几种鱼类血液指标及不同器官消化酶活性比较

蛋白酶活力单位定义：在37℃下每分钟 水解0.5%酪素产生1µg酪氨酸为一个酶 活力单位U。 蛋白酶的活力单位=A/15×F A为样品测得光密度查曲线得到相应酪氨 酸的µg数；F为酶液最终稀释倍数；15为 反应时间（min）。

2.淀粉酶活力测定
对照管 测定管
0.04%可溶性淀粉
5ml 将两管在37℃水浴预热2～5分钟
几种鱼类血液指标及不同器官 消化酶活性比较
引言

鱼类消化酶主要有蛋白酶，脂肪酶和淀 粉酶等几种，鱼类消化酶的活性随种类， 生长阶段和健康状况的不同而有差异， 同时受水体温度，盐度，无机离子以及 饲料等因素的影响，鱼类消化酶研究可 用于指导筛选饲料配方，开发新的饲料 源和确立适宜养殖条件。

而鱼类的血液指标则包括血液生理指标 和血液生化指标，生理指标包含红细胞 数目，白细胞数目，血沉降值；血液生 化指标包含血糖，血脂，血胆固醇。正 常血液指标值能反映物种的属性和动物 的生理状态。鱼类血液与其代谢、营养 及健康状况有着密切的联系。
二.血液指标的测定

血液生理指标测定： 1.红细胞计数 2.白细胞计数 3.红细胞沉降率 4.红细胞比容

血液生化指标测定： 1.血糖：邻甲苯胺法； 2.血清总脂：香草醛比色法； 3.血清胆固醇：邻苯二甲醛法。（试剂 盒）
三.消化酶指标测定

1.蛋白酶活力测定
对照管 适当稀释酶溶液 去离子水 0.5酪素（预热过） 10%三氯乙酸 取上清液于另外试管内 0.55M碳酸钠 福林试剂 / 1ml 37℃水浴预热3～5分钟 2ml 37℃水浴准确反应15分钟 3ml 离心去除沉淀 1ml 5ml 1ml 1ml 5ml 1ml 3ml 2ml 测定管 1ml /


脂肪酶活力计算方法：U=（A1-A2） /As*3632(单位U/L) As=0.681
四.结果探讨

1.鱼类食性对消化酶的影响 鱼类的食性一般分为肉食性、草食 性和杂食性，它与消化器官组织结构和 消化机能是相适应的，消化器官组织结 构不同，所承担的消化机能不同，因而 消化酶活性也呈明显差异。
5ml
酶液
/ 测定管混匀后，再置37℃水浴中反应7.5分钟
0.1ml
0.01N碘应用液
5ml
5ml


淀粉酶活力单位定义：在37℃、30min内， 100ml酶液中的淀粉酶能完全水解淀粉 10mg称为一个淀粉酶活力单位。 淀粉酶活力单位/100ml=（对照管光密度 -测定管光密度）/对照管光密度 ×2/10×30/7.5×100/1=（对照管光密 度-测定管光密度）/对照管光密度×80
一.血样及酶液制备

血样制备：尾静脉采血，将血液分装于2 支不同的离心管内，一支用肝素抗凝， 4℃保存，用于血液生理指标测定；另一 支不加抗凝剂，血液在室温凝结2h后， 4℃，2000r/min离心10min。取上清于80℃保存，用于血液生化指标测定。

酶液制备：将4种鱼置冰盘脊椎处死，取 出胃、肝脏、肠等，剔除内容物及结缔 组织，用预冷去离子水冲洗干净，于4℃ 下剪碎。按样品重的5倍加入PH7.0的冷 冻去离子水，玻璃匀浆器匀浆，匀浆液 4℃下以3000rpm/min的速率离心30分钟， 收集上清液为消化酶粗酶提取液，置于 4℃冰箱中保存，24h内检测酶活力。

3.脂肪酶活力测定 将分光光度计于420nm处以Tris缓冲液调零，1cm光 径玻璃比色皿；然后将底物缓冲液在37℃预温5min以 上。往相应编号试管中加入0.05ml新鲜血清，再用5ml 加样器吸取4ml预温的底物缓冲液冲入试管中，迅速用 冰箱保鲜膜盖住管口，立即颠倒混合5次。然后迅速倒 入比色皿中在420nm处比浊，读取吸光度值（A1）。 再将此比色液倒入原试管中置37℃准确水浴10min， 再用上法比色读取吸光度值（A2）。最后取底物缓冲 液4ml加0.9%氯化钠50μL，420nm比浊，读取吸光度 值（As）。

2.鱼类自身生长阶段对消化酶的影响 随鱼体的生长，鱼需要营养成分的 质与量也随之变化。消化器官随着生长 相对增大，内分泌机能增强，从而使消 化酶也随之相适应而变化。因而，由于 季节不同、环境水温变化，鱼类表现出 不同的生长速度。

3.血液生理指标 鱼类血液性状指标的高低与鱼类活动 性及食性有关，活动性强的鱼类高于活 动性弱的鱼类，肉食性鱼类高于草食性 鱼类，草食性鱼类高于杂食性鱼类。

2.实验目的比较简单 实验只是简单测定了4种鱼类的血液指 标和消化酶指标，可以适当增加一些实 验条件，比如增加不同PH或温度梯度下 鱼类的消化酶指标，也可以增加不同饲 料对鱼类消化酶的影响。
六.感言

大学四年时光一晃就要过去了，四年的大 学生活也给我留下了许多的美好回忆，而这篇 论文的完结我需要感谢的人实在是太多了，首 先是我的指导老师齐老师，他一直关心着我论 文的写作进展，并且给我提出了许多重要的建 议，然后还有我的王瑞师兄，是他在百忙中数 次帮我修改论文，最后我还要感谢四年来教过 我的恩师们，是你们把我从一个幼稚的高中生 转变为现在的一名合格的大学生。
Hale Waihona Puke Baidu
血液生化指标 本试验对四种鱼类血液的一些有机化 学成分，如血糖、血总脂、血胆固醇等 进行了初步的测定，结果可以作为它们 正常生理常数参考值，而且这些指标观 测值的变化指示了它们对环境改变的反 应。
五.实验反思

1.实验材料比较单一 实验只选取了4种常见的肉食性经济 鱼类作为研究对象，由于肉食性鱼类食 物组成相似，导致实验数据差别不大， 可比性不太强。



一般肉食性鱼类的消化道短，蛋白酶活性强， 草食性鱼类的消化道长，淀粉酶活性强。 蛋白酶活性从高到低顺序为：肉食性鱼类> 杂食性鱼类>滤食性鱼类>草食性鱼类；鱼类 淀粉酶活性也明显与食性相关。 有什么样的食性，就有什么样消化酶的组成 状况，而且消化酶活力大小变化程度与食物组 成的变化程度是相关的，这正是鱼类对本身生 态环境的一种适应。