茶叶中茶多酚、氨基酸的测定..

茶多酚检验 步骤：
（l）样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品3g于500mL烧 杯中，加入沸水350mL，在沸水浴中浸提45min，每隔10min摇动 1次，趁热抽滤，残渣用少量热蒸馏水洗涤2-3次，滤液倒入 500mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备 用。 （2）测定：吸取样品溶液1mL于25mL容量瓶中，加蒸馏水4mL， 加酒石酸亚铁溶液5mL，摇匀，再加入PH7.5磷酸缓冲液稀释至 刻度。以蒸馏水代替样品溶液加入同样的试剂作空白。 (3)选择540nm波长和1cm的比色杯测定吸光度
实验步骤
（l）样品溶液的制备方法：准确称取茶叶磨碎样品3g于 500mL烧杯中，加入沸水350mL，在沸水浴中浸提45min， 每隔10min摇动1次，趁热抽滤，残渣用少量热蒸馏水洗涤 2-3次，滤液倒入500mL容量瓶中，冷却至室温，用蒸馏水 定容至刻度，摇匀，备用。
（2）氨基酸标准曲线的绘制 分别准确吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL 100mg/L氨基酸标准溶液于25mL容量瓶中，各加 蒸馏水4mL，茚三酮溶液0.5ml和PH8.0缓冲溶液 2ml，在沸水浴中加热15min，冷却后加水定容至 25ml。放置10min，于570nm处，以空白试剂做 参比溶液，测吸光度。 以氨基酸浓度为横坐标， 吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
样品测定 准确吸取试液1ml于25ml容量瓶中，加入0.5ml PH8.0缓冲 溶液和0.5ml茚三酮溶液，在沸水浴中加热15min，冷却后 定容至25ml。放置10min后，于570nm处，以空白试剂做 参比溶液，测吸光度。
计算
C V1 X 1000 V 2 100% m X—茶叶中咖啡碱的质量分数。% c—咖啡碱的浓度，mg V1—样品溶液的总体积，mL V2—测定用样品溶液的量，mL m—样品质量，g
计算：
A 3.913 T 100% 1000 V m
式中：ω—茶多酚的含量，%
A—样品溶液的吸光度值 T—样品溶液的总体积，mL V—测定用样品溶液的量，mL m—样品质量，g 7.826—用0.5cm比色杯，当吸光度为1.0时，试液中茶多酚的浓度为7.826mg/mL 3.913—用1cm比色杯，当吸光度为1.0时，试液中茶多酚的浓度为 3.913mg/mL
高锰酸钾直接滴定法 酒石酸铁比色法
酒石酸铁比色法原理：
酒石酸亚铁能与茶多酚生成蓝紫色络合物，络合物溶 液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。因此可以用比色 方法测定。
仪器：分光光度源自文库 水浴锅，锥形瓶，容量瓶（100mL,25ml) 试剂： （1）酒石酸亚铁溶液：称取 FeSO4· 7H2O 1.000g，含 4个结晶水的 酒石酸钾钠5.000g，加蒸馏水溶解后，用蒸馏水稀释至1000mL （2）PH7.5的磷酸缓冲液
1）茶多酚能清除活性氧自由基，且能有效消除脂 质过氧化产物丙二醛，具有降血脂的显著功效。 2）茶多酚还具有抑制痢疾、伤寒、霍乱、金黄色 葡萄球菌等有害菌的作用。 3）具有较强的抗放射性作用，以及在抗衰老，抑 制瘤细胞，预防心脑血管疾病等方面都显示出很 好的效应。
是一种有开发前景的天然抗氧化剂。
测定方法：
说明及注意事项： 1、磷酸盐缓冲液在常温下容易生长霉菌，放冰箱中保存或临用 时现配。 2、样品溶液制备中的注意事项： （1）较透明的样液，如果味茶饮料，将样液充分摇匀后，直接 取样测定。 （2）较浑浊的样液，如果汁茶饮料、奶茶饮料等，称取充分混 匀的样液25mL于50mL容量瓶中，加95%的乙醇15mL充分混匀， 放置15min，用水定容至刻度，过滤。 （3）含有碳酸气的样液，如农夫汽茶，量取充分混匀的样液 100mL于250mL的烧杯中，称取其总量，于电炉上加热至沸，在 微沸状态下加热10min，以将二氧化碳排除，放冷，用水补足原 来的质量，摇匀，备用。
茶叶中茶多酚的测定
茶多酚
茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的20％～35％，由约30 种以上的酚类物质所组成，通称茶多酚。 茶多酚的性质： 能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。 对热、酸较稳定，2%的溶液加热至120 ℃并保持30min， 无明显变化。在碱性条件下易氧化变质。
茶多酚的功效：
紫外-可见分光光度计的基本结构
紫外-可见分光光度计的基本结构是由五个部分组成：即 光源、单色器、吸收池（样品室）、检测器和信号指示系 统。
茶叶中游离氨基酸总量的测定
茶叶水浸出物中具有α-氨基的有机酸且呈游离状态存在者， 均称为茶叶游离氨基酸。 原理： 氨基酸在PH 8.0时与茚三酮共热，产生紫色络合物，在 570nm处测定其含量。