肌苷、肌苷酸的测定

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食品中肌苷酸的测定原理

食品中肌苷酸的测定原理
肌苷酸的测定原理主要是通过颜色反应法来实现的。

下面是具体的步骤：
1. 食品样品的制备：将待测食品样品加入生理盐水或其他适当的提取液中，用搅拌器搅拌均匀，得到均匀的食品提取液。

2. 反应原理：肌苷酸与亚硝酸钠在酸性条件下发生反应生成亚硝基肌苷酸，然后亚硝基肌苷酸与硫酸铁铵反应生成深红色络合物。

3. 测定操作：在一定体积的食品提取液中加入适量的亚硝酸钠溶液和硫酸铁铵溶液，使反应发生。

经过一定的反应时间后，用分光光度计测定溶液的吸光度。

4. 比色测定：根据反应产生的深红色络合物的吸收光谱，选取合适的波长进行测定。

一般选择较大吸光度的波长作为测定波长。

5. 校正测定结果：通过对照试剂或标准品进行测定，得到标准曲线，然后用标准曲线将吸光度转化为肌苷酸的浓度。

总结：肌苷酸的测定原理是利用其与亚硝酸钠反应生成亚硝基肌苷酸，再与硫酸铁铵反应形成深红色络合物，通过测定络合物的吸光度，并用标准曲线进行校正，来间接测定样品中肌苷酸的含量。

高效液相色谱法测定肌肉中肌苷酸的含量

高效液相色谱法测定肌肉中肌苷酸的含量
吴莹莹;李文英;谢明
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2005(026)012
【摘要】本试验改进了肌肉中肌苷酸测定的高效液相色谱法.采用Waters AtlantisTM dC18色谱柱(5μm,Φ4.6mm×150mm),以50mmol/L pH6.5甲酸铵缓冲液(含5%甲醇)为流动相,流速1ml/min;柱温:25℃;紫外检测波长为254nm.结果表明,肌肉中肌苷酸含量测定结果的相对标准偏差为1.11%,回收率为100.33%～101.67%.该方法可更准确的应用于生鲜肉类食品的肌苷酸含量的检测分析.
【总页数】3页(P191-193)
【作者】吴莹莹;李文英;谢明
【作者单位】中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094;中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094;中国农业科学院畜牧研究所,北京,100094
【正文语种】中文
【中图分类】TS207.3
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定畜禽肌肉中的肌苷酸含量 [J], 李家胜
2.肌肉中肌苷酸的高效液相色谱测定法 [J], 都恒华;吕慧梅;罗崇延
3.高效液相色谱法测定兰州鲇等鱼类肌苷酸的含量 [J], 杨娟宁;杨元昊;李蕾;王绿洲;周继术;兀洁;李海滨
4.高效液相色谱法测定略阳乌鸡肌肉中的肌苷酸 [J], 陈怡博;刘媛;陈锐;曹芸花;韩
豪
5.高效液相色谱法测定肉食品中肌苷酸的含量 [J], 张燕婉;鲁红军;王津生
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青海藏系绵羊肉中肌苷酸、肌苷的含量测定

青海藏系绵羊肉中肌苷酸、肌苷的含量测定刘文惠;星玉秀;董琦;皮立;胡凤祖【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2009(030)008【摘要】采用高效液相色谱法对藏系绵羊肉中的肌苷、肌苷酸进行定量分析.色谱柱:Kromasil C18柱(4.6mm ×250mm,5 μn);流动相:甲醇-水(95:5,V/V);流速1ml/min;紫外检测波长:254nm.结果表明:肌苷酸、肌苷分别在12.96～207.50mg/L和1.40～22.42mg/L范围内呈线性关系,回收率分别为97.98%、98.26%,该方法可用于动物肌肉组织中的肌苷酸、肌苷含量的测定.【总页数】3页(P238-240)【作者】刘文惠;星玉秀;董琦;皮立;胡凤祖【作者单位】中国科学院西北高原生物研究所,青海,西宁,810008;中国科学院研究生院,北京,100049;中国科学院西北高原生物研究所,青海,西宁,810008;中国科学院研究生院,北京,100049;中国科学院西北高原生物研究所,青海,西宁,810008;中国科学院西北高原生物研究所,青海,西宁,810008;中国科学院西北高原生物研究所,青海,西宁,810008【正文语种】中文【中图分类】TS207.3【相关文献】1.聚肌苷酸与聚胞苷酸的吸收系数测定及含量测定方法的比较 [J], 陈博2.鹌鹑肌肉肌苷酸含量和鹑肉保鲜时间的研究 [J], 苏淑贞;朱汉炎;李群江3.五味子萃取物有效成分含量测定及其对鸡肉中肌苷酸含量的影响 [J], 闫俊书;单安山4.祁连清泉羊羔肉中肌苷酸含量的测定 [J], MA Li;HAN Na;MA Juan-juan;WU Zheng-yan;ZHANG Xin-tao;ZHANG Hai-jing;FU Zi-heng;WANG Yue5.鸡肉中肌苷酸含量测定方法研究 [J], 杨露;谭会泽;刘松柏;邹轶;蓝棋浩;陈丹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

离子色谱―抑制电导法测定肉类产品中的肌苷酸含量

离子色谱―抑制电导法测定肉类产品中的肌苷酸含量摘要建立了一种离子色谱分离,抑制电导直接检测肌苷酸的新方法。

采用高交换容量阴离子交换柱IonpacAS11-HC,以30 mmol/L KOH在线等度淋洗,可在短时间内完成肌苷酸的检测,且7种常规阴离子对其测定不存在干扰。

采用本方法测定肌苷酸的线性范围为1.0~200 mg/L,线性相关系数(R2)为0.999,线性关系良好。

肌苷酸保留时间、峰高和峰面积的相对标准偏差分别为0.16%,0.94%和0.86%,方法具有较好的重现性。

本方法可应用于肉类产品中肌苷酸含量的测定,样品实际加标回收率范围在86.0%~110.0%之间。

该方法简单、方便、准确、可靠,为肉类鲜味成分研究提供了一种快速及有效的分析方法。

关键词离子色谱;抑制电导;肌苷酸;肉类产品1 引言肌苷酸(Inosine monophosphate,IMP)又称为次黄嘌呤核苷酸,最早于1847年由德国化学家Liebig在牛肉组织中发现。

1913年,Kodama和Kuninuka发现肌苷酸的鲜味特征,其增加鲜味的能力较谷氨酸钠强40倍。

肌苷酸广泛存在于动物肌肉组织中,其含量是衡量肉质鲜味的重要指标[1~3]。

随着养殖业的迅速发展及生活水平的提高,人们对肉类食品的需求日益增加,对肉品质的要求也越来越高,肌苷酸含量已成为于各种肉类产品品质评定的指标。

因此测定肉类食品中肌苷酸的含量,对研究肉类食品风味及呈味物质之间的相互关系具有非常重要的意义。

肌苷酸主要测定方法有分光光度法[4]、高效液相色谱法[5~9]、反相离子对色谱法[10]、毛细管电泳法[11,12],目前采用最多的是高效液相色谱法,然而由于肌苷酸疏水性相对较弱,高效液相色谱法对肌苷酸保留较弱,保留时间接近死时间,对于复杂基质样品容易存在干扰,因此有研究者采用反相离子对色谱法[10]。

离子色谱法(Ion chromatography, IC)是一种分析无机阴阳离子、有机阴阳离子的高效分离检测技术,具有简单、快速、灵敏度高等特点[13]。

肌酐测定标准操作程序 (肌氨酸氧化酶法)

肌酐测定标准操作程序1. 摘要肌酐试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清或尿液中肌酐的含量。

2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清尿液中肌酐的浓度。

3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定CREA 浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行,室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的肌酐（CREA ）试剂盒采用的是肌氨酸氧化酶法。

5. 原理上海科华生物工程股份有限公司的肌酐 (肌氨酸氧化酶法)试剂盒的测定原理如下：O H N N O H O H HCHO O O H O H O H 2222222224---42+−−−→−-+-+++−−−−→−+++−−−−→−+−−−−→−+醌亚胺间甲苯胺磺丙基乙基氨基安替比林甘氨酸肌氨酸尿素肌氨酸肌酸肌酸肌酐过氧化物酶肌氨酸氧化酶肌酸脒基水解酶肌酐氨基水解酶肌酐在肌酐氨基水解酶的作用下水解成肌酸，肌酸在肌酸脒基水解酶的作用下生成肌氨酸和尿素，其中产物肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成甘氨酸、过氧化氢和甲醛。

最后过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原底物4-氨基安替比林和N-乙基-N-磺丙基-间甲苯胺反应生成红色化合物醌亚胺.由于醌亚胺在波长546nm 处有最大吸收峰,所以在一定底物浓度范围内, 546nm 处吸光度的变化值与样本中肌酐的含量成正比.6. 仪器日立7600自动生化分析仪7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2 试剂瓶内主要成分：肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶、ESPMT 、肌酐胺基水解酶、4-氨基安替比林7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。

试剂不可冰冻。

7.4试剂准备：试剂为即用式。

8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。

食品肌苷酸含量的检测方法研究

食品肌苷酸含量的检测方法研究肌苷酸是一种存在于动物组织中的物质，尤其在肌肉组织中含量较高。

它是能源物质的一种来源，可以通过代谢产生腺苷三磷酸（ATP），为人体提供活动所需的能量。

因此，肌苷酸在食品中的含量成为了人们关注的焦点之一。

食品肌苷酸含量的检测方法研究旨在准确测定食品中肌苷酸的含量，以帮助人们了解食品的营养价值。

过去，常用的检测方法主要是基于色谱技术，如高效液相色谱（HPLC），通过将食品样品提取后，使用色谱柱进行分离，再利用紫外或荧光检测器来定量分析肌苷酸的含量。

然而，随着科学技术的发展和深入研究，新的检测方法逐渐涌现。

一种新兴的方法是利用质谱技术进行检测。

质谱技术能够提供更加准确和灵敏的分析结果。

例如，气相色谱质谱联用可以通过将食品样品挥发成气体后，使用质谱仪进行分析，不仅可以检测肌苷酸的含量，还可以确定其结构。

同时，液相色谱质谱联用也是一种常用的肌苷酸含量检测方法，可以在不需要样品预处理的情况下，直接对食品样品进行分析。

这些质谱技术的出现使得肌苷酸含量的检测更加便捷和高效。

除了色谱和质谱技术，生物传感技术也被应用于肌苷酸含量的检测。

生物传感技术利用生物体的特异性识别和信号转导机制，将目标物质与生物分子结合，并转化为可测量的信号。

例如，利用抗体对肌苷酸进行识别，通过一系列的反应将识别到的肌苷酸转化为电化学信号进行检测。

这种方法具有灵敏度高、选择性好的优点，对于肌苷酸含量的快速检测具有重要意义。

除了传统的检测方法外，近年来，新型的纳米材料也逐渐应用于肌苷酸含量的检测。

纳米材料具有较大的比表面积和特殊的物理、化学性质，能够提高检测的敏感性和选择性。

例如，利用石墨烯等纳米材料制备传感器，可以通过肌苷酸与纳米材料发生特定的相互作用，改变纳米材料的电导率、发光性质或电化学反应，从而实现肌苷酸含量的检测。

这种纳米材料在肌苷酸检测中的应用，为人们探索更加灵敏、快速的检测方法打开了新的研究方向。

综上所述，食品肌苷酸含量的检测方法研究在近年来得到了长足的发展。

肌肉中肌苷酸的高效液相色谱测定法

定。ｔａ２用离子对色谱法Ｋｉｄ等〔ａ〕测定。本文采用
反相色谱法对大白鼠和小白鼠腿肌中的肌苷酸用外
标法进行定量测定。
实验
部分
（一）仪器和试剂色谱仪：日本岛津ＬＣ４，ＳＤ－紫外分光检测器，ＣＲ２ＡＰ１－Ａ数据微处理
机。谱Ｈｐｒｌ， μ ，５× ．ｍ色柱：ｙｓＣ８５ｍ１４ｍ，ｅｉ１０６
ｄｔｍｎｔｎＣ２，ｅ＋Ｎ２，ｎ＋Ｃ２ａｄｅｒｉｉｏｕ＋Ｆ３，ｉＺ２，ｏ＋ｎｅａｏｆ＋，
Ｐ２ｂｉｃｍｔｒｈ．ｍｘｕｅｍｏｂ＋ｙｈｏａｇｐｏｎｏａｉｒｏ６ｍｌｔｆ
ｃｒａｉ＋３ｍｌｌａｉ＋０ｍ１ｔｉｉｃｔｃｄｍｏｏａｃｄ３ｍｏａｅｃｘｉｃｃｉ
取腿肌剪碎放入试管，管口用塑料布包扎紧，在水
浴上煮沸１，冷却后离心１ｍｎ上清液用氯仿－ｈ０ｉ，苯酚饱和溶液去一次蛋白，再用氯仿反复去蛋白，直
至氯仿与水的界面间无蛋白为止。
（Ｉ标准溶液的三）ＭＰ回收用外标法测定Ｉ、Ａ、Ｎ混合溶液中ＭＰＭＰＩＯＴ的ＭＰ浓度，如表１所列，回收率良好。
表１
标准ＩＰＭ溶液的回收
结果和讨论（一）分离条件的选择用４ｍｍｏＬ０ｌ磷酸盐／缓冲溶液作流动相，调节不同的ＰＨ值，在Ｃ８１柱上进行分离。在Ｐ０— ．Ｈ６７范围内，Ｉ５ＭＰ腺苷单磷
酸（ＭＰ和肌苷ＩＯ都Ａ）Ｎ）能很好分离，而在ｐＨ
ｗｈａｐｓｅ５ａｄ／ｉｄｔｔ．ｉａｌｉｏ０ｌＵＶｓｅｏｔｓｅｆｎＶｍｚｅｃｒｎｅｅｏｒｇｔ４１４ｏＬ４（－ｙｉｄｔｔｎｅｗｓ０ｍｌ－２Ｐｒｅｃｉｅｎａ × －／ａｉｌｏｅｒｎｌＲｉ３ｏＬｍｎｍｙａ）ｒｅｉ（Ａ）ｍ１ａｏｉｚｓｃｏＰｎ／ｍｕｈｄｏｉｅｌｏＬｅｃｄＴｉｍｔｏｙｒｘｄａｄｌａｔａｉ．ｈｎｍ／ｃｉｃｓｅｄｈｗｓｌｄｔａａｙｓｈｍｎｉａａｐｉｔｈｎｌｉｏｕａｈｒｐｅｏｅｓｆａ．

高效液相色谱分析啤酒中的肌苷、肌苷酸

高效液相色谱分析啤酒中的肌苷、肌苷酸
吴波;张寒俊
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2007(000)002
【摘要】采用Nova-pak C18色谱柱(150x3.9 mmid,4 μm),水(含0.5%H3PO4)、甲醇为流动相,梯度洗脱,流速0.60 mL/min,柱温30℃,测定波长(λ)248 nm,直接进样同时分离了肌苷和肌苷酸.结果显示,在肌苷、肌苷酸含量分别为0.5 mg/L～10 mg/L时,呈线性关系,加样平均回收率为91.6%、96.8%,相对标准偏差为0.8%～2.6%.
【总页数】3页(P56-58)
【作者】吴波;张寒俊
【作者单位】武汉工业学院,湖北省粮食加工与转化重点实验室,湖北,武汉,430023;武汉工业学院,湖北省粮食加工与转化重点实验室,湖北,武汉,430023
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.肌苷酸合成酶系2个基因对苏禽乌骨鸡胸肌肌苷酸含量的遗传效应 [J], 张学余;李国辉;韩威;苏一军;束婧婷;屠云洁
2.肌苷酸合成酶系PURH基因对苏禽乌骨鸡胸肌肌苷酸含量的关联分析 [J], 张学余;束婧婷;苏一军;李国辉;屠云洁
3.风味酱中肌苷、肌苷酸的高效液相色谱分析 [J], 吴波;张寒俊
4.肌苷酸合成酶系3个基因对白耳鸡胸肌肌苷酸含量的遗传效应 [J], 张学余;束婧婷;韩威;陈国宏
5.食用菌中肌苷及肌苷酸的高效液相色谱分析 [J], 吴波;张寒俊
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畜禽肌肉中肌苷酸含量测定高效液相色谱法

畜禽肌肉中肌苷酸含量测定高效液相色谱法1 范围本标准规定了畜禽肌肉中肌苷酸含量测定。

本标准适用于畜禽肌肉中肌苷酸含量的测定。

本方法检出限为0.05 mg/g，定量限为0.20 mg/g。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 9695.19 肉与肉制品取样方法3 原理试样中的肌苷酸经5 %高氯酸溶液（4.8）提取，再与0.5 mol/L氢氧化钠溶液（4.9）发生反应生成化学状态稳定的肌苷酸钠，采用高效液相色谱（紫外检测器）测定，外标法定量。

4 试剂或材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。

4.1 水：GB/T 6682，一级水。

4.2 甲酸铵。

4.3 高氯酸。

4.4 氢氧化钠。

4.5 肌苷酸标准品：纯度≥98.0 %。

4.6 甲醇：色谱纯。

4.7 甲酸铵缓冲溶液（50 mmol/L，pH 6.5）：准确称取3.15 g甲酸铵（4.2）于烧杯，加500 mL水（4.1），用0.5 mol/L氢氧化钠溶液（4.9）调至pH 6.5，定容至1 000 mL。

用前0.45 μm滤膜过滤，超声水浴脱气20 min。

4.8 高氯酸溶液（5 %）：准确移取高氯酸（4.3）5 mL，加95 mL水（4.1）。

4.9 氢氧化钠溶液（0.5 mol/L）：将氢氧化钠（4.4）配成饱和溶液，密闭放置至溶液清亮，用塑料管虹吸，准确移取26 mL上清液于1 000 mL水（4.1）中。

4.10 肌苷酸标准储备液（1 mg/mL）：准确称取肌苷酸标准品（4.5）15.31 mg （精确至0.01 mg），水（4.1）定容至10 mL。

4.11 肌苷酸标准系列工作溶液：准确移取1 mg/mL肌苷酸标准储备液（4.10）2、4、8、10、12、14、16 mL，水（4.1）定容至100 mL，即为0.02、0.04、0.08、0.10、0.12、0.14、0.16 mg/mL的肌苷酸标准系列工作液。

几种鸡肌肉中肌苷酸(IMP)的测定

树碱的含量．中国中药杂志．９７２（）２４～３１９，２４：３２５有良好的分离度和线性关系，而且样品中的太部分色吕飞杰等．高效液相色谱法测定栀子中栀子甙的谱峰均得到有效的分离，这表明此色谱条件下，结构２张德权，
和性质相似的多种大豆异黄酮能有效分离。与国外已有文献对照，笔者认为保留时间为１．０８５２的物质可能是大豆黄素ｓｃｅ，ｌｈｉ由于投有标准品作对照，ｙｎ有待
ｃｉｋｎｈｃｅｓｗａ８２ｔｍｅｉｓｍｏｔｎｔａｏＡ — Ａｈｃｅｓ１０ｄｙｌｅ．２ｔｓａｄｏ９ａｓｌ．ｉｓ．Ｆｒｅｒｈａｈｔｆｃｉｋｎ３ａｓｏｄｎｓｒｉｍｅ．ｎｆ０ｄｙｏｄ１５ｔｍｅｏ
Ｚｏｇｕｇｇｎｈａｇｉｅｓｂｅｓｍａ，ｒｂｓ）ＴｅＭｎｅｔｆ２ｄｙｏＷａｏｔｔｅｈｇｅｈｎａｅｔｇｕｊｃｃｎ（ｒａｅｔｄｙａｅ，ｈＩＰｏｔｎｏ１０ａｓｌａｂｕ２ｍｓｉｒｈｎｉｎｉｈｋｔ．ｃｄｓｉｈ
关健词
肌昔酸肌肉高效液相色谱
＾ｓ１１ｉｏｉｅｎｐｎｐａｅｆＭＰｃｎｅｔｏｄｆｒｎｋｎｓｆｓｌｗｒａａｙｅｗｅｋｋｎｗｒｂ１ｔ瑚１ｎ昌ｎｍｏｏｈｈｔＩ）ｏｔｎｓｆｉｅｅｔｉｄｏｍｕｃｅｅｅｎｌｄｈｎｅｅｓｅｅｅｓｚｈ
几种鸡肌肉中肌苷酸（Ｐ的测定Ｉ）Ｍ
宋焕禄张建北京工商大学化工学院北京１０３００７赵环环

高效液相色谱法测定肌酸中肌酐含量

目前采用高效液相色谱法检测皂苷类成分常用的检测器
有紫外和蒸发光散射检测器两种．试验采用ＨＬ法分本ＰＣ离．发光散射检测的方法对柴胡皂苷ａｄ进行定量，决了蒸、解传统的紫外检测器在低波长紫外时．线易发生漂移和流动基
维普资讯
天津药学２００２年６月第１４卷第３期
７５
２４样品测定．按供试品溶液制备项下的方法制备供试液．一样品进每样１，定３次，算含量。Ｏ测计结果见表１色谱图见图１。。
药学杂志．９２２（）２１９，７４：１５
４董友毅．思齐，胜利．柴胡主要皂甙成分的高效液相色谱测罗潘
３讨论
定．中国中药杂志．９９１（１：８１８．４１）３
高效液相色谱法测定肌酸中肌酐含量
米沙，晓平，国林，桂敏张杨刘
３０７）０００（津市医药科学研究所．津天天
摘要目的：快速准确测定肌酐建立ＨＰ分析方法。方法：Ｃ（．为ＩＣ。柱４６ｍｍ ×２０ｍｍ，１ｍ）５０。流动相：
ＭｉＳｈａ．Ｚｈａｎａｐｉｇ・ＹａｎｕｉＬｉｕｍｉｇＸｉｏｎｇＧｏｌｎ，ｕＧｉｎ

肌苷酸和肌苷作为评价虾鲜度质量指标的研究

ｓｒｍｐ．ｈｉＫｅｒｓ：ｃｏｒｃｉｍｏｅｂｒｉ；ｕｌｏｉｅ；ｅｓｒｖｌａｉｎ；ｒｓｎｓｙｗｏｄＭａｒｂａｈｕｒｓｎｅｇｉｎｃｅｔｄｓｎｏｅａｕｔｙｏｆｅｈｅｓ
虾是一类广受欢迎的水产品，国外对各种虾的研究主要集中在海水虾，其鲜度评价指标、对核苷酸组成的变化、同保藏温度条件对其品质影响等做了大量的研究。Ｓａｓａ不ｈｍｈｄ等［研究了墨吉对虾在冰 ’ 藏和常温条件下保藏其感官、生物和生化变化，ｈｉｅｇＬｕ微Ｓｙｎｎｏｉ究了草虾在保藏期间嘌呤化合物的．研含量与鲜度之间的相关性，ｔｍｔＹｍｎｋ［研究了日本对虾死后肌肉组织的生化变化并确定次Ｍａｕｏｓｏ和ａａａａｊ
ｓｎｏｙｅａｕｔｏｓ．ＴｅｃｎｅｔｏＭＰｎｒａｅｔｔｒｇｉｎｈｎｄｃｅｓｄａｔｒｒａｈｎｘｍｕｅｓｒｖｌａｉｎｈｏｔｎｓｆＩｉｃｅｓｄｗｉｓｏａｅｔｍｅａｄｔｅｅｒａｅｆｅｅｃｉｇａｍａｉｍｈｖｌｅ．ｅｓｒｖｌａｉｎｉｄｃｔｄｔｅｑａｉｙｆｓｒｍｐｗａｎｃｅｔｂｅｗｎｔｅｃｎｅｔｆＨｘｒａｈｄ０．０ａｕＳｎｏｅａｕｔｏｎｉａｅｈｕｌｔｏｈｙｉｓｕａｃｐａｌｈｅｈｏｔｎｓｏｅｃｅ７ｔＭ／ｇｏｒＴｅｃｎｅｔｆＨｘｓｅｄｔｅａｐｉａｌｓｄｃｍｐｓｔｎｉｄｘｆｒａｓｓｉｇｑａｉｙｏｔｒｄｍｒｍｏｅ．ｈｏｔｎｓｏｅｍｅｏｂｐｌｃｂｅａｅｏｏｉｉｎｅｏｓｅｓｎｕｌｔｆｓｏｅｏ

HPLC法测定注射用肌苷的含量

HPLC法测定注射用肌苷的含量【摘要】目的用高效液相色谱法测定注射用肌苷的含量。

方法采用Kromasil C18柱（5μm 4.6mm×250mm)，以甲醇-水（10：90）作流动相，在248nm紫外波长检测。

结果肌苷在4.23～63.48μg/ml范围内有良好的线性关系（r=0.9999)。

低、中、高3个浓度的平均回收率（n=2）分别为101.4%、101.8%、101.1%，RSD为0.46%。

结论该法简便、快速、准确，可作为测定注射用肌苷中肌苷的含量。

【关键词】注射用肌苷；高效液相色谱法；含量测定【Abstract】 Objective A high-performance liquid chromatography (HPLC) was established for the determination of inosine contents in injection. Methods Impurity in the inosine injection could be separated on Kromasil C18 colnmn (5μm 4.6mm×250mm) using methanol-water (10:90) as mobile phase and UV detector at 248nm. Results The linear range was 4.23～63.48μg/ml(r=0.9999).Average recovery in the lower，moderate and higher inosine concentration groups was respectively 101.4%，101.8% and 101.1%(n=2) with RSD of 0.46%. Conclusion The method is simple，rapidand accurate.【Key words】 inosine injection;HPLC;concentration determination肌苷为微生物发酵制得的辅酶类药物，有改善机体代谢作用，临床用于各种类型的肝脏疾患、心脏疾患、白细胞和血小板减少症、中心视网膜炎及视神经萎缩等。

高效液相色谱法测定畜禽肉中肌苷酸研究

食品科学现代农业科技2014年第19期摘要建立了畜禽肉中呈味核苷酸肌苷酸的高效液相检测方法。

以0.05mol/L pH=6.5的磷酸二氢钠缓冲溶液(含15%甲醇)为流动相,采用DIONEX C 18色谱柱(5μm ,4.6mm×250.0mm )分离,流速1mL/min ,柱温35℃,二级管阵列检测器检测,检测波长为260nm 。

在0~125.4400μg/mL 浓度范围内具有良好的线性关系(R 2=0.99989),变异系数为0.05%~0.67%,加标平均回收率在86.15%以上,方法准确可靠,精密度高。

试验所测猪肉、鸡肉样品肌苷酸含量分别为178.79~198.91、144.07~163.55mg/100g 。

鸡肉、猪肉样品呈味度强度值均大于1,说明IMP 对猪肉、鸡肉的滋味有重要贡献。

关键词高效液相色谱;肌苷酸;畜禽肉;测定;精密度;回收率中图分类号O657.22;TS207.53文献标识码A 文章编号1007-5739(2014)19-0294-02高效液相色谱法测定畜禽肉中肌苷酸研究周俊华梁琪妹梁方方罗鲜青黄丽霞卢桂猷何仁春*(广西壮族自治区畜牧研究所,广西南宁530001)畜禽肉不仅要求有营养,而且要求色、香、味俱全。

鲜味与甜味、咸味、酸味、苦味一样属于基本味,是一种重要风味[1]。

畜禽肉中含有丰富的鲜味成分,肌苷酸(The inosine mono-phosphate ,IMP ),即次黄嘌呤核苷酸,是动物组织中重要的鲜味物质,其与畜禽肉类食品鲜味的产生密切相关[2-3]。

肌苷酸增加食品鲜味的能力较谷氨酸钠强40倍,含2%~8%肌苷酸的味精称为强力味精。

随着养殖业的迅速发展及生活水平的提高,人们对畜禽肉的需求日益增加,对肉品质的要求也越来越高。

畜禽肉中肌苷酸含量被作为肉质评定的重要指标,已广泛应用于各种畜禽肉类产品的品质评定,其含量高低可间接反映畜禽肉风味的优劣[4-5]。

原806-2肌苷检验标准操作程序1

目的：规范原辅料的检验方法和操作程序。

范围：肌苷。

责任：质检员。

程序：1性状1.1 外观检验：取样品5g，放于洁净的白磁盘中，检查其色泽、气、味。

1.2 依法检查（凡例），检查本品在水、氯仿、乙醇、稀盐酸、氢氧化钠溶液中的溶解情况。

2鉴别2.1 取本品1.0g，加水溶解并定容至100ml，量取1.0ml，再定容稀释至100ml，加等体积的3.5-二羟基甲苯溶液(取3.5-二羟基甲苯与三氯化铁各0.1g,加盐酸使成100mL)混匀,在水浴液中加热10分钟，观察反应现象。

2.2取2.1最初定容的溶液1ml,加氨制硝酸银试液数滴,观察反应现象。

2.3在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。

2.4依法检查（附录IV C），所得红外光吸收图谱与对照图谱（光谱集605图）比较。

3检查3.1 干燥失重：取本品1.0g，精密称定，在105℃干燥恒重，按“干燥失重测定标准操作程序”检查。

3.2 炽灼残渣：取本品1.0g，精密称定，按“炽灼残渣检查标准操作程序”检查。

3.3 重金属：取本品1.0g,按“重金属检查标准操作程序第三法”检查。

3.4 有关物质：取本品，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液20µl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高为满量程的20%，再精密量取供试品溶液与对照溶液各20µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍。

比较供试品溶液色谱中各杂质峰面积与对照品溶液的主峰面积。

3.5微生物限度按“微生物标准操作程序”进行。

4含量测定照高效液相色谱法（中国药典2005版一部附录V D）测定。

4.1色谱条件与系统适用性试验填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶流动相：甲醇-水（10.：90）波长：248nm理论板数：≥2000（按肌苷峰计算）4.2测定法取本品适量，精密称定，加水溶解制成每1ml中约含20µg的溶液，摇匀，精密量取20µl 注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取对照品适量，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。

酱油中肌苷和肌苷酸的高效液相色谱法分析

２１仪器与材料．ＶａａｒＳａ１ｉｆｎＰｏｔｒ２０泵，ｄｌ１自动进样器，Ｍｏｅ４０
３结果与讨论
３１系统适用性．
Ｐｏｔ３ＰＡ（ｒＳａ３５Ｄ二级管阵列检测器）。乙醇为分析ｒ
纯（海振兴化工一厂）肌苷：量 ≥ ９，号１１上；含８批３
相色谱法对酱油中的肌苷、苷酸进行分析［，肌９并对分离条件进行优化，为酱油产品的质量控制提供了
科学依据。
２ｍＬ，离心（００ｒｍｉቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ０，上清液进行高效液１００／ｎ４ｓ取
相色谱法分析。
２实验部分
相，行梯度淋洗，测波长２８ｍ。肌苷、苷酸分别在３９ｍ／进检４ｎ肌～０ｇＬ呈线性关系，品加标平均回收率分别为样９．、４２，对标准偏差为１１～１９。实验证明，方法适用于酱油中肌苷、苷酸的分析。８９９．相．．该肌
样１ｆ０Ｌ。梯度程序为：０２５ｍｉ，Ｂ（：２；～．４ｎＡ：８９）
２５～３０ｍｉ．４．０ｎ，Ａ（一４），９一５）；８１Ｂ（２９３ｏ～１．０ｍｉＡ：４５）１．０１．６ｉ．０１０ｎ，Ｂ（１：９；１０～１０ｍｎ，Ａ（１一１０）Ｂ（９一０）１．０４０，５；１６～１．８０ｍｉ，：１００）１．０～１．６ｎ，Ａ（００ｎＡＢ（０：；８Ｏ８０ｍｉ１０

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ICS 67.120
X22
团体标准
T/NAIA 0003—2020
肌肉中肌苷肌苷酸的测定
高效液相色谱法
（征求意见稿）
2020-XX-XX发布 2020-XX-XX实施宁夏化学分析测试协会发布
前言
本标准的编写格式符合 GB/T 1.1-2009《标准化工作导则第1部分标准的结构和编写》规定编写。

本标准由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本标准由宁夏大学、宁夏饲料工程技术研究中心、宁夏兽药饲料监察所、宁夏饲料工作站、宁夏农林科学院、宁夏昊标检测服务研究院、宁夏化学分析测试协会起草。

本标准主要起草人：辛国省、刘辉、卜姣姣、燕翀、杨仪、丁园、高巧仙、王建林、武晓宏、谢荣国、张小飞、张艳、王京。

本标准于2020年XX月XX日首次发布。

肌肉中肌苷肌苷酸的测定
高效液相色谱法
1 范围
本标准规定了肌肉中肌苷肌苷酸高效液相色谱法的测定。

本标准适用于肌肉中肌苷肌苷酸的测定。

本方法检测限为：0.01g/kg。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单位）适用于本标准。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 9695.19 肉与肉制品、取样方法
3 原理
肌肉组织中肌苷肌苷酸经高氯酸溶液提取后，通过调节pH值至6.5呈弱酸性，试液过滤膜进高效液相色谱仪经C18色谱柱分离，在254nm波长下紫外检测器（或性能相当的检测器）检测。

4 试剂与材料
除另有说明外，所用试剂均为优级纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水
4.1 高氯酸。

4.2 5%高氯酸：取5ml高氯酸加入95ml水中。

4.3 磷酸。

4.4 三乙胺。

4.5 甲醇（色谱纯）。

4.6 肌苷标准品（CAS：58-63-9，纯度不低于99.0%）。

4.7 肌苷标准储备液（0.8mg/mL）：称取肌苷标准品（4.6）20mg（准确至0,1mg）于25mL 容量瓶中，用水定容。

置于4℃冰箱保存，有效期3个月。

4.8 肌苷酸标准品（CAS:131-99-7，纯度不低于99.0%）。

4.9 肌苷酸标准储备液（1mg/mL）：称取肌苷酸标准品（4.8）50mg（准确至0.1mg）于50mL 容量瓶中，用水定容。

置于4℃冰箱保存，有效期3个月。

5 仪器和设备
5.1 实验室用粉碎机或研钵。

5.2 分析天平：感量0.0001 g。

5.3 均质机。

5.4 高效液相色谱仪：配紫外或二极管阵列检测器。

5.5 高速离心机。

5.6 超声波。

5.7 容量瓶：50mL、25mL。

5.8 移液管：玻璃移液管0.5mL、1mL、2mL、5mL。

5.9 砂芯过滤装置。

6 试样制备与保存
取肌肉组织，加液氮研磨或粉碎后置于-80℃冰箱备用。

注：在采样和制备过程中，应避免试样污染，如长途运输应加液氮或冰袋保存。

7 测定步骤
7.1 试样提取
平行做两份试验。

称取2g（准确至0.0001g），置于50mL塑料离心管中，用20mL5%高氯酸溶液分3次匀浆，匀浆液在4℃下以4000r/min离心10min，上清液转入50mL烧杯中，沉淀物继续用5%的高氯酸5mL洗涤、离心，反复2次，合并上清液于50mL烧杯，用KOH溶液调pH至6.5，用蒸馏水定容至50mL，摇匀，经0.45um滤膜过滤装入进样小瓶待测。

随同试样进行空白试验。

除不称取样品外，均按试样步骤进行。

7.2 色谱条件
色谱柱：C18，长250mm，内径4.6mm，粒径5um，或性能相当；
柱温：25℃；
进样量：20ul；
流动相：取3.5mL磷酸溶液加入200mL水和7.2mL三乙胺混匀，定容至1L，用三乙胺调pH6.5后取950mL加50mL甲醇混匀，经0.45um过滤，超声波脱气；
流速：1mL/min;
检测波长：254nm。

7.3 标准系列溶液
准确吸取标准储备液（4.7、4.9）0、0.1mL、0.2mL、0.5mL、1mL、2mL肌苷肌苷酸储备液分别置于25mL容量瓶中，用水定容。

浓度分别为：肌苷：0、3.2ug/mL、6.4ug/mL、16g/mL、
32ug/mL、64ug/mL。

肌苷酸：0、4ug/mL、8ug/mL、20g/mL、40ug/mL、80ug/mL。

现配现用。

7.4 测定
按照7.2给出参考色谱条件，依次上机测定标准系列溶液和试样溶液。

7.5 标准曲线绘制
试样溶液与标准溶液中肌苷、肌苷酸保留时间相对偏差在±2.5%之内。

在线性范围内，以肌苷、肌苷酸浓度为横坐标，以其响应值（峰面积）为纵坐标；绘制标准曲线，标准曲线相关系数不低于0.999。

8 分析结果的计算
按式(1)计算试样中的肌苷、肌苷酸含量，其数值用mg/kg表示。

肌苷、肌苷酸 (1)
式中：C—标准曲线下查的肌苷、肌苷酸浓度(ug/mL）；
V—试样定容体积(mL）；
m—试样量，单位(g)。

9 重复性
在重复条件下完成两个平行测定结果的相对偏差不大于5%。

附录
（资料性附录）
肌苷、肌苷酸标准溶液高效液相色谱图肌苷酸
肌苷
_________________________________。