结核分枝杆菌与实验室生物安全

2017/10/7
10
•
4. 球菌型（L型） 结核分枝杆菌在体内外 受物理、化学、免疫等因素的影响，维持菌 体固有形态的细胞壁缺损或丧失，产生细胞 壁缺陷型。细胞壁缺陷型细菌是1935年 Kilienberger在英国Lister医学研究院研究念珠 状链杆菌时首先发现的，故以Lister医学研究 院的第一个字母，将细胞壁缺陷型细菌命名 为L型菌。
2017/10/7
18
•
苯酚主要通过破坏菌细胞膜而致细胞质内容 物漏出，使菌体蛋白质变性、凝固，抑制菌体 脱氢酶和氧化酶等酶系统杀死结核分枝杆菌。 2%苯酚 5分钟、5%苯酚1分钟能杀死结核分枝 杆菌培养物。5%苯酚与痰液等量混合，24小时 才能杀死结核分枝杆菌。煤酚皂溶液作用机制 与苯酚相似，0.5%煤酚皂60分钟，1%煤酚皂45 分钟，2%煤酚皂10分钟，5%煤酚皂5分钟，即 能杀死结核分枝杆菌培养物。5%～10%煤酚皂 等量混入痰标本，12小时可杀灭结核分枝杆菌。
2017/10/7
8
•
2. 滤过型 早在1901年，Foutes在检查细 菌滤器滤过的结核分枝杆菌培养滤液时， 在电子显微镜下观察到球状微粒体。1991 年，Khomeko在豚鼠损坏性肺结核模型中 证实了滤过型的存在。此球状微粒体可通 过细菌滤膜，称为滤过型 。
2017/10/7
9
•
3. 颗粒型 1907年莫赫(Much)在结核性冷 性脓肿、浆液性渗出液、干酪性淋巴结等 脓液中观察到革兰染色阳性颗粒，称为莫 赫颗粒。莫赫颗粒的重要意义在于这些颗 粒型体仍有生机与活力，在适宜的营养条 件下，可重新获得增殖，发育生长出典型 结核分枝杆菌。
2017/10/7
3
结核病的疫情
感染人数 约为20亿 新发活动性肺结核病人 890万(141/10万) 新发涂阳肺结核病人 390万 结核病发病率每年增加1% 估计患病人数为1550万例（患病率为246/10万） 其中包括HIV+TB38万例 死于结核病为180万例，结核病死亡率为29/10 万,其中包括HIV+TB死亡27万例
2017/10/7
14
•
1. 物理因素影响 结核分枝杆菌生存能 力较强，在温室和阴暗处干燥痰内可以存 活6～8个月，粘附在飞扬的空气尘埃中可 保持传染性8～10天。结核分枝杆菌一般 较耐低温，在-6～8℃能存活4～5年。
2017/10/7
15
•
干热对结核分枝杆菌杀伤力弱，痰内 结核分枝杆菌在100℃下需要4～5小时被 杀灭。湿热对结核分枝杆菌杀伤力强， 在60℃30分钟、70℃10分钟、80℃5分钟 和90℃1分钟可将其杀死，因此煮沸与高 压蒸气消毒是最有效的方法之一。
2017/10/7
11
结核分枝杆菌的染色特性
• 结核分枝杆菌本身无颜色，观察结核 分枝杆菌必须染色后进行。结核分枝杆 菌革兰染色阳性，但革兰染色不易着色。 经苯胺染料着色后，能抵抗酸和酸乙醇 脱色，此种特性称为抗酸性。Z-N染色 法为最常用的一种抗酸染色方法，经此 法染色后，分枝杆菌，包括结核分枝杆 菌呈红色，而标本中其他细菌、细胞、 杂质等均呈蓝色
5
结核分枝杆菌的形态
• 结核分枝杆菌菌体具有多形态特征， 除正常典型形态外，受不良生长条件 的影响。如物理因素、化学因素，特 别是药物因素，而呈现异常变化，其 各种形态可归纳为杆菌型（基本形 态）、滤过型、颗粒型和球菌型（L型） 4种类型。
2017/10/7
6
2017/10/7
7
•
1. 杆菌型（基本形态）结核分枝杆菌正 常典型的形态是直或稍弯曲、两端钝圆的 杆菌。菌体 长1～4μm，宽0.3～0.6μm， 无芽胞、无荚膜、无鞭毛，生长发育期间 有分枝生长倾向。
2017/10/7
17
•
2. 化学因素的影响 化学消毒剂的种类很 多，其杀菌的机制因化学药物种类不同而 异。乙醇使菌细胞蛋白质变性、凝固而产 生杀菌作用。结核分枝杆菌直接接触70%～ 75%乙醇5～30分钟可被杀死，因此可用于 皮肤消毒。但由于乙醇能凝固蛋白，使痰 表面形成一层把菌体包裹起来的膜，短时 间内不能杀死细菌，故乙醇不能用于痰的 消毒。
2017/10/7
16
•
结核分枝杆菌对光线和射线敏感，在太阳光 直射下2～7小时死亡。病人用过的物品在强阳 光下直晒半日，基本可达到消毒的目的。10～ 1mg/ml菌悬液，液层厚度3mm，用10W紫外线 灯在距离确 0.5m处持续照射3分钟，在距离1m 处持续照射 10分钟，经培养无细菌生长。但紫 外线穿透力弱，难以透入固体物质内部和液体 深层，因此紫外线通常用于空气和物体表面消 毒。
12
2017/10/7
结核分枝杆菌的生长特性
• 结核分枝杆菌生长缓慢，繁殖一代在 人工培养基内约需要15～20小时，在静 脉感染未经免疫小鼠肺中约需要15小时， 在Leabharlann Baidu噬细胞内约需要15～20小时，在家 兔角膜中约需要20～22小时。
2017/10/7
13
结核分枝杆菌的抵抗力
• 结核分枝杆菌因细胞壁含大量类脂质， 尤其是腊样物质，具有疏水性，对物理 和化学因素的作用均较一般致病菌抵抗 力强。
2017/10/7 4
结核病病原学
• 结核分枝杆菌是引起人类结核病的主要 病原体。1882年由德国医生Koch发现。 在微生物分类中，结核分枝杆菌属于厚 壁门、裂殖菌纲、放线菌目、分枝杆菌 科、分枝杆菌属。分枝杆菌复合群共包 括人型、牛型、非洲型和田鼠型，而人 型结核分枝杆菌是人类主要的致病菌。
2017/10/7
结核分枝杆菌与实验室生物安全
• • • • • • • •
结核病的定义 结核病的疫情 结核病病原学 结核病的流行 结核病实验室生物安全 结核病实验室安全防护 结核病实验室废物处理 结核病职业暴露
2017/10/7
2
• 结核病是由结核分枝杆菌（偶尔可由牛型或 非洲型分枝杆菌）引起的一种细菌性疾病。 结核病可累及全身各个器官，但以肺结核最 为常见。该病具有传染性强，散播面广，不 分地域均可发生。结核病可由呼吸道、消化 道、皮肤等途径感染，但其主要传播途径是 以空气为传播因子的呼吸道传染，而排菌的 肺结核病人传染性更大，是传播感染的主要 传染源。