氮测定法标准操作规程

氮测定法标准操作规程

目的：

是建立氮测定操作规程。

2. 依据：

《中华人民共和国药典》（2000年版二部）附录。

3.范围：

适用于含氮有机物中氮含量的测定。

4. 职责：

QC检验员对本标准的实施负责。

5. 程序：

5.1. 定义：

5.1.1. 本法系将供试品在硫酸及催化剂作用下，经强热分解使有机氮转化为硫酸

铵，再经强碱碱化使氨馏出并吸收于硼酸液，最后用硫酸滴定液滴定，求出氮含量。简述为消化、蒸馏及滴定三步。

5.1.2. 氮测定法分第一法与第二法，应按中国药典各该品种项下的规定选用。

5.2. 仪器与试药；

5.2.1. 仪器：

5.2.1.1.常量定氮仪由500ml凯氏烧瓶、氮气球和冷凝管组成。

5.2.1.2.半微量定氮仪由1000ml圆底烧瓶、连有氮气球的蒸馏器和直形冷凝管等

组成。

5.2.1.3.天平万分之一天平，适用于精密称取0.1mg以上者；十万分之一天平，适用于精密称量0.1mg以下者。

5.2.1.4.消化与蒸馏可用电炉加热。

5.2.1.5.蒸馏连接用的乳胶管或橡胶管，应用氢氧化钠试液煮20分钟，洗去碱液

后用水煮沸，洗净，晾干。

5.2.2. 试药：

5.2.2.1.试剂均为化学纯。

5.2.2.2.滴定液的配制和标定应符合中国药典附录规定。硫酸液（0.005mol/L）用

硫酸液（0.05mol/L）定量稀释制成，或直接标定。

5.2.2.3.试液、指示液的配制均应符合中国药典附录规定。

5.2.2.4.硫酸铜用作消化催化剂，硫酸钾用以提高硫酸的沸点，也可将硫酸钾与硫

酸铜按10:1比例混合研匀使用。

5.3. 操作方法：

5.3.1. 常量法（第一法）：

5.3.1.1.称样取供试品适量（约相当于含氮量25—30mg），精密称定，置干燥的

500ml凯氏烧瓶中。供试品如为固体或半固体，可用定量滤纸包裹加入，也可直接称入。

5.3.1.2.消化在凯氏烧瓶中依次加入硫酸钾10g和硫酸铜0.5g，沿瓶壁缓缓加入

硫酸20ml；若瓶颈上有少量供试品粘附，可用硫酸冲下。加2—3粒玻璃珠或沸石，在瓶口置一小漏斗，并使烧瓶成45℃斜置，用直火（加热部位保持在液面之下）缓缓加热，使溶液的温度保持在沸点以下，等泡沸停止，消化液黑色渐变棕色时，强热至沸，俟溶液成澄清的绿色时，继续加热30分钟，放冷，沿瓶壁缓缓加水250ml，摇匀，放冷。

5.3.1.3. 蒸馏沿瓶壁加40%氢氧化钠溶液75ml，使流至瓶底自成一液层，加锌粒数粒，用氮气球将凯氏烧瓶与冷凝管连接（氮气球可防止碱液溅入硼酸吸收液）。另取2%硼酸溶液50ml，置500ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿指示液10滴，将冷凝管尖端浸入硼酸溶液的液面下；轻轻摇动凯氏烧瓶，摇匀（防止温度骤然变化引起硼酸接受液倒吸），加热蒸馏，蒸至接受液的总体积约为250ml时，将冷凝管尖端提出液面，

使蒸汽冲洗约1分钟，用水淋洗尖端，停止蒸馏。

5.3.1.4. 滴定馏出液用硫酸液（0.05mol/L）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并

将滴定结果用空白试验校正，即得。每1ml的硫酸液（0.05mol/L）相当于1.401mg的N。

5.3.2. 半微量法（第二法）：

5.3.2.1.称样取供试品适量（约相当于含氮量1.0—2.0mg），精密称定，置干燥

的30—50ml凯氏烧瓶中。

5.3.2.2.消化在烧瓶中加硫酸钾0.3g与30% 硫酸铜溶液5滴，再沿瓶壁用吸管

滴加硫酸2.0ml，在凯氏烧瓶口放一小漏斗，并使烧瓶成45°斜置，用小火缓缓加热使溶液保持在沸点以下，等泡沸停止，溶液由黑色变为棕黄色时，强热至沸，俟溶液成澄明绿色后，

除另有规定外，继续加热10分钟，放冷，加水2ml。

5.3.2.3.蒸馏按药典附图连接蒸馏装置，A瓶中加水适量与甲基红指示液数滴，

加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石数粒，将连有氮气球的蒸馏器和直形冷凝管用水加热用蒸气淋洗，并使水自冷凝管尖端反复冲洗2-3次，从加样品口淋洗1次，洗涤液排出蒸馏管。取2%硼酸溶液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液5滴，将冷凝管尖端浸入液面下，将凯氏烧瓶中已消化的内容物经漏斗移入连有氮气球的蒸馏器中，用水少量淋洗漏斗数次，再加入40%氢氧化钠溶液10ml，用少量水再洗漏斗数次，关闭漏斗（加少量水封闭出口），进行蒸馏（蒸馏时不宜泡沸过高，以免溅至氮气球），至硼酸液由酒红色变为蓝绿色起，继续蒸馏约10分钟，将100ml锥形瓶下移至冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。

5.3.2.4. 滴定馏出液用硫酸液（0.005mol/L）滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定的结果用空白试验（空白馏出液的容积应与供试品所得馏出液的容积基本相等）校正。每1ml的硫酸液（0.005mol/L）相当于0.1401mg的N。

5.4. 注意事项：

5.4.1.蒸馏装置连接后应严密。

5.4.2.消化时，若发现瓶壁上有黑点，可适当转动烧瓶，使硫酸回流时将黑点洗下，以保证消化完全。

5.4.3.消化液应放冷后，再沿瓶壁缓缓加水，防止供试液局部过热爆沸冲出瓶外。

5.4.4.蒸馏过程中若无黑色CuO析出，说明加入碱量不足，应补足碱量或重新实

验。

5.4.5.配制40%氢氧化钠溶液时，宜边加边振摇，避免未溶解部分沉积于容器底

部而难于溶解。

5.4.

6.约80%以上的氨在最初1—2分钟内蒸出，所以初蒸速度不宜太快，以免氨

蒸出后未能及时被吸收而逸失。

5.4.7.锥形瓶加入硼酸溶液和指示剂后应显酒红色，如显绿色，说明锥形瓶有碱性

物质污染。蒸馏出的氨接受液应尽快滴定，避免放置时间过长，影响测定结果。

5.5. 记录与计算：

5.5.1.记录应记录天平型号及室温和相对湿度，供试品与试药的名称、规格及取

用量，滴定液的名称（也可用盐酸液）、F值及消耗量（ml）。