实验透射电子显微镜及电子显微镜的使用

电镜三维重构技术 电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的 具有重要应用前景的一门新技术。
电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振
分析技术相结合，是当前结构生物学（Structural Biology）
（主要研究生物大分子空间结构及其相互关系）的主要实验手段。
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超薄切片技术主要包括取材、固定、
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疟疾破坏的两个红细胞
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二、作业
试描述扫描电子显微镜成像的基本原理
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利用样品对电子的散射 和透射形成明暗反差
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主要电镜制样技术
超薄切片技术 用于电镜观察的样本制备 负染色技术（Negative staining）
染色背景，衬托出样品的精细结构
冰冻蚀刻技术（Freeze etching） 冰冻断裂与蚀刻复型：主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒 和膜表面结构。
实验 八-1
细胞超微结构观察与透射电子 显微镜的使用
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实验目的与要求
掌握透射电子显微镜的成像基本原理及其 应用
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一、透射电子显微镜的成像基本原理
在真空条件下，电子束经高压加速后，穿 透样品时形成散射电子和透射电子，它们 在电磁透镜的作用下在荧光屏上成像。
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包埋、切片、染色可编等辑p步pt 骤。
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二、作业: 试比较电子显微镜与普通光学显 微镜的异同。
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实验八 -2
细胞超微结构观察与扫描电子显微镜的使用
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一、实验原理
利用二次电子信号成像来观察样品的表面形 态。电子“探针”扫描，激发样品表面放出 二次电子，探测器收集二次电子成像。
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电镜与光镜的比较
显微镜 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ辨本领 光源
透镜
真空
成像原理
LM TEM
200nm 100nm
0.1nm
可见光 玻璃透镜 （400-700）
紫外光 玻璃透镜 （约 200nm)
电子束
电磁透镜
（0.01-0.9）
不要求真空
不要求真空
要求真空 1.33x10-5～ 1.33x10-3Pa
利用样品对光的吸收形 成明暗反差和颜色变化