大鼠小肠吸收模型

大鼠肠吸收单向灌流模型的建立

取禁食12 h(可自由饮水)的大鼠，腹腔注射戊巴比妥钠（40 mg·kg-1）将其麻醉。将麻醉的大鼠固定于恒温手术台上以保持体温，沿腹中线打开腹腔，分离待考察肠段，长度10～15 cm，于两端切口，用37 ℃的生理盐水洗净肠内容物，然后，用空气将生理盐水排空，插入塑料管，并结扎固定，用预热至37 ℃的pH=6.8的磷酸盐缓冲液循环10 min，再用空气排出pH=6.8的磷酸盐缓冲液[10]。接着用pH=6.8的磷酸盐缓冲液配制成的供试药液以0.5 mL·min-1的流速泵入肠段，使肠段内充满药液，后将流速调至0.25 mL·min-1，同时开始记时，约0.5 h后，吸收达到稳定状态[11]。进口处用已知质量的装有供试液的小瓶进行灌流，开始每隔15 min在出口处用另一已知质量的小瓶收集一次(同时迅速更换下一个供试液小瓶和收集液小瓶)，称质量，计算灌入和收集的供试液的质量[12]。于出口处收集流出的灌流液直到105 min，即分别于记时后的45、60、75、90和105 min取样。实验结束时，将灌流肠段剪下，测量其长度和内径。所取样品置于1.5 mL离心管中，12000 r·min-1离心20 min后，取20 μL上清液用于测定峰面积，剩余的样品利用UV 测定吸光度值(A)。

大鼠外翻肠囊模型的建立

取禁食(不禁水)12小时的大鼠，腹腔注射戊巴比妥钠（40 mg·kg-1）将其麻醉，开腹取出相应肠段，以生理盐水灌流冲洗至无肠内容物，将小肠移至4℃人工肠液中，在不损伤肠管的情况下，剥离肠表面的脂肪及血管[13]，然后，用滤纸沾干表面水迹。将一与肠腔口径相适的塑料软管轻轻插入肠段（从口端向肛门端方向），用丝线将肛门端结扎在塑料软管一端，用手指轻柔地将肠管翻转使粘膜面朝外，用0℃的磷酸盐缓冲液冲洗内表面[14]，然后用注射器向肠内注入适量阴性对照液，使得肠囊的长度约为4 cm，再用丝线扎住口端，剪去塑料软管。迅速将此肠段置入一通有95％O2及5％CO2的混合气体（2mL·min-1）的25 mL预热至37℃的沙棘黄酮供试液的烧杯中，烧杯放入37 ℃恒温水浴中，分别于15、45、75 min，取肠外液1 mL置于离心管中，12000 r·min-1离心20 min后，取上清液20 μL用于测定三种苷元的峰面积。