1齐墩果酸研究进展(1、2)

2010年第4期

齐墩果酸(oleanolic acid,OA )是五环三萜类化合物,

是一种天然产物化学成分,广泛分布于植物界,如在青叶胆、女贞子、木忽木等植物中，OA 以游离或结合成苷的形式存在。自20世纪70年代该药用于治疗肝炎以来,不断发现新的药理作用,临床上得到广泛应用，引起普遍重视,并进行了深入研究。仅近5年来国内研究论文达百余篇。现将其发现、结构、理化性质、功能、药理作用和应用研究进展综述如下：

1齐墩果酸的发现

齐墩果酸(oleanolic acid,OA )是女贞子的主要有效成分，别名士当归酸，大部分以游离酸或糖苷的形式存在，为齐墩果烷型五环三萜类化合物，是我国首次从植物中发现的、治疗急性黄疸型肝炎和慢性病毒性肝炎比较理想的药物之一。齐墩果酸广泛地存在于食物、医学草本植物等植物中[1]。早在1908年，英国的F B Powers 首次从木樨科植物Oleaeuro —

peae L.的叶中分离出OA ，1946年Ruzicka 确定了它

的结构。1955年，有文献报道日本女贞Ligustrum

japonicun Thunb 果实中含有OA 。1975年，我国湖南

医药工业研究所按1974年云南青叶胆疗效鉴定会的分工，进行了青叶胆抗肝炎有效成分的化学和药理研究，鉴定其中一单体为OA 。据不完全统计，有

126种植物含有OA 。在常用的植物中，如丁香、大

枣、川西獐牙菜、女贞子、牛膝、西洋参、苏合香、连翘、青叶胆、琵琶叶、柿叶、景天三七、人参、山芝麻、甘草、关木通、东北龙胆、雪胆、摁木、小茴香、夏枯草中都含有OA 。OA 在五加科、葫芦科、铁青树科、毛茛科等植物的根和根茎(如雪胆、摁木)中主要以皂苷形式存在[2]。

2齐墩果酸的结构与理化性质

OA 为五环三萜类化合物,化学名为(3β)-3-Hydroxyolean-12-en-28-oic acid,分子式为C 30H 48O 3,

为白色簇状针晶,无色、无味、无臭、不溶于水,可溶

齐墩果酸研究进展

张蜀艳1，李政2

(1.成都市工业学校，四川成都

610015；2.成都市科技局，四川成都610051)

摘

要：综述齐墩果酸发现、结构、理化性质、功能和应用研究进展,并展望其开发利用前景。

关键词：齐墩果酸；提取分离；药理中图分类号：TS201.2

文献标识码：A

文章编号：1674-506X （2010）04-0020-0005

Progress in Oleanolic Acid Research

ZHANG Shu-yan 1,LI Zheng 2

(1.Chengdu Industry School,Chengdu 610015;2.Chengdu Municipal Science and Technology Bureau,Chengdu 610051)

Abstract:Introduced the discovery,construction,physicochemical properties,function and application progress of oleanolic acid,and prospected its developing.

Keywords:oleanolic acid;extraction and separation;pharmacology doi:10.3969/j.issn.1674-506X.2010.04-005

收稿日期：2010-07-05

作者简介：张蜀艳（1974-），女，硕士研究生，生物制药工程师，执业药师，讲师，金融经济师，现主要从事生物制药方面研究。

Food and Fermentation Technology

第46卷（第4期）Vol.46，No.4

第46卷（总第158期）于乙醇、氯仿、乙醚、丙酮等。熔点:310℃,比旋度:[α]12D+79.50(氯仿中),Lieberm ann-Burcbard 反应

呈紫红色[3]。

运用紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振谱等技术确定OA 的结构[4]:

OA 的紫外光谱在207nm 处的微弱吸收,说明

有一个孤立双键。红外光谱根据区域A (1355cm -1～

1392cm -1)和区域B (1245cm -1～1330cm -1)的碳氢吸

收来区别骨架类型,齐墩果酸在A 区有两个峰,B 区有三个峰,而其异构体乌苏酸(ursolic acid)在A 区和

B 区各有三个峰,以此可区分两者。1HNMR 谱在δ0.88～1.12处有7个属于角甲基的单峰,δ317处为3α-H 和δ5122处为Cn-H 。

OA 属于不饱和三萜化合物,因此反Diels -Alder (RDA)裂解体是普遍存在的。其中碎片(a)是

齐墩果酸的特征碎片，m/z248为基峰,其余强峰是a

,b 失去取代基形成的离子。

13

CNMR 可以解决OA 的结构类型、取代基位置

及构型等问题。齐墩果酸具有八个角甲基分别取代在C 4,C 10,C 8,C 14,C 17和C 20六个季碳上,六个季碳化学位移在30～40ppm 范围,如果角甲基被含氧基团取代,相连的季碳信号产生相应的位移。

13

CNMR 亦可以作为区别齐墩果酸和乌苏酸的工具。齐墩果酸:δ

(C 12)122.1,δ(C 13)143.4;乌苏酸δ(C 12)125.5,δ(C 13)138.0。

齐墩果酸的结构确定为以后的临床应用、生产、药品质量控制等方面提供了科学依据。

3齐墩果酸含量测定、提取分离、生产工艺3.1含量测定方法

目前应用于OA 的含量测定方法很多,早期应用的比色法、中和法由于操作复杂,显色误差较大,所以近年来已少应用,而薄层层析法则应用广泛。随着

HPLC 和SFC 的逐渐应用,因其更加简便快速的操

作及更高的准确度的优势,应是将来OA 含量测定

的主要方法,尤其是SFC [5],具HPLC 、GC 及TLC 所不能取代的某些优越性。现以测量牛膝中OA 的含量为例，简要叙述目前应用广泛的薄层层析法。

精密称取过60目筛的牛膝粉末0.5g,置圆底烧瓶中,加入2%盐酸10mL 浸泡一夜,加热回流水解

6h,抽滤,残渣用蒸馏水洗至中性。再于70℃烘箱中

烘干,置索氏提取器中,加入氯仿30mL 浸泡一夜,热回流提取16h,回收氯仿至干,残留物用氯仿溶解于5mL 容量瓶中。对照品齐墩果酸(下同)用氯仿制成每1mL 含0.5mg 的溶液,点于同一硅胶G 薄层板上,以正己烷2氯仿2醋酸乙酯2甲醇2甲酸(20∶

4∶4∶2∶1)为展开剂展开,取出晾干,喷以磷钼酸乙醇

液,在105℃烘5min 显蓝黑色斑点。

3.2提取分离[6，7]

龚慕辛等用不同提取法对女贞子中OA 进行提取:取干燥女贞子共5份(10g/份),分别以水、95%乙醇、75%乙醇提取,A 法(半仿生法)、B 法(碱水法)提取,其中A 法为头煎加pH =2的酸水100mL 浸泡

0.5h 后煎60min,二煎加pH =12的碱水100mL ，煎1h,煎液滤过合并。B 法则将A 法头煎用酸水改为pH =12的碱水,其余相同。水提取每煎用水量及时

间同A 法。将5种提取液浓缩,回流提取得浓度

40g/L 的样品溶液。用双波长薄层扫描法测得OA 含

量。结果表明,半仿生法提取OA ,提取率远高于一般水提。以pH=12的碱液提取女贞子可以使OA 提取率大于75%乙醇的提取率[7]。黄湘兰等以OA 为指标,用正交试验法对中药女贞子提取工艺进行优选。实验选择乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和次数

4个因素,每个因素3个水平。结果表明,乙醇浓度

为70%,乙醇为药材量的15倍,提取时间3h 及提取

2次,所得OA 的含量最高。而且,从数据整理结果

来看,乙醇浓度是关键因素。乙醇用量、提取时间及次数对它的影响较小。王忠壮等研究利用太白木忽木生产OA 的工艺。方法采用正交实验设计,以高效液相色谱法测定齐墩果酸的含量。结果发现影响生产的因素主要为水解酸度、水解时间、预处理、药材规格等。不同工艺的产量可相差3倍。结论:太白木忽木根皮切成3cm 小段,预发酵48h,水解酸度为

7%,水解时间为5h 的工艺产量最高;而粗粉不发

酵,酸度7%,水解4h 为最实用的生产工艺[7]。

3.3生产工艺[8]

由于OA 结构复杂,难以用合成法获得,所以目

前大多采用植物提取法进行OA 的精品制作,生产

张蜀艳等：齐墩果酸研究进展H 3C

CH 3

COOH

H CH 3

CH 3CH 3

H

CH 3

H 3C

HO 21