免疫学及免疫学检验标记技术.ppt
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《标记免疫技术》课件
抗原或抗体的含量。
荧光物质具有高灵敏度、高特异性和可 定量检测等优点，使得荧光免疫技术成 为一种高灵敏度、高特异性的检测方法
。
荧光物质可以通过不同的激发光波长和 发射光波长进行选择，从而实现多组分
的同时检测。
荧光免疫技术的应用
荧光免疫技术在医学领域中广泛应用于感染性疾病、肿瘤标志物、激素、细胞因子 等的检测。
该技术的基本原理是利用酶标记的抗 体或抗原，与相应的抗原或抗体结合 ，形成酶-抗原-抗体的复合物。
酶联免疫技术的应用
酶联免疫技术广泛应用于医学、生物 学、化学等领域，如诊断试剂、药物 筛选、食品安全检测等。
在生物学领域，酶联免疫技术用于研 究生物分子相互作用、蛋白质表达和 细胞信号转导等方面。
在医学领域，酶联免疫技术被用于检 测各种传染病、肿瘤标志物、自身抗 体等，为疾病的早期诊断和治疗提供 了有力支持。
化学发光免疫技术的优缺点
优点
化学发光免疫技术具有高灵敏度 、高特异性和低检测限等优点， 能够实现快速、准确地定量分析 目标物质。
缺点
该技术的缺点是标记物的制备较 为复杂，且某些化学发光物质具 有一定的毒性，需要谨慎处理。
THANKS
感谢观看
REPORTING
环境监测
用于检测环境中的有害物 质、污染物等，评估环境 质量。
标记免疫技术的发展历程
19世纪末
免疫学基础理论建立，为标记免疫技术发 展奠定了基础。
21世纪初
随着生物技术的不断发展，新型标记免疫 技术不断涌现，如量子点标记免疫技术、 纳米材料标记免疫技术等。
20世纪初
放射免疫技术诞生，实现了对生物样本中 微量物质的定量分析。
20世纪90年代
荧光免疫技术和化学发光免疫技术得到广 泛应用，进一步提高了检测的灵敏度和自 动化程度。
荧光物质具有高灵敏度、高特异性和可 定量检测等优点，使得荧光免疫技术成 为一种高灵敏度、高特异性的检测方法
。
荧光物质可以通过不同的激发光波长和 发射光波长进行选择，从而实现多组分
的同时检测。
荧光免疫技术的应用
荧光免疫技术在医学领域中广泛应用于感染性疾病、肿瘤标志物、激素、细胞因子 等的检测。
该技术的基本原理是利用酶标记的抗 体或抗原，与相应的抗原或抗体结合 ，形成酶-抗原-抗体的复合物。
酶联免疫技术的应用
酶联免疫技术广泛应用于医学、生物 学、化学等领域，如诊断试剂、药物 筛选、食品安全检测等。
在生物学领域，酶联免疫技术用于研 究生物分子相互作用、蛋白质表达和 细胞信号转导等方面。
在医学领域，酶联免疫技术被用于检 测各种传染病、肿瘤标志物、自身抗 体等，为疾病的早期诊断和治疗提供 了有力支持。
化学发光免疫技术的优缺点
优点
化学发光免疫技术具有高灵敏度 、高特异性和低检测限等优点， 能够实现快速、准确地定量分析 目标物质。
缺点
该技术的缺点是标记物的制备较 为复杂，且某些化学发光物质具 有一定的毒性，需要谨慎处理。
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REPORTING
环境监测
用于检测环境中的有害物 质、污染物等，评估环境 质量。
标记免疫技术的发展历程
19世纪末
免疫学基础理论建立，为标记免疫技术发 展奠定了基础。
21世纪初
随着生物技术的不断发展，新型标记免疫 技术不断涌现，如量子点标记免疫技术、 纳米材料标记免疫技术等。
20世纪初
放射免疫技术诞生，实现了对生物样本中 微量物质的定量分析。
20世纪90年代
荧光免疫技术和化学发光免疫技术得到广 泛应用，进一步提高了检测的灵敏度和自 动化程度。
临床免疫学检验技术PPT(共64页)
临床免疫学检验技术
• 江西省胸科医院：熊国亮
一、概述
• 免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学 检验领域应用的一门学科。免疫检验技术 则重点阐述各类免疫学技术的基本原理、 方法类型和临床应用。19世纪末相继建立 了凝集试验、沉淀试验和补体结合试验等 三大经典血清学试验，用于检测病原微生 物的抗原或抗体对传染病的诊断起到重要 作用。
三、酶联免疫吸附试验（enzy发展，放射 免疫技术、荧光免疫技术、酶免疫技术、 化学发光免疫技术、流式细胞免疫分析技 术等免疫标记技术应用于临床免疫学检验， 加快了免疫学检验的自动化、标准化进程， 极大地提高了免疫学检验的灵敏度，拓展 了免疫学检测范围，从检测免疫相关物质 （抗原、抗体、补体、免疫活性细胞和细 胞因子等）到检测体液中的微量物质（激 素、酶、血浆微量蛋白、血药浓度、微量 元素等）。
三、酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）
• 此法常用多孔聚苯乙烯反应板作为固相载 体，读取结果需用酶标仪。标记抗原或抗 体所用的酶常选择辣根过氧化物酶（HRP）、 碱性磷酸酶（AP）等，HRP常用的底物有 邻苯二胺（OPD）或四甲基联苯胺 （TMB），碱性磷酸酶一般采用对硝基苯 磷酸酯（P-NPP）作为底物，产物为黄色的 对硝基酚，在405nm波长处有最高吸收峰。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 3.免疫球蛋白、循环免疫复合物和补体的测 定 包括测定五类免疫球蛋白的含量、血清 总补体活性及补体成分的含量和在多种疾 病时血清中升高的循环免疫复合物。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 4. 细胞免疫相关指标测定 检测淋巴细胞亚 群和淋巴细胞的功能以及白细胞介素—2等 多种细胞因子，用于判断机体细胞免疫功 能状况。
• 江西省胸科医院：熊国亮
一、概述
• 免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学 检验领域应用的一门学科。免疫检验技术 则重点阐述各类免疫学技术的基本原理、 方法类型和临床应用。19世纪末相继建立 了凝集试验、沉淀试验和补体结合试验等 三大经典血清学试验，用于检测病原微生 物的抗原或抗体对传染病的诊断起到重要 作用。
三、酶联免疫吸附试验（enzy发展，放射 免疫技术、荧光免疫技术、酶免疫技术、 化学发光免疫技术、流式细胞免疫分析技 术等免疫标记技术应用于临床免疫学检验， 加快了免疫学检验的自动化、标准化进程， 极大地提高了免疫学检验的灵敏度，拓展 了免疫学检测范围，从检测免疫相关物质 （抗原、抗体、补体、免疫活性细胞和细 胞因子等）到检测体液中的微量物质（激 素、酶、血浆微量蛋白、血药浓度、微量 元素等）。
三、酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）
• 此法常用多孔聚苯乙烯反应板作为固相载 体，读取结果需用酶标仪。标记抗原或抗 体所用的酶常选择辣根过氧化物酶（HRP）、 碱性磷酸酶（AP）等，HRP常用的底物有 邻苯二胺（OPD）或四甲基联苯胺 （TMB），碱性磷酸酶一般采用对硝基苯 磷酸酯（P-NPP）作为底物，产物为黄色的 对硝基酚，在405nm波长处有最高吸收峰。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 3.免疫球蛋白、循环免疫复合物和补体的测 定 包括测定五类免疫球蛋白的含量、血清 总补体活性及补体成分的含量和在多种疾 病时血清中升高的循环免疫复合物。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 4. 细胞免疫相关指标测定 检测淋巴细胞亚 群和淋巴细胞的功能以及白细胞介素—2等 多种细胞因子，用于判断机体细胞免疫功 能状况。
实验诊断学--临床常用免疫学检查 ppt课件
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IgM 约占血清总Ig的 5%~10%
分子量最大（900000），由五个IgM 单体连接而成，故又称巨球蛋白。
脾脏是它的主要合成部位，IgM主要分 布于血液中，防止发生菌血症方面起重 要作用，半衰期5天左右。
天然同族凝集素抗 A抗B、冷凝集素及 伤寒沙门菌的抗体
均属此类。
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百分比
参考值
正常人群各年龄 段个体中血清 IgG、IgA、IgM 的含量有很大差
异
70%-80% 7.0-16.6g/L
10%-15% 0.7-3. 5g/L
5%-10% 0.5-2.6g/L
0.02%-1% 0.6-2.0mg/L
0.002% 0.1-0.9mg/L
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13
测定方法
❖ 血清中含量较高的 IgG、IgA、IgM多 采用单向免疫扩散法、火箭免疫电泳法和免 疫比浊法，而标本中含量极微的IgD和IgE则 采用敏感度较高的放射免疫法和酶免疫法等 进行定量测定。
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14
IgG 占总Ig的70%~80%
是血清中的主要抗体，主要由脾脏和 淋巴结合成，在机体的免疫防御中起重要作 用，抗细菌、病毒和寄生虫等，还具抗毒素 作用，为不完全抗体，分子量小 （150000），唯一能自由地通过胎盘。
半衰期约为23天， 故临床上使用丙球 作治疗时以2～3周
注射一次
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22
高Ig血症
❖ 慢性细菌感染:肺结核,麻风,慢性支气管炎, 感染早期IgM显著升高，以后IgG升高，IgA 也可升高。
15
IgA 约占血清总Ig 10%~15%
分为血清型与分泌型两种，具有抗细 菌、抗病毒、抗毒素作用，其中的分泌 型（SIgA）在局部与抗呼吸道、消化道 和泌尿生殖道感染、炎症或肿瘤等病变 密切相关,是抗过敏的重要免疫屏障。
免疫学临床应用ppt课件
（1）鉴定病原菌：诊断疾病 （2）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌 （3）检测血型抗原、HLA抗原：鉴定血型，亲子鉴定 （4）检测药物半抗原： 确认运动员是否服用兴奋剂
（二） 抗原或抗体的检测方法
凝集反应 沉淀反应 补体参与的抗原抗体反应 免疫标记技术
颗粒性抗原（红细胞、细菌、 乳胶颗粒等 ）与抗体特异性结合，形成肉眼可见的凝集块。
副作用：明显 ，主要是骨髓抑制、肝肾毒性等
其抑制作用是非特异性的，长期应用可导致：继 发性免疫缺陷 、 严重感染、 肿瘤
抗体为基础的免疫治疗
一、免疫血清
抗毒素血清、胎盘（丙种）球蛋白、抗菌免疫血清、抗病毒免疫血清、抗 淋巴细胞丙种球蛋白等
二、单克隆抗体（mAb）：用于靶向治疗等。 三、基因工程抗体：降低抗体的免疫原性
化学制剂 1、烷化剂：环磷酰胺 2、抗代谢药：激素：糖皮质激素 真菌代谢产物 1、 环孢素A：对T，尤其是TH有较好的选择性抑制作用 2、FK-506：其作用强于环孢素A10-100倍，且与环孢素A
有明显的协同作用。 中药及其有效成分 雷公藤多甙
适应症：免疫功能过高引起机体损害的患者
1、抗移植排斥 2、超敏反应性疾病：激素 3、自身免疫病：激素、雷公藤多甙 4、感染性炎症：激素
3、细胞因子检测
可用于鉴定分离的淋巴细胞亚群，监测某些疾病状态的细胞免疫功 能。IL-2、IL-2R、rIFN 、TNF等检测。 ①免疫学方法：ELISA、RIA等。 ②细胞生物学方法
③分子生物学方法，如聚合酶链反应（PCR）法等
4、体内免疫细胞功能测定：皮肤试验
（1）迟发型超敏反应：旧结核菌素试验（ OT试验 ） 皮试（+）——有一定的细胞免疫能力 皮试（—）——细胞免疫功能缺损
（二） 抗原或抗体的检测方法
凝集反应 沉淀反应 补体参与的抗原抗体反应 免疫标记技术
颗粒性抗原（红细胞、细菌、 乳胶颗粒等 ）与抗体特异性结合，形成肉眼可见的凝集块。
副作用：明显 ，主要是骨髓抑制、肝肾毒性等
其抑制作用是非特异性的，长期应用可导致：继 发性免疫缺陷 、 严重感染、 肿瘤
抗体为基础的免疫治疗
一、免疫血清
抗毒素血清、胎盘（丙种）球蛋白、抗菌免疫血清、抗病毒免疫血清、抗 淋巴细胞丙种球蛋白等
二、单克隆抗体（mAb）：用于靶向治疗等。 三、基因工程抗体：降低抗体的免疫原性
化学制剂 1、烷化剂：环磷酰胺 2、抗代谢药：激素：糖皮质激素 真菌代谢产物 1、 环孢素A：对T，尤其是TH有较好的选择性抑制作用 2、FK-506：其作用强于环孢素A10-100倍，且与环孢素A
有明显的协同作用。 中药及其有效成分 雷公藤多甙
适应症：免疫功能过高引起机体损害的患者
1、抗移植排斥 2、超敏反应性疾病：激素 3、自身免疫病：激素、雷公藤多甙 4、感染性炎症：激素
3、细胞因子检测
可用于鉴定分离的淋巴细胞亚群，监测某些疾病状态的细胞免疫功 能。IL-2、IL-2R、rIFN 、TNF等检测。 ①免疫学方法：ELISA、RIA等。 ②细胞生物学方法
③分子生物学方法，如聚合酶链反应（PCR）法等
4、体内免疫细胞功能测定：皮肤试验
（1）迟发型超敏反应：旧结核菌素试验（ OT试验 ） 皮试（+）——有一定的细胞免疫能力 皮试（—）——细胞免疫功能缺损
免疫学应用-PPT课件精选全文
将PHA注射于受试者前臂屈侧皮内， 6-12小时后局部出现红斑硬结，24-48 小时达高峰，即为阳性反应，常用于检 测细胞免疫水平。
祝愿 同学 们前 程似 锦！
免疫标记技术：——免疫荧光技术
免疫荧光直接法
免疫荧光间接法
免疫标记技术：——免疫酶技术
1、包被抗体 洗
1、包被抗原 洗
2、加抗原 洗
2、加抗体 洗
3、加酶标抗体 洗
3、加酶标抗球 蛋白
洗
4、加底物显色 ELISA双抗体夹心法
4、加底物显色 ELISA间接法
免疫标记技术：—放射免疫测定法（RIA）
细胞免疫检测——T细胞亚群测定
用间接荧光法 检测CD4和CD8 T细胞
CD4/CD8正常 比值为1.7-2.0左 右。
细胞免疫检测——淋巴细胞转化试验
---细胞介导的细胞毒试验
B细胞的检测
B细胞数量的检测 (1)膜表面免疫球蛋白(SmIg)的检测：SmIg是 B细胞特有的表面标志，因此是鉴定B细胞的可 靠指标。用抗SmIg抗体，借助直接免疫荧光法 或免疫组织化学法进行检测。
(2)间接免疫荧光法：应用针对B细胞表面抗 原(CDl9、CD20、CD21、CD22等)的特异性 单克隆抗体，以间接免疫荧光法对B细胞进 行鉴定和计数。
B细胞功能测定
B细胞增生试验 原理与T细胞增生试验相同； 但刺激物主要为美洲商陆(PWM)、富
含SPA的金葡菌、细菌脂多糖等。
体内免疫学检测
放射免疫测定法（RIA）是将放射性核 素分析的灵敏性和抗原抗体反应的特异性结 合的测定技术。具有灵敏、精确、特异性高、 易规范化及自动化等优点的一种先进的免疫 标记技术。
免疫标记技术：—金免疫技术（金标法）
祝愿 同学 们前 程似 锦！
免疫标记技术：——免疫荧光技术
免疫荧光直接法
免疫荧光间接法
免疫标记技术：——免疫酶技术
1、包被抗体 洗
1、包被抗原 洗
2、加抗原 洗
2、加抗体 洗
3、加酶标抗体 洗
3、加酶标抗球 蛋白
洗
4、加底物显色 ELISA双抗体夹心法
4、加底物显色 ELISA间接法
免疫标记技术：—放射免疫测定法（RIA）
细胞免疫检测——T细胞亚群测定
用间接荧光法 检测CD4和CD8 T细胞
CD4/CD8正常 比值为1.7-2.0左 右。
细胞免疫检测——淋巴细胞转化试验
---细胞介导的细胞毒试验
B细胞的检测
B细胞数量的检测 (1)膜表面免疫球蛋白(SmIg)的检测：SmIg是 B细胞特有的表面标志，因此是鉴定B细胞的可 靠指标。用抗SmIg抗体，借助直接免疫荧光法 或免疫组织化学法进行检测。
(2)间接免疫荧光法：应用针对B细胞表面抗 原(CDl9、CD20、CD21、CD22等)的特异性 单克隆抗体，以间接免疫荧光法对B细胞进 行鉴定和计数。
B细胞功能测定
B细胞增生试验 原理与T细胞增生试验相同； 但刺激物主要为美洲商陆(PWM)、富
含SPA的金葡菌、细菌脂多糖等。
体内免疫学检测
放射免疫测定法（RIA）是将放射性核 素分析的灵敏性和抗原抗体反应的特异性结 合的测定技术。具有灵敏、精确、特异性高、 易规范化及自动化等优点的一种先进的免疫 标记技术。
免疫标记技术：—金免疫技术（金标法）
免疫学ppt课件
免疫学的发展历程
01
02
03
经验免疫学时期
通过观察疾病现象和疫苗 接种等实践，积累了一些 免疫学经验。
实验免疫学时期
通过动物实验和细菌学研 究，揭示了免疫应答的基 本规律。
分子免疫学时期
利用分子生物学和基因工 程技术，深入研究了免疫 系统的分子机制和基因调 控。
免疫学在医学领域的重要性
01
02
03
答的治疗方法。
THANKS
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生物医学研究
在基础医学研究中，免疫学检 测技术可用于研究免疫系统的 结构和功能，揭示疾病的发生
和发展机制。
06
免疫学相关疾病与治疗
超敏反应性疾病
I型超敏反应
速发型，如过敏性休克、药物引起的药疹等 。
III型超敏反应
免疫复合物型，如局部免疫复合物病、全身 性免疫复合物病等。
II型超敏反应
细胞型，如输血反应、新生儿溶血病等。
免疫学ppt课件
目录
• 免疫学概述 • 免疫系统组成与功能 • 抗原与抗体 • 免疫应答与调节 • 免疫学检测技术与应用 • 免疫学相关疾病与治疗
01
免疫学概述
免疫学的定义与研究对象
免疫学的定义
免疫学是研究生物体免疫系统结 构、功能和免疫应答机制的科学 。
研究对象
包括免疫器官、免疫细胞、免疫 分子以及它们之间的相互作用和 调节机制。
利用放射性同位素标记的抗原或抗体与待测样品中的相应抗体或抗原 结合，通过测量放射性强度来推算待测物质的含量。
免疫荧光技术
利用荧光素标记的抗原或抗体与待测样品中的相应抗体或抗原结合， 在荧光显微镜下观察荧光信号，从而进行定性或定位检测。
免疫印迹技术
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酸等小分 胺残基等 剂对被标 被标记物
子化合物 基团,需 记物活性 活性
添加
的损伤等
标记物纯化
对游离的125I等试剂与标记物 进行分离
方法：分子筛凝胶过滤；离子 交换层析；聚丙烯酰胺凝胶电泳 （PAGE）；高效液相色谱（HPLC）
标记物鉴定
放射化学纯度
单位标记物中结合在被标记物上的放
射性占总放射性的百分率。一般要求大于95％。
其他
RIA 可 以 测 定 大 分 子 量 与 小 分 子 量 的 物 质 ， 双 位 点 IRMA只能测定在分子上具有2个以上抗原表位的物质。在 RIA中应用的为多克隆抗体，亲和力和特异性要求较高， 但用量很少。IRMA中标记抗体和固相抗体用量较多，一般 均用来源丰富、特异性较高的单克隆抗体。
特异性
在双位点IRMA中，一般均应用针对不同位点
的单克隆抗体，其交叉反应率低于应用多克隆抗体的RIA。
检测范围 通常RIA的工作范围为2-3个数量级，而RIMA可 达3个数量级以上。
分析误差 RIA中加入的抗体和标记抗原都是定量的，加 样误差可严重影响测定结果。IRMA中标记和固相抗体在反 应中都是过量的，只有受检标本的加样误差才会影响分析 结果。因此，IRMA的批内和批间变异均比较小。
及组胺残基上的氢原子 方法： 直接标记法
氯胺T法和乳过氧化物酶法
间接标记法 联接标记法
适用分 操作简便、不适于活
白质、酶 酸、组胺 易标记、 性功能区
残基等基 比放射性 的残基标
团
高
记
间接标记 甾类化合 不存在酪 可避免氧 添加基团
物、核苷 氨酸、组 化／还原 可能影响
3.放射性测定及数据处理
晶体闪烁计数仪(γ射线)或液体闪烁计数仪( β 射线)
绘制标准曲线，计算待检抗原浓度。
免疫放射分析（IRMA）
基本原理
单位点IRMA： 利用过量标记抗体与 待测抗原进行反应，形成抗原抗体复合 物，反应平衡后，用固相抗原结合反应 液中剩余的未结合标记抗体并将其分离， 测定上清液的放射量。
放射免疫技术的应用
常用于各种激素、微量蛋白、肿 瘤标志物和药物等微量物质的测定。
问题：放射性污染、常用核素 半衰期短、试剂盒稳定期不长不易自 动化仪器分析等。
第九章 免疫荧光技术
免 疫 荧 光 技 术 (immunofluorescence technique)是标记免疫技术中发展最早 的一种。 是将抗原抗体反应的特异性 与荧光物质检测的敏感性和直观性结合 起来的一种方法。
亲合力
选用亲和常数K值大(109~1012 L//mol)抗血清
特异性
其程度可直接影响结果的准确性
滴度
最大稀释度。在本技术方法中是指结合50％标记抗
原时的抗血清的稀释度。
放射免疫分析（ RIA ）
基本原理
采用定量的标记抗原（Ag＋） 和非标记抗原（Ag）竞争性结合有限 量特异性抗体（Ab）的反应。
免疫活性
％， B/T％ ↑
标记过程中，被标记物活性损伤程度。B/T％>80 抗原损伤↓。
比放射性
单位化学量标记物中所含的放射性强度. 常用
Ci/g、mCi/mg、Ci/mmol等单位表示。
比放射性↑
方法更灵敏；过高
辐
射自损伤大，对标记物免疫活性影响大，储存稳定性差 。
抗血清鉴定
多克隆抗体的抗血清是放射免 疫分析的主要试剂之一，其质量直接影 响方法的特异性和灵敏度。
重复性好等
标记物:
常用的核素有两大类 γ射线： 131I、125I、57Cr和60Co β射线：14C、3H和32P。 使用最广泛的是：125I
①性质活泼、易制备标记物 ②对被标记物的免疫活性影响小 ③测量方法简便、已推广 ④半衰期较长、核素丰度高
标记方法
125I的标记 原理：取代分子中酪氨酸或酪胺残基
以未结合的Ag*为F，Ag*Ab复合物为B，则B/F 与Ag的量变存在着函数关系。
B60/F (％) 50
40 30
20
10
0.8 1.6 2.4 3.2 4.0 4.8 5.6
Ag(ng/ml)
测定方法与步骤
1.抗原抗体反应：平衡法或非平衡法
2.分离结合与游离标记物
沉淀剂沉淀复合物，离心分离。如第二抗体沉淀 法、聚乙二醇沉淀法或活性炭吸附法等。要求：分 离彻底，迅速；分离试剂和过程不影响反应平衡； 操作简便，重复性好且经济。
免疫学及免疫学检验标记 技术
医学检验系临床微生物学及免疫学教研室 二OO四年三月
标记免疫技术= 免疫技术+标记技术
抗原抗体反应
示踪物标记
特异性
标记免疫技术的主要特点：
高特异性、高灵敏性
灵敏性
标记免疫 技术
免疫组 化技术
免疫测 定技术
示踪物及 标记技术
放射免疫技术 荧光免疫技术 酶免疫技术 化学发光技术 金免疫技术
基本原理
利用荧光素标记抗体，使之在涂片上或组织切片 上与标本中的待检抗原特异结合，采用高发光效率的点光 源，透过滤色板发出一定波长的光，使结合在标本上的荧 光素被激发而产生荧光，借助荧光显微镜观察底物片上荧 光染色形态，来判断有无待检抗原或抗体。
双位点IRMA 先用固相抗体与抗原 反应结合,然后再用过量的标记抗体 与已结合于固相抗原的另一抗原决 定簇结合,形成固相抗体-抗原-标记 抗体复合物,洗弃反应液中剩余的标 记抗体,测定固相上的放射性。
IRMA与RIA的异同点
标记物 在RIA中 核素标记抗原，抗原有不同种类，根据 其化学结构，标记时需用不同的核素和不同的方法。在 IRMA中 核素标记抗体。抗体为蛋白质，有利于碘化标记， 不同抗体标记方法基本相同。标记抗体的比活度高，提高 了分析的灵敏度。
反应速率 反应速度与反应物的浓度呈正比，在IRMA中标 记抗体是过量的，而且不存在竞争性结合复杂的反应，所 以反应速度较RIA快。在RIA中抗体量是微量的，所以一定 要用高亲和力的多克隆抗体，而在IRMA中应用亲和力较低 的单克隆体也能得到满意的结果。
反应原理 RIA为竞争抑制，测得放射性的量与受检抗 原呈反比。IRMA为非竞争结合，剂量反应曲线为正相关的 直线关系。
⋯⋯⋯
第八章 放射免疫技术
类型：
放射免疫分析（radioimmunoassay,RIA） 免疫放射分析（immunoradiometric
assay,IRMA）
广义放射免疫技术还包括放射受体分析（使用受体测量抗原）和放射配体结合 分析（使用配体研究受体）。
特点:灵敏度高(10-9-10-15g/L)、特异性强、