肥达试验

肥达实验

原理：用已知的杆菌O、H抗原和甲、乙型副伤寒杆菌H抗原,与待测血清作试管或微孔板凝集实验,以测定血清中无相应抗体存在,作为伤寒、副伤寒诊断的参考。

步骤：

1、取两块洗净晾干的20孔凹窝塑料板，分成4组，2排/每组用蜡笔做

好标记。用微量移液器于每组的1—8孔内加入生理盐水，然后在每组的第1孔内加入已经稀释成1：10的病人血清，吹打混匀后吸出至第2孔，在吹打混匀后吸入至第3孔，如此稀释到第7孔，吸出弃去，第8孔不加病人血清，作为对照孔。同法滴2、3、4组一次作对倍稀释。

2、于第一组各孔内加入伤寒杆菌“H”液，同法于第2、

3、4组各孔依

次加入伤寒“O”、副伤寒甲、乙菌液;，

3、加完菌液，振荡摇匀，置56℃温箱30—60min，取出观察结果，记

录凝集价，并做出判断。

结果判断

以能出现++凝集现象的血清最高稀释倍数为该血清的凝集效价。

++++ 完全凝集，上层液体澄清，细菌凝集块全部沉于管底

+++ 大部分凝集，上层液轻度混浊，凝集块沉于官底

++ 部分凝集，管底仅有少量凝集块上层液体较澄清。，

+ 小部分凝集，管底有小量凝集块，上层液体较混浊。

—无凝集现象，管底液体呈均匀混浊。

结果：

1 2 3 4 5 6 7 8 血清最低稀释

度1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560 对照伤寒“H”++++ ++++ +++ ++ + - - - 伤寒“O”++++ ++++ +++ ++ ++ + - - 副伤寒甲- - - - - - - - 副伤寒乙- - - - - - - -