免疫学实验设计
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放在载玻片上推成血膜干燥。用瑞特氏染 液染色，镜检。
注：淋巴细胞转化率=转化淋巴细胞数/（转化数+未转化数） 转化率的正常值约为60-70%
细胞类别 形态特征
转化的淋巴细胞
胞体大小（直径）
胞核
位置
染色质
核仁百度文库
胞浆
有丝分裂 量
嗜碱性 空泡
淋巴母细胞
10～20µm或更 大
过渡型细 胞
12～16µm
多偏于一侧， 中央或稍
免疫学：创新实验设计
T淋巴细胞转化试验
小组成员：王志高 李河川 李世学 刘有为 李天才 孟晓光
实验原理：
正常机体的T淋巴细胞在体外培养过程中受 到特异性抗原或有丝分裂原刺激，可转化 为淋巴母细胞。细胞免疫缺陷时，患恶性 肿瘤或某些其他疾病时，转化率显然降低。 目前最常用植物血凝素（PHA）作为分裂原 检测受试者的淋巴细胞转化率，从而判定 其细胞免疫功能。
• 2 取细胞悬液0.6毫升加入含有2.4毫升199培养液的培养
瓶中。
• 3 按每毫升30微克PHA加入PHA。 • 4 37℃ 67-72h，培养过程中每天翻动培养瓶1-2次。
实验步骤：
• 5 培养后震动培养瓶，将细胞重新悬起，然
后移入试管中。
• 6 1000rpm离心5分钟。 • 7 尽量去除上清液，将沉淀物混匀，取一滴
少数位于中央
偏
疏松，呈粒状 较疏松
清晰，可见 1～3个
有或无
有时可见
无
丰富，核之一 侧较宽广
稍宽
++++ 常可见
+++～++ 有或无
未转化的淋巴细胞
表3-5
转化淋巴细胞的判断标准
6～8µm
多位于中央 致密团聚
无 无
较少，常呈一窄环 ++～+ 无
伪足
常可见
有或无
无
素100单位每毫升 链霉素100微克每毫升）
• PHA（每毫升含100单位） • 无菌注射器及枪头 试管 吸管等
实验步骤：
• 1 采肝素抗凝血1-2毫升（1毫升血中加肝素20单位）充分
混匀。37℃静置1-2h。红细胞沉淀后，吸取血浆层并捎
带些红细胞，移入另一无菌试管中。计算淋巴细胞数并离 心10分钟，弃上清液。用199培养液将沉淀的淋巴细胞配 成1*107每毫升细胞悬液。
淋巴母细胞的主要特点：
• （1）形态学改变:细胞体积明显增大,为成熟淋巴
细胞3-4倍。核膜清晰,核染色质疏松呈网状。核 内见明显核仁1-4个。胞浆丰富,嗜碱性,有伪足样 突出。胞浆内有时可见小空泡。
• （2）细胞内核酸和蛋白质合成增加。 • （3）细胞代谢功能旺盛。
实验材料：
• 肝素（每毫升含100单位） • 199培养液（内含20% 灭活小牛血清 青霉
注：淋巴细胞转化率=转化淋巴细胞数/（转化数+未转化数） 转化率的正常值约为60-70%
细胞类别 形态特征
转化的淋巴细胞
胞体大小（直径）
胞核
位置
染色质
核仁百度文库
胞浆
有丝分裂 量
嗜碱性 空泡
淋巴母细胞
10～20µm或更 大
过渡型细 胞
12～16µm
多偏于一侧， 中央或稍
免疫学：创新实验设计
T淋巴细胞转化试验
小组成员：王志高 李河川 李世学 刘有为 李天才 孟晓光
实验原理：
正常机体的T淋巴细胞在体外培养过程中受 到特异性抗原或有丝分裂原刺激，可转化 为淋巴母细胞。细胞免疫缺陷时，患恶性 肿瘤或某些其他疾病时，转化率显然降低。 目前最常用植物血凝素（PHA）作为分裂原 检测受试者的淋巴细胞转化率，从而判定 其细胞免疫功能。
• 2 取细胞悬液0.6毫升加入含有2.4毫升199培养液的培养
瓶中。
• 3 按每毫升30微克PHA加入PHA。 • 4 37℃ 67-72h，培养过程中每天翻动培养瓶1-2次。
实验步骤：
• 5 培养后震动培养瓶，将细胞重新悬起，然
后移入试管中。
• 6 1000rpm离心5分钟。 • 7 尽量去除上清液，将沉淀物混匀，取一滴
少数位于中央
偏
疏松，呈粒状 较疏松
清晰，可见 1～3个
有或无
有时可见
无
丰富，核之一 侧较宽广
稍宽
++++ 常可见
+++～++ 有或无
未转化的淋巴细胞
表3-5
转化淋巴细胞的判断标准
6～8µm
多位于中央 致密团聚
无 无
较少，常呈一窄环 ++～+ 无
伪足
常可见
有或无
无
素100单位每毫升 链霉素100微克每毫升）
• PHA（每毫升含100单位） • 无菌注射器及枪头 试管 吸管等
实验步骤：
• 1 采肝素抗凝血1-2毫升（1毫升血中加肝素20单位）充分
混匀。37℃静置1-2h。红细胞沉淀后，吸取血浆层并捎
带些红细胞，移入另一无菌试管中。计算淋巴细胞数并离 心10分钟，弃上清液。用199培养液将沉淀的淋巴细胞配 成1*107每毫升细胞悬液。
淋巴母细胞的主要特点：
• （1）形态学改变:细胞体积明显增大,为成熟淋巴
细胞3-4倍。核膜清晰,核染色质疏松呈网状。核 内见明显核仁1-4个。胞浆丰富,嗜碱性,有伪足样 突出。胞浆内有时可见小空泡。
• （2）细胞内核酸和蛋白质合成增加。 • （3）细胞代谢功能旺盛。
实验材料：
• 肝素（每毫升含100单位） • 199培养液（内含20% 灭活小牛血清 青霉