黄连中小檗碱的提取
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
加浓 HCl 调 PH2～3，加滤液体积 10％的 NaCl（30g 可用食用盐）， 放置过夜，抽滤（盐析） 盐酸小檗碱粗品
盐酸小檗碱粗品 加饱和石灰水，趁热过滤
滤液 加盐酸调 ph 至 1-2，冷却，放置过夜，析晶
析出大量黄色沉淀 常压过滤
沉淀 蒸馏水洗结晶，过滤，三次
沉淀 80℃以下干燥 1 小时
掌叶防己碱
本实验是利用小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度最大。而它们的 盐类以含氧酸盐在水中溶解度较大，不含氧酸盐难溶于水，其盐酸盐在水中溶解 度则更小。利用此性质结合盐析法，可从黄连中提取小檗碱，再利用两种生物碱 极性不同，采用柱色谱分离。 三、仪器与试剂
1、试剂：黄连粗粉 50g，0.2%-0.5%硫酸溶液，乙酸乙酯溶液，甲醇溶液，10%NaOH 溶液，丙酮溶液，氨水，饱和石灰水，氯化钠。
（3）取自制精制盐酸小檗碱少许，加水 1ml 待溶解后，加浓硝酸 1-2 滴，即 产生绿色硝酸小檗碱沉淀。
（4）取自制精制盐酸小檗碱少许，加水 1ml 待溶解后，加锌粉少许，再分数 次加入浓硫酸数滴，每隔 10min 加 1 次，观察其黄色是否消退。
薄层色谱检识 吸附剂：硅胶 G-CMC-Na 薄层板 对照品：盐酸小檗碱甲醇溶液 样 品：不同色带的甲醇溶液 展开剂：CHCl3-MeOH-冰醋酸（7：1：2） 检 视：先在紫外灯光（365nm）下观察荧光，再喷改良碘化铋钾试剂，记录图 谱并计算 Rf 值 五、注意事项： 1、浓硫酸稀释时应该“酸入水，沿器壁，慢慢倒，不断搅” 2、渗漉速度不可太快； 3、精制时加饱和石灰水后要趁热过滤。 六、思考题： 1、提取分离过程中加 NaCl 起什么作用？ 2、根据盐酸小檗碱的性质，还可以用其他方法进行提取与分离吗？ 3、小檗碱属于哪一类生物碱?可以用盐酸水溶液提取吗？
2、仪器：粉碎机，渗漉筒，烧杯，硅胶 G-CMA-Na 薄层板，真空干燥箱等。 四、实验步骤：
1、提取分离
黄连粗粉 50g(可用黄柏代替) 加 0.3％H2SO4500ml（超过药材 0.2cm），浸渍 20 分钟， 装入渗漉筒，滤过（用分液漏斗浸泡 24h，渗漉）
2、精制
药渣 滤液(酸水液)
加石灰乳调 PH 值至中性，放置 10 分钟，抽滤（6-8 层纱布过滤） 滤液（300ml）
实验一 黄连中小檗碱的提取、精制、鉴定及含量测定
黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连 （coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng） 的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。 黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱 （berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。其 中小檗碱含量最高，可达 10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。小檗碱有 很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小 檗碱相似。 一、目的要求 1、掌握从黄连中提取小檗碱的原理和方法；小檗碱精制的方法。 2、学习渗漉法提取方法。 3、熟悉小檗碱的化学性质和鉴定方法。 二、实验原理 小檗碱为黄色针状结晶，mp 为 145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1:20） 及乙醇中（1:100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等 有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为 l:500，枸橼酸盐 1:125，酸性硫酸盐 1:100，硫酸盐 l:30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka=11.53），能溶于水中，其水溶 液有三种互变形式。
季铵式（红棕色）
醇式（黄色）
醛式（黄色）
小檗碱（黄连素）
掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、 乙醚等有机溶剂。盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光，易溶 于热水或热乙醇，在冷水中的溶百度文库度也比盐酸小檗碱大。
称重，计算提取率（精制的盐酸小檗碱）
3、鉴定 理化检识实验 （1）丙酮加成反应：取自制精制盐酸小檗碱 0.05g 溶于 50ml 热水中，加入
10%NaOH 溶液 2ml，混合均匀后，于水浴上加热至 50℃，加入丙酮 5ml，放置， 即有柠檬色丙酮小檗碱结晶析出。抽滤，水洗后，干燥，测 mp。
（2）漂白粉显色反应：取自制精制盐酸小檗碱少许，加稀盐酸 2ml 待溶解后， 加漂白粉少许，即显樱红色（小檗碱水溶液由黄色转变为樱红色）。
盐酸小檗碱粗品 加饱和石灰水，趁热过滤
滤液 加盐酸调 ph 至 1-2，冷却，放置过夜，析晶
析出大量黄色沉淀 常压过滤
沉淀 蒸馏水洗结晶，过滤，三次
沉淀 80℃以下干燥 1 小时
掌叶防己碱
本实验是利用小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度最大。而它们的 盐类以含氧酸盐在水中溶解度较大，不含氧酸盐难溶于水，其盐酸盐在水中溶解 度则更小。利用此性质结合盐析法，可从黄连中提取小檗碱，再利用两种生物碱 极性不同，采用柱色谱分离。 三、仪器与试剂
1、试剂：黄连粗粉 50g，0.2%-0.5%硫酸溶液，乙酸乙酯溶液，甲醇溶液，10%NaOH 溶液，丙酮溶液，氨水，饱和石灰水，氯化钠。
（3）取自制精制盐酸小檗碱少许，加水 1ml 待溶解后，加浓硝酸 1-2 滴，即 产生绿色硝酸小檗碱沉淀。
（4）取自制精制盐酸小檗碱少许，加水 1ml 待溶解后，加锌粉少许，再分数 次加入浓硫酸数滴，每隔 10min 加 1 次，观察其黄色是否消退。
薄层色谱检识 吸附剂：硅胶 G-CMC-Na 薄层板 对照品：盐酸小檗碱甲醇溶液 样 品：不同色带的甲醇溶液 展开剂：CHCl3-MeOH-冰醋酸（7：1：2） 检 视：先在紫外灯光（365nm）下观察荧光，再喷改良碘化铋钾试剂，记录图 谱并计算 Rf 值 五、注意事项： 1、浓硫酸稀释时应该“酸入水，沿器壁，慢慢倒，不断搅” 2、渗漉速度不可太快； 3、精制时加饱和石灰水后要趁热过滤。 六、思考题： 1、提取分离过程中加 NaCl 起什么作用？ 2、根据盐酸小檗碱的性质，还可以用其他方法进行提取与分离吗？ 3、小檗碱属于哪一类生物碱?可以用盐酸水溶液提取吗？
2、仪器：粉碎机，渗漉筒，烧杯，硅胶 G-CMA-Na 薄层板，真空干燥箱等。 四、实验步骤：
1、提取分离
黄连粗粉 50g(可用黄柏代替) 加 0.3％H2SO4500ml（超过药材 0.2cm），浸渍 20 分钟， 装入渗漉筒，滤过（用分液漏斗浸泡 24h，渗漉）
2、精制
药渣 滤液(酸水液)
加石灰乳调 PH 值至中性，放置 10 分钟，抽滤（6-8 层纱布过滤） 滤液（300ml）
实验一 黄连中小檗碱的提取、精制、鉴定及含量测定
黄连为毛茛科黄连属植物黄连（coptis chinensis Eraneh）、三角叶黄连 （coptis deltoidca C．Ycheng et Hsiao）或云连（coptiteetoidesC.Y.cheng） 的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。 黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱 （berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。其 中小檗碱含量最高，可达 10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。小檗碱有 很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小 檗碱相似。 一、目的要求 1、掌握从黄连中提取小檗碱的原理和方法；小檗碱精制的方法。 2、学习渗漉法提取方法。 3、熟悉小檗碱的化学性质和鉴定方法。 二、实验原理 小檗碱为黄色针状结晶，mp 为 145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1:20） 及乙醇中（1:100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等 有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为 l:500，枸橼酸盐 1:125，酸性硫酸盐 1:100，硫酸盐 l:30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka=11.53），能溶于水中，其水溶 液有三种互变形式。
季铵式（红棕色）
醇式（黄色）
醛式（黄色）
小檗碱（黄连素）
掌叶防己碱又称巴马亭，为黄色结晶，溶于水、乙醇、几乎不溶于三氯甲烷、 乙醚等有机溶剂。盐酸掌叶防已碱为黄色针状结晶，并有强烈的黄色荧光，易溶 于热水或热乙醇，在冷水中的溶百度文库度也比盐酸小檗碱大。
称重，计算提取率（精制的盐酸小檗碱）
3、鉴定 理化检识实验 （1）丙酮加成反应：取自制精制盐酸小檗碱 0.05g 溶于 50ml 热水中，加入
10%NaOH 溶液 2ml，混合均匀后，于水浴上加热至 50℃，加入丙酮 5ml，放置， 即有柠檬色丙酮小檗碱结晶析出。抽滤，水洗后，干燥，测 mp。
（2）漂白粉显色反应：取自制精制盐酸小檗碱少许，加稀盐酸 2ml 待溶解后， 加漂白粉少许，即显樱红色（小檗碱水溶液由黄色转变为樱红色）。