肥达检测步骤

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肥达结果判断:
++++ 上清完全透明，细菌全部形成凝块。 +++ 大部分细菌形成凝块，上清较透明。 ++ 约50%细菌形成明显可见的凝集块，上清中度混浊。 + 仅有小部分细菌形成小凝集块，上清较混浊。 － 液体均匀混浊，无凝集块（有部分菌体因静置而沉于管底， 振摇后细菌如云烟状升起，但很快消失。 以呈现“++”凝集的血清最高稀释倍数作为该血清的凝集效价。
抗体检测－肥达试验
步 骤： 管外稀释血清 分装已稀释血清 稀释抗原（ TO，TH ， A ， B ， C ） 抗原＋等量已倍比稀释血清（0.5mL＋0.5mL） 摇匀 ， 37℃过夜 ℃ 结果观察 ， 记录
1
待检血清稀释： 待检血清稀释：
1∶20 ∶
1∶40 ∶
1∶80 ∶
1∶160 ∶
1∶320 ∶
1∶40 ∶
1∶20
1∶20 ∶
相应稀释度
3
0 0 0 0 0 0
H H H H H H
A A A A A A
B B B B B B
C C C C C C
阴性对照(N.S) 阴性对照
1∶640 1∶1280 ∶ ∶ 1∶320 1∶640 ∶ ∶ 1∶160 1∶320 ∶ ∶ 1∶80 1∶160 ∶ ∶ 1∶40 1∶80 ∶ ∶
1∶640 ∶
0.3mL 血清 5.7ml N.S
取3mL前1管稀释液 加入下1管3mLN.S中
2
0.5mL血清稀释液 血清稀释液/ 分装待检血清稀释液 0.5mL血清稀释液/每管
阴性对照 (N.S)
1∶640 ∶ 1∶320 ∶
1∶640 1∶320 1∶160 1∶80 1∶40
1∶160 ∶ 1∶80 ∶
1∶20 1∶40 ∶ ∶
T0
TH
A
B
C
加0.5mL 相应抗原
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结果观察和记录
从温箱或水浴中轻轻取出试管架，不要振动试管。观察 结果时，取出试管，观察试管中上清液的透明度和管底 凝集物的多少及性状，然后再轻摇试管使凝块从管底升 起，记录液体的清浊，凝块的大小。 H凝集呈絮状，以疏松之团块沉于管底，轻摇试管即能 荡起，而且极易散开；O凝集呈颗粒状，呈致密凝块沉 于管底，轻摇试管不易荡起，而且不易散开。
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6
可用已稀释的不同浓度的菌液（肥达工作浓度菌液） 做上清液参照： 无菌盐水相当++++ 25%菌液相当+++ 50%菌液相当++ 75%菌液相当+ 100%菌液相当7
血清学结果报告
肥达试验：报告被检血清对伤寒沙门菌、甲型副伤寒 沙门菌(乙、丙型副伤寒沙门菌)抗原的凝集度。如果 第1管无凝集，报告“<1∶40”；第6管呈“++”或更强 ∶ 凝集，报告“≥1∶1280”。 ∶ 其他血清学报告：按试剂盒说明书要求进行报告。