JC-10 线粒体膜电位的检测
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【注】： 此处以流式检测为例。如果用荧光酶标仪检测，将 100ul 染色工作液加入 96 孔板中染色即 可。
3. 用 PBS 洗涤细胞两次。离心收集细胞。 4. 用 500ul JC-10 染色工作液将细胞重悬，37℃，5% CO2 的培养箱中孵育 15-60 分钟。
【注】： 具体孵育时间取决于细胞类型和细胞浓度。实验前建议根据所需检测的样本优化实验体系。
假去极化。 根椐细胞种类、实验条件不同流式细胞仪设置不同。 JC-10 染色并洗涤后尽量在 30 分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
悬浮细胞 1. 1X 染色缓冲液和 JC-10 染色工作液的配制： 根据样品数按下列比例配制 1X 染色缓冲液和 JC-10 染色工作液。 取 100ul 10×染 色缓冲液加 900ul 无菌纯水稀释，混匀并预热至 37℃，即成 1×染色缓冲液； 用 1×染色缓冲液将 JC-10 稀释 1000-3000 倍，充分混匀配成 JC-10 染色工作液。
-4-
电话：021-33921235
邮箱：bestbio@163.com
传真：021-60853530
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
产品说明书
saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
耗材： 离心管 吸头
使用方法：
使用注意事项： 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时
液体洒落。 冬天 JC-10 在温度较低时会凝固，可以 20～25℃水浴温育片刻全部融解后离心使用。 JC-10 可以根据实验安排小量分装后，每次使用一管。 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。 始终保持平衡染液中 pH 值的一致性，因为 pH 值的变化将影响膜电位。 与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋白，他们将与部分染料结合，降低染料的浓度，引起
或者HBSS（Hank's Balanced Salt Solution； With：Calcium Magnesium Glucose；
Without：Phenol Red。Components：CaCl2(anhydrous) 140mg/L(1.261mM)、MgCl2-6H2O 100mg/L(0.493mM)、MgSO4-7H2O 100mg/L(0.407mM)、KCl 400mg/L (5.333mM)、 KH2PO4 60mg/L(0.441mM)、NaHCO3 350mg/L(4.167mM)、NaCl 8000mg/L(137.931mM)、 Na2HPO4(anhydrous) 48mg/L(0.338mM)、D-Glucose 1000mg/L(5.556mM)）
使用安全： 使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。 如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
质量控制： 贝博® 对每批产品进行严格测试以确保产品质量一致。
技术支持：
产品技术问题可发邮件至 bestbio@163.com 咨询。 如果您有任何关于产品性能或者新应用和技术的建议，欢迎您随时联系我 们。
页码
1 1 1 2 3 4 5 6
※ ※ ※ 重要事项 ※ ※ ※
※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制： 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：
贝博® 会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相 应的版本更新。使用产品时，请参照试剂盒中随产品附带的印刷版说明书， 不能参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时 可以在收到产品后发邮件索取。
贝博® 所提供的 JC-10 溶解于 DMSO 溶液中。JC-10 可以检测细胞、组织或纯化的线粒 体膜电位。正常细胞内，在线粒体膜电位较高时，JC-10 选择性聚集在线粒体基质中形成可 逆的橙红色荧光聚合物（Ex=510nm / Em=570nm），在 488nm 激发时的最大发射波长为 570nm，可以产生橙红色荧光；当细胞发生凋亡时，线粒体膜电位较低，发生膜电位的下 降或丧失，JC-10 不能聚集在线粒体的基质中，JC-10 由多聚体转变为绿色荧光单体 （Ex=510nm / Em=520nm）形式存在于胞浆中，在 488nm 激发时最大发射波长为 520nm， 可以产生绿色荧光，形成流式图中细胞 FL1 阳性。凋亡细胞则大多为 FL1 单阳性。这样就 可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例 来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm 的下降是细胞凋亡早期的一个标 志性事件，常用 JC-1 或 JC-10 来检测。虽然 JC-1 在许多实验中被广泛地的应用，但是其水 溶性差的特性也使其很难在一些实验中使用，即使是在浓度为 1uM 的条件下，JC-1 也会在 水的缓冲液中析出。JC-10 是一种可以在需要高浓度染料的实验中替代 JC-1 的产品，与 JC-1 相比，贝博® 的 JC-10 具有更好的水溶性。
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产品说明书
贝博® BBcellProbe® JC-10 线粒体膜电位检测试剂盒可以快速灵敏地检测细胞、组织 或纯化的线粒体膜电位变化，可以用于早期的细胞凋亡检测。试剂盒染料与其他的阳离子染 料如 DiOC6(3)和罗丹明 123 相比，特异性更高，对线粒体膜电位变化的特异性高于质膜电 位变化，对线粒体去极化检测的检测一致性更好；红绿色荧光强度比率只受线粒体膜电位的 变化，不受线粒体大小，形状，密度的差异干扰；检测灵敏度强，对细胞应激反应的微小异 质性都能辨别。
有效期：
一年。
【注】： 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。 试剂拆封后请尽快使用完！
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本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
知识产权： 贝博® BBcellProbe® 系列试剂盒及其使用方法包含专有技术。
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产品说明书
内容
产品储存条件： 产品组成： 有效期： 重要事项说明： 产品简介： 自备仪器试剂耗材： 产品使用方法： 相关产品：
产品说明书目录
………………………………………… ………………………………………… ………………………………………… ………………………………………… ………………………………………… ………………………………………… ………………………………………… …………………………………………
彻底清除残留清洁剂。 6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
产品简介：
线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（△Ψmt）的破坏，被认为是细胞凋 亡级联反应过程中最早发生的事件之一，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA 断 裂）出现之前，一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。
JC-10 可以选择性的进入线粒体，并且由于膜电位的增加，其颜色会发生从绿色到橙红 色的可逆性改变。这种特性是由于 JC-10 聚合物的可逆结构，在膜电位增加的条件下，它的 发射光由 520nm（JC-10 单体发射光）转移到 570nm （JC-10 聚合体发射光）。当在 490nm 处激发时，JC-10 发生从绿色到橙红色的可逆改变，因为线粒体膜极化的更大。这两种颜色 都可以被流式细胞仪上装好的一般滤光器检测到，因此绿色发射光可以通过荧光通道 1 （FL1）进行分析，橙红色发射光可以通过荧光通道 2（FL2）进行分析。它除了可以用于 流式细胞术，也可以用于荧光成像分析。在一些细胞系中 JC-10 有着比 JC-1 更好的表现， 不过，JC-10 的性能表现对细胞系极具依赖性。
贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、 细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种 检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的 BBcellProbe® M 系列、N 系列、L 系列、 E 系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、 微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染 色试剂盒产品。
产品说明书
ຫໍສະໝຸດ Baidu
JC-10 线粒体膜电位检测试剂盒
货号：BB-41052
V 8.9
试剂盒储存条件：
2-8℃ 避光保存。
【注】： 开盖后组份按要求条件保存。 拆封后请尽快使用完！
试剂盒组成：
产品组成
BB-41052-1 BB-41052-2 BB-41052-3
组份编号
规格
20T
50T
100T
试剂 A：JC-10 染色液
产品说明书
注意事项： 1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。 2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，
避免开盖时试剂损失。 3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。 4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并
【注】： 也可以使用 HHBS（1×Hanks with 20 mM Hepes buffer, pH 7.0）或其他缓冲液（pH 7.0-7.5） 1000-3000 倍稀释 JC-10 染色液配制 1×JC-10 染色工作液，涡旋混匀。
2. 收集样本细胞以及阴性、阳性对照细胞。细胞数量在 2-5X105 个。
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通过 JC-10 从橙红色荧光到绿色荧光的转变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，同 时也可以用 JC-10 从橙红色荧光到绿色荧光的转变作为细胞凋亡早期的一个检测指标。
100ul
250ul
500ul
41052A
试剂 B：10×染色缓冲液
5ml
10ml
20ml
41052B
使用说明书
1
1
1
各组份储存条件： JC-10 染液-20℃避光保存；避免反复冻融，可根据需要小量分装。 10×染色缓冲液 2-8℃保存。 【注】： 染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。 染色液为 DMSO 溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加 热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。 可以用手捂住使其融解或 37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固 在吸头内壁产生损耗。
JC-10 荧光光谱：
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器：
流式细胞仪或荧光显微镜或激光共聚焦 离心机 移液器 冰箱 冰盒
试剂： PBS 缓冲液（pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X））（phosphate buffer
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3. 用 PBS 洗涤细胞两次。离心收集细胞。 4. 用 500ul JC-10 染色工作液将细胞重悬，37℃，5% CO2 的培养箱中孵育 15-60 分钟。
【注】： 具体孵育时间取决于细胞类型和细胞浓度。实验前建议根据所需检测的样本优化实验体系。
假去极化。 根椐细胞种类、实验条件不同流式细胞仪设置不同。 JC-10 染色并洗涤后尽量在 30 分钟内完成后续检测。在检测前需冰浴保存。
悬浮细胞 1. 1X 染色缓冲液和 JC-10 染色工作液的配制： 根据样品数按下列比例配制 1X 染色缓冲液和 JC-10 染色工作液。 取 100ul 10×染 色缓冲液加 900ul 无菌纯水稀释，混匀并预热至 37℃，即成 1×染色缓冲液； 用 1×染色缓冲液将 JC-10 稀释 1000-3000 倍，充分混匀配成 JC-10 染色工作液。
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saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
耗材： 离心管 吸头
使用方法：
使用注意事项： 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时
液体洒落。 冬天 JC-10 在温度较低时会凝固，可以 20～25℃水浴温育片刻全部融解后离心使用。 JC-10 可以根据实验安排小量分装后，每次使用一管。 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。 始终保持平衡染液中 pH 值的一致性，因为 pH 值的变化将影响膜电位。 与染料达到平衡的细胞悬液中如果含有蛋白，他们将与部分染料结合，降低染料的浓度，引起
或者HBSS（Hank's Balanced Salt Solution； With：Calcium Magnesium Glucose；
Without：Phenol Red。Components：CaCl2(anhydrous) 140mg/L(1.261mM)、MgCl2-6H2O 100mg/L(0.493mM)、MgSO4-7H2O 100mg/L(0.407mM)、KCl 400mg/L (5.333mM)、 KH2PO4 60mg/L(0.441mM)、NaHCO3 350mg/L(4.167mM)、NaCl 8000mg/L(137.931mM)、 Na2HPO4(anhydrous) 48mg/L(0.338mM)、D-Glucose 1000mg/L(5.556mM)）
使用安全： 使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。 如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。
质量控制： 贝博® 对每批产品进行严格测试以确保产品质量一致。
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贝博® 所提供的 JC-10 溶解于 DMSO 溶液中。JC-10 可以检测细胞、组织或纯化的线粒 体膜电位。正常细胞内，在线粒体膜电位较高时，JC-10 选择性聚集在线粒体基质中形成可 逆的橙红色荧光聚合物（Ex=510nm / Em=570nm），在 488nm 激发时的最大发射波长为 570nm，可以产生橙红色荧光；当细胞发生凋亡时，线粒体膜电位较低，发生膜电位的下 降或丧失，JC-10 不能聚集在线粒体的基质中，JC-10 由多聚体转变为绿色荧光单体 （Ex=510nm / Em=520nm）形式存在于胞浆中，在 488nm 激发时最大发射波长为 520nm， 可以产生绿色荧光，形成流式图中细胞 FL1 阳性。凋亡细胞则大多为 FL1 单阳性。这样就 可以非常方便地通过荧光颜色的转变来检测线粒体膜电位的变化。常用红绿荧光的相对比例 来衡量线粒体去极化的比例。
线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)△Ψm 的下降是细胞凋亡早期的一个标 志性事件，常用 JC-1 或 JC-10 来检测。虽然 JC-1 在许多实验中被广泛地的应用，但是其水 溶性差的特性也使其很难在一些实验中使用，即使是在浓度为 1uM 的条件下，JC-1 也会在 水的缓冲液中析出。JC-10 是一种可以在需要高浓度染料的实验中替代 JC-1 的产品，与 JC-1 相比，贝博® 的 JC-10 具有更好的水溶性。
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一年。
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线粒体与细胞凋亡密切相关，其中线粒体跨膜电位（△Ψmt）的破坏，被认为是细胞凋 亡级联反应过程中最早发生的事件之一，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA 断 裂）出现之前，一旦线粒体跨膜电位崩溃，则细胞凋亡不可逆转。
JC-10 可以选择性的进入线粒体，并且由于膜电位的增加，其颜色会发生从绿色到橙红 色的可逆性改变。这种特性是由于 JC-10 聚合物的可逆结构，在膜电位增加的条件下，它的 发射光由 520nm（JC-10 单体发射光）转移到 570nm （JC-10 聚合体发射光）。当在 490nm 处激发时，JC-10 发生从绿色到橙红色的可逆改变，因为线粒体膜极化的更大。这两种颜色 都可以被流式细胞仪上装好的一般滤光器检测到，因此绿色发射光可以通过荧光通道 1 （FL1）进行分析，橙红色发射光可以通过荧光通道 2（FL2）进行分析。它除了可以用于 流式细胞术，也可以用于荧光成像分析。在一些细胞系中 JC-10 有着比 JC-1 更好的表现， 不过，JC-10 的性能表现对细胞系极具依赖性。
贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、 细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种 检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的 BBcellProbe® M 系列、N 系列、L 系列、 E 系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、 微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染 色试剂盒产品。
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规格
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50T
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避免开盖时试剂损失。 3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。 4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。 5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并
【注】： 也可以使用 HHBS（1×Hanks with 20 mM Hepes buffer, pH 7.0）或其他缓冲液（pH 7.0-7.5） 1000-3000 倍稀释 JC-10 染色液配制 1×JC-10 染色工作液，涡旋混匀。
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JC-10 荧光光谱：
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
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流式细胞仪或荧光显微镜或激光共聚焦 离心机 移液器 冰箱 冰盒
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