临床病原学检测与标本的正确留取
临床微生物标本的采集与送检
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骨髓标本的微生物学检查
采集部位：骨髓穿刺法从髂骨采集标本。 采集时间：在用药前、发热初期或高热期
当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率远 高于血液培养
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二、尿液标本的采集
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尿液标本采集方法
4 、小儿收集包：对于无控制能力的小儿可应用收集 包收集尿液，这种装置由于很难避免会阴部菌群 污染产生假阳性，所以只有在检验结果为阴性时 才有意义。如果检验结果为阳性，应结合临床进 行分析，必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法 留取尿液进行复查。
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尿液标本采集方法
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粪便标本的采集容器
一次性无菌便盒
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粪便标本采集时间
1．采样原则 腹泻病人应在急性期采集 （3天以内），以提高检出率，亦最好在用 药之前。 2．沙门菌感染 肠热症在2周以后；胃肠炎 病人在急性期，早期采集新鲜粪便
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粪便标本采集方法
自然排便采集法 自然排便后，挑取其脓血、粘液部分2-3g，液 状粪便取絮状物2-3ml，盛于灭菌容器内或保存液中送检
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尿液标本的送检指征
1 有典型的尿路感染症状； 2 肉眼脓尿或血尿； 3 尿常规检查表现为白细胞和/或亚硝酸盐阳性； 4 不明原因的发热，无其他局部症状； 5 留置导尿管的病人出现发热； 6 膀胱排空功能受损； 7 泌尿系统疾病手术前。
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21
尿液标本采集容器
无菌试管或无菌尿液标本留取容 器
常用临床病原学检测
药物 AMP AMC TZP KZ COX CTX FEP ATM ETP FM
MIC(µg/ml) 敏感性
药物
MIC(µg/ml)
≥32
R
IPM
≤1
≥32
R
AK
16
≥128
R
GN
4
≥64
LOREM
R
IPSUM
DOTOLBOR
头孢泊肟≤17mm（或MIC≥8ug/ml)
确 头孢他啶≤22mm（或MIC≥2ug/ml) 证 头孢噻肟≤27mm（或MIC≥2ug/ml)
头孢曲松≤25mm（或MIC≥2ug/ml) 氨曲南≤27mm（或MIC≥2ug/ml)
头孢他啶/克拉 维酸-头孢他啶
和 头孢噻肟/克拉 维酸-头孢噻肟
初 头孢泊肟≤22mm（或MIC≥8ug/ml)
氨苄，美洛，替卡
• 头孢噻吩 肠杆菌科
拉定，氨苄，克罗
• 万古霉素s 所有
替考拉宁s
• 奈啶酸 肠杆菌科
所有FQs
报告结果方式
✓ 敏感（S）
▫ 用常规用量治疗有效 ▫ 常规用药时达到的平均血药浓度超过细菌的MIC
5倍以上。
✓ 耐药（R）
▫ 用常规用量治疗不能抑制细菌的生长 ▫ MIC高于药物在血、体液中可能达到的浓度
✓ MRSA对当前所有使用的b-内酰胺类药物均耐药（除具 有抗MRSA活性的新的头孢菌素外，如：头孢洛林）。
✓ 值得注意的是：由于罕见非mecA介导的苯唑西林耐药 机制，即mecA阴性但苯唑西林MIC是耐药（ mecA ≥4 µg/ml）的菌株，应报告苯唑西林耐药。
医院感染病例病原学检测制度
医院感染病例病原学检测制度
一、对医院感染病原体分布及其抗感染药物的敏感性进行监测。
二、首诊医生发现医院感染病例，原则在未使用抗生素前，护士积极配合医师做好细菌培养标本的留取和送检工作。
三、医院感染病例及时送病原学检查。
四、正确掌握细菌培养标本的采集，标本采集后必须及时送检。
五、微生物室发现有同种菌感染达3例以上时，应及时通知感染管理科并协助进行病原学检测。
六、微生物室定期为临床提供耐药菌的趋势与抗菌药物敏感性报告。
医院常用化验标本正确采集与注意事项
痰液标本留取要求及注意事项
❖取清晨第一口痰为宜，留痰时先漱口， 后用力咯出气管深处痰液，入专用容器 内，送检（注意不要将唾液误为痰）
❖细菌培养时，用无菌容器留取后及时送 检
❖漂浮或浓集结核杆菌检查时，需留12～ 24小时痰液送检（确诊痰液用纸包裹焚 烧）
❖做24小时痰量和分层检查时，将痰吐在 专用盛器内，加防腐剂
尿常规检查注意事项
❖ 尿细菌培养留取中段尿液的方法 *男病人
1、用清水及肥皂清洁阴茎 2、用1：1000的新洁尔灭溶液泡洗阴茎或擦试 3、留中段尿液
*女病人
1、用清水及肥皂清洁外阴 2、用1：1000的新洁尔灭把手消毒 3、用1：1O00新洁尔灭棉球消毒尿道口 4、留中段尿液
*危重病人的尿培养，用导尿方法采集尿液， 严格执行无菌操作，避免引起的泌尿系感染
医院常用化验标本 正确采集与注意事项
常规化验意义
❖ 医院实验室较为普及、方便、实用、快速 的检验内容
❖ 检验医学快速发展和检验方法改进，对检 测标本的留取与收集有较高要求
❖ 医院各种标本采集和化验是诊断疾病的重 要手段之一
❖ 化验结果的正确与否直接影响疾病的诊断 、治疗及抢救
❖ 重视落实化验标本的正确采集与注意事项
血液标本采集时注意事项
❖ 止血和血栓检测等项目，需用抗凝静脉血血浆，采血 后轻轻摇匀，避免震荡
❖ 血清检测项目（如血糖，血脂等）受饮食及昼夜因素 影响，以清晨空腹血标本为宜
❖ 血清酶活性测定，如ACP活性等，在血中衰变较快， 0~4℃贮存活性减弱也不一，项目检测须及时而快速 送检
❖ 肌酸激酶等，受运动等因素影响较大，避免活动后采 血
❖ 采血时，部位应无冻疮、炎症、水肿、破损。对烧伤 病人，可选择皮肤完整处采血
标本采集、运送标准操作规程
4 7
血培养 淋球菌培养
立即 30分钟
1小时 30分钟
阳性结果3天以上，阴性结果7天 2天
8
真菌培养
1小时
2小时
3天后
细菌室项目检验周期表
9 解脲、人型支原体培养及药敏、衣原体培 养 1小时 2小时 2天后
11
一般涂片革兰氏染色
1小时
2小时
5小时
当天下午
12
涂片找抗酸杆菌
1小时
2小时
5小时
当天下午
Байду номын сангаас
查询申请医师，补足标本信息。
仅有申请单而无标本或无菌容器内无标本
与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本
标本外漏及明显受污染（如开塞） 标本收集不符合采集要求 样本混入消毒液 或防腐剂
与原送检部门联系，退回申请单，建议重送标本。 退回申请单，及时通知临床，告知正确收集方法，要求重送标本 退回申请单，及时通知临床，建议重送标本。
13
新型隐球菌墨汁染色
1小时
1小时
5小时
当天下午
• 注： 1. 细菌室正常上班时间为周一至周六
全天、周日上午；其他时间（包括中午、 夜班、周日下午、）常规培养请送急诊化 验室。 • 2．各类血清学检测周一至周五做；支原体、 衣原体检查周一至周六上午做，其余时间 标本一律不接收。 • 3． 空气培养、物表监测周六、周日不做， 于周一至周五打电话给细菌室告之数量。
【标准操作程序】
• 3. 粪便样本
养：
• 5.1采集指征： • 当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培
粪便涂片镜检白细胞＞5/HP 体温＞38.5℃ 重症腹泻 血便或便中有脓液 未经抗菌药物治疗的持续性腹泻病人
临床微生物标本规范化采集和送检中国专家共识
临床微生物标本规范化采集和送检中国专家共识牵头专家：胡必杰、倪语星、马小军、肖永红编写专家（按首字母拼音排序）：蔡绍曦、陈佰义、褚云卓、高晓东、顾兵、黄勋、李光辉、李卫光、刘思远、刘运喜、陆群、卢晓阳、吕媛、孙自镛、索瑶、汤灵玲、王辉、王明贵、王选锭、吴安华、徐英春、颜青、俞云松、战榕、张卫红、宗志勇中华预防医学会医院感染控制分会2017年1月目录总则 (3)第一节：血培养标本 (5)第二节：呼吸道标本 (8)第三节：尿液标本 (13)第四节：其它无菌体液标本 (15)第五节：胃肠道标本： (20)第六节：生殖道标本 (24)第七节：皮肤、软组织标本 (27)总则感染性疾病的正确诊治需要以正确的病原学检测作为指导，而正确的病原学检测其前提是采集和送检合格标本。
因此，必须规范微生物标本的采集和运送，避免因标本的不合格，产生错误的病原学检测结果而误导临床治疗。
一、微生物标本采集的基本原则1.在抗菌药物使用前采集标本。
临床疑似感染的患者，必须先采集微生物标本送检，再使用抗菌药物进行治疗。
2.无菌部位的标本更具有临床价值，有菌部位采集的标本需要清除正常菌群和定植细菌才有意义。
应尽量送检无菌部位的标本，尤其是血培养。
有菌部位标本应避免“正常菌群导致标本的污染”。
人体很多部位，如下呼吸道（痰液标本）、鼻窦、皮肤伤口等处的正常菌群极易污染标本。
因此，从这些部位采集标本，要尽可能降低这些部位正常菌群或定植细菌对标本污染的可能性。
有菌部位的标本不是最理想的微生物标本。
3.标本的标签和申请单信息要完整。
对于每一份标本，实验室都需要了解该患者和标本的详细信息以及医生的送检目的。
事实上，实验室对于标本所做的所有分析，都必须基于这些信息。
申请单的内容应包括：1）患者信息：姓名、性别、年龄、患者唯一编码（如住院号）等；2）申请科室或病区、申请医生；3）标本信息：标本类型、采集日期及时间、采集部位、采集方法；4）临床诊断；5）检测目的，尤其是一些特殊检测项目；6）是否已使用抗菌药物。
临床微生物标本采集规范
新生儿及对碘过敏的患者，只能用 75%酒精消毒60s，待穿刺部位酒精挥发干 燥后穿刺采血。
2.培养瓶消毒程序： （1）用75%酒精（不要用碘液消毒）消毒 血培养瓶橡皮塞，作用60秒。 （2）用无菌纱布或无菌棉签擦去橡皮塞 表面剩余的酒精，然后注入血液。
❖ 2. 有肉眼脓尿或血尿； ❖ 3. 尿常规检查白细胞或亚硝酸盐阳性； ❖ 4. 有不明原因的发热，无其他局部症状； ❖ 5. 留置导尿管的患者出现发热； ❖ 6. 膀胱排空功能受损； ❖ 7. 泌尿系统疾病手术前；
（二）尿培养标本采集方法
标本采集应在使用抗生素之前，避免消毒剂污染标本。
❖ 清洁中段尿 留取清晨清洁中段尿标本，先用肥皂 水仔细清洗会阴部，再用清水冲洗尿道口周围；将 前段尿排去，留取中段尿10ml左右于无菌容器内， 立即加盖送检，2h内接种。该方法简单、易行，是 最常用的尿标本收集方法，但是容易受到皮肤细菌 污染。
要求： ✓ 严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手按
压静脉，除非带有无菌手套。 ✓ 不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头，
采用真空采血装置能降低污染率。
（三）血培养标本采集和运送
1.采集时间
在使用抗菌药物之前
寒战和发烧开始出现2小时内，此时为采集血培养 标本进行病原菌培养的最佳时机。
疑似感染性心内膜炎或导管相关性感染时，患者 呈持续菌血症状态，需要在24小时内多次采集血培 养，以提高检出率
❖ 留置导尿管收集尿液：留置导尿患者应消毒导尿管上端外部 及尿管口，采取无菌操作方法，用注射器通过导尿管吸取尿 液。注意防止混入消毒剂，不能从尿液收集袋中采集尿液。 长期留置导尿管患者常规尿培养没有临床意义,应在更换新 导尿管后抽取，导尿管留置时间延长易导致定植菌大量繁殖。
标本采集指南
细胞体积偏高。 3.药物对检验的影响非常复杂，在采样检查 之前，以暂停各种药物为宜，如某种药物 不可停用，则应了解可能对检验结果产生 的影响。 4.体位影响血液循环，如由卧位改为站位， Hb、HCT、RBC等亦可增加。故采集标本 时要注意保持正确的体位和保持体位的一 致性。 5.时间，病人准备还应考虑病人的生物钟规 律，纤维蛋白原在经前期最高，故采血时
（十）静脉导管 1、从病人体内拔出静脉插管，用无菌技术剪去
导管体外部分。体内段导管立即置血琼脂 平板上作滚动涂布接种。不能作床边接种 者，将导管置含有少量生理盐水的无菌试 管内送检。 2、也可将剪下的导管体内段置肉汤增菌液或 用于血培养的培养液内，但不能区分导管 感染菌与少量的定植菌。
临检室标本采集规范及报告时间
现升高倾向。另外，禁食时间过长，则又可引 起部分测定值偏低，如C3、前白蛋白、转铁蛋 白等。在测定血肌酐时，还应禁肉食三天(由 于现在生活条件比效好,一般来说就是正常饮 食三天后采血)，并不能饮咖啡、茶等，所以 在采集标本前，应让病人充分做好饮食上的准 备。
(二)药物
药物对检验可造成复杂的影响。药物不仅可以 改变某些物质在体内的代谢，同时也可干扰测 定过程中的化学反应，如维生素C就是一种可
3、采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒 剂。
（五）粪便 1、排便后，挑取有脓血、粘液部分的粪便约 2-3克（液状粪便则取絮状物），成盛于 灭菌广口瓶或蜡纸盒送检。用棉拭挑取粪 便插入Cary-Blair运送培养基或pH7.0的磷 酸盐甘油中送检，可提高病原菌检出率。 2、对为易获取粪便者或婴幼儿，可用直肠拭 子（又称肛拭子）采集。将拭子前端用无
1. 晨尿为住院病人留尿的主要方法，早晨起 床 后收集第一次尿，用尿常规检验。 2. 随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。 3. 餐后尿为收集进餐后2h尿，主要用于了解 葡 萄糖代谢情况，用以筛查隐性糖尿病或轻 症 糖尿病。 4. 计时尿应于计时开始时排空尿液，然后于 规 定时间内至截止时间留尿，计时尿多用于 肾
临床微生物标本的正确采集与运送
二、血液标本的采集方法
标本容器：血培养瓶，注意：提前从冰箱内取出复温 。
1、皮肤消毒程序：严格执行以下三步法: ①穿刺处皮肤首先用75%的酒精擦拭并待干30秒 ②用1-2%碘酊作用30秒或碘伏作用60秒，从穿刺点
向外画圈消毒，消毒直径≥5cm； ③75%的酒精脱碘待干。对碘过敏者用酒精消毒60秒
，待干后采血。
血液标本的采集方法
7、标识：多套、多点采集时培养瓶上应 注明采集时间、部位，但不能将标签贴 在条形码上，否则仪器无法识别。
血液标本的病原菌
血液标本中常见的病原菌：血液标本中致病菌以 细菌为主（需氧菌为主。厌氧菌、真菌也占相 当比例），偶为支原体；
医院内感染的菌血症常见的病原菌： 金葡、表葡、肠球菌、大肠埃希菌、肺克、其他
五、血液标本的采血时间
4.特殊的全身或局部感染采血培养的建议：
①可疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎 、关节炎或肺炎的患者应在不同部位采2～3套血标本；
②不明原因发热，如：隐性脓肿、伤寒热、稽留热等应先 采集2～3套标本，24～36小时后估计体温升高前，再采 集2套以上；
③可疑菌血症或真菌血症，但血培养持续阴性，应改变血 培养方法，选择其他种类的培养瓶，如：高渗培养瓶、 吸附抗生素的培养瓶、结核菌培养瓶，以获得罕见或苟 养的微生物；
性； ④ 不明显的发热，无其他局部症状； ⑤ 留置导尿管病人出现发热； ⑥ 膀胱排空功能受损； ⑦ 泌尿系疾病手术前。
尿液微生物标本采集时间
①未使用抗生素前；或停药后一周，如不能停 用抗菌药物，应在下次使用前。
②一般取晨起第一次尿液送检（或尿液在膀胱 内停留数小时）
③在临床症状明显时收集。
采集方法
2、几种特殊情况：
临床微生物标本规范化采集和送检
四)标签及申请单
每份标本都应贴上标签并标明必要信息，在检验申请单上填写足够的有关 临床资料。包括病人情况（病区、病人姓名、住院号）、标本情况（标本类 型、检验目的、采集部位、采集方法、采集时间等）和病人用药等信息。
五)标本运输
标本应在室温下15分钟内送到检验科。如果超过2小时送达，冷藏保存。
六)实验室拒收标准
烧伤患者的创面、组织活检、血培养等的细菌学检测结果对临床医生进行烧伤感染的诊断和治 疗十分重要。创面的拭子标本或组织活检标本都可以进行细菌定量培养。出现全身感染症状时，应 同时采集血培养标本。在采集表面拭子或组织活检标本之前，应对创面彻底清洁，且未局部应用抗 菌药物。
一)临床采样指征：
由于烧伤的早期创面无菌，烧伤后12小时勿采集标本。当患者出现发热、创面恶化时， 考虑采样。
二)采样要求 1.病原体培养应在抗菌药物应用前或停药一周后采集标本。 2.生殖器是开放性器官，标本采集过程中应遵循无菌操作以减少杂菌 污染。 3.阴道内有大量正常菌群存在，采取宫颈标本应避免触及阴道壁。 4.沙眼衣原体在宿主细胞内繁殖，采集时尽可能多的取上皮细胞。
尿道分泌物
三）采集方法
（1）男性：取样前至少1小时内不要小便。 用无菌生理盐水清洗尿道口，用灭菌纱布 或棉球擦干，用男性拭子采取从尿道口溢 出的脓性分泌物或将男性拭子插入尿道内 2～4厘米取分泌物，置无菌试管中。如无 脓液溢出，可从阴茎的腹面向龟头方向按 摩，促使分泌物溢出。
应尽量送检无菌部位的标本，尤其是血培养。有菌部位标本应避免“正常菌群导致 标本的污染”。人体很多部位，如下呼吸道（痰液标本）、鼻窦、皮肤伤口等处的正常 菌群极易污染标本。因此，从这些部位采集标本，要尽可能降低这些部位正常菌群或定 植细菌对标本污染的可能性。有菌部位的标本不是最理想的微生物标本。
医学实验室的标本采集与实验操作
医学实验室的标本采集与实验操作医学实验室是进行各种医学实验和检测的地方，其中标本采集和实验操作是实验室工作的重要环节。
本文将就医学实验室的标本采集与实验操作进行详细探讨。
一、标本采集标本采集是医学实验室中最基础也最关键的环节之一。
准确采集标本对后续实验的结果至关重要。
以下将介绍常见的标本采集方式和注意事项。
1. 血液标本采集血液标本采集是医学实验室中最常见的一种标本采集方式。
通常使用的方法有常规静脉采血和采用采血针进行小儿采血。
在采血之前，采取以下注意事项：- 确保患者是空腹状态下进行采血；- 预先准备好采血所需的材料，如采血针、采血管等；- 事先告知患者采血的程序和可能的不适感。
2. 尿液标本采集尿液标本采集是进行尿液检测的基础。
常见的采集方式有中段尿、24小时尿等。
在采集尿液标本时，需要注意以下几点：- 让患者清洁外阴部，避免细菌的污染；- 告知患者正确的尿液采集方法；- 预先准备好尿杯或其他容器，以便患者采集尿液。
3. 组织标本采集组织标本采集主要用于病理学检查。
一般情况下，采用切片或穿刺的方式进行组织标本的采集。
在组织标本采集时需要注意以下事项：- 做好局部消毒，避免感染的发生；- 使用合适的手术器械进行切割或穿刺采集；- 长时间保存组织标本时，需冷藏保鲜。
二、实验操作实验操作是医学实验室中进行各种试验和检测的关键环节。
以下将介绍医学实验室中一些常见的实验操作。
1. 标本处理标本处理是指将采集的标本进行预处理，以便后续的实验操作。
在标本处理过程中，需要注意以下几点：- 严格按照实验操作规程进行标本处理；- 避免污染和交叉感染；- 记录标本处理的相关信息，如处理时间、方法等。
2. 实验操作规范实验操作规范是医学实验室中最重要的要求之一。
在实验操作过程中，需要注意以下几点：- 遵循实验操作规程，严格按照操作步骤进行；- 使用正确的实验器材和试剂；- 保持实验环境的洁净和安全。
3. 结果分析与汇报实验操作完成后，需要对实验结果进行分析和汇报。
临床病原学检测与标本的正确留取
临床病原学检测与标本(biāoběn)的正确留取痰液标本(biāoběn)采集(cǎijí)与运送(yùn sònɡ)⏹痰液由气管(qìguǎn)、支气管和肺泡所分泌⏹正常情况下分泌物甚少，呼吸道粘膜受刺激时，分泌物增多，但多为清晰、水样，无临床意义。
⏹病理情况下痰量增多，呈不透明并有性状改变采集目的一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸引物可用于厌氧菌的检测。
一般原则1采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。
2宜采集清晨第二口痰液。
3对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3天。
不建议24小时内多次采样送检，除非痰液外观性状出现改变。
4怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检。
采集方法1、自然咳痰与雾化倒痰法：无痰或痰量极少者可用3%～5%氯化钠溶液5ml雾化吸入约5min后留取痰液。
如有可能，应在护理人员直视下留取清晨第二口痰。
嘱咐患者留取前摘去牙托，清洁口腔，如刷牙后反复用生理盐水漱口；深吸气后用力自气管深部咳出痰液，置无菌容器内。
应尽可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入样品，不应用纸巾包裹痰液。
2、支气管镜法：鼻或口腔插入支气管镜。
常用采集方法有经支气管镜吸引、支气管肺泡灌洗、防污染毛刷采样或防污染支气管肺泡灌洗等。
3、经人工气道吸引法：进行手卫生后将一次性吸痰管末端拆开，连接吸引器，调节吸引器置适宜负压（成人：40.0～53.3kpa;小儿：＜40.0kpa）。
将一次性吸痰管外包装取出，戴手套持吸痰管试吸生理盐水，检查管道是否通畅。
折叠一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工气道至适宜深度，放开吸痰管末端，轻柔、灵活、迅速地左右旋转上提吸痰管吸痰。
见吸痰管内有痰液吸出，即折叠一次性吸痰管退出，将一次性吸痰管与吸引器分离（使用人工呼吸机者，一次吸痰时间不超过15s，高浓度氧气1～2min）。
将痰液注入无菌容器（试管）内，如痰液粘稠可用一次性针筒向吸痰管末端注入少量生理盐水，将痰液冲入无菌容器（试管）内。
临床微生物标本的采集与送检
①一般要求常温下15-30分钟内接种培养皿，尤其是脑脊液和心包液；除了做结核杆菌、真菌培养的标本应在4℃下保存外，做其他项目的应常温保存。
②严格无菌穿刺。
③为了防止穿刺液的凝固，最好在无菌试管中预先加入灭菌肝素，再注入穿刺液
考虑到方便操作，建议常规血培养应尽量在使用抗菌药物前，于病人寒战或发热开始时30-60分钟内同时于不同部位采集2-3份血培养。
3.采血次数
①.留置深静脉导管且怀疑导管相关血流感染：
至少同时采集2套血培养，其中至少一套来自外周静脉，另一套从导管采集。（1套血培养定义：
从一个部位如静脉穿刺或静脉导管所获血液的培养，不论被接种在1个还是多个血培养瓶内都只能算是1套）
先以无菌生理盐水清洗外阴部或外生殖器，将无菌试管对准尿道口，待尿排出后送检注意事项严格进行无菌操作，因为尿液标本的采集和培养中最大的问题是污染杂菌通常应取晨起第一次尿液送检多数药物均通过尿液排泄，因此采集尿液应在用药前进行长期留置导尿管的患者应在更换新管时留取尿标本。导尿留取尿液时，集尿袋内的尿液和导尿管末端的尿液不能用于培养。
发热(≥38℃)或低温(≤36℃),寒战,白细胞增多,皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭,血压降低,C反应蛋白升高及呼吸加快,血液病患者出现粒细胞减少,血小板减少等,或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血液培养。新生儿可疑菌血症,应该同时做尿液和脑脊液培养。
2.采血时机：
据研究表明：
细菌通常在病人寒战和发烧前1小时进入血流，因此规范规定在病人发热高峰前1小时抽血。
（二）、微生物检查的标本采集、运送原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查。
51_病原学标本送检及采集规范
病原学标本送检及采集规范科室：主讲人：目录12345总则血培养标本呼吸道标本尿液标本其他标本01总则微生物标本采集的基本原则1 2 3 4在抗菌药物使用前采集标本应尽量送检无菌部位的标本，如血培养有菌部位应避免“正常菌群导致的标本污染”标本的标签和申请单的信息要填写完整严格无菌操作送检标本的种类与临床意义血脑脊液、胸腹水、无菌体液 尿脓、伤口分泌物痰、咽拭子（HI、SP除外）粪便、肛拭子微生物标本运送的基本原则1 2尽快送检，多数标本两小时内到达保证必要的运送条件不合格的生物标本标本采集至实验室接收过程间隔过长，或无标本采集时间，或保存温度不当。
标本运送条件不正确：如厌氧培养标本却在有氧条件下送检。
容器不规范：如容器有裂缝或被打破导致标本泄露、容器非无菌等。
未贴标签或贴错标签：标本与检验目的不符合，如痰培养送检尿标本患者信息与标本不符，如女性患者送检前列腺标本。
标本明显被污染，如痰标本中混有食物残渣等。
拭子上的标本已经干涸标本不符合检验要求，如痰标本以唾液为主。
标本量太少。
纳入病原学送检率的检验项目无菌体液细菌涂片合格标本细菌培养肺炎链球菌尿抗原军团菌抗原/抗体检验真菌涂片及培养血清真菌G实验或GM试验血清降钙素原检验（PCT）02血培养标本血培养采血指征可以感染患者出现以下任一指征体温＞38℃或＜36℃ 呼吸频率＞20次/分PCO2＜32mmhg寒战心率＞90次/分血培养采血指征 可以感染患者出现以下任一指征皮肤黏膜出血 多器官功能衰竭 昏迷血压降低血培养采血指征可以感染患者出现以下任一指征白细胞增多（>10×10^9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多）粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×10^9/L）血小板减少炎症指标如：CRP、PCT增高血培养采血指征 以下情况需多次采集血培养凡原因未明的发热，持续在1周以上，伴有心脏杂音或心脏超声发现赘生物，或原有心脏基础疾病、人工心脏瓣膜植入患者感染性心内膜炎凡原因未明的发热，持续在1周以上，伴有心脏杂音或心脏超声发现赘生物，或原有心脏基础疾病、人工心脏瓣膜植入患者导管相关血流感染导管相关血流性感染血培养留取方法短期外周导管血培养导管尖端培养1-2套外周血培养中心静脉导管血培养保留导管不保留导管1套导管血培养导管尖端培养1-2套外周血培养1-2套外周血培养血培养采血要求采血时间采血套数采血量寒战或发热初起时采集 抗菌药物使用前采集 每人每次采集2-3套每次从不同穿刺点采集儿童一般仅采集需氧瓶成人每瓶采集量8-10ml注射器采集先注入厌氧瓶蝶形针采集先注入需氧瓶血培养采血要求对于成人血培养，1个需氧瓶和1个厌氧瓶为1套，在体位一侧采集至少10-20ml血液分别注入1套血培养瓶中，每瓶5-10ml血液；同时在另一侧采集至少10-20ml血液注入第2套血培养瓶，如果抽取的血液量很少时，应首先满足需氧瓶。
临床微生物标本采集和运送规范
脓液或伤口分泌物标本 采集运送标准
❖ 本卷须知 ❖ 迅速送往实验室，1小时内不能培养应将标本冷藏。 ❖ 皮肤消毒对培养结果至关重要。 ❖ 不要仅送检脓液。脓液不能代表伤口特点，应在病灶
活动区域或基底部采集标本。 ❖ 除非有渗出物，枯燥、结痂伤口一般不做培养 ❖ 标记：不要只写“伤口〞标记标本，应有专门的描述
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二、临床各类标本的采集、 运送及保存标准
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血培养的采集、运送标准
❖ 采集程序: ❖ 皮肤消毒程序：推荐三步法 〔酒精→碘伏→酒精〕 ❖ 培养瓶消毒程序：75%酒精消毒 ❖ 静脉穿刺和培养瓶接种程序
❖ 采血量：成人8-10ml，儿童1-3ml。 骨髓采集量1-2ml ❖ 采血时间和数量: ❖ 采血时间:在寒战或体温顶峰到来之前0.5-1h，或于寒战
储存 环境
标本来源
4℃冰 箱
痰、尿液、粪便、气管冲洗物、导尿管、静脉导管、脓液和伤口分泌物 细菌或真菌培养；无菌体液（胸腹水、心包液、关节液、鞘膜积液、胆 汁）真菌培养；支原体培养；衣原体检查；血清学检查（包括ASO、RF、 肥达反应）
室温 脑脊液、生殖道、眼、耳、鼻、喉、血培养、血管导管尖、活检组织细
❖ 注意：从静脉取血；不要与血气和血沉标本一起采血； 不推荐血入瓶前换针头；不推荐静脉血直接入瓶；不宜 在静脉导管或静脉留置口采血〔除非疑心导管相关性血 流感染〕。
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血培养的采血量
❖ 成人采血量5-10ml〔最好8-10ml〕，儿童采血量1-3ml 〔不超过总血量的1％〕。血液和肉汤之比为1：5~1： 10。骨髓采集量1-2ml。
❖ 应注明具体标本来源如眼标本注明是眼睑、结膜 还是角膜，并注明左眼还是右眼。
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脓液或伤口分泌物标本 采集运送标准
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临床病原学检测与标本的正确留取
痰液标本采集与运送
⏹痰液由气管、支气管和肺泡所分泌
⏹正常情况下分泌物甚少，呼吸道粘膜受刺激时，分泌物增多，但多为清晰、
水样，无临床意义。
⏹病理情况下痰量增多，呈不透明并有性状改变
采集目的
一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸引物可用于厌氧菌的检测。
一般原则
1采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。
2宜采集清晨第二口痰液。
3对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3天。
不建议24小时内多次采样送检，除非痰液外观性状出现改变。
4怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检。
采集方法
1、自然咳痰与雾化倒痰法：无痰或痰量极少者可用3%～5%氯化钠溶液5ml雾化吸入约5min后留取痰液。
如有可能，应在护理人员直视下留取清晨第二口痰。
嘱咐患者留取前摘去牙托，清洁口腔，如刷牙后反复用生理盐水漱口；深吸气后用力自气管深部咳出痰液，置无菌容器内。
应尽可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入样品，不应用纸巾包裹痰液。
2、支气管镜法：鼻或口腔插入支气管镜。
常用采集方法有经支气管镜吸引、支
气管肺泡灌洗、防污染毛刷采样或防污染支气管肺泡灌洗等。
3、经人工气道吸引法：进行手卫生后将一次性吸痰管末端拆开，连接吸引器，
调节吸引器置适宜负压（成人：40.0～53.3kpa;小儿：＜40.0kpa）。
将一次性吸痰管外包装取出，戴手套持吸痰管试吸生理盐水，检查管道是否通畅。
折叠一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工气道至适宜深度，放开吸痰管末端，轻柔、灵活、迅速地左右旋转上提吸痰管吸痰。
见吸痰管内有痰液吸出，即折叠一次性吸痰管退出，将一次性吸痰管与吸引器分离（使用人工呼吸机者，一次吸痰时间不超过15s，高浓度氧气1～2min）。
将痰液注入无菌容器（试管）内，如痰液粘稠可用一次性针筒向吸痰管末端注入少量生理盐水，将痰液冲入无菌容器（试管）内。
标本运送
⏹痰以深咳排出后，应装于有密封瓶盖的无菌塑料容器中，以免感染自己或他
人。
⏹标本应及时送检，室温≤3h。
⏹若不能及时处理，可选择运送培养基运送和保存标本，但不应≥48h。
⏹痰标本要求
白细胞（WBC）≥25/LPF。
⏹鳞状上皮细胞（SEC）＜10/LPF。
⏹如不符合上述指标，通知临床重新采样。
血培养标本采集
血培养指征：
⏹患者出现寒战，体温超过38℃或低体温（≤36℃)
■怀疑血流感染时，尤其存在以下情况时，应抽血做细菌和真菌培养：医院内肺炎；留置中心静脉导管超过72h；感染性心内膜炎；骨髓炎；有严重基础疾病、免疫缺陷伴全身感染症状，临床医生怀疑有血流感染可能的其他情况。
⏹白细胞过多（≥10000/μl），并有核左移现象。
⏹中性粒细胞过少（≤1000/μl）。
采血时机：
一旦怀疑有血流感染可能，应立即采血做血培养
最好在抗菌药物治疗前或停用抗菌药物24h后，以寒战、发热时采集为宜。
采血流程：
消毒：1培养瓶消毒程序：用酒精消毒培养瓶橡皮塞，待干燥后使用。
2皮肤消毒程序：用安尔碘消毒液从穿刺点向外划圈消毒，至消毒区域直达5cm以上，待消毒液挥发干燥后（常须30s以上）穿刺采血。
静脉穿刺和培养瓶接种：采用负压血培养瓶，将患者静脉直接吸入血培养瓶，减少污染环节。
先注于厌氧培养瓶，
采血部位
⏹采血部位通常为肘静脉。
⏹对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶或髂前（后）上棘处消毒后抽取骨
髓培养。
⏹疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。
采血量：以培养基与血液之比10:1为宜，以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。
采血量过少会明显降低阳性率。
成人每次每培养瓶采血8～10ml，婴幼儿每次每培养瓶采血2ml。
需要采集多少份血培养？
每名患者应至少采集2份血培养，最好为3份（CLSI规定采集2～3份血培养）。
在一名败血症患者初期诊断时，绝不能只采集1份血培养（CLSI强调了此观点）。
注意：1“份”是指一次静脉穿刺。
运送要求
■所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在2h内。