苎麻脱胶菌株的原生质体紫外线诱变育种及应用

菌种大都存在着分泌的酶系不全或 分泌脱胶关键酶能力差等 缺点 ， 致使脱胶纤维达不到麻纺行业后续加工 的要求 ， 因此有 必要引入理化诱变及分子生物学手段进行苎麻脱胶菌的育种 研究 ， 以获取新型高产菌株来优化脱胶工 艺 ， 完善生物脱胶 技 术体系。
原生质体诱 变是 以获取的细胞 原生质体 为材料 ， 采用物 理或化 学诱变 剂处 理 ， 过再生 培养 ， 经 选育 获得突变 株 的技
王 军 黄 秀琴 黄 小云 ， ， ，孙冬梅 王 洁 ， ，曾庆福 ，陈 悟 。 洪 高 ，陈
（． １武汉 纺织 大学纺织 印染清洁生产教育部工程研究中心 ， 湖北武汉 ４ ０７ ； ． ３０ ３ ２ 武汉纺织大学环境与城建学院 ， 湖北武汉 ４ ０ ７ ） ３０ ３
摘要 ：为实现苎麻 的生物脱胶 ， 本研究 对苎麻脱胶菌株 ＨＹ １原生质体进行 紫外 诱变筛选 ， １ 以诱 变菌株 的果胶 酶 活性为筛选指标 ， 筛选出脱 胶菌株 ＨＹ １— ３ 并对 该菌株进行形态观察及脱胶试验 。结果表 明 ， １ ７， 菌株 Ｈ １— ３果胶 Ｙ１ ７
０ ５ 、 ａ １０ ５ 牛 肉膏 ０ ５ 果 胶 ０ ５ 琼 脂 ２ ， ．％ Ｎ Ｃ ． ％、 ． ％、 ． ％、 ％ Ｋ Ｈ Ｏ 调 ｐ 值至 ７ ０ ＭＭ 液 ： 糖 ０ ５ｍ ｌｍ 、 Ｐ４ Ｈ ． 。Ｓ 蔗 ． ｏ Ｌ 氯化 镁 ／ ００ ｏ ｍ 、 ．２ｍ ｌ Ｌ 顺丁烯二酸 ００ ｏ ｍ 调 ｐ ／ ．２ｍ ｌ Ｌ， Ｈ值到 ７０ ／ ． 。固体
进行脱胶试验 。
１ 材 料 与 方 法
１１ 材 料 ．
１ １ １ 菌种 ．．
从脱胶厂沤 麻池 的厌 氧泥和堆积腐 败 的苎麻
的精 干麻品质优 于化 学脱胶麻 ， 且成本低 、 绿色环保 、 工艺 简 单、 易于 自动化操 作 ， 是一项极具发展潜力的技术 …。 目前生物脱胶 的研究取 得了很大 的进展 ， 已经筛选 了很
生物培养基 制品厂 ； 萄糖 ， 津市博迪化工有 限公 司； 葡 天 甘氨
酸， 天津市福晨化学试剂厂 。
１２ 试 验 方 法 ．
使 得突变株产 紫杉 醇的 产量 由出发 菌株 的 ２ ｇＬ提 高到 ０ ／ ２ ５ ２ ／ 。胡婷婷等以绿色木 霉 ， ２ ． ｇ Ｌ Ｉ Ｕ为出发菌株 ， 对其进 行 原生 质体紫外诱变 ， 筛选得到 突变株 Ｕ Ｔ２， Ｃ Ｖ １ 其 ＭＣ酶活
线 和硫 酸二 乙 酯 处 理 ｍ ｉ ｔ ｉ Ｙ １７ 优 化 培 养 基 后 ， ａｒ ｓ ａ １ １ ， ｅ ｒｎ
钠， 国药集 团化学试剂有 限公 司； 果胶 ， 国 ｓ ｍ 公 司； 白 美 ｉ ａ ｇ 蛋
胨 ， 京奥博星生 物技 术有限公 司； 北 酵母抽提物 ， 北京双旋微
多用于 苎 麻 脱 胶 的菌 株 ， 武 汉 大 学 筛 选 的 嗜 碱 芽 孢 杆 如 菌 ， 中国农 业科 学 院麻类 作 物 科学 研 究 所筛 选 的 Ｔ ５— ８ ２０３以及 Ｚ ｅｇ等筛选 了 ３株嗜碱性菌株 Ｎ ３ Ｎ ５ 、 ６＿ ｈｎ Ｔ一 ９、 Ｔ一 ３ Ｎ Ｔ一７ ６应用于苎麻的脱胶 过程 等。由于 当前筛 选 的野 生
１ １３ 培养基 ．．
０５ 、 ．％ 牛肉膏 ０ ５ 葡萄糖 １ Ｋ Ｈ ０ 调 ｐ ． ％、 ％， Ｐ ４ Ｈ值至 ７０ ． 。高
渗再生培养基 ： 在完全培 养基的基础上添加 ０ ７ｍ ｌＬＫ １ ． ｏ Ｃ 制 ／ 备成氯 化钾 再 生培 养 基。活化 培养 基 ： 白胨 ２ 、 蛋 ％ 酵母 粉
培养基是在液体培养基基础上添加 １５ ． ％的琼脂粉 。 １ １４ 主要 试剂 ．． 蜗 牛酶 、 ， ３ ５一二 硝基水杨 酸 、 Байду номын сангаас石酸 钾
术。原生质体通 常是 由对数生长期 的细胞 制备而来 的 ， 这个 时期的细胞代谢 旺盛 、 复制频繁 、 生活力强 、 对诱 变剂 的敏感 性 也强 ， 从而成为诱变较为理想 的材料 。因此 ， 生质体诱变 原 技术被广泛应用 于工业 微生 物菌种 的选育 ， Ｘ 如 ｕ等用 紫外
标 均优于出发菌 Ｈ １ Ｙ１ 。
关键词 ： 苎麻 ； 脱胶菌株 ；原生质体 ； 紫外线诱 变
中图分类号 ： ５ ３ １ｌ ￥ ６ ．０ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ：０ ２—１０ （０ １ ０ １０ ３２ ２ １ ）３—０５ ０ ４ ９— ３
苎麻是一种传 统纤维作物 ， 其纤维有 着“ 天然纤 维之王 ” 的美誉 ， 其原麻含有 ６ ％ 一 ０ ０ ７ ％纤 维素和 ３ ％ 一 ５ ０ ３ ％非纤 维 素的胶质成分 ， 在纺纱前这些胶 质成分必须去除 ， 才能释放 出 单纤 维用 于后续纺织加工 。 目前通用的化学脱胶方法存 在用 水量 大 、 污染严重等缺陷。生物脱胶作用条件温和 ， 脱胶制成
中筛选优化得到的高果胶 酶活性 （ 粗酶液酶活 ６ １Ｕ ｍＬ 、 １ ３ ／ ） ￣ 低纤维素酶活性 （ 粗酶 液酶 活性 ８Ｕ ｍ ） ／ Ｌ 的菌株 Ｈ １ （ Ｙ １ 酵
母菌 ） 。 １ １２ 苎麻 ．．
公司。
苎麻韧皮纤 维取 自于 湖北 新农生态 麻业有 限 完全培养基 ： 蛋白胨 ２ 酵母 粉 ０ ５ Ｎ Ｃ ％、 ． ％、 ａ １
酶产量高于 出发菌 Ｈ １ １３３ ， Ｙ １ ２ ．％ 生长速度提高 了 ４．６ ； ２８ ％ 诱变菌 Ｈ １ — ３ 苎麻 具有较好的脱胶效果 ， ｄ可以 Ｙ１ ７ 对 ３ 完成脱胶 ， 苎麻 的失重率为 ３ ．４ ； ４ ０ ％ 脱胶 后纤维的化学成分分析结果表 明， 诱变菌 Ｈ １ ３除水溶物含量外其余 指 Ｙ１ —７
江苏农业科学 ２ １ 年第 ３ 卷第 ３ ０１ ９ 期
王 军， 秀琴 ， 黄 黄小云 ， 等．苎麻 脱胶 菌株的原生质体 紫外线诱 变育种及应用 ［ ］ Ｊ ．江苏农 业科 学， １ ， （ ） ４ ９ ４ １ ２ １３ ３ ： － ６ ０ ９ ５
苎麻脱胶菌株 的原生 质体 紫外 线诱 变育种及应用