4℃
6、除空白孔外,分别将不同浓度标准品/标本100ul/ 孔加入板条的相应孔中,标准品和标本应作双复 孔或三复孔。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵育 90分钟。
7、洗板4次。 8、除空白孔外,加入1:100稀释的生物素化抗体(2a)
• 2、将浓缩洗涤液(4)用双蒸水稀释(1:20)。未 用完的放回4℃。
• 3、标准品:以标准品/标本稀释液(1b)1.0ml复溶冻 干标准品(1a), 静置15分钟后混匀,按说明稀释至 所需浓度,再进行倍比稀释至所需浓度。未用完 的复溶标准品放入-20℃保存, 稀释的标准品不应 重复使用。
• 4、可根据实际情况,将标本做适当倍数稀释(可 做预实验,以确定稀释倍数)。
酶是生物催化剂ppt课件
5.底物浓度
酶量一定的条件下,在一定范
反
应
围内随着底物浓度的增加,反 速 率
应速率也增加,但达到一定浓
底物浓度[s]
度后不再增加,原因是受到酶数量和酶活性的
限制。
6.酶浓度
反
应
在底物充足、其他条件适宜且 速
率
固定的条件下,酶促反应速率
与酶浓度成正比。
酶浓度[E]
7.影响酶活性的曲线(多因素)
支 应 物 乘 剩 余 量 ( 相对 量 )
④在各自所控制的温度下保温一段时间
⑤滴加 碘 液 ,观察颜色变化
步骤顺 序
3%淀粉 液
2%淀粉 酶液
温度预 处理
混合后 摇匀
控制温 度
试管1 试管1’ 2ml
1ml 0℃保温5min
混合 0℃保温5min
试管2 试管2 ’ 试管3 试 管 3 ’
2ml
2ml
1ml
1ml
60℃保温5min 100℃保温5min
3、在上述实验中,自变量是什么?无关变量是 什么?
自变量是不同的温度;无关变量是可溶性淀粉溶 液、新鲜淀粉酶溶液、碘液的量
酶活性受许多因素的影响
(1)本实验不宜选用过氧化氢酶催化H₂O₂分解,因为 过氧化氢酶催化的底物过氧化氢在加热的条件下分解 也会加快。
(2)本实验不宜选用斐林试剂鉴定,温度是干扰
淀粉(非还原糖)淀粉酶 麦芽糖(还原糖) ① 淀粉(非还原糖)蔗糖酶淀粉
②再用本尼迪特试剂鉴定,从而探究酶的专一性。
1、探究淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用
第一步:1ml 水 水 水 淀粉酶淀粉酶 第二步:3ml 淀粉 蔗糖 淀粉酶淀粉蔗糖
第三步:各试管充分摇匀后,37℃保温15分钟
《酶联免疫分析法》课件
酶联免疫分析法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点。
酶联免疫分析法广泛应用于医学、生物学、环境科学等领域。
分类:直接法、间接法、双抗体夹心法、竞争法等 应用:临床诊断、药物研发、食品安全检测、环境监测等领域 优点:灵敏度高、特异性强、操作简便、成本低等 局限性:存在假阳性和假阴性结果,需要标准化操作和严格的质量控制
汇报人:PPT
PPT,a click to unlimited possibilities
汇报人:PPT
CONTENTS
PART ONE
PART TWO
酶联免疫分析法(ELISA)是一种免疫学检测方法,用于检测样品中的抗原或抗体。
原理:利用抗原-抗体特异性结合的原理,通过酶催化底物产生颜色反应,从而定量或定性检测样品中的抗原或 抗体。
优点:灵敏度高,特异性强,检测速度快,操作简便 缺点:成本较高,需要专业人员操作,容易受到环境因素影响
PART THREE
抗原选择:选择合适的抗原,如蛋 白质、多肽等
抗原标记:将抗原与酶或荧光素等 标记物结合
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
抗原纯化:通过离心、层析等方法 纯化抗原
抗原保存:将标记好的抗原保存在 适当的条件下,如低温、避光等
检测水中有机污染物:如农药、多 环芳烃等
检测土壤中的污染物:如重金属、 有机氯农药等
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
检测空气中的污染物:如二氧化硫、 氮氧化物等
检测生物体内的污染物:如农药残 留、重金属等
蛋白质定量分析:通过酶联免疫分析法检测蛋白质的浓度 抗体检测:通过酶联免疫分析法检测抗体的存在和浓度 细胞因子检测:通过酶联免疫分析法检测细胞因子的存在和浓度 基因表达分析:通过酶联免疫分析法检测基因的表达水平和调控机制
酶联免疫分析法广泛应用于医学、生物学、环境科学等领域。
分类:直接法、间接法、双抗体夹心法、竞争法等 应用:临床诊断、药物研发、食品安全检测、环境监测等领域 优点:灵敏度高、特异性强、操作简便、成本低等 局限性:存在假阳性和假阴性结果,需要标准化操作和严格的质量控制
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CONTENTS
PART ONE
PART TWO
酶联免疫分析法(ELISA)是一种免疫学检测方法,用于检测样品中的抗原或抗体。
原理:利用抗原-抗体特异性结合的原理,通过酶催化底物产生颜色反应,从而定量或定性检测样品中的抗原或 抗体。
优点:灵敏度高,特异性强,检测速度快,操作简便 缺点:成本较高,需要专业人员操作,容易受到环境因素影响
PART THREE
抗原选择:选择合适的抗原,如蛋 白质、多肽等
抗原标记:将抗原与酶或荧光素等 标记物结合
添加标题
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添加标题
添加标题
抗原纯化:通过离心、层析等方法 纯化抗原
抗原保存:将标记好的抗原保存在 适当的条件下,如低温、避光等
检测水中有机污染物:如农药、多 环芳烃等
检测土壤中的污染物:如重金属、 有机氯农药等
添加标题
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添加标题
检测空气中的污染物:如二氧化硫、 氮氧化物等
检测生物体内的污染物:如农药残 留、重金属等
蛋白质定量分析:通过酶联免疫分析法检测蛋白质的浓度 抗体检测:通过酶联免疫分析法检测抗体的存在和浓度 细胞因子检测:通过酶联免疫分析法检测细胞因子的存在和浓度 基因表达分析:通过酶联免疫分析法检测基因的表达水平和调控机制
《酶抑制法》课件
医学研究
酶抑制法也可用于医学研 究中,例如研究某些疾病 的发生机制和开发新的药 物。
农业科学
在农业科学领域,酶抑制 法可用于研究植物病虫害 的防治和农药残留等。
02
酶的选择与制备
酶的选择
酶的来源
根据实验需求选择合适的 酶来源,如动物、植物或 微生物。
酶的性质
了解酶的活性、最适pH、 最适温度等性质,以确保 实验的准确性和可靠性。
酶抑制法的原理
酶是一种生物催化剂,能够催化生物体内的化学反应。
酶的活性受到抑制剂的影响,抑制剂可以与酶的活性中心结合,从而抑制酶的活性 。
通过研究抑制剂对酶活性的影响,可以了解酶的催化机制和底物与酶之间的相互作 用。
酶抑制法的应用领域
01
02
03
生物化学研究
酶抑制法在生物化学研究 中被广泛应用于研究酶的 催化机制、抑制剂设计和 药物开发等领域。
缺点
干扰物质影响
酶抑制法可能会受到其他物质的干扰,导致 检测结果不准确。
适用范围有限
酶抑制法通常只适用于特定的物质或反应, 对于其他物质可能不适用。
对酶的依赖
该方法依赖于酶的活性,酶的失活或活性降 低可能会影响检测结果。
成本较高
某些酶和试剂的成本较高,增加了检测成本 。
改进方向
开发新型酶和试剂
优化操作流程
蛋白检测
使用蛋白质检测方法,如 Bradford法、Lowry法等,检测
纯化后酶的浓度和纯度。
活性检测
通过测定酶促反应速率,检测纯化 后酶的活性。
分子量测定
使用SDS-PAGE等方法测定纯化后 酶的分子量,以验证纯化效果。
03
酶抑制法实验流程
实验-酶的专一性及影响酶活性的因素-经典PPT课件
0.1
稀释唾液
0.5
0.5
0.5
0.5
混匀,37℃,保温(用反应板)
碘液(滴)
1
1
1
1
观察记录颜色
目录
目录
注意事项 1. 每次加试剂后都要摇匀,碘液不可滴在管壁上。
2. 加碘液要迅速,以保证反应时间相等。 3. 保温100℃的管应先冷却再加碘液,其它各管均
应置于相应温度下或取出后立即加碘液摇匀。 4. 表3和表4使用反应板。 5. 提前烧水,沸水浴时注意安全。
二实验原理一验证酶专一性的实验原理二验证温度ph激活剂和抑制剂影响酶活性的实验原理酶的专一性唾液淀粉酶只能催化淀粉水解最终产物为麦芽糖而不能催化其它糖如纤维素和蔗糖等水解
酶的专一性及影响 酶活性的因素
目录
一、实验目的 1. 掌握 验证酶的专一性及温度、pH、 激动剂和抑制剂对酶活性影响的实验方法。 2. 熟悉 验证酶的专一性及温度、pH、 激动剂和抑制剂对酶活性影响的实验原理。 3. 了解 实验设计的对照原则。
目录
目录
目录
2 . 显色原理 蔗糖与淀粉均无还原性,与班氏试剂呈阴性反应。 麦芽糖和蔗糖的水解产物葡萄糖和果糖皆可与班氏 试剂呈阳性反应(即在一定条件下使班氏试剂中二 价铜还原为一价铜生成砖红色沉淀)。
目录
(二)验证温度、pH、激活剂和抑制剂影响酶活性 的实验原理 淀粉水解为麦芽糖的反应过程经历以下几个 阶段,不同反应阶段的产物遇碘呈现不同颜色:
稀释唾液
1.0
1.0
1.0
混匀,37℃,保温5分钟(用反应板)
碘液(滴)
2
2
2
观察记录颜色
目录
目录
(四) 激动剂和抑制剂对唾液淀粉酶的影响
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用具设计实验,同时验证过氧化氢酶具有催化作用和高效性。
材料及用具:适宜浓度的H2O2溶液、蒸馏水、3.5%FeCl3溶液、 0.01%过氧化氢酶溶液、恒温水浴锅、试管。
(1)实验步骤: ①_取_三_支_试_管_编_号_甲_、_乙_、_丙_,_分_别_滴_加_适_量_且_等_量_的_H2O,2溶液
放入37℃恒温水浴锅中10分钟。 ②_向_3支_试_管_中_分_别_加_入_等_量_的_蒸_馏_水_、_F_e_Cl_3溶_液_和_过_氧_化氢 __酶_溶_液_并_混_合_均_匀,继续37℃恒温水浴锅保温。 ③ _观_察_记_录_三_支_试_管_里_气_泡_从_溶_液_中_释_放_的_速_度_。__。
3
考点2:验证酶的催化作用与高效性
小结:
实验目的 验证酶具有催化作用
实验组
底物+相应酶液
验证酶的高效性 底物+相应酶液
对照组 底物+等量蒸馏水
底物+无机催化剂
自变量 相应酶液的有无
无机催化剂和酶
因变量 无关变量
能否发生反应 (反应速率)
底物量、温度等
反应速率
底物的数量、温度等
4
(09全国)已知H2O2的分解速度可通过反应过程中O2的生成速 度(即气泡从溶液中释放的速度)来判断,请用所给的材料和
2
试管及操作
H2O2溶液(mL) FeCl3溶液(滴) 鲜肝研磨液(滴)
HCl溶液 NaOH溶液 蒸馏水(滴)
保持温度(℃)
1号
2号
3号
4号
2
2
2
2
—
—
2
—
—
2
—
2
—
—
—
—
—
—
—
—
2
—
—
—
37
37
37
0
(1)1号和2号试管对比得出的结论是 酶具有催化作用 (2) 2号和3号试管对比得出的结论是 酶具有高效性 (3) 2号和4号试管对比得出的结论是酶的活性受温度影响
因变量
复燃
过氧化氢在不同条件下的 分解速率不一样,在酶的 催化下速率最快。
控制 单一 变量 1
【例1】为了探究口腔的分泌液中是否有蛋白酶, 某学生设计了两组实验,如图所示。在37℃
水浴中保温一段时间后,1、2中加入适量双缩 脲试剂,3、4不加任何试剂,下列实验能达到 目的的是
A.实验②
B.实验①
C.实验①、实验②都能 D.实验①、实验②都不能
比较过氧化氢在不同条件下的分解速率
设置对照实验 对照组 试管编实号验组
步骤
1
2
3
4
说明
H2O2 浓度 一 剂量 二 反应条件
结 气泡产生 果 卫生香燃烧
结论
3%
3% 3%
3% 无关变量
2ml 2ml 2ml 2ml
常温
不明显 不复燃
90℃
少量
2滴 FeCl3
较多
不复燃 变亮
2滴肝脏 研磨液
自变量
大量
图1和图2分别表示了酶具有________________。洗衣粉 中加入的A之所以能够耐酸碱、忍受表面活性剂和较高温 度,是因为它是通过________精心设计改造生产出来的; 控制其合成的直接模板主要分布在细胞的________中。 (2)图3是与酶活性影响因素相关的曲线,请分析回答: 当pH从5上升到7,酶活性的变化过程_______________; 从图示曲线我们还可以得出的结论是_______________1_3 。
观察各试管溶液的颜色变化
9
5、探究pH对酶活性的影响
组别 步骤
实验操作内容
试管1
试管2
试管3
1
α-淀粉酶溶液
1 mL
1 mL
1 mL
2 设置不同pH 1 mL蒸馏水 1 mLNaOH 1 mLHCl
3
淀粉溶液
2 mL
2 mL
2 mL
4
60℃水浴
5分钟
5分钟
5分钟
5
斐林试剂
2 mL
2 mL
2 mL
6
再取3支洁净试管,编号A、B、C,分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液。
(2)将试管1和A放入60℃左右的热水、试管2 和B放入沸水、试管3和C放入 冰水 中,维持各 自的温度5min。 (3)将A、B、C试管中的淀粉酶溶液分别倒入 1、2、3试管的淀粉溶液中,摇匀后,再维持各 自的温度5min。 (4)在3支试管中各滴入1滴 碘液 ,摇匀,
水浴加热
2分钟
2分钟
2分钟
出现砖红 不出现砖红 不出现砖
7 观察实验现象
色沉淀
色沉淀 红色沉淀
判断:可用碘液代替斐林试剂进行检验
10
6、探究酶的最适温度和pH
实验目的 探究酶的适宜温度
相互对照 一定温度梯度下的 同一温度处理后的 底物和酶混合
探究酶的最适pH
一定pH梯度下的 同一pH处理后的 底物和酶混合
4
加碘液
1滴
1滴
5
观察实验现象 不出现蓝色 蓝色
试管3
2 mL 冰块 (5分钟) 1 mL (5分钟) 1滴
蓝色
判断:
步骤2和步骤3可以颠倒
除了淀粉酶,还可以探究温度对H2O2酶的影响 可用斐林试剂代替碘液进行检验
8
4、酶的活性受温度的影响
步骤:(1)取3只洁净的试管,编号1、2、3, 分别注入2mL可溶性淀粉液;同时,
自变量
温度
PH
因变量
底物的分解速率或底物的剩余量 酶的活性
无关变量 底物和酶的量、溶 液pH、反应时间等
底物和酶的量、
溶液温度、反应
时间等
11
下图中能正确表示胰蛋白酶对底物的分解速度和温度关系 的是
12
(2010·南京二模)请你解读与酶有关的图示、曲线: (1)图1和图2是与酶的特性相关的图示,请回答下列问题:
(2) 实验结果及结论: 丙试管里气泡的释放的速度最快,乙试管较慢,甲试管无
明显的气泡放出。过氧化氢酶具有催化作用和高效性。
(3)如果仅将实验中的恒温水浴改为80℃,重复上述实验,O2 的释放速度最快的是:乙_试_管_(_滴_加_Fe_CL_3_溶_液_)原因是 _80_℃_条_件_下_,_F_eC_l3_的_催_化_作_用_加_快_,.而过氧化氢酶因高温失活
(1)若“+”代表加入适量的溶液,“-”代表不加溶液,甲代表 试管标号,请用这些符号完成下表实验设计。
溶液 试管
蔗糖溶液
淀粉溶液
蔗糖酶溶液
唾液淀粉酶溶液
甲
+
-
+
-
乙
-
﹢
﹢
-
丙
﹢
-
-
﹢
丁
-
﹢
-
﹢
(2)实验步骤:
①按照上表中的设计,取试管、加溶液。
② 混匀,37℃恒温水浴一段时间(5分钟)
;
③ 分别加入适量且等量的斐林试剂,混匀,60℃水浴一段时间;
5
3、验证酶的专一性
α-淀粉酶
60℃保温5分钟
50-65 ℃水浴加热2分钟
判断:
若用唾液淀粉酶,则保温温度为37℃
可用碘液代替斐林试剂进行检验
6
设计实验验证蔗糖酶和淀粉酶的催化作用具有专一性。 材料与用具:适宜浓度的蔗糖酶、唾液淀粉酶、蔗糖、淀粉4种 溶液、斐林试剂、试管、37℃恒温水浴锅、60℃恒温水浴锅。
④ 观察实验现象并记录实验结果
。
(3)结果预测 砖红色沉淀 无砖红色沉淀 无砖红色沉淀 砖红色沉淀。7
4、探究温度对酶活性的影响
组别 步骤
实验操 作内容
试管1 试管2
ห้องสมุดไป่ตู้
1
淀粉溶液
2 mL
2 mL
2
控制不同 温度条件
60℃热水 沸水 (5分钟) (5分钟)
3
淀粉酶溶液
1 mL
1 mL
(5分钟) (5分钟)
材料及用具:适宜浓度的H2O2溶液、蒸馏水、3.5%FeCl3溶液、 0.01%过氧化氢酶溶液、恒温水浴锅、试管。
(1)实验步骤: ①_取_三_支_试_管_编_号_甲_、_乙_、_丙_,_分_别_滴_加_适_量_且_等_量_的_H2O,2溶液
放入37℃恒温水浴锅中10分钟。 ②_向_3支_试_管_中_分_别_加_入_等_量_的_蒸_馏_水_、_F_e_Cl_3溶_液_和_过_氧_化氢 __酶_溶_液_并_混_合_均_匀,继续37℃恒温水浴锅保温。 ③ _观_察_记_录_三_支_试_管_里_气_泡_从_溶_液_中_释_放_的_速_度_。__。
3
考点2:验证酶的催化作用与高效性
小结:
实验目的 验证酶具有催化作用
实验组
底物+相应酶液
验证酶的高效性 底物+相应酶液
对照组 底物+等量蒸馏水
底物+无机催化剂
自变量 相应酶液的有无
无机催化剂和酶
因变量 无关变量
能否发生反应 (反应速率)
底物量、温度等
反应速率
底物的数量、温度等
4
(09全国)已知H2O2的分解速度可通过反应过程中O2的生成速 度(即气泡从溶液中释放的速度)来判断,请用所给的材料和
2
试管及操作
H2O2溶液(mL) FeCl3溶液(滴) 鲜肝研磨液(滴)
HCl溶液 NaOH溶液 蒸馏水(滴)
保持温度(℃)
1号
2号
3号
4号
2
2
2
2
—
—
2
—
—
2
—
2
—
—
—
—
—
—
—
—
2
—
—
—
37
37
37
0
(1)1号和2号试管对比得出的结论是 酶具有催化作用 (2) 2号和3号试管对比得出的结论是 酶具有高效性 (3) 2号和4号试管对比得出的结论是酶的活性受温度影响
因变量
复燃
过氧化氢在不同条件下的 分解速率不一样,在酶的 催化下速率最快。
控制 单一 变量 1
【例1】为了探究口腔的分泌液中是否有蛋白酶, 某学生设计了两组实验,如图所示。在37℃
水浴中保温一段时间后,1、2中加入适量双缩 脲试剂,3、4不加任何试剂,下列实验能达到 目的的是
A.实验②
B.实验①
C.实验①、实验②都能 D.实验①、实验②都不能
比较过氧化氢在不同条件下的分解速率
设置对照实验 对照组 试管编实号验组
步骤
1
2
3
4
说明
H2O2 浓度 一 剂量 二 反应条件
结 气泡产生 果 卫生香燃烧
结论
3%
3% 3%
3% 无关变量
2ml 2ml 2ml 2ml
常温
不明显 不复燃
90℃
少量
2滴 FeCl3
较多
不复燃 变亮
2滴肝脏 研磨液
自变量
大量
图1和图2分别表示了酶具有________________。洗衣粉 中加入的A之所以能够耐酸碱、忍受表面活性剂和较高温 度,是因为它是通过________精心设计改造生产出来的; 控制其合成的直接模板主要分布在细胞的________中。 (2)图3是与酶活性影响因素相关的曲线,请分析回答: 当pH从5上升到7,酶活性的变化过程_______________; 从图示曲线我们还可以得出的结论是_______________1_3 。
观察各试管溶液的颜色变化
9
5、探究pH对酶活性的影响
组别 步骤
实验操作内容
试管1
试管2
试管3
1
α-淀粉酶溶液
1 mL
1 mL
1 mL
2 设置不同pH 1 mL蒸馏水 1 mLNaOH 1 mLHCl
3
淀粉溶液
2 mL
2 mL
2 mL
4
60℃水浴
5分钟
5分钟
5分钟
5
斐林试剂
2 mL
2 mL
2 mL
6
再取3支洁净试管,编号A、B、C,分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液。
(2)将试管1和A放入60℃左右的热水、试管2 和B放入沸水、试管3和C放入 冰水 中,维持各 自的温度5min。 (3)将A、B、C试管中的淀粉酶溶液分别倒入 1、2、3试管的淀粉溶液中,摇匀后,再维持各 自的温度5min。 (4)在3支试管中各滴入1滴 碘液 ,摇匀,
水浴加热
2分钟
2分钟
2分钟
出现砖红 不出现砖红 不出现砖
7 观察实验现象
色沉淀
色沉淀 红色沉淀
判断:可用碘液代替斐林试剂进行检验
10
6、探究酶的最适温度和pH
实验目的 探究酶的适宜温度
相互对照 一定温度梯度下的 同一温度处理后的 底物和酶混合
探究酶的最适pH
一定pH梯度下的 同一pH处理后的 底物和酶混合
4
加碘液
1滴
1滴
5
观察实验现象 不出现蓝色 蓝色
试管3
2 mL 冰块 (5分钟) 1 mL (5分钟) 1滴
蓝色
判断:
步骤2和步骤3可以颠倒
除了淀粉酶,还可以探究温度对H2O2酶的影响 可用斐林试剂代替碘液进行检验
8
4、酶的活性受温度的影响
步骤:(1)取3只洁净的试管,编号1、2、3, 分别注入2mL可溶性淀粉液;同时,
自变量
温度
PH
因变量
底物的分解速率或底物的剩余量 酶的活性
无关变量 底物和酶的量、溶 液pH、反应时间等
底物和酶的量、
溶液温度、反应
时间等
11
下图中能正确表示胰蛋白酶对底物的分解速度和温度关系 的是
12
(2010·南京二模)请你解读与酶有关的图示、曲线: (1)图1和图2是与酶的特性相关的图示,请回答下列问题:
(2) 实验结果及结论: 丙试管里气泡的释放的速度最快,乙试管较慢,甲试管无
明显的气泡放出。过氧化氢酶具有催化作用和高效性。
(3)如果仅将实验中的恒温水浴改为80℃,重复上述实验,O2 的释放速度最快的是:乙_试_管_(_滴_加_Fe_CL_3_溶_液_)原因是 _80_℃_条_件_下_,_F_eC_l3_的_催_化_作_用_加_快_,.而过氧化氢酶因高温失活
(1)若“+”代表加入适量的溶液,“-”代表不加溶液,甲代表 试管标号,请用这些符号完成下表实验设计。
溶液 试管
蔗糖溶液
淀粉溶液
蔗糖酶溶液
唾液淀粉酶溶液
甲
+
-
+
-
乙
-
﹢
﹢
-
丙
﹢
-
-
﹢
丁
-
﹢
-
﹢
(2)实验步骤:
①按照上表中的设计,取试管、加溶液。
② 混匀,37℃恒温水浴一段时间(5分钟)
;
③ 分别加入适量且等量的斐林试剂,混匀,60℃水浴一段时间;
5
3、验证酶的专一性
α-淀粉酶
60℃保温5分钟
50-65 ℃水浴加热2分钟
判断:
若用唾液淀粉酶,则保温温度为37℃
可用碘液代替斐林试剂进行检验
6
设计实验验证蔗糖酶和淀粉酶的催化作用具有专一性。 材料与用具:适宜浓度的蔗糖酶、唾液淀粉酶、蔗糖、淀粉4种 溶液、斐林试剂、试管、37℃恒温水浴锅、60℃恒温水浴锅。
④ 观察实验现象并记录实验结果
。
(3)结果预测 砖红色沉淀 无砖红色沉淀 无砖红色沉淀 砖红色沉淀。7
4、探究温度对酶活性的影响
组别 步骤
实验操 作内容
试管1 试管2
ห้องสมุดไป่ตู้
1
淀粉溶液
2 mL
2 mL
2
控制不同 温度条件
60℃热水 沸水 (5分钟) (5分钟)
3
淀粉酶溶液
1 mL
1 mL
(5分钟) (5分钟)