GBT22388奶粉中的三聚氰胺检测液相色谱质谱法

流程图
称样 2g 50 mL 离心管 均质 振荡萃取，4000 r/min 离心 5 min 0.2 mol/L 高氯酸溶液 9.8 mL 0.2 μg/mL 内标溶液 0.2 mL 10 mL 二氯甲烷
取水相（上层）5 mL 过柱（用前预活 化） 3mL 水和 3mL 甲醇洗涤柱子，弃去洗液 3mL5%的氨化甲醇洗脱柱子，收集洗脱液 洗脱液于 50 ℃氮气吹干 2.0 mL 乙腈+水（9+1）洗脱、过滤，上机检测
三聚氰胺检测原理（LC/MS/MS）
标准中：试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取， 经阳离子交换固相萃取柱净化后，用液相 色谱-质谱/质谱检测和确证，外标法 本实验室用0.2 mol/L高氯酸溶液提取，增 加了“样品经0.2 mol/L高氯酸溶液提取后 加入10 mL二氯甲烷萃取”,离心，取上层 过柱，内标法定量，固相萃取净化步骤同 标准。
标准曲线配制
2、5 、10 、20ng/mL(各含内 曲线浓度 标10.0 ng/mL)
工作液
移取体积 （mL） 0.2 曲线 0.5 0.1μg/mL 1.0 稀释至 10 mL 浓度 （ng/mL） 2 5 10
2.0
内标0.2ug/mL 0.5
20
10
3．色谱条件
• 仪器型号：Agilent 1200-6410 LC/MS (08JL016) • 色谱柱：ACQUITY UPLC BEH HILIC 1.7 μm • 流速：0.2 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：5 μL； • 流动相：A醋酸铵水B乙腈；梯度洗脱； • Iron Source：ESI+；Capillary：4kV； • Fragmentor：105；delta EMV：300； • Gas Temp：110 ℃； Gas Flow：11L/hr； • Nebulizer: 35psi。

检出限
HPLC/MS/MS：0.01 mg/kg HPLC:2mg/kg

检测流程：
称样2.00 g, 准确加入0.2 mol/L高氯酸溶液9.8 mL、 0.2 μg/mL三聚氰胺内标溶液0.2 mL，均质，加入 10 mL二氯甲烷，振荡，4000r/min 离心5分钟，准 确移取5 mL上清液过混合性阳离子交换固相萃取 柱（用前用3 mL甲醇、3 mL水活化），分别用 3mL水和3mL甲醇淋洗柱子，再用3.0 mL 5%氨水 甲醇溶液洗脱，收集洗脱液于50 ℃氮气吹干，准 确加入乙腈+水（9+1）2.0 mL，涡旋振荡，洗脱 液用0.25 μm微孔滤膜过滤，上机测定。
Time(min ) A% 0.0 95 1.0 95 2.0 50 4.5 50Baidu Nhomakorabea4.6 95 8.0 95
注意事项
每批检测样做样顺序为试剂空白、样品空白、样品加标、样品。 加标回收：移取0.2 mL，0.1 μg/mL标准溶液至样品中，相当于0.01 mg/kg添加水平，加入0.2mL 0.2 μg/mL内标工作液，初测加标要选 同等基质的样品做空白，样品复测做平行样，复测时如没有同等基 质的空白样品则直接在样品中加标，加标量为初测时样品中的含量 3 倍，且加入内标量也应与三聚氰胺含量相当，样品提取液在过固 相萃取柱之前稀释到合适的范围，取稀释液过固相萃取柱，且应保 证最终上机工作液中内标的含量为10.0ng/mL . 检测结果无需校正回收率，检测结果应减去试剂空白。 每次检测结果应与标准谱图对照，如相同浓度标液峰面积偏差较大， 应及时查找原因；
GB/T22388 奶粉中的三聚氰胺检测液相色谱质谱法
2016.02.29
1 性质




三聚氰胺：别名蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺。 分 子 式：C3N6H6、 C3N3(NH2)3 ；分 子 量： 126.12 物理性能：白色结晶粉末，无毒，无味； 相对密度：1570kg/m³； 熔点：在常压下，354℃分解； 升华温度：300℃； 溶 解 性：能溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、 甘油、吡啶；微溶于水、乙醇；不溶于乙醚、 苯和四氯化碳，水溶液呈弱碱性
化学性能

三聚氰胺是一种重要的氮杂环有机化工原料， 显弱碱性，能够与各种酸反应生成三聚氰胺盐； 在强酸或强碱液中，三聚氰胺发生水解，胺基 逐步被羟基取代，生成三聚氰酸二酰胺、三聚 氰酸一酰胺和三聚氰酸；三聚氰胺与醛类反应 生成加成化合物；三聚氰胺与甲醛反应制成树 脂，三聚氰胺树脂是一种多种用途的材料，防 火耐热且有很高的稳定性，用于生产塑料、地 板砖，厨房用具，防火纤维，商业滤膜，胶水 和阻燃剂