血糖浓度测定

血糖浓度测定

【实验目的】学会用分光光度计测定血清中GLU（葡萄糖）的含量。

【检验原理】肉眼可见彩色光称为可见光，波长范围在400～750nm。当可见光通过有色溶液介质，一部分光能被吸收，一部分被透过。这种光能的吸收和透过，可用于某些物质的定性、定量分析。用葡萄糖试剂同样处理已知浓度的葡萄糖标准液和待测血清样品，标准管和样品管内的葡萄糖与试剂发生显色反应（形成红色醌型化合物），在510nm波长测定其吸光度值，计算样品的血糖浓度。

【检验用品】葡萄糖测定试剂、葡萄糖标准液，大、小微量移液计、配套吸管，722-P可见分光光度计，试管、试管架、玻璃笔，手控电热水浴槽。

【检验方法】

1．准备试管试液：取三支试管，用玻璃笔在试管上划记1、2、3编号，1试剂空白管、2标准管、3样品管。用大移液计（配大吸管）分别吸取试剂1ml（1000μl）入三支试管内，换用小移液计（配小吸管）吸取葡萄糖标准液10μl入标准管内，换小吸管后吸取待测血清样品10μl入样品管内。

2．水浴：各管混合均匀，置于试管架上并放入水浴槽内，37℃水浴15分钟后取出。

3.上机测定

（1）接通光度计电源、开机，打开光度计比色皿，按编号依次将三支试管液倒入比色皿中，使其磨砂面相邻隔光，透光面对准光路。

（2）把可见光波长调至510nm。当试剂空白管透光时，按MODE （功能）键设置T(透光度)为100%。再按功能键设置为A（吸光度），滑动比色皿拉杆，依次让标准管、样品管透光并测出其吸光度值。

1试剂空白管2标准管3样品管试剂（ml） 1.0 1.0 1.0

标准液（μl）—10 —

样品（μl）——10

【检验结果】

C样：样品浓度？C标：标准液浓度（5.55mmol/L）A样：样品吸光度值（）A标：标准液吸光度值（）

C样=A样/ A标×C标