【检验医学】胆固醇氧化酶法测定
血清总胆固醇的测定
实验原理
• 第一步：血清胆固醇酯可被胆固醇酯酶水 解为游离胆固醇和游离脂肪酸 。
• 第二步：胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作 用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2。
• 第三步：H2O2在4-氨基安替比林和酚存在 时，经过氧化物酶催化，反应生成苯醌亚 胺非那腙的红色醌类化合物，其颜色深浅 与标本中TC含量成正比。
• 鱼类。乌鱼又称黑鱼性寒味甘，能补脾利水同时 它又是一种高蛋白低脂肪食品。青鱼性平味甘， 能补气健脾化湿。鳆鱼又称鲍鱼，肉性平味甘咸， 蛋白质含量极高，而脂肪含量很低的清补营养品。 黄鳝甘温，古代医家认为它有添精益髓，又有通 血脉、壮筋骨的作用同时它又是一种低脂食品。 另外，如黄瓜、海带、羊栖菜、海藻、槐花等食 物，均有降低血中胆固醇的效果。
试剂
• 基础液：100ml 0.1mol/L 磷酸缓冲液 （pH=6.7）(含胆酸钠129mg),4-氨基安替 比林16mg,苯酚132mg,TritionX-100 0.2ml
• 酶试剂应用液：临用前取商品三酶（胆固 醇酯酶，胆固醇氧化酶，过氧化物酶）合 剂1ml,加基础液30ml,混匀既得
• 胆固醇标准液（5.17mmol/L）:精准称取胆 固醇200mg,用纯无水乙醇溶解，用乙醇定 容至100ml，分装4ºC保存，临用时取出
注意事项
• 1、最后加酶试剂，各管反应时间应一致； • 2、比色应在30min内完成； • 3、试管在操作前尽量保持干燥； • 4、试剂中酶的质量影响测定结果 ； • 5、若需检测游离胆固醇浓度，将酶试剂成
分中去掉胆固醇酯酶即可。
• 此法中血红蛋白高于2g/L时引起正干扰；胆 红素高于0.1g/L时有明显负干扰；血中维生 素C与甲基多巴浓度高于治疗水平时，会使 结果降低。高TG血症对本法无明显影响。 检测TC的血清(浆)标本密闭保存时，在4℃ 可稳定1周，－20℃可稳定半年以上。
《临床生物化学检验》实验教学大纲
《临床生物化学检验》实验教学大纲课程类别：专业核心课程英文名称：Clinical Biochemistry Examinations课程性质：必修是否独立设课：否总学时：112 其中实验学时：48总学分：5.5 其中实验学分：1.5适用专业：医学检验技术开课单位：医学院实验项目数：8必做项目数：8综合项目数：2一、教学目的与基本要求通过本课程的学习，使学生能够掌握临床常见疾病的基础理论和检验的基本技术，能够理论联系实际，成为具有分析问题和解决问题的能力，面向临床的高级医学检验专门人才。
要求学生掌握本学科的基本理论、基本知识、基本技能，有关检验项目的实验原理、操作方法、结果判断和临床意义。
二、主要仪器设备及工具离心机，分光光度计，紫外分光光度计，半自动生化分析仪、恒温水浴箱，电泳仪，电泳槽、吸量管，微量加样枪，注射器、电脑、分析软件、扫描仪等。
三、实验内容及要求四、考核方式1.实验报告要求：实验报告由实验者本人撰写，实验基本情况的信息应填写完整、清楚。
做到内容完整、文理通顺、字迹工整、数据记录要真实可靠、图表规范、分析详尽、讨论深刻。
实验报告的一般格式如下：(1)实验名称、专业、班级、学生姓名和实验时间。
(2)实验目的、实验原理、试剂和器材、操作方法、实验结果、讨论。
2.考核方式：实验课成绩按百分制记录，占课程总成绩30%：其中，实验操作考核10%、实验报告20%。
五、主要参考教材1.钱士匀.临床生物化学和生物化学检验实验指导（第四版）.北京：人民卫生出版社，2013.2.杨国珍.临床生物化学检验实验指导（第一版）.北京：科学出版社，2012.3.郑铁生. 临床生物化学检验实验指导. 北京：中国医药科技出版社，2004.4.Lothar Thomas. 临床实验诊断学-实验结果的应用与评价. 上海：上海科学技术出版社，2004.5.王凤学. 临床生物化学自动分析操作规程. 北京：人民军医出版社，2006.。
临床检验医学的量值溯源
2021
2023
常规方法
参考方法
决定性方法
加
围
增
范
用
应
加
增
度
确
准
分级依据：IFCC根据分析方法的准确性与精密度的不同。
三级检测方法关系图
O1
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O2
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O3
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检测方法的分级
决定性方法（definitive method)： 准确度最高，系统误差最小，用于评价参考方法和一级标准品。 参考方法（reference method）： 准确度与精密度已充分证实的分析方法，干扰，系统误差小，用于鉴定常规方法和二级标准品。 常规方法（routine method）： 性能指标符合临床需要，有适当分析范围，经济实用，用于临床常规标本的检测。
01
常规方法（routine method）
应用：
临床常规检验使用，常规方法在作出评定以后，经有关学术组织认可，可以作为推荐方法（recommended method ） 。
主要方法：
溴甲酚绿法、双缩脲法、J-G法等。
2
定义：
应具有足够的精密度、准确度和特异度，有适当的分析范围，经济实用，其性能指标符合临床或其它目的的需要。
临床实验室的溯源
欲使医学实验室的测量结果具有溯源性，最直接、简便的途径是进入“不间断的溯源链”
RANDOX的校准品是如何溯源的
#O1
#2022
参考物质 ＋ 参考程序
检测体系 校准品 ＋ 仪器 ＋ 试剂
检测结果的比对
结果具有可比性 证明溯源性有保证
结果不具可比性 证明溯源性缺乏保证
参考体系
溯源性的验证
生物化学检验练习题库(附答案)
生物化学检验练习题库（附答案）一、单选题（共96题，每题1分，共96分）1.在血脂测定中当TG大于多少时LDL-C不宜用计算法求得A、>1.8mmol/LB、>3.5mmol/LC、>4.5mmol/LD、>5mmol/LE、>6mmol/L正确答案：C2.患者男性，21岁，咽部不适3周，水肿、尿少1周，轻咳，无发热，自服诺氟沙星不好。
近1周感双腿发胀，双眼睑水肿，晨起时明显，同时尿量减少，尿色较红。
检查尿蛋白(++)，红细胞(+++)，白细胞偶见。
发病以来精神食欲可，轻度腰酸、乏力，无尿频、尿急、尿痛。
尿蛋白(++)，红细胞(+++)。
可能诊断为A、尿路感染B、肾小管间质病变C、急性肾小球肾炎D、肾病综合征E、慢性肾小球肾炎正确答案：C3.血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳通常用缓冲液PH值为A、6.8B、9.56C、8.6D、5.6E、7.6正确答案：C4.目前用于急性冠状动脉综合征(ACS)实验室诊断的心肌肌钙蛋白的是A、cTnT和cTnIB、cTnT和CK-MBC、cTnT和TnCD、TnC和cTnIE、TnC和CK-MB正确答案：A5.关于Beer定律:A=KBC中B正确的是:A、吸光系数B、吸光度C、透光度D、透光系E、光径正确答案：E6.血清总胆固醇测定的常规方法是A、胆固醇氧化酶法B、胆固醇氧化酶法C、胆固醇氧化酶法D、胆固醇氧化酶法E、胆固醇氧化酶法正确答案：A7.合成VLDL的场所主要是在A、肾脏B、肝脏C、小肠粘膜D、血浆E、脂肪组织正确答案：B8.糖尿病早期肾损害的敏感指标是A、组织生长因子(CTGF)与血清胱抑素C(Cys-C)B、β-微球蛋白C、本-周蛋白D、α-微球蛋白E、清蛋白正确答案：A9.低钾血症诊断的界值是A、2.5mmol／LB、6.5mmol／LC、4.5mmol／LD、3.5mmol／LE、5.5mmol／L正确答案：D10.创伤患者一般不会升高的蛋白是A、结合珠蛋白B、铜蓝蛋白C、C-反应蛋白D、转铁蛋白E、C3、C4正确答案：D11.葡萄糖-6-磷酸酶缺陷导致A、非酮症高渗性昏迷B、半乳糖血症C、糖原累积病D、酮症酸中毒E、动脉粥样硬化正确答案：C12.唯一能降低血糖的激素是A、肾上腺素B、胰岛素C、髙血糖素D、甲状腺素E、生长素正确答案：B13.以下哪项不是采集血标本的注意事项A、需全血的标本应选择抗凝试管B、女患者月经期不宜留取C、生化标本应清晨空腹抽取D、血清标本应防止溶血E、根据化验目的计算血量正确答案：B14.具有转运维生素A作用的血浆蛋白质是A、前清蛋白B、清蛋白C、α-球蛋白D、β-球蛋白E、γ-球蛋白正确答案：A15.以下试验中血标本受溶血影响最小的是A、K测定B、LD测定C、血清铁测定D、Na+测定E、AST测定正确答案：D16.目前我国临床化学试验室中测定血清胆固醇的常用方法是A、化学法B、气相色谱法C、电泳法D、酶法E、高效液相色谱法正确答案：D17.用于确诊实验的分析方法，必须有较高的A、诊断灵敏度B、阴性结果的预示值C、阳性结果的预示值D、诊断特异性E、实验的总有效率正确答案：D18.在骨骼疾病的诊断酶学中下列哪项最有价值A、LDHB、CKC、ALPD、ACPE、ALT正确答案：C19.符合阻塞性黄疸的是A、尿胆红素阴性,尿胆原阴性或弱阳性B、尿胆原阳性,尿胆红素阴性C、尿胆红素阳性,尿胆原阴性D、尿胆红素阳性,尿胆原阳性E、尿胆红素阴性,尿胆原强阳性正确答案：C20."被称为"好脂蛋白"的是"A、CMB、VLDLC、IDLD、LDLE、HDL正确答案：E21.患儿足月顺产，无窒息，第2天出现黄疸，逐渐加重，贫血，嗜睡，肝脾可触及。
临床医学检验总胆固醇(TC)
临床医学检验总胆固醇(TC)胆固醇是脂质成分之一，机体中胆固醇80％～90％由肝和肾上腺自身合成，而多种因素可影响体内TC的水平，包括：①年龄与性别，TC水平往往随年龄上升，但到70岁或80岁以后有所下降，中青年期女性低于男性，50岁以后女性高于男性；②长期的高胆固醇，高密度饱和脂肪和高热量包含可使TC增高；③遗传因素；④其他，如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使TC升高。
胆固醇的增高与多种疾病有关，所以胆固醇的检验是临床检验的主要项目之一。
(一)酶法1.原理血清中的胆固醇酯(CE)被胆固醇酯水解酶(CEH)水解成游离胆固醇(Cho1)，后者被胆固醇氧化酶(CHOD)氧化成△4-胆甾烯酮并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)，生成红色醌亚胺色素(Trind er反应)。
醌亚胺的最大吸收在500 nm左右，吸光度与标本中TC含量成正比。
反应式如下：2.计算TC(mmol／L)=A测定／A标准×定标血清TC浓度(mmol／L)。
速率法测定根据仪器性能及所用试剂的反应速度设计操作程序，一般要求试剂中酶用量较高。
3.技术指标(1)精密度：终点法批内CV<1.5％，批间CV≤2.5％。
(2)准确性：以参考方法(ALBK法)定值的血清为标准液时，本法测定结果与ALBK法基本一致。
以Chol水溶液为标准时，结果往往比AL-BK法低，故不宜采用Chol水溶液。
(3)灵敏度：显色剂用酚时，TC 5.2 mmol／L(200 mg／d1)时的吸光度A500nm0.30-0.35，故A500nm=0.005时的TC浓度约0.08 mmol／L(3 mg／d1)。
(4)测定范围：血清与酶试剂用量之比为1：100时，测定上界为13 mmol／L(500 mg／d1)。
(5)特异性：血清中多种非胆固醇甾醇会不同程度地与本试剂显色。
正常人血清中非胆固醇甾醇约占TC的l％，故在常规测定时这种影响可以不计。
临床医学检验技术分类模拟题25
临床医学检验技术分类模拟题25一、A1型题(最佳选择题，每题仅有一个正确答案)1.正常人清晨空腹时血浆中没有的是A.CMB.VLDLC.IDLD.LDLE.HDL答案：A［解答］CM来源于食物脂肪。
正常人空腹12h后血浆中无CM。
2.血浆中胆固醇含量最多的脂蛋白是A.CMB.VLDLC.IDLD.LDLE.HDL答案：D［解答］LDL是血浆中含胆固醇最多的脂蛋白，人体内约70%的胆固醇存在于LDL。
3.由肝脏产生不能和其他脂蛋白相互转化的脂蛋白是A.CMB.VLDLC.Lp(a)D.LDL答案：C［解答］Lp(a)1963年北欧学者Berg发现的、目前认为是由肝脏直接产生，不能和其他脂蛋白互相转化的一类独立的脂蛋白。
4.载脂蛋白的功能不包括A.构成并且稳定脂蛋白的结构B.修饰并影响和脂蛋白有关的酶的代谢和活性C.构成细胞结构的重要成分D.决定和参与脂蛋白和细胞表面脂蛋白受体的结合和代谢过程E.作为一些酶的辅助因子答案：C［解答］载脂蛋白的功能包括：构成并且稳定脂蛋白的结构；修饰并影响和脂蛋白有关的酶的代谢和活性；决定和参与脂蛋白和细胞表面脂蛋白受体的结合和代谢过程；作为一些酶的辅助因子。
5. CM中的主要结构蛋白是A.ApoB48B.ApoEC.ApoCD.ApoA1E.ApoB100答案：A［解答］乳糜微粒中的主要结构蛋白是ApoB48。
6.脂蛋白酶激活物是A.ApoB48C.ApoCD.ApoAlE.ApoB100答案：C［解答］ApoC是脂蛋白酶的激活物。
7. LDL中的结构蛋白是A.ApoB48B.ApoEC.ApoCD.ApoAlE.ApoB100答案：E［解答］ApoB100是LDL中唯一的结构蛋白。
8.电泳中迁移率最快的脂蛋白是A.CMB.VLDLC.IDLD.LDLE.HDL答案：E［解答］电泳中HDL分子最小，阻力最小，迁移最快。
9.在正常生理情况下，与ApoAl相关性最强的项目是A.CMC.IDLD.LDLE.HDL答案：E［解答］ApoAl是HDL中的主要载脂蛋白，约占65%。
2023年检验类之临床医学检验技术(师)题库及精品答案
2023年检验类之临床医学检验技术（师）题库及精品答案单选题（共30题）1、传染性单核细胞增多症患者血清中的嗜异性抗体出现高峰和持续时间是（）A.出现于发病后1周内，高峰2周内，持续时间1～3个月B.出现于发病后1～2周内，高峰为2～3周内，持续时间3～6个月C.出现于发病后2～3周内，高峰为3～4周内，持续时间6～9个月D.出现于发病后3～4周内，高峰为4～5周内，持续时间9～12个月E.以上都不是【答案】 B2、下列血脂项目中生物学变异最大的是A.高密度脂蛋白胆固醇B.甘油三酯C.低密度脂蛋白胆固醇D.总胆固醇E.脂蛋白(a)【答案】 B3、依赖维生素K凝血因子为A.Ⅰ、Ⅴ、Ⅷ、XⅢB.Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、ⅩC.Ⅰ、Ⅱ、Ⅷ、XⅢD.Ⅺ、Ⅻ、PK、HMWKE.Ⅲ、Ⅴ、Ⅸ、Ⅹ【答案】 B4、患者尿液用80%饱和硫酸铵沉淀后，取上清液进行隐血试验为阳性，诊断最可能为A.肌红蛋白尿B.血尿C.血红蛋白尿D.卟啉尿E.氨基酸尿【答案】 A5、关于前列腺酸性磷酸酶的叙述，正确的是（）。
A.酶活性测定反应pH在10.0B.作为前列腺癌的辅助诊断和疗效观察指标C.作为前列腺癌的确诊指标D.酶活性对酒石酸不敏感E.很稳定【答案】 B6、关于Ⅳ高脂血症的描述错误的是A.LDL↑B.血清外观浑浊C.电泳深前β带D.常见原因为VLDL合成亢进E.VLDL处理速率变慢【答案】 A7、患者女，50岁。
发高烧。
腰痛1天到医院就诊。
查体：体温39.5℃，血压110/79mmHg，脊肋角及输尿管压痛阳性。
实验室；WBC137×109/L，NE92.9‰尿蛋白（－），尿白细胞酯酶（＋＋＋＋），尿隐血（＋）。
临床诊断该患者为急性肾盂肾炎。
该患者的尿液中可见典型的何种细胞？（）A.红细胞B.闪光细胞C.鳞状上皮细胞D.颗粒管型E.吞噬细胞【答案】 B8、受者肾移植1年后出现排尿逐渐减少现象，免疫抑制剂治疗没有改善，此为A.宿主抗移植物反应B.移植物抗宿主反应C.慢性排斥反应D.超急性排斥反应E.急性排斥反应【答案】 C9、患者男，28岁。
临床生化检验 第四章 脂蛋白的测定
评价：
➢优点：本法灵敏度高、准确度高、精密度好，线性范围宽。
➢主要缺点是：
①某些胆固醇酯酶对胆固醇酯的水解不完全，不能用纯胆固醇结晶以有机 溶剂配制的溶液作为TC分析的校准液，而应以准确定值的血清作为标准， 此校准液（品）相当于三级标准。 ②表面活性剂，如吐温-40可以干扰胆固醇酯酶的作用，而聚乙烯醇6000 可使结果提高1％～2％；
2.比色
加入物 血清上清液(ml) 标准液上清液(ml) 异丙醇(ml) 显色剂(ml)
空白管 － － 1.0 3.0
标准管 － 1.0 － 3.0
测定管 1.0 － － 3.0
充分混匀后继续60℃水浴15min，然后置室温冷却后530～ 550nm比色。
计算
血清
TG(mmol/L)＝
测定管吸光度 标准管吸光度
【临床意义】
TC除了作为高胆固醇血症的诊断指标之外，不能作为其它任何疾病的诊断 指标，对于动脉粥样硬化和冠心病而言，TC是一个明确的危险因子，与冠心 病的发病率呈正相关。
影响TC水平的因素
①年龄与性别； ②长期的高胆固醇、高饱和脂肪酸和高热量饮食可使TC增高； ③遗传因素； ④其它：如缺少运动、脑力劳动、精神紧张等可能使TC升高。
× 标准液浓度
参考值 犬：3.50-
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意义 。?
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评价
本法测定范围较宽，干扰因素多，准确测定有赖于 从标本中抽提、皂化、纯化过程，操作较繁，不适于 大批量标本分析及自动分析，一般很少用。
二、磷酸甘油氧化酶法（GPO-PAP法）
原理
试剂
1. 甘油三酯液体稳定酶试剂组成
GOODs缓冲液(pH7.2) 50mmol/L
一、高铁——硫酸显色法测TC （理解）
医学检验技术知识点：血脂的检查内容-总胆固醇测定(2)
医学检验技术知识点：血脂的检查内容-总胆固醇测定（2）对医疗卫生事业单位考试医学检验学的部分知识做了汇总，今天我们来学习医学检验技术知识点-血脂的检查内容-总胆固醇测定，希望对大家的复习有所帮助。
血脂的检查内容-总胆固醇测定(二)检测1.方法：化学法曾于很长一段时间用于常规检查，一般包括：①抽提;②皂化;③毛地黄皂苷沉淀纯化;④显色比色四个阶段。
代表性的方法是省去③步骤的Abell-Kendall法，现作为标准参考方法予以利用。
胆固醇酯首先在胆固醇酯酶的催化下水解成游离胆固醇，胆固醇在胆固醇氧化酶的催化下生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的催化下以Trinder反应显色测定。
2.参考值：TC水平因生活条件(饮食、运动等)而异，随年龄上升，中青年男性略高于女性，老年女性高于男性。
我国血脂异常防治建议：以5.17mmol/L(200mg/dl)为合适水平;5.20～5.66mmol/L(201mg/dl～219mg/dl)为临界范围(或边缘升高);5.69mmol/L(220mg/dl)为升高。
(三)临床意义：1.胆固醇升高：(1)胆固醇是动脉粥样硬化的重要危险因素之一。
(2)胆固醇升高容易引起动脉粥样硬化性心、脑血管疾病如冠心病、心肌梗死，脑卒中等。
(3)胆固醇升高可见于各种高脂蛋白血症、梗阻性黄疸、肾病综合征、甲状腺功能低下、慢性肾功能衰竭、糖尿病等时。
(4)此外，吸烟、饮酒、紧张、血液浓缩等也都可使血液胆固醇升高。
(5)妊娠末三个月时，可能明显升高，产后恢复原有水平。
2.胆固醇降低：可见于各种脂蛋白缺陷状态、肝硬化、恶性肿瘤、营养吸收不良、巨细胞性贫血等。
女性月经期也可降低。
检验科生化高密度脂蛋白胆固醇HDL测定的标准操作规程
高密度脂蛋白胆固醇测定的标准操作规程【目的】体外检测血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL)含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理本试剂采用化学修饰酶法，其反应原理如下：CHER表面活性剂HDL-胆固醇^胆固醇+游离脂肪酸胆固醇+O2™D(化学修饰)胆甾烯酮+H2O22H 2O2 + 4-AA+TOOS+H 3+O POD红色苯醍色素+5H2OTOOS: N-己烷基-N-硫羟基-丙烷基-M-二甲苯胺钠盐在上述反应中，红色苯醍色素的生成量与样本中高密度脂蛋白胆固醇浓度成正比，通过在6nm处测定吸光度的变化值，即可测得样本中高密度脂蛋白胆固醇的浓度。
二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司HDL-C试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂1（R1）TOOS0.3g/L过氧化物酶0.65KU/LMES 缓冲液0.05mol/L试剂2（R2）胆固醇氧化酶2.1KU/L胆固醇酯酶3KU/LMES 缓冲液0.05mmol/L4-氨基安替比林0.6g/L2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征高低密度脂蛋白胆固醇校准品对测定进行校准。
临床生物化学检验题库(2)
临床生物化学检验题库（2）一、单选题1、下列哪些物质可用于二级参考测量程序的校准（D）。
A、常规样品B、厂家产品校准物C、厂家工作校准物D、一级校准物2、下列关于同工酶概念的叙述，正确的是（B）。
A、结构相同，而存在部位不同的一组酶B、催化相同化学反应，而酶的分子结构不同、理化性质各异C、性质相似，催化的反应相似，而分布不同的一组酶D、催化相同反应，存在部位相同的一组酶3、在血浆中形成，转运内源性甘油三酯和胆固醇酯的血浆脂蛋白是（C）。
A、乳糜微粒B、极低密度脂蛋白C、中间密度脂蛋白D、低密度脂蛋白4、多次重复测定的均值与被测量真值的接近程度，称为（B）。
A、准确度B、正确度C、精密度D、偏倚5、理想的临床化学质控品的有效期，应在到达实验室后（D）。
A、2个月以上B、3个月以上C、6个月以上D、12个月以上6、某一实验室在血糖测定进行室内质控时，采用两个浓度水平质控物，正常浓度水平质控物测定结果的均值为 5.5mmol/L，标准差为0.5mmol/L，病理浓度水平测定结果的均值为8.25mmol/L，标准差为0.25mmol/L。
该实验室两个浓度水平的变异系数分别为（A）。
A、9.09%和3.03%B、0.50%和0.25%C、5.0%和8.0%D、2.75%和2.06%7、当生化分析仪出现所有的项目均失控时，其可能有以下原因，但除外（D）。
A、样本采样针阻塞B、分析仪灯泡老化C、样本采样针漏水D、某些项目的试剂变质8、骨、吸收标志物由破骨细胞在骨吸收期间产生，骨形成标志物由成骨细胞在骨形成期间产生，可在尿中检查的骨吸收标志物是（C）。
A、骨钙素B、骨碱性磷酸酶C、脱氧吡啶酚D、前胶原肽9、随肾小球病变的加重，尿中蛋白质的检出顺序是（A）。
A、转铁蛋白→白蛋白→IgG、IgA→IgMB、白蛋白→转铁蛋白→IgG、IgA→IgMC、白蛋白→IgG、IgA→转铁蛋白→IgMD、白蛋白→IgG、IgA→IgM→转铁蛋白10、仪器用水具体参照仪器使用说明书并定期检测，电导率一般应不大于（）μS/cm（25℃），微生物总数＜（）CFU/mL。
血浆胆固醇含量测定实验报告
一、实验目的1. 掌握血浆胆固醇测定的原理和方法。
2. 了解胆固醇在人体内的生理功能及其异常与疾病的关系。
3. 培养实验操作技能，提高对实验数据的分析和处理能力。
二、实验原理胆固醇是人体内一种重要的脂质物质，主要存在于细胞膜中，参与细胞膜的结构和功能。
血液中的胆固醇分为总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），其中LDL-C又被称为“坏胆固醇”，过高水平的LDL-C与心血管疾病的发生密切相关。
高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）则被称为“好胆固醇”，具有清除血管内胆固醇的作用。
本次实验采用酶法测定血浆总胆固醇含量。
三、实验材料1. 试剂：胆固醇氧化酶试剂盒、胆固醇酯水解酶试剂盒、过氧化氢溶液、显色剂等。
2. 仪器：自动生化分析仪、离心机、恒温水浴箱、移液器等。
3. 样品：健康志愿者血浆。
四、实验步骤1. 样本处理：将采集的血浆样品在室温下放置30分钟，使红细胞充分沉降，取上层血浆，离心分离血浆。
2. 试剂配制：按照试剂盒说明书配制胆固醇氧化酶、胆固醇酯水解酶等试剂。
3. 测定：将分离好的血浆样品按照试剂盒说明书进行测定，包括加样、孵育、显色、测定吸光度等步骤。
4. 数据处理：将测定的吸光度值输入自动生化分析仪，进行数据处理，得到血浆总胆固醇含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果：本次实验共测定了10名健康志愿者的血浆总胆固醇含量，结果显示，男性志愿者血浆总胆固醇含量均值为（5.12±0.85）mmol/L，女性志愿者血浆总胆固醇含量均值为（4.98±0.76）mmol/L。
2. 结果分析：本次实验结果显示，男女志愿者的血浆总胆固醇含量差异不显著（P>0.05）。
这与相关文献报道一致，说明在正常人群中，男女志愿者的血浆总胆固醇含量没有显著差异。
六、实验讨论1. 实验原理：本次实验采用酶法测定血浆总胆固醇含量，该方法具有较高的准确性和重复性，是临床常用的检测方法。
2. 实验操作：实验操作过程中，严格按照试剂盒说明书进行操作，确保实验结果的准确性。
血清总胆固醇(TC)测定操作规程
血清总胆固醇(TC)测定操作规程A1．2 原理血清中的胆固醇酯(CE)被胆固醇酯水解酶(CEH)水解成游离胆固醇(Chol)，后者被胆固醇氧化酶(CHOD)氧化成△4—胆甾烯酮，并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化4—氨基安替比林与酚(三者合称PAP)，生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)。
醌亚胺的最大吸收在500nm 左右，吸光度与标本中总胆固醇呈正比。
反应式如下：胆固醇酯+H2O CEH 胆固醇+游离脂肪酸胆固醇+02 CHOD △4-胆甾烯酮十H2022H202+4－氨基安替比林+酚POD 昆亚胺+4H2OA1．3．1 受检者(体检对象或病人)的准备：除总胆固醇不一定用空腹血外，测定甘油三酯、脂蛋白与载脂蛋白的病人必须空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，近期内体重稳定，无急性病、外伤、手术等意外情况。
妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月检验才能反映其基本血脂水平。
注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药、噻嗪类利尿剂、β受体阻滞剂、免疫抑制剂、某些降压剂、降糖药、胰岛素及其他激素制剂等，检验以前应根据所用药物的特性停止用药数天或数周，否则应记录用药情况。
对体检对象及做前瞻性观察者，还应注意采血的季节，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24h内不作剧烈运动。
A1．3．2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，因此影响血脂水平。
例如站立5 min 可使血脂浓度提高5％，15 min提高16％，故在采血前至少应***5min。
一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1 min，穿刺成功后立即松开止血带。
静脉阻滞5min可使甘油三酯增高10％～15％。
A1. 3．3 抗凝剂：我国多用血清作血脂检验。
如用血浆，多主张用EDTANa2(1mg／mL)抗凝。
总胆固醇(TCHOL)检测标准操作规程5.0
迪安诊断总胆固醇(TCHOL) 检测标准操作规程(版本号Version：第5/0版)2013年 12 月 30 日颁布实施编制(Editor)：审核(Checker)：批准(Approver)：修订履历(Revision History)1.目的指导正确进行血清总胆固醇（TC）检测。
2.实验原理胆固醇氧化酶法胆固醇酯＋H2O 胆固醇酯水解酶胆固醇＋脂肪酸胆固醇＋O2 胆固醇氧化酶Δ4胆甾烯酮＋H2O22H2O2＋4－氨基安替比林 + 酚过氧化物酶醌亚胺色素＋4H2O生成的苯醌亚胺的颜色深浅与胆固醇的浓度成正比。
3.适用系统:罗氏Cobas C8000全自动生化检测系统。
4.试剂4.1检测试剂4.1.1厂家：罗氏诊断公司生产4.1.2稳定性：未开封于2～8O C保存，可稳定至有效期末，Cobas C501上机后稳定4周Cobas C701上机后稳定4周4.1.3成分：试剂1：PIPES缓冲液：225mmol/L，PH 6.8；Mg2+：10mmol/L；胆酸钠：0.6mmol/L；；4-氨基比林：≥0.45mmol/L；酚：≥12.6mmol/L；脂肪醇聚乙二醇醚：3%；胆固醇酯酶（假单胞菌属）：≥25μkat/L（≥1.5U/ml）；胆固醇氧化酶（大肠杆菌）：≥7.5μkat/L（≥0.45U/ml）；过氧化物酶（辣根）：≥12.5μkat/L（≥0.75U/ml）；稳定剂；防腐剂4.1.4配制：无需配制，直接使用4．1.5规格：400T/盒，2100T/盒4.2校准品 C.f.a.s4.2.1厂家：罗氏诊断公司生产4.2.2稳定性：未开封于2～8O C保存，可稳定至有效期末；校准物复融后冷冻起来，盖紧盖子保存在-15～-25O C，可稳定4周。
4.2.3配制：每瓶使用时用3mL去离子水复溶，静置30分钟轻轻混匀后使用，剩余量根据需要分装于离心管中，于-15～-25O C保存。
4.2.4规格：12×3mL4.3质控品伯乐化学物质质控物1,24.3.1厂家：美国Bio-Rad laboratories.INC4.3.2稳定性：未开启的质控品保存在2～8O C时，可稳定至有效期末。
医学检验复习重点
1青霉素能抑制细胞壁肽聚糖的合成；2. 普通培养基：含有细菌需要的最基本营养成分,可供大多数细菌生长；血培养含有丰富的营养成分可供营养要求较高的细菌生长；SS选择培养可选择所欲分离的细菌生长,而抑制其他细菌生长；厌氧培养基加有还原性的物质,降低培养基的氧化还原电势,利于厌氧菌生长,而不利于兼性厌氧菌的生长；3. 药物敏感试的稀释法用来定量测定药物对被检菌的MIC和MBC；4. 临床细菌学检验常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法；5. WHO推荐梅毒血清学诊断的过筛试验是快速血浆反应素环状卡片试验RPR；WHO推荐梅毒血清学诊断的确证试验是荧光密螺旋体抗体吸收试验FTA-ABS；6. 大肠埃希氏菌在KIA上分解GLU和乳糖,产气、不产生H2S、在MIU上,动力阳性,吲哚阳性,脲酶阴性,在IMVIC试验++--加加减减；7. 寄生虫病流行的三个特点是：地方性、季节性、有些自然疫源性；8. 我国流行广泛开展重点防治的五大寄生虫病是：血吸虫、疟疾、黑热病、钩虫、丝虫病；9. 检查微丝蚴制作厚血膜时应注意：应在晚上九点钟以后采血、取三大滴血、应自然风干、血检季节应以夏季或气候温暖时为宜；10. 可致腹泻的原虫是：结肠小袋纤毛虫、人毛滴虫、隐孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫；11. 瑞特染料的质量可采用吸光度比值RA来作为瑞特染料的质量规格,当瑞特染料成熟时,其RA值应接近于；12. 消化道肿瘤与消化道溃疡患者粪便隐血试验主要区别在：阳性持续的时间；13. 嗜碱性点彩红细胞形成的原因为：胞浆内残留的RNA变性；14. 脑脊液中IgM增高,主要见于化脓性脑膜炎；15. 精子形态异常超过30%时为不正常,可影响受孕；16. 胆固醇结晶可存在于：胆汁、胸膜腔积液、关节腔积液、粪便中；17. 血浆中能使血沉减慢的物质有白蛋白和卵磷脂；18. 沉淀反应第一阶段：抗原抗体特异性结合、几秒钟至几分钟内即完成、可用散射比浊测定反应结果；19. 采用试管凝集试验方法的实验有：肥达氏试验、外斐试验、输血交叉配血试验；20. 正向间接凝集试验是用已知抗原检测相应抗体、临床是主要用于检测自身免疫病患者抗体;1. 循环免疫复合物的检测是诊断自身免疫性疾病的辅助指标；2. 待测孔最后显示的颜色深浅与标本中的待测抗原或抗体呈正相关的是：双抗体夹心法、双位点一步法、间接法测抗体；3. HbF检查,2周岁后正确值是小于%；4. 正常人红细胞内没有：HbH和HbS；5. 在正常凝血过程中,可形的复合体的有：A：III、VIIa和Ca2+；B：IXa、VIIIa、磷脂和Ca2+； C：Xa、Va、磷脂和Ca2+；6. 内源性凝血途径的始动因子是因子XII,外源性的是因子III组织因子；7. 决定出血时间延长的主要因素是血小板数量和功能异常；8. 出血时间延长可见于血小板减少性紫癜；9. 对凝血酶敏感的因子是：I、V、VIII、XIII；10. 采血体位、运动、年龄、性别、食物可能影响血液生化成份非病理性因素；11. 诊断试验的诊断效率是：所有实验结果中正确结果的百分数；12. 区带电泳有：滤纸电泳、琼脂糖电泳、PAGE电泳、琼脂电泳、醋酸纤维素薄膜电泳；13. 影响酶活性的因素有：底物、样品存放时间、温度、PH值、缓冲液的浓度；14. 发射光谱分析法是火焰光度法的原理；15.丁泽尔现象见于：散射光谱法分析；16.高速离心机的最高转速成可达25000转/分；17.凝胶层析的作用：用于研究生物大分子的沉降特性和稀溶液的浓缩；18.血浆蛋白中白蛋白的主要生理功能是：营养作用、运输作用、维持胶体渗透压作用、缓冲作用；19.尿β2微球蛋白主要用于监测肾小管功能；肾移植后如排斥反应影响肾小管功能时,尿β2微球蛋白可出现增高；存在于所有有核的细胞表面；急性白血病有神经浸润时,脑脊液中β2微球蛋白或增高；20.白蛋白参与调节激素和药物的代谢,维持血浆胶体渗透压,具有缓冲酸与碱的能力,是血液中主要的载体,占血浆蛋白的40~60%;1. 血浆的脂类包括：胆固醇及胆固醇酯、磷脂、甘油三脂、游离脂肪酸；2. 运输内源性胆固醇的脂蛋白主要是LDL；3. VLDL中含有甘油三酯、胆固醇、磷脂、胆固醇酯,是血液中第二种富含甘油三脂的脂蛋白；在肝脏合成；其中的ApoCII激活LPL促进VLDL的代谢；4. 进行预染标脂蛋白琼脂糖电泳后,自阴极脂蛋白区带依次为：CM、β-脂蛋白、前β-脂蛋白、α-脂蛋白；5. 血气分析中表示代谢性酸碱平衡的指标是HCO3-；6. 实际碳酸氢盐AB等于标准碳酸氢盐SB,二者小于正常,表明为代谢性酸中毒；7. 甲胎蛋白不是血浆中分子量最大的蛋白、80%的原发性肝癌患者血清中含量增高、主要在胎儿肝内合成、用于胎儿产前监测、不参与物质的运输；8. 癌基因产物包括：生长因子、P12蛋白、DNA结合蛋白、蛋白激酶、不包括化学致癌物质；9. 微生物的最小分类单位是：种；10. 中等大小的杆菌大小为：长2~3um宽~；11. 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的共同成分是：肽聚糖；12. 质粒是：细菌染色体以外的双链闭合环状DNA分子；13. 在临床细菌学检验中,细胞质内的纡回体颗粒可用于鉴别细菌；14. 在临床细菌学检验中,用于鉴别细菌的细菌特殊结构有：荚膜、芽胞、鞭毛；15. 用厚血膜检查疟原虫的主要问题是可致疟原虫形态改变；16. 疟疾的典型发作呈：周期性寒战、发热、出汗；17. 草绿色链球菌的生化应：触酶试验阴性、optochin敏感试验耐药、胆汁溶解试验阴性；18. 肺炎链球菌的生化应：触酶试验阴性、optochin敏感试验敏感、胆汁溶解试验阳性；19. 可经输血感染的寄生虫为：疟疾；20. 绦虫感染后能在粪便中排出虫卵的是阔节裂头绦虫;1. 班氏丝虫的主要传播媒介是淡色库蚊；2. 黑热病骨髓检查率较高；3. 曼氏迭宫绦虫和猪带绦虫人既是中间宿主,又是终宿主；4. 细粒棘球绦虫人是中间宿主；5. 寄生虫对宿主的损伤包括：机械性、化学性、摄取营养、机体免疫应答产生超敏反应；6. CSF中葡萄糖含量下降可见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、新型隐球菌脑膜炎；7. ABO血型天然抗体大多是IgM,免疫抗体大多属于IgG,不完全抗体能通过胎盘；8. 凝集反应是颗粒性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼可见的凝集现象；9. 用已知抗体检测抗原的方法有：ELISA夹心法、免疫荧光技术直接法和间接法；10. PAI纤溶酶原激活物抑制物有利于止血；11. 血清铁蛋白是判断体内铁储存量最敏感的方法；12. 具有促进血小板聚集作用的是：血小板活化因子PAF；13. 血小板α颗粒内较特异产物是：β-TG和PF4；14. 白血病复发的实验室指标是骨髓涂片中原+幼稚细胞大于20%；15. 诊断试验的诊断效率是所有实验结果中正确结果的百分数；16. 最早的使用的电泳技术是自由电泳；17. 区带电泳包括：滤纸电泳、琼脂糖电泳、PAGE电泳、琼脂电泳、醋酸纤维素薄膜电泳；18. 发射光谱分析是火焰光度法测定是原理；19. 甲状腺功能减退表现为：反应迟钝、心动过缓、性腺功能减退、非凹陷性黏液性水肿；20. 血气中表示代谢性酸碱平衡的指标是HCO3-;1. 药物浓度测定的常见技术有：光谱法、色谱法、放射免疫法、荧光免疫法、酶免疫法；2. 将凝胶电泳与免疫化学方法结合起来的电泳技术为转移电泳；3. 细胞毒性T细胞属于CD8+亚群；4. 免疫活性细胞发生、分化、成熟的场所是：骨髓和胸腺；5. 活化蛋白C的主要作用是：灭活FVa和FVIIIa；6. 血小板膜糖蛋白IIb/IIIa复合物与血小板聚集功能有关；7.卡波氏环形成的可能是胞浆中脂蛋白变性或纺锤体残留物所致；8. 1升=103毫升=106微升=109纳升=1012皮升=1015飞升；9. 纤维蛋白原是被分认为最强有力的促红细胞缗钱状聚集的物质；10. 胃泌素瘤常以BAO升高为特性；11. PT试验可反映：凝血酶原、纤维蛋白原、因子V、VII、X的水平；12. ISI国际敏感指数：越低表示试剂越敏感、是标准品组织活酶与每批组织凝血活酶PT 校正曲线的斜率,由试剂厂商提供；13. 机体的免疫防御功能过高时易患超敏反应；14. 鲎试验的原理：鲎是一种海洋节肢动物,其血液中有一种独特的有核变形红细胞,这种变形红细胞的裂解物可与微量的细菌内毒素起凝集反应,这是由于细胞的裂解物中一种酶被细菌内毒素脂多糖激活,使蛋白形成凝胶；15. 154.外斐试验原理：变形杆菌属中的某些特殊菌株如X19、X2、XK的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原成分,可代替立克次体作为抗原与某些立克次体病串者血清作凝集反应,以辅助诊断某些立克次体病；16. 反映外源性凝血途径的试验是PT；17. 糖原染色呈强阳性的细胞是原巨核细胞；18. 尿干化学检测原理：RBC和HGB用四甲基联苯胺法,尿胆原测定用偶氮偶联法；19. 可以引起血磷降低的情况有：甲状旁腺机能亢进,维生素D缺乏,肾小管性酸中毒；20. 骨髓检查的适应征是原发性血小板减少性紫癜、继发性血小板减少性紫癜、白血病伴皮肤黏膜出血;1. 中性粒细胞的生物化学与代谢包括：趋化作用、调理作用、变形性和粘附性、杀菌作用、吞噬作用；2. 黄疸的发生机制：红细胞破坏过多、肝细胞摄取胆红素能力下降、肝细胞处理胆红素能力下降、胆道梗阻；3. 可用于荚膜肿胀试验分型的细菌为：肺炎链球菌；4. 沙门菌属的Vi抗原属于表面抗原；5. 软性下疳的病原菌是：杜克嗜血杆菌；6. ELISA间接法、间接法荧光免疫技术可用一种标记物检测多种被测物；7. E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验；8. 在补体结合试验中能够检测病人血清中抗体；9. 支气管哮喘属于I型变态反应；10. 单向琼脂扩散法的检测敏感度：不高,检测进间长达48~72小时；11. 实际碳酸氢盐AB大于标准碳酸氢盐SB提示为呼吸性酸中毒；12. 血友病类出血性疾病：APTT延长、PT正常、,加正常血浆能纠正；13. FVII缺乏症：APTT正常、PT延长、,加正常血浆能纠正；14. 类肝素物质增多：APTT延长、PT延长、TT延长、加甲苯胺蓝能纠正；15. 嗜碱性点彩红细胞检查的染色方法是：碱性美蓝染液；16. 能反映肝内或肝外胆汁淤积的试验是血清胆红素测定、血清总胆汁酸测定、血清ALP及其同工酶、血清GGT；17. 能用于人工被动免疫的制品有：抗毒素、丙种球蛋白；18. 先天性免疫包括：吞噬细胞的吞噬作用、皮肤和黏膜的屏障、体液中的抗微生物物质；19. 中性粒细胞碱性磷酸酶积分值降低的疾病有：慢粒和PNH、MDS、恶性组织细胞病等；20. 血象中出现幼稚粒细胞的疾病有：慢粒、急性白血病、再障、PNH和缺铁性贫血；21. 嗜酸性粒细胞减低见于伤寒和烧伤病人；22. 输血传播的疾病有：肝炎、艾滋病、巨细胞病毒、疟疾、梅毒；23. 酸性尿中常见的结晶有：非晶形尿酸盐、尿酸结晶、草酸钙结晶、三联磷酸盐结晶、磷酸钙结晶；24. 肝硬化不会引起血尿酸增高；25. 普通实验室常规测定香草扁桃酸VMA使用的方法是：化学显色法；26. 新生霉素敏感试验适用于腐生葡萄球菌的鉴定；27. 鉴别脑膜炎奈瑟氏菌和淋病奈瑟菌有关的是麦芽糖发酵；28. 精密度是指：对同一样品重复进行检测时所得结果的符合程度；29. 免疫反应的特异性是指：检测物与其对应物之间选择性反应;1. 将区带电泳和双向琼脂扩散相结合的免疫分技术称为免疫电泳；2. 鉴别原发性纤溶与继发性纤溶亢进最有价值的是3P试验3P试验对继发性纤溶有较好的特异性,但敏感性较差,所以目前建议用血浆D-二聚体检测代替之；3. 原始细胞CD41阳性的急性白血病属于FAB分类的AML—M7；4. 磺基水杨酸法测定尿蛋白最大优点是灵敏度高；5. 甲醛常用于作尿液有形成分保存的防腐剂；6. 口服抗凝药PT延长,血友病APTT延长；7. 酶法测定血清胆固醇中用到的酶有：胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶；8. 磷钨酸—镁试剂可选择性地沉淀VLDL和LDL；9. 肠杆菌的主要性状包括：发酵葡萄糖、还原硝酸盐、需氧或兼性厌氧、触酶阳性；10. 可用作B群链球菌鉴定试验是：CAMP试验和马尿酸钠水解试验；11. 急性淋巴细胞白血病L1和L2在形态学上的鉴别主要依据有：细胞大小、胞浆量、胞核形态、核仁；12. 骨髓原始细胞POX染色可呈阴性反应的是：急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、急性粒—单核细胞白血病、急性巨核细胞白血病、急性淋巴细胞白血病；13. PH计中的电极是属于玻璃电极；14.可进行“冷增菌”的病原菌是：产单核细胞李斯特菌；15.根据流行病学调查,使人致病的脑膜炎奈瑟主要是A,B,C和Y群,我国流行的以A群为主,欧美流行的主要是B、C群；16.根据不同疾病采取不同的标本进行分离和培养,伤寒的第一、二周采血液,第二、三周采粪便与尿液,整个病程中骨髓分离阳性率阳性率高；17.伯氏疏螺旋体是引起莱姆病的病原体,主要传播媒介是硬蜱；18.回归热螺旋体以虱为传播媒介,引起流行性回归热；19.赫姆硫螺旋体以蜱为传播媒介,引起地方性回归热；20.宋内志贺菌迟缓分解乳糖,血清型属于D群,仅有一个血清型,其菌落常出现光滑型菌落,同时伴有扁平、较大、粗糙型菌落；21.破伤风芽胞梭菌是引起破伤风的病原菌,对人的致病因素是它产生的外毒素；22.流脑的病原菌是脑膜炎奈瑟氏菌,对干燥、寒冷、热等极为敏感；23.没有细胞壁的原核细胞型微生物是支原体;1. HbF检查,2周岁后正确值是小于%；2. 正常人红细胞内没有：HbH和HbS；3. 在正常凝血过程中,可形医学.敎育.网收集整理的复合体的有：A：III、VIIa和Ca2+；B：IXa、VIIIa、磷脂和Ca2+； C：Xa、Va、磷脂和Ca2+；4. 内源性凝血途径的始动因子是因子XII,外源性的是因子III组织因子；5. 决定出血时间延长的主要因素是血小板数量和功能异常；6. 出血时间延长可见于血小板减少性紫癜；7. 对凝血酶敏感的因子是：I、V、VIII、XIII；8. PAI纤溶酶原激活物抑制物有利于止血；9. 血清铁蛋白是判断体内铁储存量最敏感的方法；10. 具有促进血小板聚集作用的是：血小板活化因子PAF；11. 血小板α颗粒内较特异产物是：β-TG和PF4；12. 白血病复发的实验室指标是骨髓涂片中原+幼稚细胞大于20%；13. 血小板膜糖蛋白IIb/IIIa复合物与血小板聚集功能有关；14. 纤维蛋白原是被分认为最强有力的促红细胞缗钱状聚集的物质；15. PT试验可反映：凝血酶原、纤维蛋白原、因子V、VII、X的水平；16. ISI国际敏感指数：越低表示试剂越敏感、是标准品组织活酶与每批组织凝血活酶PT 校正曲线的斜率,由试剂厂商提供；17. 鲎试验的原理：鲎是一种海洋节肢动物,其血液中有一种独特的有核变形红细胞,这种变形红细胞的裂解物可与微量的细菌内毒素起凝集反应,这是由于细胞的裂解物中一种酶被细菌内医学.敎育.网收集整理毒素脂多糖激活,使蛋白形成凝胶；18. 反映外源性凝血途径的试验是PT；19. 糖原染色呈强阳性的细胞是原巨核细胞；20. 血友病类出血性疾病：APTT延长、PT正常,加正常血浆能纠正；21. FVII缺乏症：APTT正常、PT延长,加正常血浆能纠正；22. 类肝素物质增多：APTT延长、PT延长、TT延长、加甲苯胺蓝能纠正；23. 嗜碱性点彩红细胞检查的染医学.敎育.网收集整理色方法是：碱性美蓝染液；24. 中性粒细胞碱性磷酸酶积分值降低的疾病有：慢粒和PNH、MDS、恶性组织细胞病等；25. 血象中出现幼稚粒细胞的疾病有：慢粒、急性白血病、再障、PNH和缺铁性贫血；26. 嗜酸性粒细胞减低见于伤寒和烧伤病人；27. 输血传播的疾病有：肝炎、艾滋病、巨细胞病毒、疟疾、梅毒；28. 鉴别原发性纤溶与继发性纤溶亢进最有价值的是3P试验3P试验对继发性纤溶有较好的特异性,但敏感性较差,所以目前建议用血浆D-二聚体检测代替之；29. 原始细胞CD41阳性的急性白血病属于FAB分类的AML—M7；30. 口服抗凝药PT延长,血友病APTT延长；31. 急性淋巴细胞白血病L1和L2在形态学上的鉴别主要依据有：细胞大小、胞浆量、胞核形态、核仁；32. 骨髓原始细胞POX染色可呈阴性反应的是：急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、急性粒—单核细胞白血病、急性巨核细胞白血病、急性淋巴细胞白血病;1. 血浆的脂类包括：胆固醇及胆固醇酯、磷脂、甘油三脂、游离脂肪酸；2. 运输内源性胆固醇的脂蛋白主要是LDL；3. VLDL中含有甘油三酯、胆固醇、磷脂、胆固醇酯,是血液中第二种富含甘油三脂的脂蛋白；在肝脏合成；其中的ApoCII激活LPL促进VLDL的代谢；4. 进行预染标脂蛋白琼脂糖电泳后,自阴极脂蛋白区带依次为：CM、β-脂蛋白、前β-脂蛋白、α-脂蛋白；5. 血气分析中表示代谢性酸碱平衡的指标是HCO3-；6. 实际碳酸氢盐AB等于标准碳酸氢盐SB,二者小于正常,表明为代谢性酸中毒；7. 甲胎蛋白不是血浆中分子量最大的蛋白、80%的原发性肝癌患者血清中含量增高、主要在医学.敎育.网收集整理胎儿肝内合成、用于胎儿产前监测、不参与物质的运输；8. 癌基因产物包括：生长因子、P12蛋白、DNA结合蛋白、蛋白激酶、不包括化学致癌物质；9. 肝硬化不会引起血尿酸增高；10. 普通实验室常规测定香草扁桃酸VMA使用的方法是：化学显色法；11. 精密度是指：对同一样品重复进行检测时所得结果的符合程度；12. 酶法测定血清胆固醇中用到的酶有：胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶；13. 磷钨酸—镁试剂可选择性地沉淀VLDL和LDL；14. PH计中的电极是属于玻璃电极；15. 活化蛋白C的主要作用是：灭活FVa和FVIIIa；16. 黄疸的发生机制：红细胞破坏过多、肝细胞摄取医学.敎育.网收集整理胆红素能力下降、肝细胞处理胆红素能力下降、胆道梗阻；17. 可以引起血磷降低的情况有：甲状旁腺机能亢进,维生素D缺乏,肾小管性酸中毒；18. 实际碳酸氢盐AB大于标准碳酸氢盐SB提示为呼吸性酸中毒；19. 能反映肝内或肝外胆汁淤积的试验是血清胆红素测定、血清总胆汁酸测定、血清ALP 及其同工酶、血清GGT；20. 区带电泳有：滤纸电泳、琼脂糖电泳、PAGE电泳、琼脂电泳、醋酸纤维素薄膜电泳；21. 影响酶活性的因素有：底物、样品存放时间、温度、PH值、缓冲液的浓度；22. 发射光谱分析法是火焰光度法的原理；23.丁泽尔现象见于：散射光谱法分析；24.高速离心机的最高转速成可达25000转/分；25.凝胶层析的作用：用于研究生物大分子的沉降特性和稀溶液的浓缩；26.血浆蛋白中白蛋白的主要生理功能是：营养作用、运输作用、维持胶体渗透压作用、缓冲作用；27.尿β2微球蛋白主要用于监测肾小管功能；肾移植后如排斥反应影响肾小管功能时,尿β2微球蛋白可出现增高；存在于所有有核的细胞表面；急性白血病有神经浸润时,脑脊液中β2微球蛋白或增高；28.白蛋白参与调节激素和药物的代谢,维持血浆胶体渗透压,具有缓冲酸与碱的能力,是血液中主要的载体,占血浆蛋白的40～60%.29. 药物浓度测定的常见技术有：光谱法、色谱法、放射免疫法、荧光免疫法、酶免疫法；30. 将凝胶电泳与免疫化学方法结合起来的电泳技术为转移电泳；31. 诊断试验的诊断效率是所有实验结果中医学.敎育.网收集整理正确结果的百分数；32. 最早的使用的电泳技术是自由电泳；33. 区带电泳包括：滤纸电泳、琼脂糖电泳、PAGE电泳、琼脂电泳、醋酸纤维素薄膜电泳；34. 发射光谱分析是火焰光度法测定是原理；35. 甲状腺功能减退表现为：反应迟钝、心动过缓、性腺功能减退、非凹陷性黏液性水肿;1. 瑞特染料的质量可采用吸光度比值RA来作为瑞特染料的质量规格,当瑞特染料成熟时,其RA值应接近于；2. 消化道肿瘤与消化道溃疡患者粪便隐血试验主要区别在：阳性持续的时间；3. 嗜碱性点彩红细胞形成的原因为：胞浆内残留的RNA变性；4. 脑脊液中IgM增高,主要见于化脓性脑膜炎；5. 精子形态异常超过30%时为不正常,可影响受孕；6. 胆固醇结晶可存在于：胆汁、胸膜腔积液、关节腔积液、粪便中；7. 血浆中能使血沉减慢的物质有白蛋白和卵磷脂；8. 采血体位、运动、年龄、性别、食物可能影响血液生化成份非病理性因素；9. 诊断试验的诊断效率是：所有实验结果中正确结果的百分数；10. CSF中葡萄糖含量下降可见于化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、新型隐球菌脑膜炎；11. ABO 血型天然抗体大多是IgM,免疫抗体大多属于IgG,不完全抗体能通过胎盘；12.卡波氏环形成的可能是胞浆中脂蛋白变性或纺锤体残留物所致；13. 1升=103毫升=106微升=109纳升=1012皮升=1015飞升；14. 胃泌素瘤常以BAO升高为特性；15. 尿干化学检测原理：RBC和HGB用四甲基联苯胺法,尿胆原测定用偶氮偶联法；16. 中性粒细胞的生物化学与代谢包括：趋化作用、调理作用、变形性和粘附性、杀菌作用、吞噬作用；17. 磺基水杨酸法测定尿蛋白最大优点是灵敏度高；18. 甲醛常用于作尿液有形成分保存的防腐剂;1. 沉淀反应第一阶段：抗原抗体特异性结合、几秒钟至几分钟内即完成、可用散射比浊测定反应结果；2. 采用试管凝集试验方法的实验有：肥达氏试验、外斐试验、输血交叉配血试验；3. 正向间接凝集试验是用已知抗原检测相应抗体、临床是主要用于检测自身免疫病患者抗体；4. 循环免疫复合物的检测是诊断自身免疫性疾病的辅助指标；5. 待测孔最后显示的颜色深浅与标本中的待测抗原或抗体呈正相关的是：双抗体夹心法、双位点一步法、间接法测抗体；6. 凝集反应是颗粒性抗原与相应抗体在适当电解质存在下形成肉眼可见的凝集现象；7. 用已知抗体检测抗原的方法有：ELISA夹心法、免疫荧光技术直接法和间接法；8. 外斐试验原理：变形杆菌属中的某些特殊菌株如X19、X2、XK的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原成分,可代替立克次体作为抗原与某些立克次体病串者血清作凝集反应,以辅助诊断某些立克次体病；9. ELISA间接法、间接法荧光医学.敎育.网收集整理疫技术可用一种标记物检测多种被测物；10. E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验；11. 在补体结合试验中能够检测病人血清中抗体；12. 支气管哮喘属于I型变态反应；13. 单向琼脂扩散法的检测敏感度：不高,检测进间长达48～72小时；14. 先天性免疫包括：吞噬细胞的吞噬作用、皮肤和黏膜的屏障、体液中的抗微生物物质；15. 免疫反应的特异性是指：检测物与其对应物之间选择性反应；16. 将区带电泳和双向琼脂扩散相结合的免疫医学.敎育.网收集整理分技术称为免疫电泳;1. 青霉素能抑制细胞壁肽聚糖的合成；2. 普通培养基：含有细菌需要的最基本营养成分,可供大多数细菌生长；血培养含有丰富的营养成分可供营养要求较高的细菌生长；SS选择培养可选择所欲分离的细菌生长,而抑制其他细菌生长；厌氧培养基加有还原性的物质,降低培养基的氧化还原电势,利于厌氧菌生长,而不利于兼性厌氧菌的生长；3. 药物敏感试的稀释法用来定量测定药物对被检菌的MIC和MBC；4. 临床细菌学检验常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法；5. WHO推荐梅毒血清学诊断的过筛试验是快速血浆反应素环状卡片试验RPR；WHO推荐梅毒血清学诊断的确证试验是荧光密螺旋体抗体吸收试验FTA-ABS；6. 大肠埃希氏菌在KIA上分解GLU和乳糖,产气、不产生H2S、在MIU上,动力阳性,吲哚阳性,脲酶阴性,在IMVIC试验++--加加减减；7. 微生物的最小分类单位是：种；。
临床生物化学检验实验指导(医学检验技术专业48学时)
《临床生物化学和生物化学检验》实验指导前言实验教学作为基础医学教学中的一项重要内容，在培养学生分析问题、解决问题及动手能力等方面发挥着十分重要的作用。
临床生物化学检验实验教学是临床生物化学检验课程的重要组成部分，本教研室根据中医本科专业的特点，并依据《临床生物化学检验》实验大纲要求，结合多年的教学实践，组织编写了《临床生物化学和生物化学检验》实验指导。
本实验指导内容共12项实验。
每项实验包括实验目的、实验原理、实验内容（材料、方法、结果分析及注意事项）等项目，同时后附思考题，以供学生独立思考、加深理解。
实验学时：48学时实验一基本操作（综合性实验，4学时）【实验目的】1.掌握移液管、微量加样器正确使用方法。
2.掌握721分光光度计的正确使用方法及简单维护3.熟悉试验结束后试管、移液管的清洗方式【实验仪器、器材与试剂】1.实验仪器和器材：721分光光度计、玻璃试管、微量加样器、移液管、试管架、洗耳球、记号笔等。
2.实验试剂：蒸馏水、生理盐水等。
【实验项目、方法与步骤】1、微量移液器使用（1）根据取用溶液体积选用适当量程的微量移液器a)P20 2 ~ 20b)P200 21 ~ 200c)P1000 201 ~ 1,000（2）容量设定从大值调整到小值时，刚好即可。
从小值调整到大值时，需要调超过三分之一圈后再返回，这是因为计数器里面有一定的空隙，需要弥补。
不要将按钮旋出量程，这将导致移液器损坏。
（3）吸液头安装正确的安装方法是：把白套筒顶端插入吸液头，在轻轻用力下压的同时，把移液器按逆时针方向旋转180度。
切记用力不能过猛，更不能采取剁吸液头的方法来进行安装，那样做会对移液器造成不必要的损伤。
（4）预洗吸液头安装了新的吸液头或增大了容量值以后，应把需要转移的液体吸取、排放两到三次。
这样做是为了让吸液头内壁形成一道同质液膜，确保移液工作的精度和准度，使移液过程具有重现性。
（5）吸液先将移液器排放按钮按至第一停点，再将吸液头垂直浸入液面。
血清总胆固醇测定操作规程
血清总胆固醇测定操作规程A1．2 原理血清中的胆固醇酯(CE)被胆固醇酯水解酶(CEH)水解成游离胆固醇(Chol)，后者被胆固醇氧化酶(CHOD)氧化成△4—胆甾烯酮，并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化4—氨基安替比林与酚(三者合称PAP)，生成红色醌亚胺色素(T rinder反应)。
醌亚胺的最大吸收在500nm左右，吸光度与标本中总胆固醇呈正比。
反应式如下：胆固醇酯+H2O CEH 胆固醇+游离脂肪酸胆固醇+02 CHOD △4-胆甾烯酮十H2022H202+4－氨基安替比林+酚 POD 昆亚胺+4H2OA1．3 标本采集与处理对于血脂分析，特别需要强调“分析前”各个环节的质量管理。
A1．3．1 受检者(体检对象或病人)的准备：除总胆固醇不一定用空腹血外，测定甘油三酯、脂蛋白与载脂蛋白的病人必须空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，近期内体重稳定，无急性病、外伤、手术等意外情况。
妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月检验才能反映其基本血脂水平。
注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药、噻嗪类利尿剂、β受体阻滞剂、免疫抑制剂、某些降压剂、降糖药、胰岛素及其他激素制剂等，检验以前应根据所用药物的特性停止用药数天或数周，否则应记录用药情况。
对体检对象及做前瞻性观察者，还应注意采血的季节，因为血脂水平有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24h内不作剧烈运动。
A1．3．2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，因此影响血脂水平。
例如站立5 min可使血脂浓度提高5％，15 min提高16％，故在采血前至少应***5min。
一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1 min，穿刺成功后立即松开止血带。
静脉阻滞5min可使甘油三酯增高10％～15％。
A1. 3．3 抗凝剂：我国多用血清作血脂检验。
《生物化学检验》课程教学大纲
《生物化学检验》课程教学大纲课程名称：生物化学检验英文名称：Biochemistry test课程类型：专业课总学时：132学时理论课学时：60学时实验学时：72学时适用对象：医学检验专业课程简介：《生物化学检验》是以健康和疾病时的生物化学过程为研究目的，通过测定组织、体液的成分，揭示疾病变化和药物治疗对机体生物化学过程和组织、体液成分的影响，以提供疾病诊断、病情监测、药物疗效、预后判断和疾病预防有用信息的一门学科。
是医学检验专业的一门专业课程。
通过学习使学生获得医学检验专业高素质的高职高专人才所必需的生物化学检验技术的基本知识和基本技能，为毕业后能在各级各类医疗卫生机构、防疫机构、医学科研等单位从事生化检验工作奠定必要的基础。
一、课程教学目的和任务使学生具备医学检验专业高素质的高职高专人才所必需的生物化学检验技术的基本知识和基本技能，具有一定的自学能力和运用知识分析问题、解决问题的能力。
二、教学基本要求在学习本课程前，学生必须具备化学、生物学、生理学、生物化学的基础知识。
生物化学检验是一门实践性很强的课程，只有理论与实践有机地结合，才是一门完整的课程，理论与实验同步进行。
理论学时数与实验学时数之比为1﹕1.2。
三、教学内容及要求理论教学（一）绪论1. 目的与要求【掌握】生物化学检验的任务。
【熟悉】生物化学检验的研究领域。
【了解】生物化学检验的发展。
2. 内容要点生物化学发展简史、研究内容及与医学的关系。
（二）生物化学检验实验室基本知识1. 目的与要求【掌握】分析试剂的选择与保存；实验方法的分级、标准品分级；实验误差的定义、分类和表示方法；方法评价实验（回收试验和干扰试验）的原理；诊断性能评价的指标。
【熟悉】熟悉纯水的制备方法；实验方法选择的原则和步骤；方法评价的基本内容和步骤；方法评价的指标；参考值和医学决定水平的概念。
【了解】水的纯度检查；方法性能判断的指标；受试者工作曲线的应用和用途。
2. 内容要点实验用纯水的制备和纯度检查；分析试剂的选择、保存及实验试剂的配制；实验方法、标准试剂的分级，实验方法选择的原则和步骤；实验误差的定义、分类和表示方法，方法评价指标与评价实验；诊断性能评价的指标（三）光谱分析技术1. 目的与要求【掌握】光吸收定律；比色分析的基本原理及定性和定量方法。
还原型谷胱甘肽对氧化酶法检测项目的干扰
还原型谷胱甘肽对氧化酶法检测项目的干扰唐吉斌;陈继中;吕明;姜开明;汪亚勤【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2007(022)001【摘要】目的探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对氧化酶法检测项目的干扰.方法选择氧化酶法生化检测项目总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)、血糖(Glu)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),在新鲜无黄疸、脂血的血清中加入不同浓度的GSH,分别检测血清中TC、TG、UA、Cr、Glu、HDL-C含量.结果当标本中GSH含量为0.15 mg/mL时,即对Cr和UA的测定结果产生明显负干扰,两者分别降低了13.6%和10.3%.随着标本中GSH含量的增加对其他检测项目也产生明显负干扰.用药后1和4 h各生化项目结果与用药前比较差异有统计学意义(P＜0.01),其中以1 h差异最大,用药后8 h各生化项目结果与用药前比较差异有统计学意义(P＜0.05),12 h后各生化项目的结果与用药前比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 GSH对氧化酶法检测的生化项目有较大的负干扰,临床采集标本时应在用药后12 h进行.【总页数】3页(P25-27)【作者】唐吉斌;陈继中;吕明;姜开明;汪亚勤【作者单位】铜陵市人民医院检验科,安徽,铜陵,244009;铜陵市人民医院检验科,安徽,铜陵,244009;铜陵市人民医院检验科,安徽,铜陵,244009;铜陵市人民医院检验科,安徽,铜陵,244009;铜陵市人民医院检验科,安徽,铜陵,244009【正文语种】中文【中图分类】Q516【相关文献】1.还原型谷胱甘肽对基于 Trinder 反应生化项目检测结果干扰的探讨 [J], 沈东华;张敏健2.葡萄糖检测试剂盒已糖激酶法和氧化酶法抗干扰性能评价 [J], 张桂春;周方满3.羟苯磺酸钙对肌氨酸氧化酶法和苦味酸法检测肌酐的干扰 [J], 戴莹洁;周勇;陈文举;李招云4.还原型谷胱甘肽对部分氧化酶法项目检测的影响 [J], 潘本友;宋静芳;张海涛5.维生素C对单试剂氧化酶法检测总胆固醇和三酰甘油的干扰分析 [J], 李得娟; 唐云芳; 罗静萍; 巩琳莉; 李红; 张瑶; 梁珊珊; 贺勇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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3小时。不能立刻测定的标本要分离血清，转 移至有盖子的小试管中，当天不能测定的，可 暂时存放于4℃冰箱保存。
方法学评价
• 本方法灵敏度高，准确度高，精密度好，线性 范围宽
• 对标准参考物的要求较高（要求有定值的校准 液），且容易受到一些还原物质如尿酸、胆红 素、维生素C、谷胱甘肽等的干扰
• 本实验检测/可报告范围0.08～20.7 mmol/L， 分析灵敏度（检测低限）0.08 mmol/L
胆固醇氧化酶法测定 血清总胆固醇
目的
• 掌握酶法测定血清胆固醇的基本 原理及操作
• 熟悉血清胆固醇测定的临床意义 • 了解酶法测定血清胆固醇的特点
和注意事项
简介
• 决定方法为同位素稀释—质谱法 • 参考方法为正己烷抽提L-B反应
显色法（AL-BK法） • 常规方法为酶法（胆固醇氧化酶
法（COD-PAP））
试剂与器材
• 缓冲液 • 色原 • 4-AAP • 胆固醇酯酶 • 胆固醇氧化酶 • 过氧化物酶 • 全自动生化分析仪；半自动生化分析仪
原理
• 胆固醇酯＋H2O 胆固醇酯酶 胆固醇＋RCOOH
• 胆固醇＋O2 胆固醇氧化酶 Δ4—胆甾烯酮＋H2O2
• 2 H2O2 ＋4－氨基安替比林 + 酚 过氧化物酶 醌亚胺＋4 H2O
• TC降低：常见于低脂蛋白血症、贫血、败血症、 甲状腺功能亢进、肝疾病、严重感染、营养不 良、肠道吸收不良和药物治疗过程中的溶血性 黄疸及慢性消耗性疾病，如晚期癌症等。
注意事项
• 血清和血浆（肝素、EDTA-K2、EDTA-NA2）均 可供TC测定，但后者结果比前者结果低3%。不 可使用柠檬酸、草酸或氟化物抗凝。
• 现在实验室的TC参考范围：3.6— 5.17mmol/L
临床意义
• TC增高：TC水平往往随着年龄上升，但到70岁 以后有所下降，中青年女性低于男性，50岁以 后女性常高于男性。在病理情况下TC升高常见 于动脉粥样硬化、原发性高脂血症、糖尿病、 肾病综合征、总胆管阻塞、甲状腺功能减低、 肥大性骨关节炎、老年性白内障和牛皮癣。
操作步骤
混匀后，37℃保温5min，用半自动生化分析仪 于500nm波长处测定各管吸光度值，空白管调零。来自计算测定管吸光度
• 血清TC(mmol/L)=
×胆固
标准管吸光度
醇标准液浓度
生物参考区间
• 理想范围：＜5.1mmol/L 边缘升高 5.2—6.2mmol/L 升高≥6.21mmol/L
• 理想范围：＜5.2mmol/L 边缘升高 5.23—5.69mmol/L 升高≥5.72mmol/L