大鼠结肠组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性测定

大鼠结肠组织髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）

活性测定

通过测定大鼠结肠组织髓过氧化物酶MPO活性来评估大鼠结肠组织中性粒细胞的浸润程度，采用分光光度法，根据Bradley的方法略加修改。操作过程简述如下：

1、用电子天平称取50mg大鼠结肠组织进行匀浆，匀浆液为磷酸缓冲液（50mM，pH6.0，内含0.5%十六烷基溴化胺），在冰上操作，为保证匀浆充分，每个标本匀浆10min；

2、将大鼠结肠组织匀浆液超声粉碎10sec；

3、将大鼠结肠组织匀浆液进行冻融（-80℃/37℃），反复冻融3次；

4、4℃14，000*g离心20min；

5、取离心上清液100μl，再加入2.9ml（50mM，pH6.0，内含0.167mg/ml邻联茴香胺和0.0005%过氧化氢）；

6、立即在460nm处观察记录吸光度的变化，25℃时每分钟降解1μmol的过氧化氢为1个单位髓过氧化物酶活性。