实验七小鼠骨髓细胞染色体标本的观察

几种动物染色体形态特征
动物名称 染色体数
染色体类型
x染色体形态
y染色体形态
青蛙 小白鼠
ຫໍສະໝຸດ Baidu26
中央、亚中央着丝粒染色 中央着丝粒染色体 中央着丝粒染色体
体
，介于6～7号
，介于8～9号
40
全部为近端着丝粒染色体 大小介于5～6号 大小介于19～20号
大白鼠
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中央、亚中央近端着丝粒 近端着丝粒染色体 近端着丝粒染色体
1. 简述小白鼠骨髓细胞染色体的制备过程。 2. 制片过程中为什么要进行低渗处理？ 3. 在取骨髓前为什么要给动物注射秋水仙素?
8.离心：1000rpm离心6分钟，弃上清液。
9.固定II：同固定I。 10.离心：同8离心后,加1mL固定液，吸管吹打成
细胞悬液。 11.滴片：用吸管吸取细胞悬液，滴在预冷的载玻
片上，室温晾干 12.染色：10% Giemsa染液染色30分钟
五、实验结果
在显微镜下观察Giemsa染色之后的染色体 片(染色体呈紫红色)，找出分散适度的中期染色 体图象, 观察小白鼠的染色体形态，统计其染色 体数目。
染色体
，介于4～5号
，介于18～19号
家兔
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中央、亚中央近端着丝粒 亚中央着丝粒染色 近端着丝粒染色体
染色体
体，介于5～6号 ，介于19～20号
六、注意事项
低渗与离心等步骤的操作要轻。 观察细胞的标准为：
1.细胞完整，轮廓清晰，染色体分布在同一水平面上
2.染色体形态和分布良好。 3.最好无重叠，即使有个别重叠，也要能明确辩认，
制得好的标本应是细胞多、颜色为紫红色。 此时间期细胞由于低渗和固定处理，细胞膜和质 已被去掉，镜下看到的仅为膨胀后呈圆形的细胞 核。分裂期细胞染色体集中在一起，其外也无细 胞膜包裹，染色体之间无重叠，易分辨，臂的长 度适中。但最重要的是分裂相要多。
2012年11月（生技101班）
2012年11月（生技101班）
实验七 小鼠骨髓细胞染色体标本的观察
杭州师范大学 刘姬艳
一、实验目的
1. 通过小白鼠骨髓细胞染色体的制备，初 步掌握低渗法制备动物骨髓细胞染色体 的方法
2.熟悉染色体的形态、种类及小白鼠等动 物染色体的数目及特点
三、实验用品
1.材料：小白鼠 2.试剂：0.01﹪秋水仙素,0.4%氯化钾
(KCl),固定液(甲醇:冰醋酸=3:1),Giemsa染液, 0.01M磷酸缓冲液(pH 6.8)，2%柠檬酸钠。 3.器材：离心机、显微镜、剪刀、解剖刀、小镊 子、注射器及针头、刻度离心管、吸管、载玻 片和盖玻片、染色缸、玻片盒
以免差错。 4.所观察的细胞处于同一有丝分裂阶段，即染色体螺
旋化程度或染色体长短大致一样。在所观察的细胞 周围，没有离散的单个或多个染色体存在，以免影 响计数。
七、实验报告与思考题
实验报告
1.记录所观察小白鼠骨髓细胞染色体的数目和形态。 2.绘制一个你所观察到的小白鼠骨髓细胞染色体分裂相图。
思考题
5.低渗：加入6mL 0.4% KCl溶液,37oC低渗20分钟， 中间（约10分钟）用吸管吹打二次，使细胞分 散，悬浮于溶液中。
四、实验步骤(continued)
6.离心：1000rpm离心5分钟后弃去上清液，
7.固定I：加6ml固定液并用吸管轻轻吹匀，室温下静 置20分钟，每10分钟时吹打一次。
四、实验步骤
1.预处理：实验前2.5-3小时，按每克体重注射0.02ml， 给小白鼠腹腔注射秋水仙素。
2.断颈处死动物.
3.剥取股骨和胫骨，剔去肌肉组织，剪去两端的股 骨头
4.冲洗骨髓：吸取2%柠檬酸钠,注射器针头插入骨 一端,反复冲洗骨髓,取6ml至离心管中.1000rpm 离心5min,弃上清.