含量测定方法学考察

含量测定方法学验证内容及可接受标准

１。准确度

指标:该指标主要就是通过回收率来反映。

方法:验证时一般要求分别配制浓度为80％、100％与120%得供试品溶液各三份(9份样品),分别测定其含量,将实测值与理论值比较,计算回收率。

可接受得标准为:各浓度下得平均回收率均应在９8。0％-1０2、0％之间,9

个回收率数据得相对标准差(ＲSＤ)应不大于2。0%。

２。线性

指标:线性一般通过线性回归方程得形式来表示。

方法:在8０%至1２0％得浓度范围内配制6份浓度不同得供试液,分别测定

其主峰得面积,计算相应得含量、以含量为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y),进行线性回归分析。

可接受得标准为:回归线得相关系数(R)不得小于0。9９8,Ｙ轴截距应在100％响应值得2%以内,响应因子得相对标准差应不大于2、0％、

3、精密度

1）重复性

方法:配制６份相同浓度得供试品溶液,由一个分析人员在尽可能相同得条件下进行测试,所得6份供试液含量得相对标准差应不大于2、０%。

2）中间精密度

方法:配制6份相同浓度得供试品溶液,分别由两个分析人员使用不同得仪器与试剂进行测试,所得12个含量数据得相对标准差应不大于2。0%。

4、专属性

可接受得标准为:空白对照应无干扰,主成分与各有关物质应能完全分离,分离

度不得小于2、０。以二极管阵列检测器进行纯度分析时,主峰得纯度因子应大于980、ﻫ５、检测限

主峰与噪音峰信号得强度比应不得小于3。6ﻫ、定量限

主峰与噪音峰信号得强度比应不得小于10。另外,配制6份最低定量限浓度得溶液,所测6份溶液主峰得保留时间得相对标准差应不大于2。0％。

7、耐用性

方法:分别考察流动相比例变化±5％、流动相ｐH值变化±0、2、柱温变化±５℃、流速相对值变化±２0%时,仪器色谱行为得变化,每个条件下各测试两次。

可接受得标准为:主峰得拖尾因子不得大于２。0,主峰与杂质峰必须达到基线分离;各条件下得含量数据(n=6)得相对标准差应不大于２。0％。8ﻫ、系统适应性

方法:配制6份相同浓度得供试品溶液进行分析,主峰峰面积得相对标准差应不大于2、0％,主峰保留时间得相对标准差应不大于１、0％。另外,主峰得拖尾因子不得大于2。0,主峰与杂质峰必须达到基线分离,主峰得理论塔板数应符合质量标准得规定。

有关物质测定方法学验证内容及可接受标准:

１、准确度

该指标主要就是通过回收率来反映。验证时一般要求根据有关物质得定量限与质量标准中该杂质得限度分别配制三个浓度得供试品溶液各三份(例如某杂质得限度为0、2％,则可分别配制该杂质浓度为０、１％、０、2％与0、3％得杂质溶液),分别测定其含量,将实测值与理论值比较,计算回收率,并计算９个回收率数据得相对标准差(RＳD)。该项目得可接受得标准为:各浓度下得平均回收率均应在8０％-１20％之间,如杂质得浓度为定量限,则该浓度下得平均回收率可放宽至7０%-１30％,相对标准差应不大于10％。ﻫ２。线性

线性一般通过线性回归方程得形式来表示、具体得验证方法为:在定量限至一定得浓度范围内配制６份浓度不同得供试液,分别测定该杂质峰得面积,计算相应得含量、以含量为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y),进行线性回归分析。可接受得标准为:回归线得相关系数(Ｒ)不得小于0。9９0,Y轴截距应在10０％响应值得

25%以内,响应因子得相对标准差应不大于10％。

３、精密度

1)重复性配制6份杂质浓度(一般为０、1%)相同得供试品溶液,由一个分析人员在尽可能相同得条件下进行测试,所得6份供试液含量得相对标准差应不大于１５％、

２)中间精密度配制6份杂质浓度(一般为０、1%)相同得供试品溶液,分别由两个分析人员使用不同得仪器与试剂进行测试,所得１２个含量数据得相对标准差应不大于20％。4ﻫ、专属性

可接受得标准为:空白对照应无干扰,该杂质峰与其它峰应能完全分离,分离度不得小于2、０。5ﻫ。检测限

杂质峰与噪音峰信号得强度比应不得小于３、6ﻫ、定量限

杂质峰与噪音峰信号得强度比应不得小于10。另外,配制6份最低定量限浓度得溶液,所测6份溶液杂质峰保留时间得相对标准差应不大于2、0％,峰面积得相对标准差应不大于５、0％。

７。耐用性

分别考察流动相比例变化±５％、流动相pH值变化±0、２、柱温变化±5℃、检测波长变化±5nm、流速相对值变化±2０%以及采用三根不同批号得色谱柱进行测定时,仪器色谱行为得变化,每个条件下各测试两次。可接受得标准为:各杂质峰得拖尾因子不得大于2、0,杂质峰与其她成分峰必须达到基线分离;各条件下得杂质含量数据(n＝6)得相对标准差应不大于２、０%,杂质含量得绝对值在±0、1％以内。ﻫ８、系统适应性

配制６份相同浓度得杂质溶液进行分析,该杂质峰峰面积得相对标准差应不

大于2。0％,保留时间得相对标准差应不大于1、0％。另外,杂质峰得拖尾因子不得大于２、0,理论塔板数应符合质量标准得规定。

9、溶液稳定性

按照分析方法分别配置对照品溶液与供试品溶液,平行测定两次主成分与杂

质得含量,然后将上述溶液分别贮存在室温与冰箱冷藏室(4℃)中,在1、2、3、5

与7天时分别平行测定两次主成分与杂质得含量。ﻫ可接受得标准为:主成分得含量变化得绝对值应不大于2。0％,杂质含量得绝对值在±0。1%以内,并不得出现新得大于报告限度得杂质、