线粒体膜蛋白提取方法

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产品号 BB-3101 BB-3102 BB-3411 BB-3501 BB-3121 BB-3122 BB-3123 BB-3125 BB-3105 BB-3702
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产品号 BB-3108 BB-3103 BB-3401 BB-3721 BB-3151 BB-3124 BB-3152 BB-3301 BB-3311 BB-3703
线粒体膜蛋白提取试剂盒
产品组成：
产品组成 规格
线粒体膜蛋白提取 试剂 A 线粒体膜蛋白提取 试剂 B 线粒体膜蛋白提取 试剂 C
膜蛋白溶解液 蛋白酶抑制剂混合物
BB-3158-1 50T 10ml 10ml 10ml 6ml 100ul
BB-3158-2 100T 20ml 20ml 20ml 12ml 200ul
使用方法：
1. 取 2×107 个细胞①，在 4℃，500×g 条件下离心 2-3 分钟，小心吸取培养基， 尽可能吸干，收集细胞。
2. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸Hale Waihona Puke Baidu上清。 3. 加入 200μl 冷的试剂 A，置冰上 10 分钟。 4. 匀浆器匀浆 30-40 下，然后在 4℃，500×g 条件下离心 5 分钟。 5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管。 6. 在 4℃，11000×g 以上条件下离心 20 分钟。 7. 在沉淀中加入 200μl 冷的试剂 B，混匀。 8. 在 4℃，11000×g 以上条件下离心 20 分钟。。 9. 弃上清。 10. 在沉淀中加入 200μl 冷的试剂 C，2ul 蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡 15
秒，置冰上 20 分钟，每隔 5 分钟高速涡旋振荡 15 秒。 11. 37℃水浴 10 分钟。
12. 37℃下②2000g 离心 5 分钟，此时溶液分为两层（对着光线看），下层约为 20μl。
13. 小心吸取上层丢弃或小心吸出下层。 14. 用 80-150μl 冰冷的膜蛋白稀释液稀释下层相，即得线粒体膜蛋白。 15. 将上述蛋白提取物定量③后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
储存条件： 蛋白提取液 2-8℃保存；蛋白溶解液室温保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
有效期： 一年。
产品简介： 贝博线粒体膜蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实
体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结 缔组织等哺乳动物组织中提取线粒体膜蛋白。提取过程简单方便。制备的线粒体膜蛋白不仅 纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于 Western Blotting、转录活性 分析、Gel shift 凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。