实验四 温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响

1、实验器材：
(1)恒三温、水试浴剂锅 和(2器)试材管 (3)烧杯 (4)量筒 (5)玻璃棒 (6)白磁板
(7)铁三角架 (8)酒精灯 (10 )试管夹 (11)试管架 (12)秒表
2、实验试剂 (1) 0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液 (2) KI-I2 (4) 1%NaCl 6) 1%Na2SO4 (7) 0.1%淀粉溶 (8) 唾液淀粉酶
管号
1
2
3
淀粉溶液（ml）
1.5
1.5
1.5
稀释唾液（ml）
1
1
－
煮沸的稀释唾（ml）
－
－
1
(二) 激活剂和抑制剂对酶活性的影响
试剂
管号
1
2
3
1%NaCl（ml）
1.0
—
—
1%CuSO4（ ml ）
—
蒸馏水（ ml ）
—
wk.baidu.com1.0
—
—
—
1%Na2SO4（ ml ）
—
0.1%淀粉（ ml ）
1.5
—
1.0
一般情况下，一种激活剂对某种酶是激活剂，而对另一种酶则起
抑制作用；
剂
i
对于同一种酶，不同] 激活剂浓度会产生不同的作用。
（三）抑制剂对酶反应的影响 抑制剂能与酶分子上某些必须基团结合,使酶的活性中心的化学 性质发生改变，导致酶活力下降或丧失。酶的抑制剂一般具备两 个特点： 1、在化学结构上与被抑制的底物分子的过渡状态相似。 2、能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的 复合体。
1.5
1.5
唾液淀粉酶
1.0
1.0
1.0
摇匀，置37℃水浴中10分钟，取出冷却。
KI-I2（滴）
1-2滴
1-2滴
1-2滴
记录结果
4 — — 1.0 — 1.5 1.0
1-2滴
五、注意事项
1、本实验中的保温时间分别是5min或10min，但不同的唾液淀 粉 酶的活性是不同的，如果没能得到理想的颜色梯度，则需要 根据先前的现象结果适当调整酶浓度或反应时间。
2应、后加才入能酶得液到后理务想必的剂 i 充颜分色摇梯匀度，变保化证结酶果与。淀粉溶液充分混匀，反 ]
实验四 温度、激活剂和抑制剂对酶活 力的影响
一、实验目的
1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶 最适温度的方法。 2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应 速度的原理和方法。
二、实验原理 （一）温度对酶活性的影响
一方面是温度升高,酶促反 应速度加快。 另一方面,温度升高,也将导 致酶活性降低甚至丧失。
因此大多数酶都有一个最 适温度(即 酶促反应速度最 快时的环境温度)
酶的最适温度不是一个常 数，它与作用时间长短有 关。
（二）激活剂对酶反应的影响
激活剂大部分是一些无机离子和小分子有机物。这些物质可与酶 分子上的氨基酸侧链基团结合，可能是酶活性部位的组成部分， 也可能作为辅酶或辅基的一个组成部分起作用。
(5) 1%CuSO4
四、操作步骤 （一）温度对酶活性的影响
取3支试管，编号，按下加入试剂，摇匀后，将1号、3号试管放入37℃恒温 水浴中，2号试管放入冰水中。10 min后取出，将2号管内液体分为两半，用 碘化钾-碘溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录结果， 将2号管剩下的一半溶液故入37℃水浴中继续保温10 min后，再用碘液实验， 结果如何?