涂片找抗酸杆菌的标准操作规程

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涂片找抗酸杆菌的标准操作规程生效日期：2012年11月01日编制人：审核人：批准人：

目录

1：目录 (1)

2：修改记录 (2)

3：员工培训记录 (3)

4：年度审核记录 (3)

5：涂片找抗酸杆菌的标准操作规程 (4)

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修改记录

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员工培训记录

签名日期签名日期

年度审核记录

编制人审核人批准人签名及日期：

签名及日期：

签名及日期：

签名及日期：

签名及日期：

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涂片找抗酸杆菌的标准操作规程

1 检验目的

检验样本中是否含有抗酸杆菌，为临床提供诊断依据。

2 原理

结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色，但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色，然后再以酸及乙醇加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色（红色）。3标本要求

（1）标本类型：病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等

（2）标本采集：见标本采集手册（一般须得深咳痰，其它无特殊要求。）（3）标本储存和运输：可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环境。

4 容器和添加剂类型

痰盒、试管等

6 试剂

（1）试剂名称：结核菌染色液

（2）试剂生产厂家：贝索

（3）包装规格：4X250ML

（4）试剂盒组成：

试剂1：石碳酸复红液

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试剂2：酸性酒精溶液

试剂3：亚甲基蓝溶液

7仪器设备：

奥林巴斯CX-21显微镜

8 校准程序

送无锡市计量质量检测研究所校准

9操作步骤

1、取待检标本1-2ml置于玻璃管中，加入%NAOH溶液。

2、将玻璃试管放入试管架并用水煮沸灭菌30min。

3、等冷却经4000转/min离心20分钟后取沉淀涂片检查。

4、涂片经火焰固定，加石碳酸复红液染色5分钟或更久（需加温）。

5、水洗（之后尽可能将水沥干）。

6、加酸性酒精溶液，脱色1-2分钟。

7、水洗（假如标本面还可以看到残存红色时，再加酸性酒精溶液脱掉红色为止）。

8、加亚甲基蓝溶液染色30秒，水洗，干燥。

9、镜检。

10质量控制：

参加我科质量管理组的质量控制活动。

11干扰和交叉反应

麻风菌可能对检验结果产生影响。

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12生物参考区间

涂片未见抗酸杆菌

13患者检验结果的可报告区间

涂片未见抗酸杆菌/涂片见细长、红色抗酸杆菌

阴性：全视野未找到抗酸杆菌

＋：全视野发现3－9个抗酸杆菌

＋＋：全视野发现10－99个抗酸杆菌

＋＋＋：每视野发现1－9个抗酸杆菌

＋＋＋＋：每视野发现10个以上抗酸杆菌

（全视野发现1－2个抗酸杆菌时，报告抗酸杆菌个数）

14临床意义：

结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素，其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力，细菌成分与其代谢产物引起免疫反应（Ⅳ型）导致一系列组织学上的意义。

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