醛酮类化合物检测方法

醛酮類化合物检测方法─高效能液相层析法

中华民国89年8月29日（89）环署检字第48966号公告

自中华民国89年11月29日起实施

NIEA R502.10C

中华民国91年3月5日环署检字第0910014627号公告修正为NIEA R502.11C

一、方法概要

本方法用以检测非气体基质中具游離醛酮基(free carbonyl) 化合物。固态样品萃取液

或水样经过濾后，在40 ℃下与2,4-二硝基苯胼

(2,4-dinitrophenylhydrazine, DNPH) 反应，

生成相对应之DNPH 衍生物，经C18 管柱萃取或二氯甲烷液相－液相萃取及浓缩后，取

适当体积注入高效液相层析仪(HPLC) 。使用逆相层析管柱及梯度冲提分離出各种醛類与

酮類之DNPH 衍生物，用紫外光侦测器在360 nm 之波长测其吸收强度，进行目标待测物

的确认与定量。

二、适用范围

（一）本方法适用于水样、土壤、废弃物、及毒性化学物质样品检测。各目标待测物列出

如下：

（二）方法侦测极限列在表一及表二。视样品基质干扰情形及步骤中所使用的样品体积，

各样品的方法侦测极限，可能与表中所列之值不同。

三、干扰

（一）方法的干扰可能源自于溶剂、试剂、玻璃器皿和样品处理用设备的污染，导致随机

干扰，或使层析图谱的基线升高，因此必须使用相同的检测条件设定，依七、（四）节步骤执行实验室内试剂及器皿之方法空白检测，以确定无干扰物存在。

待测物CAS No.a

甲醛(Formaldehyde) 50-00-0

乙醛(Acetaldehyde) 75-07-0

丙醛(Propanal, Propionaldehyde) 123-38-6

巴豆醛(Crotonaldehyde) 123-73-9

丁醛(Butanal, Butyraldehyde) 123-72-8

环己酮(Cyclohexanone) 108-94-1

戊醛(Pentanal, Valeraldehyde) 110-62-3

己醛(Hexanal, Hexaldehyde) 66-25-1

庚醛(Heptanal) 111-71-7

辛醛(Octanal) 124-13-0

壬醛(Nonanal) 124-19-6

癸醛(Decanal) 112-31-2

注：a 化学文摘社登记号码。

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.tw/niea/REFUSE/R50211C.htm 2008/10/6 1.玻璃器皿必须绝对洁净，使用后必须立即以最后所使用的溶剂冲洗，接着用清

洁剂和热水清洗，再用自來水和不含有机物的试剂水清洗，清洗完成后，晾干

并干燥之，使用前再于130 ℃烘箱中烘2-3 小时。乙腈的冲洗步骤可以烘箱烘

烤步骤取代，不可用甲醇或丙酮清洗玻璃器皿，因这些溶剂会与DNPH 反应而

生成干扰物。于干燥并冷却后，玻璃器皿应保存于一洁净区域，避免灰尘堆积

或其它污染物的污染。

2.使用高纯度试剂和溶剂可减少干扰，并可使用全玻璃蒸馏系统蒸馏纯化溶剂。

3.当执行硅胶管处理步骤时，必须戴聚乙烯(PE) 材质的手套，以避免可能的污

染。

（二）由于环境中自然存在甲醛，故常发生DNPH 试剂被甲醛污染，所使用的DNPH试剂

必须以HPLC 级的乙腈进行多次再结晶纯化步骤，再结晶纯化步骤系于40 - 60 ℃慢

慢将溶剂蒸发以得到最多的结晶，纯化后的DNPH 结晶保存于HPLC 级的乙腈中。

于执行样品检测前应先执行DNPH 中所含醛酮類化合物不纯物的检测，不纯物的量

应小于25 mg/L。參見附錄之DNPH 再结晶步骤。

（三）基质干扰可能來自于与样品共同被萃取出來的污染物，基质干扰情形可分成样品來

源和基质本身。若一系列样品都有干扰问题，则应更换移动相或进行必要的清洗步

骤。

（四）若样品中含有乙醇则于进行衍生步骤时，会产生乙醛，此背景问题，将无法检测浓

度低于0.5 ppm ( 500 ppb ) 的乙醛。

四、设备

（一）高效液相层析仪(组装式)

1.泵系统：可梯度冲提，固定流量控制可达1.5 mL/min.。

2.高压注射阀，附20 μL样品回路。

3.管柱：250 mm ×

4.6 mm 内径，5 - μm 粒径之C18 填充剂(Zorbax）或同级品。

4.吸光侦测器：360 nm。

5.与侦测器聯通的记錄器：最好用數据处理系统以量测尖峰面积及滞留时间。

6.氦气：供移动相溶剂除气。

7.移动相盛装容器和抽气过濾装置：供盛装和过濾HPLC 移动相之用，过濾装置

必须全为玻璃和铁氟龍材质，并使用0.22 μm 聚酯濾膜。

8.样品注射针：将样品注入HPLC 样品回路中，至少需承装样品回路体积之四倍

的容量。

（二）衍生反应设备

1.反应瓶：250 mL 平底长颈圆烧瓶。

2.分液漏斗：250 mL 附铁氟龍栓塞。

3.K-D装置：參見「分液漏斗液相－液相萃取法（NIEA R106.00C）」或其它萃取

方法系列的适当方法。(若其它浓缩装置经实验室验证，具同等功能者亦可使用)。

4.沸石：以二氯甲烷溶剂萃取洁净处理过，约为10 / 40 mesh (碳化硅或同级品)。

5.pH计：能量测精确至0.01 单位。

6.玻璃纤维濾纸：孔径1.2 μm (Fisher G4 级或同级品)。

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.tw/niea/REFUSE/R50211C.htm 2008/10/6

7.固相吸附管：内部充填2 g C18 (Baker 或同级品)。

8.真空固相萃取装置：能同时萃取12 个样品(Supelco 或同级品)。

9.样品容器：容量为60 mL (Supelco 或同级品)。

10.微量吸管：能精确转置0.10 mL 的溶液。

11.水浴槽：加热用，附同心圆盖，可控制温度(精确至± 2 ℃ )，需在抽气柜中操

作。

12.样品震荡器：回转震荡式及附温度控制烘箱(精确至± 2 ℃ ) (Lab-Line Orbit

Environ-Shaker Model 3527 或同级品)。

13.注射针：5 mL、500 μL、100 μL，(附旋转密合接头或同级品)。

14.针筒过濾片：0.45 μm 濾片匣，(Gelman Acrodisc 4438 或同级品)。（三）量瓶：5 mL 、10 mL 及250 mL 或500 mL。

（四）样品瓶：10 或25 mL 玻璃瓶，附铁氟龍内衬螺旋盖或加压密合盖。（五）天平：分析天平，精确至0.0001 g。

（六）玻璃漏斗。

（七）聚乙烯(PE) 手套：用來处理硅胶吸附管。

（八）固体样品萃取设备