畜禽肉中兽药残留的测定(精)
畜产品中瘦肉精、氯霉素等残留的胶体金检测技术
３ １ 卷
第１ Ｏ 期
畜 产 品 加 工
畜产 品 中瘦 肉精 、氯霉素等残 留的胶体 金检 测技术
姜在清 陈 明生
２ ６ ２ ２ ０ ０ ） （ 山东省诸 城市畜牧兽医管理局 ，山东诸城
诸 城 市畜 牧 局 坚持 以人 为本 的 理念 ，始终 把 畜 禽产 品质量 安 全 Ｔ 作放 在 全 局 作 的首 要 任 务 。严格 贯 彻 执行 《 食 品安 全 法 》 《 动 物 防疫 法 》 《 农 产 品质 量安 全 法 》 《国务 院关 于加 强 食 品及 产品 监督 管 理 特 别规 定 》 《 动 物性 食 品 中兽 药 最高 残 留 限量 》等 法 律 法规 及 有 关配 套 规 定 ，加 强畜 禽 产业 行 业 管理 ，强化 官 方兽 医监 管 职责 ，定期 不 定期 到畜 禽产 业 各环 节 进 行监 管 ，发 现 问题 依法 处 理 ，同时 充分 发 挥动 物 疫病 预 防控 制 中心 的技 术 优势 ，积 极开 展 对 动物 疫病 、兽 药 饲料 、畜禽 产 品药 物 残 留进 行 监测 和技 术指 导 ，发现 问题 由动 物卫 生 监督 机 构 依法 处 理 。 南于诸 城 市 对 畜禽 产 品 质量 安 全 的高 度 重视 ，加 强 畜 禽产 业 各环 节 的 监管 、兽
诸 城市 场 上采 用 的 “ 瘦 肉精 ”快速 检测 卡 应用 了竞 争抑 制 免疫 层 析 的 原理 ，样 品 中的 “ 瘦 肉精 ”在 流动 过 程 中与胶 体 金 标记 的特 异 性单 克 隆抗 体结 合 ，抑 制 了抗 体 和Ｎ Ｃ 膜检 测 线上 “ 瘦 肉精 ”一 蛋 白偶联 物 的结 合 。如样 品尿液 中 “ 瘦 肉精 ”含量 大 于３ ｐ ｐ ｂ ，肉 类中 “ 瘦 肉精 ”含 量 大 于 Ｉ ｐ ｐ ｂ ，检 测线 不 显 色 ，结果 为 阳性 ；反 之为 阴性 。 “ 瘦 肉精 ”胶 体 金 快速 检 测 卡 检 测 方 法 ： （ １ ） 最 简 单 的方 法 只需要 取一 些 猪 肉 、肝 脏 、肺 脏 、。 肾脏 、瘦 肉样 品 （ 约１ ０ ｇ ）， 将样 品剪 碎装 入 １ ． ５ ｍｌ 离 心管 中 ，盖 紧 管 盖 ，在水 浴 中煮 ５～１ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ，使 汁液 浸 ，取 出离 心管 放 至室温 ，将 煮 出的 汁液 加 同样体 积 的配 套缓 冲液混 匀 ，用 吸管 吸入 样本 液 垂 滴加 １ ～２ 滴 于 加样 孑 Ｌ 内 ，用 于检测 即可 ，几个 ｐ ｐ ｂ 的瘦 肉精 就能 被测 出 ，全程 只需 十几 分钟 。注 意脂 肪会 造 成 似 阳性 ，取 样 时请 弃 去 肉 眼可 见 的脂 肪 。 （ ２） 样 品猪 肉组 织 ，称取 ５ ． ０±Ｏ ． ０ ５ ｇ 新 鲜猪 肉 （ 或肝 ） 样 品 ，放 于５ ０ ０ ｍ ｌ 带 盖 离 心 管 中３ ｎ ５ ｇ 无水 硫 酸钠 ，再￣ １ ５ ｍ ｌ 乙氰振 荡 ３ ｍｉ ｎ ， ４ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ 离心 １ ０ ｍ ｉ ｎ ，取４ ｍｌ 上 清 液 于 另 一试 管 中５ ６ 度 空 气 后氮 气 吹 干 ，Ｏ ． ３ ｍｌ 二 三 蒸水 复溶 ，振荡 ３ ａｉ ｒ ｎ 取液 体 检 测 ； （ ３ ）样 品饲 料 ，称 取均 质 的饲 料样 品 １ ． ０ ±Ｏ ． ０ ５ ｇ 加人１ ０ ｍ ｌ 甲醇 ，再 加入 ５ ｇ 无水 硫 酸钠 振荡 ３ ｍ ｉ ｎ ，室 温４ ０ ０ ０ ｇ ｏ ｒ ｉ ｎ 以上 离心 １ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ，吸 离 心后 的 上清液１ ｍ ｌ ，于５ ６ 度 氮气 吹 干 ，用 ｌ ｍ ｌ 三蒸 水 复溶 ，再 加 ｌ ｍ ｌ 正 己烷 混合３ ０ ｓ 室温 ４ ０ ０ ０ ｆ ｍｉ ｎ 以上 离心 ，取 下 层液 体检 测 。检 测 ，在 检 测 卡 的 加样 孑 Ｌ 内加 入２ 滴 （ ８ ０ １ ） 待 检样 品溶 液 ，在 室 温下 静 置 ５～ ８ ａ ｒ ｉ ｎ 内判 定结 果 ，超过 ３ ０ ｍ ｉ ｎ 的结果 只能 做参 考 ， 当样 品 溶液 中 的瘦 肉精 含 量大 于 检测 限 时 ，检 测线 不 显 色结 果 为 阳性 ，当样 品溶 液 中瘦 肉精含 量 小 于检 测 限时 ，检 测 线 显紫 红 色 ，结果 为阴 性 。肉类 检测 限为 ｌ ｐ ｐ ｂ 、饲 料５～１ ０ ｐ ｐ ｂ 。 胶体 金 快 速检 测 卡对 生 猪 尿液 中 “ 瘦 肉精 ”的 检测 （ 适 合 于 官方 兽 医搞 产 地检 疫 检 测和 屠 宰检 疫 及屠 宰 厂检 验 检测 时 ）。具 体操 作 与 注意 事项 ：取 出检 测 卡 ，根 据检 测 样 品 的数量 确 定需 要 检 测卡 的数量 ；检 测卡 放 置在 平坦 的台 面上 ；划 的规定 和 操作 规 程 和技 术 要求 进 行兽 药 残 留 的监测 ，至今 无畜 禽及 畜 禽产 品质 量安 全事 故发 生 。 ２ ０ ０ ２ 年３ 月农 牧 发 ［ ２ ０ ０ ２］１ 号 文件 《 食 品动 物禁 用 的兽 药 及 其 化合 物 清单 》、２ ０ ０ ２ 年４ 月 农 牧发 ［ ２ ０ ０ ２ ］２ ３ ５ 号 文件 《 动 物性 食 品 中兽 药 最 高 残 留 限量 》中 “ 瘦 肉精” （ 盐 酸 克 伦 特 罗 及 其 盐 、酯 ）、氯霉 素 及其 盐 、酯是 首 要禁 止 使用 的药 物 ，在 动物 性 食 品 中不 得 检 。盐酸 克 伦 特 罗在 人 的 临床 上用 于 治疗 哮 喘 病 ， 对 心 脏 副作 用 大 ，属 于一 肾 上 腺 类 激 素 ，据 资 料 报 道 人 医用 量
畜禽肉中多类兽药残留的快速检测
畜禽肉中多类兽药残留的快速检测黄 立（昆明市食品药品检验所，云南昆明 650032）摘 要：建立了猪肉、牛肉、鸡肉中磺胺类、四环素类、喹诺酮类共15种兽药残留量的快速检测方法。
样品经过Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液-2.5%乙酸乙腈溶液提取，经氯化钠、无水硫酸钠除水盐析后取乙腈相用高含碳量的C18吸附粉吸附净化，再用0.1%甲酸水乙腈（75+25）定容后上机检测。
结果显示，本方法测定三类混合药物的回收率在63.9%～104.0%，RSD在1.1%～12.2%，检测快速、灵敏度高、重复性好，定性定量准确可靠，适用于猪肉、牛肉及鸡肉中磺胺类、四环素类、喹诺酮类药物残留的快速检测。
关键词：液相色谱-串联质谱法；磺胺；四环素；喹诺酮Rapid Detection of Multiple Types of Veterinary Drug Residues in Livestock and Poultry MeatHUANG Li(Kunming Institute for Food and Drug Control, Kunming 650032, China) Abstract: A rapid method was established for the determination of 15 veterinary drug residues of sulfonamides, tetracyclines and quinolones in pork, beef and chicken. The samples were extracted by Na2EDTA-Mcllvaine buffer-2.5% acetic acid acetonitrile solution, and the acetonitrile phase was purified by adsorption with high carbon content C18 adsorbent powder after dehydration salting by sodium chloride and anhydrous sodium sulfate, and then fixed with 0.1% formic acid aqueous acetonitrile (75+25) and detected on the machine. The results showed that the method determines the recovery of the three types of mixed were 63.9%～104.0%, RSD were 1.1%～12.2%, rapid detection, high sensitivity, good repeatability, accurate and reliable qualitative and quantitative, suitable for the rapid detection of sulfonamides, tetracyclines, quinolones drug residues in pork, beef and chicken.Keywords: liquid chromatography-tandem mass spectrometry; sulfonamide; tetracycline; quinolone合理使用兽药可以提高畜禽养殖效率，节省成本，缩短出栏周期，进而增加收益，但越来越多的人为追求经济效益滥用药物，导致了一些兽药以残留的形式流入人体，从而对身体健康造成威胁[1]。
品检中的兽药残留检验方法
品检中的兽药残留检验方法兽药残留是指兽药在兽体内或畜禽产品中残留的化学物质。
合理使用兽药可以预防和治疗动物疾病，提高畜禽养殖效益。
然而，如果兽药残留超过安全标准，可能对消费者健康造成潜在风险。
因此，兽药残留的检验方法在品检中显得尤为重要。
兽药残留检验方法是确定畜产品中兽药残留水平的关键步骤。
本文将介绍一些常用的兽药残留检验方法，并讨论其原理和应用。
高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS）是目前应用广泛的兽药残留检验方法之一。
该方法基于高效液相色谱（HPLC）和质谱联用仪（MS），通过对样品进行分离和定性分析，可以快速、准确地检测多种兽药残留物。
HPLC-MS方法具有高选择性、高灵敏度和高分辨率的特点，适用于不同类型的兽药残留物检测。
酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种基于免疫学原理的兽药残留检测方法。
该方法利用特异性抗体与兽药残留物结合，形成特异性抗原-抗体复合物，并通过酶作用产生颜色反应，从而定量检测兽药残留物的含量。
ELISA方法具有简单、快速、便捷的特点，适用于大规模的兽药残留检测。
气相色谱-质谱联用法（GC-MS）也是常用的兽药残留检验方法之一。
该方法利用气相色谱和质谱联用仪对样品进行分离和定性分析，可以检测挥发性兽药残留物和半挥发性兽药残留物。
GC-MS方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点，适用于多种兽药残留物的分析。
快速液相色谱法（UPLC）也是兽药残留分析中常用的检测方法之一。
与传统的液相色谱相比，UPLC具有更高的分离效率、更短的分析时间和更低的溶剂消耗量。
因此，UPLC是一种高效、准确和经济的兽药残留检验方法。
综上所述，兽药残留检验方法在品检中起着重要的作用。
通过合理选择和应用适当的检验方法，可以快速、准确地检测畜产品中的兽药残留物。
这有助于确保畜产品的质量安全，保护消费者的健康。
未来，随着科技的进步，兽药残留检验方法还会不断发展和完善，以应对不断变化的兽药种类和畜产品需求。
兽药残留检测PPT课件
兽药残留的类型
抗生素类：四环素、氯霉素、磺胺类、呋喃类等； β-兴奋剂：盐酸克伦特罗、己烯雌酚、孕酮等； 激素：己烯雌酚、孕酮等； 抗寄生虫类：左旋咪唑、苯丙咪唑、克并咪唑、克球酚、 吡喹酮等。
兽药残留的来源
在食品动物体内或动物性食品中发现的违章残留, 大都是由用药错误造成的,其原因主要有:
N
N
H3CO
OCH3
sulfadoxine (SD)
OCH3 N
N
OCH3
sulfadimethoxine (SDMX)
OCH3 NN
sulfamethoxypyridazine (SPMX)
OCH3 N
N
OCH3 N
N
OCH3
sulfadimethoxine (SDMX) sulfamonomethoxine (SMMX)
不同的物质有不同的质量谱——质谱，利用这一性质，可以进行定性分析（包括 分子质量和相关结构信息）；谱峰强度也与它代表的化合物含量有关，可以用于 定量分析。
GC-MS的基本流程
GC-MS联用的优缺点
色谱仪有很强的分离混合物的能力，但是对化合物定性的能力差。 质谱分析试样必须是高度纯净物，而质谱本身无分离混合物的能力，但是能用
肝
≤
肾
≤
畜禽肉、水产品
畜禽（可食性组织） ≤
水产品
≤
猪肉、鸡肉、鸡蛋、牛肉≤
水产品
鸡肉、鸡蛋
≤
畜禽肉
畜禽肉、水产品
最高残留限量(mg/kg) 0.1 0.3 0.6
不得检出(检出限0.01) 0.1 0.1(单种） 0.1(以总量计) 不得检出
0.1 不得检出(检出限0.01)
不得检出(检出限0.05)
23235427_固相萃取法快速分析畜禽肉中多种类兽药残留量
现今，食品安全广受关注。
兽药残留问题不仅与人们的健康息息相关，也直接影响到该产业的经济效益，甚至影响到国际贸易和国家形象。
我国畜牧养殖环节监管难度较大，用药较泛滥，目前使用较多的兽药主要有四环素类、磺胺类、喹诺酮类、β-受体激动剂类、大环内脂类、糖皮质激素类、酰胺醇类、头孢类、青霉素类和性激素类等。
这些药物使用不当会在畜禽肉中残留，最终通过食物链在人体内蓄积，给人类健康带来危害。
因此，监测畜禽肉中多种兽药的残留对保证食品安全具有积极意义。
目前，相关标准和文献报道的兽药残留检测大多按照兽药种类分成若干种检测方法，能够快速高效同时检测分析多种类兽药残留的报道较少。
近年来国内外学者将QuEChERS技术引入到了兽药残留检测领域，并已发表了相关文章。
卜明楠等采用QuEChERS技术结合LC-MS-MS同时检测虾肉中的72种兽药残留[1］。
郭海霞等采用QuEChERS 技术结合HPLC-MS-MS同时检测猪肉中的121种兽药残留[2]。
国家标准检测方法需要分类检测，成本高，检测时间长；而文献报道的QuEChERS技术存在技术复杂、成本高等问题。
本研究方法创新了前处理过程，采用统一的提取步骤，优选了Oasis PRiME HLB固相萃取柱进行通过式净化，建立了稳定高效的多兽药残留UPLC-MSMS分析方法，从而实现了对四环素类、磺胺类、喹诺酮类、β-受体激动剂类、酰胺醇类和青霉素类6大类32种兽药的同时分析，能够快速、准确的报告结果，极大地降低了检测成本。
1 实验部分1.1 仪器设备和试剂耗材1.1.1 仪器设备Agilent 1290-6460 超高压液相色谱-串联质谱联用仪；TGL-20M高速台式冷冻离心机；TH-800BQG超声波清洗机；HYQ-3110旋涡混合器；SR-2DS振荡器；OA-SYS氮吹仪；T18均质机；Milli-Ｑ型纯水系统。
1.1.2 试剂耗材Oasis PRiME HLB固相萃取柱（6 mL，200 mg，沃特世公司）；乙腈、甲醇、甲酸、乙酸铵均为HPLC级；氢氧化钠为优级纯；Na2EDTA·2H2O、Na2HPO4·12H2O、柠檬酸均为分析纯。
《兽药残留检测技术》PPT课件精选全文完整版
第六章 兽药残留检测技术
第二节 样品前处理
样品前处理是指样品的制备和对样品中的待测组分进行 提取、净化、浓缩的过程。
样品前处理的目的是消除基质干扰、保护仪器、提高检 测方法的灵敏度、选择性、准确度、精密度。
一、常见兽药
按用途分类
抗微生物药
抗寄生虫药 激素类药物
抗生素：青霉素、链霉素、氯霉素 抗菌药：磺胺药、呋喃类药、喹诺酮类 抗病毒药：干扰素 抗蠕虫药 抗原虫药 杀虫药
生长促进剂
1、抗微生物药
抗微生物药是指对病原微生物(细菌、真 菌、支原体、病毒等)具抑制或杀灭作用, 主要有用于全身感染的抗生素、磺胺药及 其他化学合成抗菌药。
3. 硝基呋喃类药物
主用于抗菌消炎, 如呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因等。
4. 抗寄生虫类药物
主要用于驱虫或杀虫, 如苯并咪唑、左旋咪 唑、克球酚、吡喹酮等。
而常用的苯并咪唑类抗寄生虫药物有丙硫 苯咪唑、丙氧咪唑、噻苯咪唑、甲苯咪唑、 丁苯咪唑等。
5. 激素类药物
主要用于提高动物的繁殖和加快生长发育 速度, 使用于动物的激素有性激素和皮质激 素。而以性激素(包括多种内源性性激素、 人工合成的类似性激素的类固醇化合物、 人工合成的具有性激素某些特性的非类固 醇化合物) 最常用, 如孕酮、睾酮、雌二醇、 甲基睾酮, 丙酸睾酮、苯甲酸雌二醇、己烯 孕酮等。
兽药的危害
引起过敏、致畸、致突变及致癌等不良反 应。
立法
为防止动物性食品中可能出现的药物残留损害人体健 康,1984年在CAC的倡导下由联合国粮农组织(FAO)和世 界卫生组织(WHO)联合发起组织了食品中兽药残留立法 委员会(CCRVDF)。
畜产品中兽药残留危害及检测方法
畜牧兽医X U MU SH OUYI养殖问题研究畜产品中兽药残留危害及检测方法孙 榕（榆林市农产品质量安全中心，陕西榆林 719000）摘 要 对于畜牧业养殖而言，兽药在预防和控制畜类疾病中发挥着不可替代的作用，可保障养殖动物的健康，提高畜产品品质。
但在兽药日益广泛运用的形势下，出现了诸多问题，其中畜产品中兽药残留问题备受关注。
基于此，重点分析了畜产品兽药残留的危害，并提出了几种常见的检测方法，以期保障畜产品质量。
关键词 畜产品；兽药；残留危害；检测方法新经济常态下，城乡居民收入持续增长，生活水平日益提升，肉、蛋、奶人均消费量不容小视。
但在畜产品大规模增长的同时，其安全问题日益凸显，近年来类似“瘦肉精”“三聚氰胺”等的安全事件频繁出现，严重影响了肉类产品消费及贸易，引起了社会大众对兽药及饲料等添加剂安全的探究[1]。
兽药残留不仅不利于生态环境及产业健康发展，而且还会威胁到人们的健康，因此应充分意识到兽药残留的危害，并采取科学合理的检测方法，以此确保畜产品产业健康发展。
１ 畜产品中兽药残留的危害兽药残留，不仅会通过食物链进入人体，而且还可通过动物体的排泄物、非正常死亡的尸体进入土壤环境、水环境，进而对水资源、土资源造成严重污染，而当水环境、土壤环境被严重污染后，又会对人体健康造成严重影响。
相关调查数据显示，2018年我国共产生了954起和兽药残留相关的事件，造成经济损失约2.7亿元[2]，且受兽药残留等相关问题的影响，每年约有84亿美元的畜产品被退回。
食用涉及兽药残留的畜产品，一般中毒潜伏期为30 min，其中短的可能 10 min，长的2 h，表现出来的症状有头晕、食欲不振、恶心、视力模糊、呕吐等。
如果中毒情况较为严重，还会出现瞳孔缩小、腹泻、肌肉颤动、言语障碍等症状，甚至会出现呼吸麻痹、大小便失禁、痉挛、体温上升等症状。
兽药残留还能在人体内部进行积累，高于一定量后就会引发部分疾病，如不育。
相关部门研究发现，畜产品中包含的残留兽药长时间滞留在人体，还会引起慢性中毒，形成癌症、糖尿病及心血管疾病等，蓄积在人体中的兽药，还会凭借怀胎及哺乳的方式传给下一代。
畜产品中常用兽药残留危害及检测方法
畜产品中常用兽药残留危害及检测方法兽药残留对人体健康的危害有多个方面。
首先，兽药残留可能导致抗药性菌株的产生。
长期暴露于兽药残留的情况下，细菌、寄生虫等会逐渐形成抗药性，从而降低了抗生素的疗效。
其次，兽药残留可能导致人体免疫力下降。
人类消费含有兽药残留的畜产品后，兽药残留会进入人体，影响人体的免疫系统，使身体对其他疾病产生抵抗力下降。
此外，一些兽药残留还可能对人体的内分泌系统产生影响，导致激素失衡。
目前，针对兽药残留的检测方法主要包括生化方法、免疫学方法和分析化学方法。
生化方法是通过测定畜产品中特定兽药的生物活性来进行检测。
常用的方法包括抗生素菌落呈阴性检测法、抗生素抑菌法等。
这些方法通过将畜产品与感受器混合，观察感受器是否发生生理变化，从而判断兽药残留是否超标。
免疫学方法是通过检测畜产品中与兽药相关的抗体或免疫反应来进行检测。
常用的方法有ELISA(酶联免疫吸附测定法)、免疫层析法等。
这些方法通过检测样本中抗体和兽药之间的免疫反应，来判断兽药残留是否超标。
分析化学方法是通过分析畜产品中兽药的化学成分来进行检测。
常用的方法有气相色谱法、液相色谱法等。
这些方法通过将畜产品中的兽药提取出来，然后使用化学试剂进行分析，从而判断兽药残留是否超标。
综上所述，畜产品中常用兽药残留对人体健康构成潜在风险。
为了保证畜产品的质量安全，必须使用科学合理的方法进行兽药残留的检测。
目前生化方法、免疫学方法和分析化学方法是常用的检测方法。
这些方法在实际应用中，可以互相结合，提高检测的准确性和可靠性。
未来的研究还可以进一步改进和发展更加高效和灵敏的兽药残留检测方法，确保畜产品的质量安全。
畜禽产品兽药残留检测项目
畜禽产品兽药残留检测项目1.引言1.1 概述概述部分的内容应该对畜禽产品兽药残留检测项目进行简要介绍，包括该项目的背景、目的和意义。
畜禽产品兽药残留检测项目是指对养殖中使用的兽药在畜禽产品中残留的情况进行检测的一项工作。
随着畜禽养殖业的发展和畜禽产品市场的扩大，为了保障消费者的食品安全和畜禽产品的质量，对兽药残留的监管和检测变得越来越重要。
兽药残留是指使用兽药治疗或预防畜禽疾病后，兽药在畜禽体内残留的物质。
兽药残留可能对人体健康造成潜在的危害，如引起人体过敏反应、对人体内脏器官产生损害等。
因此，畜禽产品兽药残留检测项目的目的是确保畜禽产品中的兽药残留在规定的安全范围内，从而保障消费者的健康和权益。
该项目的意义在于，通过对兽药残留的监测和检测，可以及时发现和排除养殖中使用兽药不规范的问题，确保畜禽产品的质量安全；同时，也可以建立健全的兽药残留监管体系，提高兽药的合规使用水平和监管能力，推动养殖业的可持续发展。
通过对畜禽产品兽药残留检测项目的研究和应用，可以为相关部门和企业提供科学的监管依据和决策支持，以及为消费者提供安全可信赖的畜禽产品。
因此，畜禽产品兽药残留检测项目对于保障食品安全、促进畜禽养殖行业发展和维护消费者权益具有重要意义。
1.2 文章结构文章结构部分的内容是对整篇文章的结构安排进行介绍和说明。
在本文中，文章结构主要分为引言、正文和结论三个部分。
引言部分作为文章的开篇，主要包括概述、文章结构和目的三个要点。
概述部分介绍了畜禽产品兽药残留检测项目的背景和现状，概括性地引出了本文要讨论的问题。
文章结构部分是对整篇长文的结构安排进行说明。
本文按照引言、正文和结论的顺序进行组织，通过这样的结构安排可以使文章内容具有逻辑性和条理性。
目的部分明确了本文的写作目的，即通过对畜禽产品兽药残留检测项目的介绍和分析，探讨其意义和提出相关建议。
总的来说，本文的结构安排旨在系统地介绍畜禽产品兽药残留检测项目的相关内容，并对其意义和建议进行总结和讨论。
畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定
畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的测定一、实验范围：本标准规定了畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的检测方法；本标准适用于各种畜、禽肉中土霉素、四环素、金霉素残留量的检测；本标准检出限为土霉素0.15mg/kg、四环素0.20mg/kg、金霉素0.65mg/kg；二、实验原理试样经提取、微孔滤膜过滤后，直接进样，用反相色谱分离紫外检测器检测，与标准比较定量，出峰顺序为土霉素、四环素、金霉素。
标准加法定量。
三、实验试剂3.1乙腈（分析纯）3.2 0.01mol/l磷酸二氢钠溶液：称取1.56g磷酸二氢钠溶于蒸馏水中定容到100ml，经微孔滤膜（0.45um）过滤，备用。
3.3 土霉素（OTC）标准溶液：称取土霉素0.0100g用0.1mol/l盐酸溶液溶解并定容10.00ml，此溶液每毫升含土霉素1mg。
3.4四环素（TC）标准溶液：称取四环素0.0100g（精确到0.001g）用0.01mol/l盐酸溶液溶解并定容10.00ml，此溶液每毫升含四环素1mg。
3.5 金霉素（CTC）标准溶液：称取金霉素0.0100g（精确到0.001g ）溶于蒸馏水并定容10.00ml，此溶液每毫升含金霉素1mg。
以上标准品均按1000单位/mg折算，3.3~3.5溶液应于4℃以下保存，可使用一周。
3.6 混合标准溶液：取3.3、3.4标准溶液各1.00ml，取3.5标准溶液2.00ml，置于10ml容量瓶中，加蒸馏水至刻度，此溶液每毫升含土霉素、四环素各0.1mg，金霉素0.2mg，临时现配。
3.7 5%高氯酸溶液四、实验仪器高效液相色谱仪（HPLC）：具紫外检测器五、色谱条件：5.1 柱：ODS-C18（5um）6.2mm×15cm5.2 检测波长：355nm5.3灵敏度：0.002AUFS5.4柱温：室温5.5 流速：1.0ml/min5.6进样量：10ul5.7:流动相：乙腈+0.01mol/l磷酸二氢钠溶液（用30%硝酸溶液调节PH2.5）=35+65，使用前用超声波脱气10min。
农业部公告2003年第236号——动物性食品中兽药残留检测方法
农业部公告2003年第236号——动物性食品中兽药残留检测方法文章属性•【制定机关】农业部(已撤销)•【公布日期】2003.01.22•【文号】农业部公告2003年第236号•【施行日期】2003.01.22•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】畜牧业正文农业部公告（2003年第236号）根据《兽药管理条例》规定，我部组织制定了12种动物性食品中兽药残留检测方法，现予发布，请各地遵照执行。
附件：动物性食品中兽药残留检测方法中华人民共和国农业部二00三年一月二十二日动物源性食品中兽药残留检测方法目录1、动物源食品中卡巴氧标示残留物检测方法--------------高效液相色谱法2、动物源食品中硝基咪唑类药物残留检测方法------------高效液相色谱法3、动物源食品中磺胺二甲嘧啶残留检测方法--------------高效液相色谱法4、动物源食品中拉沙洛西钠残留检测方法----------------高效液相色谱法5、动物源食品中恩诺沙星和环丙沙星残留检测方法--------高效液相色谱法6、动物源食品中恶喹酸和氟甲喹残留检测方法(鸡)--------高效液相色谱法7、动物源食品中恶喹酸和氟甲喹残留检测方法(鱼)--------高效液相色谱法8、动物源食品中苯唑西林残留检测方法(鸡)--------------高效液相色谱法9、动物源食品中青霉素素抗生素残留检测方法(鸡)--------高效液相色谱法10、动物源食品中苯唑西林残留检测方法(牛奶)-----------高效液相色谱法11、动物源食品中氯霉素残留检测方法(牛奶)-------------高效液相色谱法12、动物源食品中青霉素抗生素残留检测方法(牛奶)-------微生物法。
畜禽肉中兽药残留的测定(精)
将固相萃取柱在固相萃取仪上安装好，用5mL的刻度吸管分两次、每次吸取3.0mL共6.0mL
的甲醇活化，再用5mL的刻度吸管分两次、每次吸取3.0mL共6.0mL的水进一步活化；取离心所得上清液5.0mL过柱；用水2.0mL清洗，挤干；用流动相2.0mL洗脱；并用5mL试管收集洗脱液；用2mL的一次性注射器吸取洗脱液，并将收集的洗脱液过0.22μm有机系膜，直接装在样品瓶中，做好标记，供色谱测定。
三、操作步骤
（一）称样
准确称取3份牛肉样品（事先粉碎成肉糜）2±0.05g于50mL具塞离心管中，记录数据。
（二）提取
准确移取20.0mL磷酸盐缓冲液在每份已称量好的牛肉样品中；将离心管置于漩涡振荡器上，中速振荡5min；用空离心管和纯化水在托盘天平上进行配平，然后高速离心（10000r，5min）；将上清液倒入25mL烧杯中，以备过柱用。
四、注意事项
1.计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
2.空白试验：除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。
二、仪器、物品
分析天平，高效液相色谱仪（配荧光检测器），组织匀浆机，旋涡混合器，离心机，固相萃取柱，离心管，移液管。牛肉。
试剂：
1.5.0mol/L氢氧化钠溶液：取氢氧化钠饱和液28mL，加水稀释至100mL。
2.0.03mol/L氢氧化钠溶液：取5.0mol/L氢氧化钠液0.6mL，加水稀释至100mL。
（五）结果计算
式中X——试样中被测兽药残留量，ng/g；
Cs——对照溶液中相应药物的浓度，ng/mL；
A——试样溶液中相应药物的峰面积；
As——对照溶液中相应药物的峰面积；
m——试样质量，g；
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《技能训练库》综合技能实训指导书
实训项目名称畜禽肉中兽药残留的测定学时6学时
实训目的1.熟练掌握高效液相色谱仪的使用方法。
2.学会NY/T 1025-14-2008测定动物性食品中氟喹诺酮类药物残留的方法。
一、原理
用磷酸盐缓冲溶液提取试样中的药物，C18柱净化，流动相洗脱。
以磷酸-乙腈为流动相，
用高效液相色谱-荧光检测法测定，外标法定量。
二、仪器、物品
分析天平，高效液相色谱仪（配荧光检测器），组织匀浆机，旋涡混合器，离心机，固相
萃取柱，离心管，移液管。
牛肉。
试剂：
1.5.0mol/L氢氧化钠溶液：取氢氧化钠饱和液28mL，加水稀释至100mL。
2.0.03mol/L氢氧化钠溶液：取 5.0mol/L氢氧化钠液0.6mL，加水稀释至100mL。
3.0.05mol/L磷酸/三乙胺溶液：取浓磷酸 3.4mL，用水稀释至1000mL。
用三乙胺调pH至2.4。
4.磷酸盐缓冲溶液：取磷酸二氢钾 6.8g，加水溶解稀释至500mL，用
5.0mol/L氢氧化钠调节pH至7.0。
5.达氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星标准工作液：准确量取适量标准储备液，用
乙腈稀释成适宜浓度的标准工作液。
置2～8℃冰箱中保存，有效期1周。
三、操作步骤
（一）称样
准确称取3份牛肉样品（事先粉碎成肉糜）2±0.05g于50mL具塞离心管中，记录数据。
（二）提取
准确移取20.0mL磷酸盐缓冲液在每份已称量好的牛肉样品中；将离心管置于漩涡振荡器
上，中速振荡5min；用空离心管和纯化水在托盘天平上进行配平，然后高速离心（10000r，5min）；将上清液倒入25mL烧杯中，以备过柱用。
（三）净化
将固相萃取柱在固相萃取仪上安装好，用5mL的刻度吸管分两次、每次吸取 3.0mL共6.0mL
的甲醇活化，再用5mL的刻度吸管分两次、每次吸取 3.0mL共6.0mL的水进一步活化；取离心所得上清液 5.0mL过柱；用水 2.0mL清洗，挤干；用流动相 2.0mL洗脱；并用5mL试管收集洗脱液；用2mL的一次性注射器吸取洗脱液，并将收集的洗脱液过0.22μｍ有机系膜，直接装在样品瓶中，做好标记，供色谱测定。
（四）测定
1.色谱条件
⑴色谱柱：C18250mm×4.6nm，粒径5um。
⑵流动相：0.05mol/L磷酸溶液/三乙胺—乙腈（82+18，v/v），使用前经微孔滤膜过滤。
⑶流速：0.8mL/min。
⑷检测波长：激发波长280nm；发射波长450nm。
⑸柱温：室温。
⑹进样量：1uL。
2.色谱分析
由自动进样器分别吸取 1.0uL标准混合溶液和净化后的样品溶液注入色谱仪中，以保留时
间定性，以样品溶液峰面积与标准溶液峰面积比较定量。
（五）结果计算
式中X——试样中被测兽药残留量，ng/g；
Cs——对照溶液中相应药物的浓度，ng/mL；
A——试样溶液中相应药物的峰面积；
As——对照溶液中相应药物的峰面积；
m——试样质量，g；
V1——提取用磷酸盐缓冲溶液的总体积，mL；
V2——过C18固相萃取柱所用备用液体积，mL；
V3——洗脱用流动相体积，mL。
四、注意事项
1.计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
2.空白试验：除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。