微核诱导

洗手液对大蒜根尖的微核诱导

摘要本实验选用大蒜根尖为实验材料，某品牌洗手液为待测样品，依据化学诱变剂可以改变细胞染色体复制、分离中的完整性及数目，从而产生有染色体或其片段形成微核结构的原理，展开实验。其中用蒸馏水设置一组阴性对照。关键词洗手液、大蒜、微核诱导

前言微核（micronucleus, 简称MCN）也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式，呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下，折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合成DNA的能力。微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片形成的。

一、诱导对象及方法：

1.实验材料的培养本实验选取大蒜根尖为实验材料。将筛选好的大蒜（2头）放盛有蒸馏水的小烧杯中，液面刚好淹没大蒜底部以保证根尖垂直、同步生长。室温培养约2-4天，待根尖长出2-3 cm即可备用。

2.待测液处理将某品牌洗手液分别稀释5倍、10倍、50倍、100倍、200倍，配置成20 ml的溶液。将备用的大蒜根尖浸于相应浓度的待测液中（2颗/浓度）。另外取2颗备用大蒜根尖浸于蒸馏水中，作为阴性对照。室温处理时间为48 h。

3.恢复培养取出待测液中的大蒜根尖用蒸馏水反复冲洗3-5次，1-2 min/次，再置于盛有蒸馏水的小烧杯中继续室温培养24 h。

4.解离与染色恢复培养后将根尖剪下约2 cm，分别置于1M的盐酸溶液中、60°C水浴中经10 min解离取出。取一个根尖用蒸馏水冲洗后放在干净的载玻片，用吸水纸吸取根尖周围的水分，取根部尖端约0.5-1 cm进行染色。将一滴吉姆萨染液滴于待染的根尖，染色约10-15 min。

5.制片与镜检吸取根尖周围的染液，滴一滴45%的醋酸溶液，盖上盖玻片，轻压。用吸水纸包住玻片，用铅笔的橡皮头敲打盖玻片至标本呈散开的云雾状。用显微镜观察制片。

二、假设与预期

设计次实验旨在观察洗手液对微核的诱导，从而启示大家在日常生活中一方面注意洗手液的取用量，另一方面减少洗涤用品的污染。

假设待测液能对细胞产生微核诱导，通过浓度梯度的设置，从低到高一次可看出微核出现数量的差异。稀释倍数越大，诱导能力越低，微核数量越少；反之则微核数量相应增多。

三、结果与思考

微核显微摄像如下（筛选后）：

图1 对照组

图2 5倍稀释液

图3 10倍稀释液

图4 50倍稀释液

图5 100稀释液

图6 200稀释液

通过观察以上照片发现，洗手液对大蒜根尖的微核诱导有较明显的效果，5倍稀释液相对最接近原液浓度，其中微核数量最多，说明高浓度的洗手液对细胞确实有一定诱导效应。随浓度的降低微核数也依次减少，说明适量的去用洗手液可以降低对细胞的伤害。但是200倍稀释液出现异常现象，微核数较之前明显有增加。另外，图2、3、6中细胞形态较其他图中有明显差异。

四、分析影响微核诱导的因素

首先，培养的大蒜根尖长短有所不同，对于待测液的吸收利用能力不同，尽管实验中已尽量避免该因素可能造成的误差；

其次，在微核诱导时会出现随诱导物浓度的升高，其微核率有逐渐上升再降低的趋势。

原因可能：

低浓度时，随诱导物浓度的升高，染色体损伤的情况有所加大，导致微核率升高；当诱导物浓度升高到一定程度时，会导致细胞分裂受阻，有丝分裂指数下降，甚至细胞死亡。

最后，压片过程中如细胞分散不均匀，会影响观察结果。

结束语

此次实验充分发挥了学生的学习自主性，极大程度上给予学生创新实践、团队合作的机会。实验结果也从一个方面提示大家在日常生活中适量去用化学洗涤用品，避免其危害人类健康。

参考文献：

《遗传学综合实验》李雅轩赵昕主编科学出版社/