对照品溶液的制备

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（二）滴定分析法
➢ 酸碱滴定法：测定生物碱、有机酸、内酯类 ➢ 沉淀滴定法
银量法：生物碱的氢卤酸盐及有机卤化物 四苯硼钠法：+生物碱→白色沉淀 亚铁氰化钾法
➢ 配位滴定法（EDTA法和硫氰酸铵法）：测定鞣质、
生物碱及含Ca2+、Mg2+、7 Fe3+、Hg2+等矿物类制剂的 含量
➢ 氧化还原滴定法：酚类、糖类及矿物药中Fe、As等
中药分析学
第六章 中药的含量测定
第一节 常用含量测定方法
目录
一、化学分析法 二、光谱分析法 三、色谱分析法 四、联用技术
一、化学分析法
➢ 包括重量分析和滴定分析 ➢ 适用：主要用于测定制剂中含量较高的一些成分
及含矿物药制剂中的无机成分 如：总生物碱类、总酸类、总皂苷及矿物药 ➢ 优点：仪器简单，结果准确 ➢ 缺点：灵敏度低，操作繁琐、耗时长，专属性不 高，不适宜微量成分测定
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（一）重量分析法
1.挥发法：测定具有挥发性或能定量转化为挥发性 物质的组分含量。
如：干燥失重 、水分 ；灰分及炽灼残渣的测定
2.萃取法：被测组分在互不相溶的两相中溶解度的 不同而分离
如：总皂苷、总有机酸、总生物碱
3.沉淀法：沉淀反应
x%
mF
5
100%
ms
5
例：芒硝中硫酸钠的含量测定（重量法）
取芒硝约0.4g，精密称定，加水200ml溶解后，加盐酸1 ml， 煮沸，不断搅拌，并缓缓加入热氯化钡试液（约20ml），至 不再生成沉淀，置水浴上加热30分钟，静置1小时，用无灰 滤纸或称定重量的古氏坩埚滤过，沉淀用水分次洗涤，至洗 液不再显氯化物的反应，干燥，并炽灼至恒重，精密称定， 与0.6086相乘，即得供试品中含有硫酸钠的重量。
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计算原理
（1）直接滴定
（2）返滴定
x% TVT F 100% ms
x% T F V0 V 100%
W
8
8
例：半夏中总有机酸含量测定（酸碱滴定法）
取本品粉末（过四号筛）约5g，精密称定，置锥形瓶中，加 乙醇50ml，加热回流1小时，同上操作，再重复提取2次， 放冷，滤过，合并滤液，蒸干，残渣精密加入氢氧化钠滴定 液 （ 0.1mol/L ） 10ml ， 超 声 处 理 （ 功 率 500W ， 频 率 40kHz）30分钟，转移至50ml量瓶中，加新沸过的冷水至 刻度，摇匀，精密量取25ml，照电位滴定法（通则0701） 测定，用盐酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用 空白实验校正。每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于 5.904mg的琥珀酸（C4H6O4）9 。
溶液的荧光强度（Rr），扣除空白溶液的荧光强度 （Rrb）后，以（Rr- Rrb）对浓度绘制标准曲线。在相
同的条件下测定供试品溶液及其空白溶液的荧光强度， 根据工作曲线计算供试品的浓度。 ▪ 选择一种激发光和发射光波长与供试品近似但对光稳 定的物质作为基准溶液校13正仪器的灵敏度。如蓝色荧 光可用硫酸奎宁的稀硫酸溶液，黄绿色荧光可用荧光 素钠水溶液，红色荧光可用罗丹明B水溶液等。
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（2）比例法
cx
Rx Rr
Rxb Rrb
cr
Cx为供试品溶液浓度，Cr为对照品溶液浓度
❖ 注意：荧光强度与浓度的线性范围较窄，
（Rx– Rxb）/（Rr- Rrb）应控制在0.5~2之间，
如若超过，应调整溶液1浓4 度后再测。
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（三）原子吸收光谱法
1.基本原理
▪ 当待测元素灯发出的特征谱线通过供试品经原子化产 生的原子蒸气时，谱线被基态原子吸收，辐射光强度 减弱，通过测定辐射光强度减弱的程度，求出供试品 中待测元素的含量。
A KC
2.特点 15 ▪ 优点：灵敏度高、选择性好、操作简便、测定范围广 ▪ 缺点：线性范围窄、测定不同元素需要不同光源
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3.定量方法
（1）标准曲线法
配制含待测元素的对照品溶液至少5份，浓 A
度依次递增，并分别加入各品种项下制备供
试品溶液的相应试剂，同时以相应试剂制备
空白对照溶液。将仪器按规定启动后，依次
❖ 供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，混匀，取适量，研细， 取1g，精密称定，置100ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀， 滤过，精密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即 得。
❖ 测定法：取对照品溶液与供试品溶液，照原子吸收分光光度法（通则 0406第一法），在248.3nm的波长处测定，计算，即得。
▪ 蛋白质和酶、部分甾体、黄酮、香豆素、蒽醌和生物 碱类物质等，可用荧光法直接测定或经过衍生后用荧 光法测定
2.特点
▪ 具有灵敏度高、操作简便的优点
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▪ 中药成分复杂，干扰大，常与薄层色谱、高效液相色 谱联用进行含量测定
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3.定量方法
❖ （1）标准曲线法
▪ 同紫外可见分光光度法。在测定前，用一定浓度的对 照品溶液校正仪器的灵敏度。然后测定一系列对照品
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二、光谱分析法
（一）紫外-可见分光光度法 1.定量原理
A ECl
2.特点 灵敏，但不具分离功能，10常用于总成分的测定，如 总生物碱、总黄酮、总皂苷、总多糖等测定
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3.定量方法
（1）吸收系数法
不需对照品；对测量条件、测量仪器要求较高C
A E11c%ml
（2）标准曲线法
– 5~7个标准溶液；
– 回归方程的相关系数不得小于0.999
– 供试品溶液的吸光度值应在标准曲线范围内
（3）对照品比较法
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C样
– 对照品溶液和供试品溶液的制备应平行操作
C对照品 A样 A对照品
百度文库
– 对照品溶液的浓度应在供试品溶液中待测组分浓度的
100%±10%之间。
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（二）荧光分析法
1.适用样品
▪ 本身具有荧光或者能转化为荧光衍生物的物质，常具 有刚性平面结构的共轭体系；
测定空白对照溶液和各浓度对照品溶液的吸 0
浓度
光度，以每一浓度3次吸光度读数的平均值
为纵坐标，以相应浓度为横坐标，绘制标准
曲线。然后测定供试品溶液的吸16光度，取3 次读数的平均值，从标准曲线上查得相应的
浓度，计算元素的含量。
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例：健脾生血颗粒中硫酸亚铁含量测定
❖ 对照品溶液的制备：取铁单元素标准溶液适量，用水稀释成每1ml含 铁100μg的溶液，作为标准溶液。精密量取标准溶液1.0ml、1.5ml、 2.0ml、2.5ml和3.0ml，分别置25ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀， 即得。