共聚焦以及普通荧光显微镜的操作
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准备工作:至少提前半小时
1,先开空调
2,打开激光器:上面的小的是530激光器【0.53μm半导体端泵绿光】;下面大的是488激光器【488nm蓝光半导体激光器】。先打开二者的总的开关,然后再打开响应的钥匙。若不知道需要什么激光,全都打开。PS:关的时候,先关闭钥匙,在关闭总的开关。
3,依次打开
olympus LG-PS2冷光源【电压12V,功率100W,低燥音,发热低,小巧美观.使用进口特种灯泡使用寿命可达4-5年.质量稳定,可靠性高,带有多种滤色片,可输出黄色光、白色光、红色光、蓝色光等多种在不同场合需要的纯正光色。亮度高、能耗低。】
U-RFL-T【外接汞灯电源】
FV5-PSU【扫描控制装置, 负责控制各部分电源分配和整个扫描系统的整合】4,然后再依次打开共聚焦电脑(白色)和普适电脑(黑色)
左边的白色电脑密码为fluoview
打开user,密码为user
右边黑色为普适电脑,密码为2618710
打开DPcontrol
操作过程:
1档:空档,用于共聚焦
2档:蓝激绿激发波长Ex=460-490nm;发射波长Em>510nm
3档:绿激红Ex=510-550nm;Em>570nm
4档: 紫激蓝Ex=330-385nm; Em>420
5档:紫激蓝Ex=426-450nm;Em=467-499nm
6档:DIC=空档+立体化
显微镜的操作:
软件的操作:
1,microscope control
2,laser intensity
3,三个长方形的通道
4,Objective
步骤:
1,打开汞灯
2,将
打开
3,将objective调节到相应的与物镜一致的型号,如物镜为60X W,则objective 应调节为60X W;其中,只有60X W中有W,代表water,是水镜,在观察前滴一滴水。
4,PMT:光电信号增强
Gain:信号放大
Offset:扣除背景
5,
调节其中的三个参数。