高效液相色谱-质谱法分析菊芋叶中的绿原酸类化合物
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（ ) ’ 中国科学院大连化学物理研究所，辽宁 大连 ))%"!& ；! ’ 西北烟草质量监督检查站，甘肃 兰州 (&""&" ） （ 5678)9$)!: ） 定 性 分 析 方 法。 液 相 色 谱 摘要： 建立了菊芋叶中绿原酸类化合物的高效 液 相 色 谱 ) 紫 外 检 测 ) 质 谱 条件： ;/<=>?,& @A:)& 色谱柱 （ !$" ++ , -. % ++ ， $ !+） ； 甲醇和水 （ 含 ) B 乙酸） 梯度洗 脱， 流 量 ). " +7 C +,/ ； 柱温 &$ D ； 检测波长 &!( /+ 。质谱条件： E3<=+% 公司 E:F 三级四 极 杆 质 谱 仪； 电喷雾电离 （ *:; ） 接 口； 负离子检出模 式。采用该方法得到了菊芋叶提取物的紫外检测的色谱图、 负离子监测的总离子 流 图 以 及 相 应 色 谱 峰 的 紫 外 光 谱 图和一级、 二级质谱图， 对其进行解析， 鉴别出菊 芋 叶 中 的 ( 个 绿 原 酸 类 成 分。 该 方 法 简 便、 快 速、 灵 敏 度 高， 可以 很好地对菊芋叶中的绿原酸类化合物进行定性分析。 绿原酸； 菊芋叶 关键词： 高效液相色谱 ) 质谱法； @%$#+ + 文献标识码： G + + 文章编号： )""" )#()& （ !""# ） "& )"&&$ )"-+ + 栏目类别： 研究论文 中图分类号：
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#" 结果与讨论
# $ !" 色谱分离条件的确定 ’ ’ 菊芋 叶 提 取 物 是 一 个 包 含 多 种 成 分 的 复 杂 样 品， 流动相梯度洗 脱 可 以 缩 短 分 析 时 间， 改 善 分 离。 因为绿原酸类化合 物 为 有 机 酸 类 成 分， 所以选用有 机溶剂 < 乙酸水体系进行梯度洗脱。比较了乙腈 < 乙 酸水与甲醇 < 乙酸 水 洗 脱 体 系， 发现甲醇 < 乙酸水梯 度洗脱效果较好， 能较好地分离菊芋叶中的绿原酸 类成分。图 ! 为在 “*D ! ” 节色谱条件下分离菊芋叶 提取物的色谱图。
。绿 原 酸 类 化 合 物 的 活 性 与 酚
羟基数量及酚羟基 的 连 接 位 置 有 关， 即该类化合物 的活性与咖啡酰基 有 关， 当咖啡酰基的一个羟基被 甲氧基取代， 形成阿魏酰奎尼酸时， 其抗氧化活性被 大大削弱， 绿原酸类 化 合 物 的 生 物 活 性 顺 序 为 二 咖 啡酰奎尼酸 % 咖啡酰奎尼酸 % 阿魏酰奎尼酸 原酸的提取 纯 化 药理作用
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’ ’ 近年来对于绿原酸的研究主要集中在植物中绿 、 含量测定
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、 结构鉴定
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等方面。 菊 科 向 日 葵 属 植 物 菊 芋 中 富
含绿原酸类化合物， 对于菊芋中该类化合物的鉴定 工作尚未见报道。 本 文 建 立 了 一 种 高 效、 快速定性 分析菊芋叶中绿原 酸 类 成 分 的 方 法， 对开发利用菊 芋叶中的该类成分有重要的现实意义。在本文确定 的分析条件下， 共鉴定出三类绿原酸类化合物， 分别 是咖啡酰奎尼酸、 阿魏酰奎尼酸和二咖啡酰奎尼酸； 与对照品比较确定最大的色谱峰所对应的化合物为 。目前从植物中发现 绿原酸 （ , !!!咖 啡 酰 奎 尼 酸 ） 属于这三类的绿原酸类化合物有 *+ 种， 结构式见 图 *， 图 * 中的 "* - "# 分别代表咖啡酰基及阿魏酰基 在奎尼酸上的不同取 代 位 置， 其 中 "* 为 * 位 取 代， "! 为 , 位 取 代， ", 为 # 位 取 代， "# 为 $ 位 取 代。 当 "* - "# 中的一个或两个被咖 啡酰 基 取 代或 者 被 阿魏酰基取代， 便形成了 *+ 种不同的绿原酸类化 合 物， 分别是： , ! ! ! 咖啡酰奎 尼 酸， # ! ! ! 咖 啡 酰 奎 尼 酸， $ ! ! ! 咖啡酰奎尼酸， , ! ! ! 阿 魏 酰 奎 尼 酸， # !!!阿 魏 酰 $ ! ! ! 阿 魏 酰 奎 尼 酸， *， , !二!!!咖 啡 酰 奎 尼 奎尼酸， ,， # ! 二 ! ! ! 咖啡 酰 奎 尼 酸， ,， $ !二!!!咖 啡 酰 奎 尼 酸， 酸， #， $ ! 二 ! ! ! 咖啡酰奎尼酸。
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色
谱
第 !" 卷
利胆、 抗菌、 增高白血球、 清除自由基的功能， 此外还 具有抗艾滋病毒、 抗 过 敏、 抗 肿 瘤、 预防心血管疾病 和糖尿病等功能
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色
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高效液相色谱 !质谱法分析菊芋叶中的绿原酸类化合物
袁晓艳 ) ， + 高明哲 ) ， + 王 + 锴! ， + 肖红斌 ) ， + 谭成玉 ) ， + 杜昱光 )
’ ’ 菊芋叶于 !++, 年 ** 月采摘于山东莱州菊 芋试 验基地， 由南京农 业 大 学 资 源 与 环 境 学 院 刘 兆 普 教 授鉴定为菊科向日葵属植物菊芋的干燥叶子。 ! $ #" 实验条件 ’ ’ 色 谱 条 件： 56&’%(23 7)/!, 色 谱 柱 （ #. " -- / !$+ -- ， $ !- ） ， 柱 温 ,$ 8 ； 流 动 相 * 相 为 *9 乙 梯 度 洗 脱 程 序： + - *+ 酸 水， 流 动 相 : 相 为 甲 醇； -26 ， !+ 9 : - ,$ 9 : ； *+ - !$ -26 ， ,$ 9 : - $+ 9 : ； !$ - ,$ -26 ， $+ 9 : - (+ 9 : ； 流 速 *. + -; < -26 ； 检 测波长 ,!& 6- ； 进样量 *+ ! ; 。 ’ ’ 质谱条 件： 电喷雾电离 （ =/5 ） 接 口； 负离子模式 监测； 加热毛细 管温度 ,!+ 8 ； 扫 描范围 " # $ !$+ * !++ ； 吹扫气压力 !&$. " >?（ ； 辅助气 !+ *@ ； $ #+ 4(2 ） 雾化电压 #. $ >A ； 二级质谱碰撞能量 *+ - #$ &A 。 ! $ $" 供试液的制备 ’ ’ 准确称取干燥粉碎的菊芋叶 #. +, B ， 以 !+ 倍体 积的 (+ 9 乙醇水溶液 （ 4C , ） 回流提取两次， 合并提 取液， 以 &+ 9 乙 醇 醇 沉 过 夜。 过 滤， 滤液减压浓缩 至浸膏状， 以 $+ 9 甲 醇 溶 解 并 定 容 于 *++ -; 容 量 瓶中， 用 +. !! ! - 有机滤膜过滤， 供分析。
图 ! " 三类绿原酸类化合物的总的结构式 !"#$ ! " %&’()&(’*+ ,- &.’** )/&*#,’"*+ ,- ).0,’,#*1") /)"2+
收稿日期： !""( )"# ))& 第一作者： 袁晓艳， 硕士研究生 ’ *)+",& ：-##."/ * 0,12’ "1’ 1/’ 通讯联系人： 肖红斌， 博士生导师 ’ *)+",& ：34-,"% * 0,12’ "1’ 1/’ 基金项目： 中国科学院知识创新工程领域前沿项目资助 ’
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