21三体综合征产前诊断

晚期妊娠时，先扪清胎先露，然后上推先露 部，在先露部下方穿刺；也可在胎儿颈背部空隙 处或胎儿肢体侧空隙处穿刺。
取材
4、确定穿刺部位后，以20～21号腰椎穿刺 针垂直刺入腹壁，通过腹壁及宫壁两次阻力，当 有落空感时即进入羊膜腔，抽出芯针，见羊水溢 出，接上注射器，顺利抽得清亮羊水，再次证实 在羊膜腔内后，可注射药物。如欲做羊水检查， 则抽取羊水20ml立即送检。
结果判断
纯合型
嵌合型
易位型
结果判断
• (1)标准型
• 占患者总数的92.5%，患儿体细胞染色 体有47条，有一条额外的21号染色体，核 型为47，XX（或XY）+21。其发生机制为 亲代（多为母亲）的生殖细胞在减数分裂 时染色体不分离所致。
结果判断
纯合型
嵌合型
易位型
结果判断
• (2)嵌合型
• 仅占21-三体综合征的2.5%-5%，是指受精卵 在有丝分裂期间染色体不分离而导致的，因此只 是部分而不是所有的细胞存在缺陷。患儿体内含 有正常和21-三体细胞二种细胞株，形成嵌合体， 核型为46，XX（或XY）/47，XX（或XY）+21， 其临床表现随正常细胞所占百分比而定。嵌合型 的患儿的智商较其它两型高，临床并发症的发生 率也相对较少。
案例一
——遗传病的产前诊断
产前诊断
定义
对象
方法
• 产前诊断是在遗传咨询的基础上，主要通 过遗传学检测和影像学检查，对高风险胎 儿进行明确诊断，通过对患胎的选择性流 产达到胎儿选择的目的，从而降低出生缺 陷率，提高优生质量和人口素质。产前诊 断又称宫内诊断。它是为了了解胎儿在子 宫内的健康情况，有无先天性畸形或遗传 病，用某些特殊检查方法在子宫内对胎儿 进行诊断，以便及早采取措施避免残疾儿 的出生，提高出生人口的素质，是有生学 的重要组成部分。
产前诊断
定义
对象
方法
产前诊断对象
• 35岁以上的高龄孕妇； • 夫妇双方有一人为染色体畸变，或曾生育过染色体异常患 儿的孕妇； • 曾生育过单基因遗传病患儿的孕妇、已知或推测为AR或 XR遗传病携带者的孕妇夫妇； • 夫妇之一有开放性神经管畸形，或出生过这种畸形患儿的 孕妇； • 有原因不明的自然流产史、畸胎史、死胎及新生儿死亡史 的孕妇； • 具有遗传病家族史又系近亲婚配的孕妇； • 夫妇之一有致畸因素接触史的孕妇； • 羊水过多、宫内生长发育迟缓或疑为严重宫内感染的孕妇
四、实验步骤
取材 ↓ 体外细胞培养 ↓ 制片 ↓ 显带 ↓ 核型分析
取材
1、腹部备皮，排光膀胱，平卧位常规消 毒后铺无菌洞巾。
2、麻醉，一般不必需要，精神紧张者或 可用普鲁卡因或利多卡因麻醉。
取材
3、选择穿刺部位，经B超胎盘定 位后避开胎盘。
中期妊娠时，一般选择在耻骨联合上3横指 相当于子宫下段处，于腹中线或其左右侧旁，扪 及囊样感的部位做穿刺；也可于宫底与耻骨联合 连线中点或左右任何一侧穿刺。
三、实验材料、试剂及器材
• （1）器材：离心管，离心机，天平，37℃ 温箱，载玻片，盖玻片，恒温水浴锅，光 学显微镜，标本板，玻璃铅笔，定时钟， 染色缸，直柄虹膜镊，滴管。
• （2）药品：pH6.8 PBS，Giemsa， 0.025%胰蛋白酶（取0.9%氯化钠100ml， 加0.25%胰蛋白酶1ml）。
结果判断
纯合型
嵌合型
易位型
结ຫໍສະໝຸດ Baidu判断
• (3)易位型
• 约占全部病例的2.5%～5%，多为罗伯逊易 位，即着丝粒融合，其额外的21号染色体长臂易 位到另一近端着丝粒染色体上。最常见为D/G易 位，D组中以14号染色体为主，核型为46，XX （或XY）-14，+ t（14q;21q），少数为15号染色 体。另一种为G/G易位，是由于G 组中两个21号 染色体发生着丝粒融合，形成等臂染色体，核型 为46，XX（或XY）-21，+ t（21q；21q）。
二、实验原理
• 1. 羊水中有一定数量胎儿脱落细胞，通过 羊膜穿刺获取羊水中的胎儿细胞，经体外 培养后通过G显带实验进行核型分析，判断 染色体是否畸形，诊断是否患有21三体综 合征。
• 2. G显带是指以Giemsa染料染色后， 使染色体显带的技术。Giemsa染料是 由噻嗪和曙红组成的，着色时DNA先 于2个噻嗪分子结合，然后再与一个曙 红分子结合，形成沉淀物，而DNA的 某些部位对染料不敏感，由此形成明 暗相间的条带。
•
四、实验步骤
取材 ↓ 体外细胞培养 ↓ 制片 ↓ 显带 ↓ 核型分析
核型分析
纯 合 型
核型分析
•
• •
易 位 型
核型分析
五、注意事项
• （1）胰蛋白酶浓度和处理时间随气温高低有所不 同。一般规律是标本存放时间越长，在胰蛋白酶 当中处理时间越长。太新鲜的标本，染色体会出 现毛茸现象。片龄很长的标本往往会导致斑点状 的染色体。 • （2）胰蛋白酶温度：温度越高，反应的速度就越 快，一般是室温，但温度必须稳定至少20min。 • （3）胰蛋白酶处理的时间：如果细胞呈紫蓝色， 说明胰蛋白酶的作用时间不够，如果细胞呈桃红 色，说明作用时间刚好。
产前诊断
定义
对象
方法
产前诊断方法
• • • • • • • • 1.X线检查 2.超声波检查 3.胎儿镜 4.羊膜穿刺术 5.绒毛吸取术 6.脐带穿刺术 7.孕妇外周血分离胎儿细胞 8.植入前诊断
一、实验目的
• 掌握遗传病的产前诊断过程，通过对21三 体综合征的诊断设计，培养运用遗传学现 代技术解决医学实际问题的能力。
显带
•
1、将制好的染色体标本，置 72℃～75℃烤箱中烤片3h。 2、放入预温至37℃的0.025%胰 酶溶液中（pH=7.2～7.4）消化1min左 右，每次的作用时间并不完全相同， 可先试一张片子，再根据显带效果调 整胰酶作用时间。
• •
显带
•
3、在Giemsa 染液中染色10min， 自来水冲洗干净，晾干后，即可阅片。 4、镜检：在显微镜高倍目镜下检 查显带标本，在染色体上若出现清晰 的深浅相间的带型，即为可取标本， 可供摄像分析
谢谢
5、穿刺完毕后拔出穿刺针，局部压迫5分 钟，穿刺部位敷以无菌纱布，胶布固定。
四、实验步骤
取材 ↓ 体外细胞培养 ↓ 制片 ↓ 显带 ↓ 核型分析
细胞体外培养
四、实验步骤
取材 ↓ 体外细胞培养 ↓ 制片 ↓ 显带 ↓ 核型分析
制片
四、实验步骤
取材 ↓ 体外细胞培养 ↓ 制片 ↓ 显带 ↓ 核型分析