鹅细小病毒CGDY07株的分离与鉴定
鹅细小病毒和番鸭细小病毒鉴别诊断方法_杨旭东
为 其特 征 性 病 变 是 严 重 危 害 养 鹅 业 发 者 的 展 的 重 要 传染 病 之
一
和
Ｖ Ｐ２
存 在差异
张 云 等用
。
番 鸭 细 小 病 毒 ＧＰ Ｖ
株
Ｖ Ｐ３
蛋 白 旳 原核 表 达 产 物
Ｅ ＬＩ Ｓ Ａ
引 起 的 番 鸭 细 小 病毒 病 临 床 上 主 要 发 作 包 被 抗 原 建 立
：
一
些 主 要鉴 别 诊 断 方 法 都 出 现 了 两 条 反 应 带
；
Ｖ Ｐ３
；
Ｇ Ｐ Ｖ 测 出 相 应 的
Ｖ Ｐ３ Ｖ Ｐ２
；
病原
；
，
对芯 片 上 的 其 它 病
７ ８ ８ ６ｎｇ／ Ｌ
．
关 键词
鹤 细 小病毒
；
番鸭细 小 病毒 多抗 和
；
ＭＤ Ｐ Ｖ
只有
３
条 反 应带
ＶＰ
１
原无 交 叉 杂 交
敏感 性 可 达
；
，
鉴 别诊断
方 法 与
Ｇ ＰＶ 出
现
条反应带
、
、
高 于 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳
的 检 出 率高
、
；
对实 验 临 床样
、
Ｖ Ｐ３ Ｍ Ｄ ＰＶ
；
单 抗 仅识 别
Ｍ ＤＰＶ
和
Ｇ Ｐ Ｖ 本
可应 用 于 鸭瘟病 毒
鹅细 小 病毒 引 起 的 小 鹅瘟 是
１
３６
國禽 Ｅ３ 业
Ｉ
２０１ ５ ９
．
Ｇｅ ｎ Ｂａｎ ｋ
范 文胜 等 根
5株鹅细小病毒分离鉴定及VP3基因遗传进化分析
5株鹅细小病毒分离鉴定及VP3基因遗传进化分析王郑;徐萍;李甜甜;黄海琼;钱钟;宋庆庆【摘要】从江苏省各市鹅场死亡的、具有小鹅瘟典型病变的雏鹅肝、脾、肠病料组织中分离到5株病毒分离物.经过实验鉴定,该5株病毒分离能与小鹅瘟阳性血清发生沉淀反应,并均能使用针对小鹅瘟病毒VP3基因特异性引物扩增出与目的条带大小一致的DNA片段.将PCR产物纯化、连接、转化、TA克隆等一系列实验后将获得阳性重组质粒送测序.另外,为了探究该病毒的遗传进化方向,本研究同时对鹅细小病毒VP3基因进行了系统进化分析.【期刊名称】《国外畜牧学-猪与禽》【年(卷),期】2015(035)012【总页数】3页(P74-76)【关键词】鹅细小病毒;琼脂扩散试验;序列测定;遗传进化【作者】王郑;徐萍;李甜甜;黄海琼;钱钟;宋庆庆【作者单位】金宇集团扬州优邦生物药品有限公司,江苏扬州 225008;金宇集团扬州优邦生物药品有限公司,江苏扬州 225008;金宇集团扬州优邦生物药品有限公司,江苏扬州 225008;金宇集团扬州优邦生物药品有限公司,江苏扬州 225008;金宇集团扬州优邦生物药品有限公司,江苏扬州 225008;金宇集团扬州优邦生物药品有限公司,江苏扬州 225008【正文语种】中文【中图分类】S853.3**通信作者：宋庆庆，博士，主要从事畜禽传染病病原学研究，联系方式：*************。
鹅细小病毒病又称小鹅瘟，其作为一种急性传染病给养鹅业造成了重大的经济损失，严重影响了养鹅业的健康发展。
该病主要侵害1月龄以内的雏鹅，发病后主要表现为精神萎靡、食欲废绝、严重下痢和渗出性肠炎等症状[1]。
该病的病原为鹅细小病毒(Goose Parvovirus，GPV)，该病毒属于细小病毒科细小病毒属，GPV仅有一个血清型[2]，病毒粒径约20 nm，是目前已知的动物病毒中较小、较简单的病毒之一[3]。
我国学者方定一于1956年首次在江苏扬州发现并命名为“小鹅瘟”[1]。
小鹅瘟病原分离及鉴定
似香肠 样 ，坏死 的肠黏膜 、渗 出的纤维素等凝 固
形成栓子 。对照 的 ５ 只雏 鹅没有任何变化 。可 见 该小鹅瘟病毒株 为强毒 株 ，死亡率高 ，并且 出现 小鹅瘟典型 的症状和病变 。 ２ ５ 毒 株致病性测 定结果 ． ｌ ３日龄 Ｓ Ｆ鹅 胚接 现典 型症状 ；病毒株 可被 小鹅瘟 阳性 血清 中和 ， Ｐ 种各稀 释度后死 亡情况见 表 １ 。从表 １ 见引起 分离株 的这些特性 与鹅细小病毒一 致 ，确 认所分 可 全 部 鹅 胚致 死 的最 高稀 释 度 为 １ ０ ，按 公式 计 离病毒株 为鹅 细小病毒 。鹅细小病 毒 的 自然感染 算 ，ＭＤ ＝ ２ （） Ｔ７． ｈ。 ２ 宿主 虽只为雏鹅和雏番鸭 ，但 随着 养鹅业 的不 断
床 症状 为精神 萎顿 ，食欲减退进而废 绝 ，眼结膜 将１ Ｏ只非 免疫健康雏 鹅分 成 ２ 发 炎 、流泪 ，严 重腹泻 ，呼吸 困难 ，两脚麻 痹 ，
组 。试验组接种病料分离毒 ，接种量为 ０ 职 ， 行走 困难 。 ．ｍ １ 剖检 见小肠黏膜充血或 出血，肝脏肿大 ，呈 肌注 ，对 照组 未接毒 ，在相 同条件 下 隔离饲养 。
２ ３ 血清学鉴 定结果 ．
病毒 中和试 验 ，将 ｌ ８只
ｌ ３日龄 鹅 胚分 成 ３组 ，阳性 血清 与分 离 病 毒尿 １２ １ 病毒 的形 态观 察 鹅 胚尿 囊液 ，４ｃ ． ． ｃ下 ． Ｙ ４０ ０ｒ ｉ 心 ｌｈ ０ ｍ ｎ离 ／ ，吸取 上清加 入等 量三 氯 乙 囊液 等量混合后 ，０５ｍ 胚接种试 验组鹅 胚 ，同 时分离尿囊 液毒 ０ ｌ ． ｍ 接种 对照 组鹅胚 。结 果 ， ５ 烷（ 氯仿） ，振摇 ２ ～ ０ｍ ｎ Ｏ ３ ｉ，经 ３００ｒ ｉ 离心 ０ ｍ ｎ ／ 试验组 鹅胚 １ 后全部存活 ，而对 照组鹅胚 ４ ～ ０ｄ ８ ３ ｉ，吸取上清液 装入透析袋 ，置 于有 干燥硅 ０ｍ ｎ ９ 全 部死亡 。反向间接血凝试验 阳性 。 ６ｈ 胶的密封玻璃缸 中数 小时 。经磷钨酸 负染后进 行 ２４ 回归试验 结果 接种 分 离毒 的雏鹅 接种 后 ． 电镜观察 。 Ｏ天 １ ２ ２ 血 清 学鉴 定 通过 病 毒 中和 试验 和 反 向 ．． 第 ８天开始 出现症 状 ，到第 ｌ 全部 死亡 。临 间接血凝试验进行血清学鉴 定。 １３ 回归试验 ．
鹅细小病毒YG株的鉴定及在器官中的分布_邵周伍林
第９期 邵周伍林等：鹅细小病毒 ＹＧ 株的鉴定及在器官中的分．１ 病 料 来 源 病料来自黑龙江省某养鹅场的疑似小鹅瘟患病 雏 鹅 ，该 养 鹅 场 的 ５ 日 龄 雏 鹅 出 现 精 神 委 顿 、食 欲 减 退 、排 黄 绿 色 稀 粪 等 临 诊 症 状 ；死 亡 雏 鹅 经 剖 检 后 发 现 肝 、肾 瘀 血 肿 大 ，肠 黏 膜 充 血 、出 血 ，小 肠 下 段 极 度 肿大，剖检可见坏死 脱 落 的 肠 黏 膜 和 纤 维 素 性 渗 出 物所形成的栓塞。 １．２ 细 胞 、抗 体 和 实 验 动 物 鹅胚成纤维细胞（ＧＥＦ）按照常规方 法 制 备 。 ［４－５］ 抗鹅细小病毒 ＶＰ３ 蛋 白 单 克 隆 抗 体 为 本 实 验 室 制 备 。 ［６］ 无母源抗 体 的 １ 日 龄 雏 鹅 及 １１ 日 龄 鹅 胚 均 购自哈尔滨新立养殖场。 １．３ 试 剂 和 主 要 仪 器 ＴａＫａＲａ Ｅｘ Ｔａｑ ＰＣＲ 试 剂 盒、ＤＬ２０００ ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ、ｐＭＤ１８－Ｔ 载 体 均 购 自 宝 生 物 工 程 （大 连 ） 有限公司。 胎 牛 血 清 购 自 Ｇｉｂｃｏ 公 司。ＤＭＥＭ 购 自 ＨｙＣｌｏｎｅ公司。异硫氰 酸 荧 光 素 （ＦＩＴＣ）标 记 的 山羊 抗 小 鼠 ＩｇＧ 抗 体 购 自 中 杉 金 桥 生 物 技 术 有 限 公司。ＡｘｙＰｒｅｐ质粒 ＤＮＡ 小量 试 剂 盒 购 自 爱 思 进 生物技术 （杭 州）有 限 公 司。 Ｗ５２１１ 柱 式 小 量 胶 回 收试剂盒 购 自 上 海 华 舜 生 物 工 程 公 司。ＥＶＯＳ Ｆ１ 荧 光 倒 置 显 微 镜 为 美 国 ＡＭＧ 公 司 产 品。ＣＫＸ４１ 型光学显微镜为日本 Ｏｌｙｍｐｕｓ公司产品。 １．４ 病 毒 的 分 离 无菌采集送 检 雏 鹅 的 肝、脾、肠 道 及 其 内 容 物， 将 病 料 剪 碎 后 ，使 用 玻 璃 匀 浆 器 研 磨 制 成 组 织 匀 浆 。 反复冻融３次 后，以 ３ ０００ｒ／ｍｉｎ 离 心 ３０ｍｉｎ，取 上 清，向 病 料 上 清 液 中 加 入 工 作 浓 度 为 １ ０００Ｕ／ｍＬ 的青 霉 素 和 ０．１ｍｇ／ｍＬ 的 链 霉 素。 病 料 上 清 液 按 １∶１００的 比 例 用 灭 菌 ＰＢＳ 稀 释 后，经 尿 囊 腔 接 种 １１日龄鹅胚，每枚接种０．２ｍＬ，另 一 组 接 种 等 量 的 灭菌 ＰＢＳ设为对照。接种后的鹅胚置 于 ３７ ℃ 的 孵 化 器 内 继 续 孵 育 ，每 天 照 胚 ２ 次 ，观 察 鹅 胚 的 生 长 发 育 及 死 亡 情 况 ，弃 去 ２４ｈ 之 内 死 亡 的 鹅 胚 ，收 集 ２～ ５ｄ 内 死 亡 的 鹅 胚 ，并 置 于 ４ ℃ 冰 箱 内 过 夜 后 收 集 尿 囊液。 １．５ ＰＣＲ 检测 取 鹅 胚 尿 囊 液 ２００μＬ，采 用 ＳＤＳ 和 蛋 白 酶 Ｋ 的方法 提 ［７］ 取病毒基因组 ＤＮＡ，利用本实验 室 建 立 的 ＧＰＶ ＰＣＲ［８］对鹅胚尿囊液中的 ＧＰＶ 进行检测。 １．６ ＩＦＡ 检测 将调整好浓度的 ＧＥＦ 细胞悬液加入６孔板内， 并且 采 用 同 步 接 毒 的 方 法，向 细 胞 悬 液 内 按 １∶２０
感染鹅细小病毒雏鹅病理学研究的开题报告
感染鹅细小病毒雏鹅病理学研究的开题报告
题目：感染鹅细小病毒雏鹅病理学研究
摘要：鹅细小病毒是一种引起雏鹅高死亡率的病原体，其感染会导致雏鹅的呼吸道、消化道、中枢神经系统等器官受到损害，严重影响其生长和发育。
本研究旨在探
讨鹅细小病毒感染雏鹅的病理学变化及其发生机制，为该病的防治提供理论依据和实
验基础。
研究内容：本研究计划选取一定数量的健康雏鹅和感染鹅细小病毒的雏鹅，观察并比较它们的病理学变化。
具体研究内容如下：
1.采集标本：收集健康雏鹅和感染鹅细小病毒的雏鹅的组织标本，包括肝脏、脾脏、肺、肠、脑等。
2.病理学检查：对收集到的组织标本进行病理学检查，观察各器官在感染后是否有炎症、水肿、坏死等病理变化。
同时，应对比健康雏鹅和感染雏鹅的病理学变化，
分析感染鹅细小病毒对雏鹅各器官的影响。
3.分子检测：通过PCR法检测感染鹅细小病毒的雏鹅组织标本中是否存在该病毒。
4.病理学变化机制研究：结合病理学检查和分子检测结果，分析鹅细小病毒感染雏鹅的病理学变化机制，探讨该病毒对雏鹅器官的损害机理。
预期结果：通过本研究，预计可以得到以下结果：
1.明确鹅细小病毒对感染雏鹅各器官的具体损害情况；
2.探讨鹅细小病毒感染雏鹅的病理学变化机制，为该病的防治提供理论依据和实验基础；
3.为鹅细小病毒的防治提供理论依据和实验基础。
关键词：鹅细小病毒；雏鹅；病理学；感染；发生机制。
新型鹅星状病毒的分离鉴定与全基因序列分析
动物医学进展,021 ,42(3)=32-135Progress in Veterinary Medicine新型鹅星状病毒的分离鉴定与全基因序列分析卢秀娴1,张思远1*，梁昭平2,林举攀1,冯盛春1，黄 芬1，潘俊斌2(.广州市华南农大生物药品有限公司，广东广州510300；.华南农业大学，广东广州51064 2)摘要：为了解近年鹅星状病毒的流行情况，通过鹅胚接种、鹅胚半数致死量测定(EID ；0)、RT-PCR 检测和基因组序列测定等方法，从2019年山东某养鹅场雏鹅疑似星状病毒引起鹅内脏痛风病的病料中分离出1株 新型鹅星状病毒，命名为Ast V /Goose/SD776/2019.该分离株能引起鹅胚典型的临床症状，病毒无血凝活性，EID ＞；0为10 40/0.2 mL ,动物回归试验中死亡的雏鹅可以复制出与临床自然感染相似的病变。
用RT-PCR 对分离株全基因组序列分析结果显示，分离株的3个ORF 和与新型鹅星状病毒毒株(JSHA 、SD()1、SDPY 、GD)的核苷酸和氨基酸同源性较高(99.2%以上)与能导致雏鹅肠炎的鹅星状病毒(FLX)及其他种属禽源星状病毒同源 性相对较低，遗传进化分析结果显示，分离株在进化树上与4株新型鹅星状病毒的亲缘关系接近，表明分离毒株为新型鹅星状病毒。
关键词：鹅星状病毒；分离；鉴定;序列分析中图分类号S852.65鹅星状病毒(Goose astro v irus , GoAstV )是近年危 害我国养鹅业重要的病毒性传染病病原之一］1 ,主要感染3周龄以内的雏鹅［］。
感染后鹅群发生高度致 死性内脏痛风病,病死率可高达30%,该病的病原是由星状病毒引起的(Astrovirus , AstV)，临床病变主要 以肾脏及腿部肌肉、关节覆盖大量尿酸盐沉积物为特征［］。
AstV 属于星状病毒科，1975年被首次发现, 是一种无囊膜20面体的单股正链RNA 病毒,广泛存在于动物群体中［］AstV 的基因组全长约6.1 —7.9kb,不同种星状病毒之间序列变异较大，包括5'端未翻译区(untranslation region , UTR)、3个开放性阅读 框(ORF1 a .ORF1 b 和ORF2)3’UTR 及多聚腺苷酸(PolyA )尾［］；不同种AstV 之间存在基因重组现象，同源重组多发生于基因组ORFlb/ORF2交界区，该区域包含一个稳定的发夹结构，是AstV 同源重组的高发部位，但ORF1 b 区域同样可以发生基因重组［］。
免疫组化和PCR方法检测鹅细小病毒在感染雏鹅体内分布规律研究的开题报告
免疫组化和PCR方法检测鹅细小病毒在感染雏鹅体内分布规律研究的开题报告一、研究背景和意义鹅细小病毒是一种引起鹅细小病的病原体，对于养殖业产生了严重的危害。
针对该病的研究已有一定进展，但目前对于其在感染雏鹅体内的分布规律仍存在较大的不确定性。
因此，本研究旨在通过免疫组化和PCR方法检测鹅细小病毒在感染雏鹅体内的分布情况，为疫病的防治提供科学依据。
二、研究内容和方法本研究拟采用以下方法：1. 动物模型建立：选择健康2日龄的雏鹅，随机分为实验组和对照组，实验组采用鹅细小病毒进行感染。
2. 免疫组化检测：采用免疫组化方法检测不同组织中的鹅细小病毒抗原表达情况。
3. PCR检测：采用PCR方法检测不同组织中的鹅细小病毒DNA含量及其分布情况。
三、研究预期结果通过免疫组化和PCR方法检测，可了解鹅细小病毒在感染雏鹅体内的分布规律，包括其寄生在哪些组织和器官中，以及抗原表达和基因含量的差异等。
因此，本研究可以为探究鹅细小病的发病机制提供理论支持，并对疫病的及时防治提供依据。
四、研究进度安排本研究计划拟定为12个月，进度安排如下：第1-2个月：收集阅读文献，撰写开题报告。
第3-4个月：准备实验材料和介绍鹅细小病毒育苗。
第5-6个月：建立病毒感染动物模型。
第7-8个月：使用免疫组化方法检测实验组和对照组组织中的鹅细小病毒。
第9-10个月：使用PCR方法检测实验组和对照组组织中的鹅细小病毒。
第11-12个月：整理实验数据，撰写实验报告和论文。
五、预期成果和应用前景本研究通过免疫组化和PCR方法检测鹅细小病毒在感染雏鹅体内分布规律，对该疫病的发病机制和防治提供了新的理论支持。
此外，该研究还可以推动相关领域的研究发展，为养殖业的疾病控制和预防提供更加科学的依据。
鹅细小病毒基因组结构特征研究进展
鹅细小病毒基因组结构特征研究进展朱海侠;万春和;黄瑜【期刊名称】《中国动物传染病学报》【年(卷),期】2011(19)1【摘要】鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)属细小病毒科,细小病毒属,由我国学者方定一1956年首次分离报道.GPV基因组约5Kb,由左右2个完整的开放阅读框(open reading frame,ORF)组成:LORF(1eft ORF)和RORF(right ORF).LORF 编码非结构蛋白(nonstructural protein,NS)NS1和NS2,RORF编码VP1、VP2和VP3 三种结构蛋白.本文针对近年来鹅细小病毒基因组结构特征的研究进展进行了综述.【总页数】5页(P82-86)【作者】朱海侠;万春和;黄瑜【作者单位】福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福州,350013;福建农林大学动物科学学院,福州,350002;福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福州,350013;福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福州,350013【正文语种】中文【中图分类】S858.332.659.2;Q754【相关文献】1.新型鹅细小病毒四川株的全基因组扩增及遗传进化分析 [J], 葛志琪;吴英;赵新新;程安春;刘亚刚;陈舜;朱德康;刘马峰;汪铭书;贾仁勇;孙昆峰;杨乔2.鹅细小病毒基因组结构研究进展 [J], 曹楠;杨舒展;黄冠雄;郭思璇;曾依翎;李冰心;田允波;许丹宁3.半番鸭胚中鹅细小病毒的分离鉴定及其基因组分子特征分析 [J], 傅秋玲;朱春华;黄瑜;程龙飞;万春和;傅光华;施少华;陈红梅;刘荣昌;陈翠腾;陈珍4.鹅细小病毒基因组与致病机制研究进展 [J], 朱峰伟;朱新产5.鹅细小病毒弱毒株的培育及其致弱前后全基因组中核酸变异的分析 [J], 张青山;李晨曦;刘明;邵周伍林;张云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
用病毒分离法鉴定诊断小鹅瘟
ｓｇ ｆ ｏ ｌ ｇｐ ａｕ Ｉ ｅｒｓ ｌｓ ｏ ｄ ｔａ ｔ ｅｉｏａｅ ｉ ｓｗａ ｇ ｏ ｅｐ ｒ ｏ ｉ ． ｉｎｏ ｇ ｓｉ ｌｑ ｅ ＇ ｅｕｔ ｈ ｗｅ ｈ ｔｈ ｓ ｌｔｄｖｒ ｎ ｈ ｕ ｓ ｏ ｓ ａｖ ｖｒ ｓ ａ
小鹅 瘟是 由鹅细 小病毒 引起 的 ４ ＿０日龄雏鹅 小鹅瘟疫 苗 。选取 ｌ ＿２ ２日龄鹅 胚用 于病 毒 分离 。 的急性 败血 性传 染病 ，传 播速 度快 ，死亡率 高 ，对 某养鹅 场 ７日龄 雏鹅 发生大批 死亡 ， 我们 对送 检雏 鹅 进行 了病毒 分 离 ， 初步 鉴 定为 细小病 毒感 染 。 动 强 。现 将结果 报 告如 下： １１ ．材料 １１ ．． １病料
ｔｅ１ ａ ｓ ｏ ｓ ｈ ２ ｄ ｙ ｏ ｅ∞ ｂ ｙ ｙ ｄ ｂ ｅｈ ａ ｔ ｙｇ ｏ ｅｗｈ ｃ ｒ ｏ ｇ ｒ ０ ｌ ｅ ｙ ｔ ｅ ｌ ｏ ｓ ｉｈ ｗｅ ｎ ｔ ｍｍｕ ｉ ｅ ｏ ｓ ａ ｖ Ⅵｍ ｓ ａ ｃ ｎ ．Ｔｈ ｉ ｓ ａ ｈ ｈ ｅ ｉ ｎ ｚ ｄ ｇ ｏ ｅｐ ｒ ０ ｃ ｉｅ ｖ ｅｖ ｒ ｕ Ｗｆ ａ ｖ ｉ ｅｖ ｒ ｓ ｂ ｅ ｖ ｄｗｉ ｌｃｒ ｎｃｍｉ ｒ ｓ ｏ ｅ ｌ ｐ ｒ ｏ ｋ ｉ ｓ ｒ ｅ Ｓ ｌ ｕ ｏ ｈ ｈ ｔ ｔ ｅｅ ｔｏ ｉ ｃｏ ｃ ｐ ．Ｂｙｔ ｅｃ ａｌｎ ｅｔｓ，ｔｅ ｇ ｓ ｉｇ ｉｄ ｗｉ ｅｃａ ｓｃ ｌ ｅ ｈ ｌ ｇ ｔ ｈ ｏ ｌ ｓ ｅ ｔ ｔ ｌｓ ｉ ａ ｈ ｅ ｅ ｎ ｄ ｈｈ
Ｈｕ Ｇｕ ｘ ｅ Ｚ ａ ｇ Ｊｎ ｉ ｇＸｉｏ ｅ ｇｅ ． ｉ ｕ ｈ ｎ ｉｌ ａ ｆｎ ｔ ｎ １ ａ
（ ｌ ｇ ｉ ｌｔ ｌ ｉｅｓ Ｊ ｉ ｓ ｃ Ｕｒ Ｕｎｖ ｒｉ Ｃ ａ ｇ ｈ ｎ １０ １ ） ｉｎＡ ｕ ａ 吼 ｈ ｎ ｃ ｕ ３ １ ８
小鹅瘟病毒分离与初步鉴定
小鹅瘟病毒分离与初步鉴定胡桂学高光邹啸环肖峰摘要:取死于具有小鹅瘟典型症状的7日龄吉林白鹅脾脏，制成乳剂，接种于未免疫小鹅瘟疫苗的健康母鹅所产种蛋的12日龄鹅胚尿囊腔。
结果当盲传至第3代，鹅胚死亡，电镜负染尿囊液观察到细小病毒样粒子。
雏鹅接种实验结果表明，试验组雏鹅表现出小鹅瘟临床症状和剖检特征。
由此证明，该雏鹅死于小鹅瘟。
关键词：小鹅瘟；细小病毒；分离鉴定Isolation and Primary Identification of Goose Parvovirus of Gosling Plaque Abstract:With 12-days goose embryo produced by healthy geese, a strain of virus was isolated from the spleen of 7-days old gosling died from gosling plaque. It was parvolike virus observed clinic signs of gosling plague. The result showed that the isolatedvirus was goose parvovirus.Key words: gosling plaque; goose parvovirus; isolation and identification 小鹅瘟是由鹅细小病毒引起的4～20日龄雏鹅的急性败血性传染病，传播速度快，死亡率高，对养鹅业危害极大。
2001年5月，吉林省大安市某养鹅场7日龄吉林白鹅大批死亡。
笔者对送检雏鹅进行了病毒分离，初步鉴定为细小病毒感染。
动物回归实验表明，该分离病毒对易感雏鹅的致病性强，现将结果报道如下。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 病料为2001年5月吉林省大安市送检的7日龄吉林白鹅。
主诉：雏鹅及母鹅未接种过小鹅瘟疫苗或免疫血清。
鹅细小病毒的分离和PCR鉴定_贺冬梅
根据流行病学、临床特征和剖检特点，初步诊断本病 例为小鹅瘟。经过病毒分离，获得鹅细小病毒海南分
离株。试 验 通 过 PCＲ 扩 增 出 与 预 期 大 小 相 符 的 470 bp 目的片段，对扩增片段进行测序及 BLAST 分
DNA 抽提按照试剂盒操作说明书进行。扩增体 系及程序分别以抽提的 DNA 为模板进行 PCＲ 扩增。 反应体系（ 20 μL） ： 10 × Ex Taq Buffer 2 μL，上、下游 引物各 1 μL，dNTP Mixture 2 μL，Ex Taq 酶0． 1 μL， 组织基因组 DNA 2 μL，加水补足至 20 μL。扩增反 应程序： 94 ℃ 预变性 5 min； 94 ℃ 变性 30 s，55 ℃ 退 火 30 s，72 ℃ 延伸 30 s，30 个循环； 72 ℃ 延伸 7 min。 取 PCＲ 产物 5 μL，用 1% 琼脂糖凝胶电泳观察分析 PCＲ 产物。然后按凝胶回收试剂盒操作说明书纯化 回收 PCＲ 产物，由英潍捷基（ 上海） 贸易有限公司进 行测 序，对 所 测 序 列 用 Lasergene 7． 10 软 件 进 行 BLAST 比对分析。 3 结果 3． 1 病毒分离结果
［4］ 牛鑫，高洪，严玉霖，等． 楚雄部分地区猪伪狂犬野毒株的血清 学调查［J］． 上海畜牧兽医通讯，2014（ 6） ： 36 － 37．
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荧光定量PCR检测雏鹅人工感染鹅细小病毒后病毒在体内分布规律
荧光定量PCR检测雏鹅人工感染鹅细小病毒后病毒在体内分布规律毕建敏;田夫林;李延鹏;朱瑞良【期刊名称】《中国预防兽医学报》【年(卷),期】2008(030)001【摘要】2005年从山东某鹅场16日龄商品代病死鹅中分离到1株鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV),命名为SD2005株.用建立的荧光定量PCR(FQ-PCR)检测鹅细小病毒的方法,检测SD2005株人工感染3日龄雏鹅(GPV抗体阴性)后各器官不同时间段的病毒含量,结果表明:在攻毒8 h后能从消化系统及血液、心脏和肝脏中检测到病毒DNA;病毒DNA的含量在48 h后达到最高峰,并一直维持到168 h.随后各待检脏器中病毒DNA含量持续降低,但在720 h后仍能从粪便、肝脏和脾中检测到少量的病毒DNA.本试验为阐明GPV的致病机理及防控提供了重要的试验数据和理论依据.【总页数】4页(P64-67)【作者】毕建敏;田夫林;李延鹏;朱瑞良【作者单位】山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271000;山东省畜牧兽医总站,检验技术中心,山东,济南,250022;山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271000;山东农业大学,动物科技学院,山东,泰安,271000【正文语种】中文【中图分类】S852.659.2【相关文献】1.鹅细小病毒感染雏鹅的免疫球蛋白IgG/IgM变异性研究 [J], 朱新产;邵艳红;朱峰伟;杨丽金2.感染鹅细小病毒后雏鹅组织器官的3种消化酶及同工酶 [J], 朱新产;韩彬;杨丽金3.鹅细小病毒感染雏鹅的主要组织相容性复合体变异性研究 [J], 朱新产;毕经帅;杨丽金4.鹅细小病毒感染雏鹅血液的蛋白/酶活性及同工酶变异性研究 [J], 朱新产;王倩文;朱峰伟;李洪强5.人工感染雏鹅新型病毒性肠炎病毒的形态发生及宿主细胞的超微结构变化 [J], 程安春;汪铭书;周毅;陈孝跃;郭宇飞;刘兆宇;方鹏飞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一株猪细小病毒7群的鉴定和分离
一株猪细小病毒7群的鉴定和分离张 志1，王树双1（1. 266019）摘 要：猪细小病毒7群（群中是否存在PPV-7，本文用10份猪流产胎儿和10份保育仔猪病料分别进行检测，结果发现其中1份保育仔猪样品的常规PCR 和实时荧光定量PCR 检测结果均为阳性，常规PCR 扩增出的246 bp 特异性条带测序和分子遗传演化时发现，该序列与PPV-7参考毒株KU5637332和KY996757的同源性分别为99.6%和98.0%，表明该样品中含有PPV-7，进一步用PK-15细胞分离病毒，连续传代5次后PK-15细胞都没有出现典型的细胞病变，但其上清液用实时荧光定量PCR 方法都可以检测到该病毒。
本研究结果证实我国猪群中存在PPV-7的感染，且检测到的PPV-7毒株能在PK15细胞中增殖。
关键词：猪细小病毒7群；实时荧光定量PCR ；常规PCR ；鉴定；分离 中图分类号：S852.659.2文献标志码：A文章编号：1674-6422（2019）04-0063-06ISOLATION AND IDENTIFICATION OF A NOVEL PORCINEPARVOVIRUS 7ZHANG Zhi 1, ZHANG Li-li 1,2, LIU Shuang 1, WU Fa-xing 1, LI Xiao-cheng 1, W ANG Shu-shuang 1(1. China Animal Health and Epidemiology Center, Qingdao 266032, China; 2. Qingdao Agricultural University, Qingdao 266109, China)收稿日期：2018-05-07基金项目：科技基础性工作专项（2012FY111000）作者简介：张志，男，博士，副研究员，主要从事动物分子流行病学研究通信作者：李晓成，E-mail：lxch20062006@ Abstract: Porcine parvovirus 7 (PPV-7) was first found in American pigs. The real status of PPV-7 is still unknown so far on pig farms in China. Twenty samples of nursery pigs and aborted fetuses were screened for PPV-7 by classical PCR and real-time fluorescence quantative PCR assay. As a result, one sample of nursery pig was positive by two PCR assays. A special band of 246 bp in classical PCR assay was amplified, sequenced and analyzed with the reference strains, obtaining nucleotide sequence homology of 99.6% and 98.0% with the reference strains KU5637332 and KY996757. This result confirmed the existence of a novel virus of PPV-7. The cytopathic effect was not observed in PK-15 cells after 5 passages. However, the PPV-7 virus DNA was detected in the culture supernatant. These results further verified the infection of PPV-7 on Chinese pig farm.Key words: Porcine parvovirus 7; real-time fluorescence quantative PCR; classical PCR; identification; isolation细小病毒科，是一种单股非囊膜线性DNA病毒，基因组大小为4~6.3 kb，由5'端非翻译区、非结构蛋白、结构蛋白和3'端UTR组成[1]。
鹅细小病毒LH株的分离鉴定
鹅细小病毒LH株的分离鉴定刘宇卓;李银;魏雪涛;张敬峰【期刊名称】《江苏农业学报》【年(卷),期】2009(025)005【摘要】采用鹅胚接种方法从南京六合具典型鹅细小病毒病病变的死亡雏鹅体内分离到1株鹅细小病毒(LH 株).在电镜下观察到该病毒液具细小病毒样粒子;8 日龄健康易感雏鹅人工感染后100%发病、死亡,且具有典型鹅细小病毒病临床症状和剖检特征.在琼脂扩散试验中,用感染鹅胚液制备的待检沉淀抗原,能与鹅细小病毒阳性血清发生特异性反应.应用针对GPV VP3特异性引物对LH毒液进行PCR检测,扩增出的片段为1.6 kb,与目的条带大小相符.序列分析发现,扩增产物与已发表的GPV的VP3片段相比较,同源性达99%以上,表明所分离到的LH株是一株鹅细小病毒.【总页数】4页(P1091-1094)【作者】刘宇卓;李银;魏雪涛;张敬峰【作者单位】江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏,南京,210014;江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏,南京,210014;江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏,南京,210014;江苏省农业科学院兽医研究所,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏,南京,210014【正文语种】中文【中图分类】Q93-331【相关文献】1.鹅细小病毒LH株的纯化及其生物学特性 [J], 刘宇卓;刘飞;李银;黄欣梅;赵冬敏;韩凯凯2.鹅细小病毒HN株的分离鉴定及全基因组序列分析 [J], 贺冬梅;谭树义;陈朝喜;叶保国;张艳;林哲敏;曹宗喜3.江苏省盐城市3株白羽肉鸭源鹅细小病毒的分离鉴定及其VP3基因遗传进化分析 [J], 李亚非;潘金金;陈洪益;陆红霞;刘东;刘红祥;陈先亮;徐全刚4.红毛鸭胚源鹅细小病毒江西株的分离鉴定与NS基因的分析 [J], 傅秋玲;陈翠腾;李海琴;黄瑜;傅光华;万春和;韦启鹏;陈红梅;黄江南;程龙飞;施少华;刘荣昌5.1株鹅细小病毒的分离鉴定及致病特性、VP基因特征分析 [J], 刘宝山;李珮瑶;许莉莉;高晶萍;张瑞华;徐彤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一株猪细小病毒的分离与鉴定
一株猪细小病毒的分离与鉴定
周思旋;周碧君;岳筠;程振涛;徐春志;鲍娟;罗阿东;李永明
【期刊名称】《畜牧与兽医》
【年(卷),期】2008()9
【摘要】取疑似猪细小病毒(PPV)流产胎儿组织病料,处理后接种PK-15传代细胞,2～4 d后出现了明显的细胞病变;荧光抗体试验结果显示,PPV呈现阳性;以猪细小病毒VP2基因的1对特异性引物,从PPV疫苗、流产胎儿病料及感染细胞培养物中PCR扩增出158 bp的DNA条带;扩增产物经EcoR I酶切分析,得到了预期的条带(123 bp和35 bp),从而证实PCR方法的特异性;敏感性试验结果显示,PCR的最小检出量为300 pg.研究结果表明,2006年9月发生在贵州省某种猪场的疫情确由猪细小病毒感染所致.
【总页数】3页(P71-73)
【关键词】猪细小病毒;分离;鉴定;贵州省
【作者】周思旋;周碧君;岳筠;程振涛;徐春志;鲍娟;罗阿东;李永明
【作者单位】贵州大学动物科学学院;贵州大学动物疫病研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S852.65
【相关文献】
1.一株内源性猪细小病毒的分离与鉴定 [J], 李昌文;仇华吉;童光志;田志军;王玉春;韩孝成;刘红全;董齐
2.一株猪细小病毒7群的鉴定和分离 [J], 张志;张丽丽;刘爽;吴发兴;李晓成;王树双
3.一株貉源犬细小病毒CPV-CL01株的分离鉴定 [J], 许玲涵;葛平萍;王金亮;王殿永;张洪学;李金波;李富金
4.一株番鸭细小病毒的分离鉴定 [J], 黄俊霖;江婷;唐华丽;杨飞燕;韦天超
5.一株新型猪细小病毒的鉴定和分子克隆 [J], Andrew K.Cheung;晋大鹏
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小鹅瘟病原分离鉴定及高免卵黄抗体研制
小鹅瘟病原分离鉴定及高免卵黄抗体研制
于新和;宋庆华;王彩敏
【期刊名称】《中国动物检疫》
【年(卷),期】2004(21)7
【摘要】小鹅瘟病是由鹅细小病毒引起的一种鹅急性败血性传染病，其特征病变为渗出性肠炎，其传染快死亡率高，是严重危害鹅业的一种传染病。
近年来河南许多鹅场20日龄以下的雏鸡死亡相当严重，怀疑是由于本病的流行引起，为弄清病因，进行综合防治，我们开展了此项研究。
【总页数】1页(P32-32)
【作者】于新和;宋庆华;王彩敏
【作者单位】郑州牧业工程高等专科学校,450008;郑州牧业工程高等专科学
校,450008;郑州市畜牧局,450002
【正文语种】中文
【中图分类】S835
【相关文献】
1.小鹅瘟病原分离鉴定及高免卵黄抗体的研制 [J], 张晓根;汪德刚;王欣
2.鸡禽流感病原分离鉴定及高免卵黄抗体研制 [J], 张晓根;何雷堂;蒋士传
3.湖南小鹅瘟防治研究：Ⅱ.小鹅瘟疫苗的研制及其应用效果 [J], 何月英;谢曼琳
4.用小鹅瘟卵黄抗体防治雏鹅小鹅瘟的试验报告 [J], 高玉兰;晁书之
5.湖南小鹅瘟防治研究——Ⅳ.抗小鹅瘟高免血清、卵黄抗体、山羊血清对小鹅瘟防治效果比较试验 [J], 何月英;谷祥云;李友昌
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