SRB细菌培养检测操作规程
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实验室接种。
5， 采样后随即贴上标签，标签上应注明取样日期，时间，地点，取样条件和取样人。 四、 操作步骤
采用二次重复法。
1， 根据水样中 SRB 的估计浓度，可以选择一组合适数目的细菌瓶。首先将培养瓶排成 一组，并依次编上序号。
2， 将细菌瓶的瓶塞保护膜揭去，并用 70%的乙醇溶液消毒。 3， 按照准备工作的第 3 条操作后，用无菌注射器取 1ml 水样，注入到一号瓶内，充分
生长指标 000
菌量 （pcs/ml）
0
生长指标 110
菌量 （pcs/ml）
1.3
生长指标 211
菌量 （pcs/ml）
13.0
001
0.50
111
2.0
212
20.0
010
0.5
120
2.0
220
25.0
011
0.9
121
3.0
221
70.0
020
0.9
200
2.5
222
110.0
100
0.6
201
震荡。
4， 用另一支无菌注射器从一号瓶内取 1ml 水样，注入到二号瓶内，充分震荡。 5， 再更换一支无菌注射器，从二号瓶内取 1ml 水样，注入到三号瓶内，充分震荡。 6， 依次类推，一直稀释到最后一瓶为止。根据细菌含量确定稀释瓶数，一般稀释到 7
号瓶。
7， 把上述测试瓶放入到恒温培养箱中，培养温度控制在现场水温正负 1℃范围内，两周 后读数。
能源发展采油工程技术服务公司 ISO9001 质量管理体系
化学技术服务操作规程汇编
SRB 细菌培养检测操作规程
编号 批准人Βιβλιοθήκη Baidu
发布日期 生效日期
页数
第1页共2页
一、 检测原理；
SRB 细菌培养检测操作规程
二次重复法
采用绝种稀释法，即将预测定的水样用无菌注射器逐级注射到测试瓶中，进行接种稀释，
在实验室中进行培养。根据细菌瓶阳性反应和稀释的倍数，计算出水样中细菌的数目。
五、 细菌生长的鉴别
瓶中液体变黑或有黑色沉淀，即表示有硫酸盐还原菌。
能源发展采油工程技术服务公司 ISO9001 质量管理体系
化学技术服务操作规程汇编
SRB 细菌培养检测操作规程
编号 批准人
发布日期 生效日期
页数
第2页共2页
六、 菌量的计算 根据下列表可计算出细菌数目的多少:
表一、细菌菌量计数示例表：
二、 检测试剂和器材
1，SRB（硫酸盐还原菌）测试瓶 2，1ml 无菌注射器 3，恒温细菌培养箱 三、 取样前准备工作：
1， 应确定采集的水样应具有代表性； 2， 取样前应接好接头和胶头管线，以便于取样端和系统的连接； 3， 取样时将取样阀门打开，以 5-6L/min 的流速畅流 3min； 4， 应在现场接种，同时测定水温，室内培养。若无测试瓶，应现场取样，24 小时内送
5.0
101
1.2
210
6.0
示例
1 2 3 4 5
1 号瓶 ＋－ ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋
细菌观察
2 号瓶 3 号瓶 4 号瓶
＋－
――
――
――
――
――
＋－
――
――
＋＋
＋＋
＋－
＋＋
＋＋
＋＋
5 号瓶 ―― ―― ―― ―― ＋－
生长指标
110 200 210 221×101 221×102
注：＋表示细菌生长，－表示细菌未生长。 细菌的查表只与重复度有关，菌量数由表二中查出近似值，在乘以相关系数。 表二、细菌菌量计数表
5， 采样后随即贴上标签，标签上应注明取样日期，时间，地点，取样条件和取样人。 四、 操作步骤
采用二次重复法。
1， 根据水样中 SRB 的估计浓度，可以选择一组合适数目的细菌瓶。首先将培养瓶排成 一组，并依次编上序号。
2， 将细菌瓶的瓶塞保护膜揭去，并用 70%的乙醇溶液消毒。 3， 按照准备工作的第 3 条操作后，用无菌注射器取 1ml 水样，注入到一号瓶内，充分
生长指标 000
菌量 （pcs/ml）
0
生长指标 110
菌量 （pcs/ml）
1.3
生长指标 211
菌量 （pcs/ml）
13.0
001
0.50
111
2.0
212
20.0
010
0.5
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2.0
220
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震荡。
4， 用另一支无菌注射器从一号瓶内取 1ml 水样，注入到二号瓶内，充分震荡。 5， 再更换一支无菌注射器，从二号瓶内取 1ml 水样，注入到三号瓶内，充分震荡。 6， 依次类推，一直稀释到最后一瓶为止。根据细菌含量确定稀释瓶数，一般稀释到 7
号瓶。
7， 把上述测试瓶放入到恒温培养箱中，培养温度控制在现场水温正负 1℃范围内，两周 后读数。
能源发展采油工程技术服务公司 ISO9001 质量管理体系
化学技术服务操作规程汇编
SRB 细菌培养检测操作规程
编号 批准人Βιβλιοθήκη Baidu
发布日期 生效日期
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第1页共2页
一、 检测原理；
SRB 细菌培养检测操作规程
二次重复法
采用绝种稀释法，即将预测定的水样用无菌注射器逐级注射到测试瓶中，进行接种稀释，
在实验室中进行培养。根据细菌瓶阳性反应和稀释的倍数，计算出水样中细菌的数目。
五、 细菌生长的鉴别
瓶中液体变黑或有黑色沉淀，即表示有硫酸盐还原菌。
能源发展采油工程技术服务公司 ISO9001 质量管理体系
化学技术服务操作规程汇编
SRB 细菌培养检测操作规程
编号 批准人
发布日期 生效日期
页数
第2页共2页
六、 菌量的计算 根据下列表可计算出细菌数目的多少:
表一、细菌菌量计数示例表：
二、 检测试剂和器材
1，SRB（硫酸盐还原菌）测试瓶 2，1ml 无菌注射器 3，恒温细菌培养箱 三、 取样前准备工作：
1， 应确定采集的水样应具有代表性； 2， 取样前应接好接头和胶头管线，以便于取样端和系统的连接； 3， 取样时将取样阀门打开，以 5-6L/min 的流速畅流 3min； 4， 应在现场接种，同时测定水温，室内培养。若无测试瓶，应现场取样，24 小时内送
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示例
1 2 3 4 5
1 号瓶 ＋－ ＋＋ ＋＋ ＋＋ ＋＋
细菌观察
2 号瓶 3 号瓶 4 号瓶
＋－
――
――
――
――
――
＋－
――
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＋＋
＋＋
＋－
＋＋
＋＋
＋＋
5 号瓶 ―― ―― ―― ―― ＋－
生长指标
110 200 210 221×101 221×102
注：＋表示细菌生长，－表示细菌未生长。 细菌的查表只与重复度有关，菌量数由表二中查出近似值，在乘以相关系数。 表二、细菌菌量计数表