第三章药物杂质检查教学案例

测定条件
（1）配制标准铁贮备液 FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸铁铵）
（2）反应需在盐酸酸性条件下进行。
为什么？
（3）铁盐检查时，加过硫酸铵 可氧化Fe2+为Fe3+。
（4）比色方法：同置于白色背 景上，自上向下观察。
4. 干扰及排除 （1）为了提高灵敏度或供试管与对
照管色调不一致时，可用正丁醇提取后，
杂质限量
允许杂质存在的最大量 供试品量
杂质限 标 量准溶供液 试 标 体品 准 积量 溶液
LVC100% S
97：71．检查某药物中的砷盐，取标 准砷溶液2ml（每1ml相当于1g的As） 制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001％， 应取供试品的量为
A. 0.20g B. 2.0g C．0.020g
（1）本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓
冲液控制溶液pH值为3～3.5。为什么？
2. 干扰及排除
（1）供试品如有色，需经处理后方 可检查。
外消色法：在对照管中加稀焦糖 溶液或其他无干扰的有色溶液。
（2）Fe3+干扰的排除
（3）若药物本身能生成不溶性硫化物 时，可加入掩蔽剂消除干扰。如 ZnSO4中重金属的检查，要在碱性下 加KCN掩蔽Zn2+后，再检查
C3 C HS 2 H N 2 O H p H 3 C .5 3 C HO 2 H N 2 S 药物 P2b ： H2S p H 3.P 5 b黄 S 色～棕
对P 照 b3： c N 、 V O H 2 S p H 3P .5黄 bS色～
适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。
2. 测定条件
第一法 目视比色法 即与标准比色 液比较的方法，全波长范围定性观 察
观察方法 从 平上 视向下颜 颜色 色较rO7、CoC2、 l CuS4O溶液不 同 比 例 5种色调标准贮 不 备同 液 量 水 稀释
5种色5调0个色号标准比色液
九、易炭化物检查法
无机杂质、有机杂质
（二）药物中的杂质按性质分为：
信号杂质、有毒杂质
（三）药物中的杂质按来源分为
1. 一般杂质（general impurities） 如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、 砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、 炽灼残渣等。一般杂质的检查方法 收载在中国药典的附录中。
2. 特殊杂质（special impurities）：指 某一个或某一类药物的生产或贮藏过 程中引入的杂质。
对K 照 2S（ 4O ： c、 V ） Ba 2 C H C lB l a4 白 SO 色
（二）测定条件
1. 标准K2SO4溶液0.1mg/ml， 50ml溶液中含0.1～0.5mg所显浑 浊梯度明显，相当于标准K2SO4 溶液1～5ml。
2. 反应需在盐酸酸性条件下 进行，且以50ml供试溶液中含
1. 原理 对照法
Z n H C H 2 lA3 3 s O A3 s H
遇HgBr2试纸生成黄色～棕色的砷斑， 与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的 砷斑比较
2. 测定条件 （1）标准砷溶液临用新配，1gAs/ml。
（2）酸为反应物，酸量应足够，所以 加浓盐酸5ml。
（3）酸性氯化亚锡及碘 化钾的作用?
• 目前砷的测定方法有许多种,可 以归类为容量法、光度法、电 化学法、原子吸收法、中子活 化法、微波发射光谱法、放射 分析法、气相色谱法、动力方 法、化学发光法。
• 和这些方法相比,砷斑法(即古 蔡氏法,下称为砷斑法)实验仪
器简单,所需药品的价格低廉, 过程简便,精确度高。
（一）古蔡法 Ch.P（2005）、BP（2005）
特点特：点不：需不知需知道道杂杂质质的的准准确确含含量量， 但可判断杂质是否超标
2. 灵敏度法
系指在供试品溶液中加入试 剂，在一定反应条件下，不得有 正反应出现。
特点：不需对照物质
3. 比较法
含量测定法：测定杂质的 绝对含量，如测定吸光度、pH 值等。
特点：准确测定杂质的量， 不需对照品
三、 杂质限量的计算
砷的毒害
• 砷为 银 灰 色金属样工业毒物， 它以氧化或盐的形式存在， 如:As2O3粉尘(砒霜)及其他砷盐形 式。
• 由于长期呼吸道吸人，皮肤直 接接触，砷以无活性的形式或蓄 积在皮肤、毛发、指(趾)甲及骨 骼中而引起砷中毒，甚至在脱离 接触后砷仍可残留在体内达数年 之久。而导致皮肤癌、肺癌等。
（3）避免弱酸银盐如碳酸银、 磷酸银以及氧化银沉淀的形成。
（4）供试液和对照液稀释后， 再加硝酸银溶液，使生成白色 浑浊而不是白色沉淀
5. 避光、暗处放置5分钟后比 浊，因氯化银见光易分解。
6. 比浊方法：同置于黑色背景 上，自上向下观察。
二、硫酸盐检查法
（一）原理 对照法
药物 S2 4 O ： Ba 2 C H C lB l a4 白 SO 色
第三二章 药物的杂质检查
第一节 概述
一、药物的纯度
指药物纯净程度，反映了药 物质量的优劣，含有杂质是影 响药物纯度的主要因素。
为什么要控制？
• 不同的效价 • 不同的生物利用度 • 副作用 • 毒性
鱼腥草事件——中药静脉注射 剂残害中国人民达三十年之久
• 鱼腥草静脉注射剂含有的48种化 学成分造成杂质过多，引起肾功 能障碍。
重金属的危害
• 痛不欲生的“骨痛病”
镉中毒
骨质破坏 “骨痛病”
餐厅免费“垃圾茶”重金属超标 危害人体肝肾
• 中国质量万里行促进会说，“垃圾 茶”不仅农药残留和重金属含量都 超出了标准。食用过量的铅会引发 血液中毒，肝肾等脏器中毒，使这 些器官的功能下降，还会造成神经 系统损伤等。
铅盐检查法
（一）第一法 硫代乙酰胺法 1. 原理 对照法
炽灼% 残 残渣 渣 供及 试 空 坩 品 坩 埚 重 1 埚 重 0% 0 重
3. 注意事项
（1）供试品的取样量应根据炽灼 残渣限量和称量误差决定。
（2）加硫酸处理是使杂质转 化为稳定的硫酸盐，并帮助有 机物炭化
八、溶液颜色检查法 控制药物中有色杂质限量的方法。 Ch.P（2005）采用三种方法检查。
分取正丁醇层比色。
（2）具环状结构的有机药物， 需经700～800℃炽灼破坏处理后再 依法检查。 为什么？
五、重金属
什么是重金属？
重金属指相对原子量较大的金属元素，
•
如 汞、铅、镉等，但不是我们传统意义 上的金属。人类至今在地球上总共发现 了110种化学元素，仅金属就占了80多种。 其中重金属是指在实验室条件下能与S2作用显色的金属杂质，如铅、镉、汞等。 砷虽不属于重金属，但因其来源以及危 害都与重金属相似，故通常列入重金属 类进行研究、讨论。
检查药物中的微量不溶性杂 质，用作注射剂的原料药一般应 作此项检查。
1. 检查方法 对照法
供 规试 定 品 级 供号 试的 品浊 溶比 度 液标 较 准
2. 浊度标准液的配制
中国药典规定用浊度标准液 作为澄清度检查的标准。
（二）Ag-DDC法 检查、含量测定 Ch.P（2005）、USP（29）
对照法
Z n H C H 2 lA3 3 s O A3s H
AsH 36Ag(DDC)
AsDD3C6A红 g( 色3）HDDC
Ag-DDC法检查装置
直接比色或于510nm波长处测 定吸收度，进行比较。
用 有 机 碱 吸 收 反 应 产 生 的 HDDC 有 利 于 反 应 的 进 行 。 USP （ 29 ） 用 吡 啶，Ch.P（2005）用三乙胺。
稀盐酸2ml为宜。 为什么？
3. 试剂：氯化钡 BaCL2
4. 供试液和对照液稀释后，再 加氯化钡溶液，使生成白色浑 浊而不是白色沉淀。
5. 比浊方法：同置于黑色背 景上，自上向下观察。
三、铁盐检查法
（一）硫氰酸盐法 Ch.P（2005）、USP（29）
1. 原理 对照法
对 F 3 照 C 、 e V 6 ： S H C C F S lN e 6 C 3 红 N
三、杂质限量
指药物中允许杂质存在的 最大量，通常用百分之几或百 万分之几来表示
杂质量≤ 杂质限量＜杂质量
药品合格
药品不合格
二、药物的杂质检查法
1. 对照法 限量检查法 （Limit Test）
供试品 供试品溶液 同一条件下反应 对照品 对照品溶液
颜色 浑浊 色斑
比色 比浊 比较色斑
样品管 对照品管 合格
D. 1.0g E. 0.10g
第三节 一般杂质检查
一、一般杂质检查规则
《药品检验操作标准》规定：
1. 遵循平行操作原则
（1）仪器的配对性 如纳氏比 色管应配对 （2）对照品与供试品同步操作
2. 正确的比色、比浊方法
3. 检查结果不符合规定或在限 度边缘时应对供试管和对照管 各复查二份
二、氯化物检查法
A. 还原As5+为As3+，加快反应速度；
B. 碘化钾被氧化生成的I2又可被氯化 亚锡还原为I-，I-与反应中生成的Zn2+ 能形成稳定的配位离子，有利于生成 砷化氢的反应不断进行；
C. 氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成 锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生；
（4）醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及 供试品中少量硫化物的干扰，醋酸铅 棉花60mg装管高度60～80mm。 （5）锌粒应无砷
检查药物中遇H2SO4易炭化或 易被氧化呈色的微量有机杂质。
方法：H2SO4炭化后与对照液比 较。
对照液： （1）“溶液颜色检查”项下的标 准比色液； （2）由比色用氯化钴液，比色用 重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按规 定方法配成的对照液；
（3）高锰酸钾液
比色：同置白色背景前，平视观察 比较。
十、澄清度检查法
七、炽灼残渣检查法 检查不含金属的有机药物或
挥发性无机药物中混入的无机杂 质（金属氧化物或无机盐类）。
1. 原理 样 品 炭 化 后 + H2SO4 湿 润
→700～800℃炽灼至恒重→炽灼 残渣（硫酸灰分）
限量一般为0.1%～0.2%
2. 操作方法
样品炽灼至恒重的坩埚 直 火缓缓 加 热 至全部黑色、无烟放 雾冷 ， H2S O40 .5～1m l湿润 ，直火加 热 至H2SO4蒸气除尽700～ 800℃ 高 温灼 烧 残渣（恒重
为什么检查氯化物？
（一）原理 对照法
药物 C l： Ag3N H O N 3 O Ag 白 C色 l
对N 照 （ aC ： C ,V ） lAg 3 N H N 3 O O Ag 白 C色 l
（二）检查方法 药典附录
（三）测定条件 反应需在硝酸酸性条件下进行。
（1）加速AgCl浑浊的形成； （2）产生较好的乳浊；
如：阿司匹林中的游离水杨酸
甾体激素中的有关物质。
为什么收载在各药品 质量标准中？
特殊杂质检查方法收载在中国药 典正文各药品的质量标准中。
四、药物纯度与化学试剂纯度的区 别
药物的纯度考虑杂质的生理作 用，药物必须进行临床试验。药品 只有两个等级：合格或不合格。
化学试剂有很多等级，如基准试 剂、优级纯（GR）、分析纯 （AR）、化学纯（CP）、色谱 纯、光谱纯。
二、药物中杂质的来源
二、药物中杂质的来源
1. 生产过程中引入
2. 贮藏过程中产生
水解、氧化、分解、异构 化、晶形转变、聚合、潮解和 发霉等
易发生水解反应的结构：
酯、内酯、酰胺、卤代烃、 苷类等
易发生氧化反应的结构： 醚、醛、酚羟基、巯基、
亚硝基、双键等
三、杂质的分类
（一）药物中的杂质按结构分为：
（6）砷斑不稳定，应立即观察
4. 干扰及排除 （1）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、 硫代硫酸盐时，加HNO3，△，使氧 化成硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫 酸钠中砷盐的检查。
（2）供试品若为铁盐，需先加酸性氯 化亚锡试液，将Fe3+还原为Fe2+。如枸 橼酸铁铵中砷盐的检查。
（3）具环状结构的有机药物，要先行 有机破坏后再进行检查。
（二）第二法 炽灼残渣法 适用于含芳环、杂环以及不溶于水、
稀酸、乙醇及碱的有机药物。
1. 原理 对照法
500～600℃炽灼后的残渣，经处 理后，依一法检查。
六、砷盐检查法
法国国际法医毒物学家协会主席帕斯卡 尔·金茨最近宣布，在拿破仑的两绺头发 中发现了毒物砷，这与过去对拿破仑头 发所做的实验结果一致。最新的科学研 究为砷中毒一说增添了新证。 新华社电 1821年，法国皇帝拿破仑·波拿巴在他的流放之所———大西洋上偏远的圣赫勒拿岛去世。此后这些年来，人们一直对这位52