拟南芥种植方法

种拟南芥的步骤

种拟南芥的步骤
种拟南芥的步骤
1、紫外线照实验台15-20分钟。

准备：1/2MS培养基；平皿；枪；灭菌水；
0.1%Agar溶液（高温高压灭菌）；灭菌枪头（黄枪头要剪）；marker笔；无
水乙醇；95%乙醇；封口膜。

2、数种子于1.5ml的EP管中，做好标记。

3、微波炉化1/2MS培养基，倒板。

需要加抗生素的要加抗生素（潮霉素：每
100ml培养基加56ul；卡纳：每100ml培养基加100ul），无菌操作。

4、洗种子：
A、向盛种子的EP管中加1ml 75%的乙醇（250ul的无菌水加750ul的无水
乙醇，现配现用，且要先加无菌水），剧烈晃动8分钟。

【或者洗两次，每次4分钟】
B、将上述酒精倒出后，加入95%的乙醇冲洗5遍。

【3遍也可以】
C、用无菌水清洗2遍，倒掉水。

【1遍也可以】
5、将种子悬起。

加入100—200ul的0.1%的Agar溶液，将种子用枪吹起。

【Agar
的量要视情况而定】
6、点种子。

用200ul的枪和剪过的黄枪头吸取种子，在培养基上依次点种，尽
量分散均匀，晾干。

7、封皿，并做好标记。

8、层化。

放于4度的冰箱处理3天。

9、将层化的种子置于光照培养箱中育苗一周，培养皿要倾斜放置。

10、移栽于土中。

绿萝栽种方法

绿萝栽种方法
绿萝（又名拟南芥）是一种热带植物，生长在地表上会有不同的形状和色泽，一旦放在室内，它就会完美展现出它的美丽。

绿萝的种植是很容易的，下面就介绍一下绿萝的栽种方法：
首先，先在室内准备绿萝的穴盆，可以使用旧的或者新的穴盆，里面应该填充一定量的泥土和有机肥料，以保证穴盆里的土壤质量。

然后，将绿萝的苗木放入穴盆，使表面排列在搅拌好后的土壤上，把多余的土壤补充到穴盆中，双手轻轻按压平坦即可，避免了尖刺，后期浇水时能够更轻松些。

最后，完成了穴盆的装填，绿萝会慢慢吸收养分，准备为它浇水，一般使用温开水适量和每次浇水的时间控制在5-10分钟内，也可以在短时间后补充少量水分，保证小苗身上的水分稳定。

在季节更替之前，每隔一段时间添加有机肥料及腐熟的肥料到穴盆，以增加养分，使植物更加健康鲜艳，同时需要注意穴盆土壤千万不要过湿以及植物两边不要暴晒，长时间避免曝晒，保持穴盆温暖干燥，每隔一段时间对穴盆进行除虫，以保护植物的安全。

绿萝是应季节温度变化而发生变化的植物，如果是冬季，它新的叶片会慢慢地休眠，如果是夏季，则会有繁盛的叶片，所以每一季顺应环境的变化，及时调整浇水的频率，才能让绿萝生长得茁壮。

通过以上简单的步骤就可以轻松的栽种绿萝。

拟南芥的栽培

拟南芥的栽培拟南芥生长周期短，6∽8周即可完成从种子到种子的整个生活周期。

1.播种腐殖质土：珍珠岩或赭石=2 : 1，播种前土壤混合物进行高压灭菌30 min，以杀死可能混有的害虫。

通常使用培养皿点播拟南芥种子，点播时使用琼脂糖浓度为0.8 %的1/2 MS培养基进行点播种子（因为该琼脂糖浓度有利于在不伤根的情况下取出培养基中的小苗，移植至土壤中）。

直接土壤播种后，将播有种子的容器移至低温条件下（2∽4 ℃）2∽4 d，以破除种子休眠（对新鲜收获的种子尤为重要），在种子发芽期间必须保持土壤高湿度，故容器需要用塑料膜覆盖1周左右揭去。

2.生长发育条件控制光：光强度为120∽150 umol/(m2•s)，光周期为16 h光照，8 h黑暗。

长日照促进拟南芥提前开花，使叶数量减少且降低种子生成，较短日照有利于营养生长。

温度：拟南芥最适生长温度为25 ℃左右（对于迟开花拟南芥生态型来说，幼苗期要给以4 ℃左右几周的春化处理，以破除休眠）。

水分：拟南芥两片真叶开始伸展之前必须避免干旱，但供水过量会引起土表藻类和真菌的生长；当真叶长出后，灌水频率可相应减少（如每周一或两次），至长角果充实阶段必须保证水分供应，以利于种子形成，但当长角果进入成熟阶段时，较低湿度（< 50 %）是有利的。

营养：营养贫瘠的植株叶呈微淡绿色，植株矮、提早开花，且种子着生少；营养充足的健壮植株呈暗绿色。

防止杂交：防止昆虫进入导致杂交，各品系种植之间的距离>20 cm，从而防止不同品系的花相互接触。

3.拟南芥的花浸法注意事项：当拟南芥花序枝刚伸出时，摘除初生花序枝，促进其长出更多的花序枝，并移至长日照（16∽24 h光照/d）下生长，约一周后进行转化。

正常的生长条件下，转化约3周后收获种子以供鉴定。

确认再生植株为转基因植株的方法有：Southern印迹，报告基因的活性测定和组织化学等鉴定。

在取得一系列突变体后，可用功能互补的转化法来鉴定一个基因，即：用某种途径取得的DNA片段去转化一个功能缺失的突变体，如果转化后能够补偿基因功能突变表型的话，那么这个片段即为含目的基因片段。

拟南芥盆栽方案

拟南芥盆栽方案拟南芥（学名：Arabidopsis thaliana）是一种小型的一年生植物，因其生命周期短、易于培养和遗传实验的可行性，被广泛应用于植物科学研究中。

在本文中，我们将提供一个拟南芥盆栽方案，以帮助那些对这一植物进行自家种植的人。

1. 材料准备- 拟南芥种子：可在植物学实验室、种子公司或在线购买。

- 盆：选择适宜大小的盆，保证拟南芥根系能够充分扩展。

- 泥土：使用适宜的培养土，可在花草市场或园艺店购买。

- 平底盘或托盘：用于放置盆，以避免水滴在室内滴落。

2. 盆栽步骤2.1 准备盆土选择质地疏松、排水良好的培养土。

可以将培养土轻轻湿润，但避免过于湿润，以免引发根部腐烂。

2.2 播种将拟南芥种子均匀撒在培养土表面上，并轻轻压实，不要完全覆盖种子。

拟南芥种子较小，所以要小心操作，以确保均匀分散。

2.3 浇水使用喷壶或水壶从顶部轻轻喷洒水，保持培养土湿润。

避免使用喷头过大或水流过大的工具，以免种子被冲走。

2.4 光照与温度控制拟南芥适宜在温度适宜、充足的光照下生长。

将盆栽置于明亮的窗户旁或人工照明设备下。

室温保持在20-25摄氏度之间。

2.5 生长环境调节拟南芥对于光照的要求较高，因此要经常转动盆栽，以保证植株各个方向都能得到充足的光照。

如果环境光线不足，可以补充使用植物专用灯。

2.6 浇水与施肥保持培养土湿润，但避免过度浇水，以免引发根系病害。

约每周浇水一次，根据环境湿度和季节的变化做适当调整。

在生长过程中可以适时施加适量的植物营养液，以促进拟南芥的生长和发育。

3. 生长管理3.1 害虫防治定期检查拟南芥植株，如发现害虫如蚜虫、螨虫等，可以使用适量的杀虫剂进行处理，但要遵循产品说明。

3.2 避免拥挤随着拟南芥生长，植株之间可能会产生拥挤。

在植株茁壮成长后，适当间隔并摘除较弱的植株，以保证光照和营养的充足供给。

3.3 测量和记录生长数据观察拟南芥的生长情况，使用尺子或其它测量工具记录植株的高度、叶片数量等数据，以便后续分析比较。

拟南芥种植方法.doc

培养基上点种子：1.种子处理1.1 种子消毒处理在培养基中点样前，必须对种子进行消毒，防止感菌，具体方法为：先将种子倒在干净的纸上，挑去大的杂质，再将种子倒入EP管中，加入1mL70%酒精，振荡10min，将种子放在超净台中吹干。

1.2 点样将消毒处理后的种子，可以利用牙签点到培养基上，每次仅点一粒种子，根据培养皿的大小，确定一个里面能够点多少个种子，每个90mm培养皿上大约种30粒种子，防止植株长大后影响根与子叶的发育。

1.3 春化种子点样完毕后，将培养基密封，置于4℃冰箱里放置72h后，放回温室。

土培法：1.种种子前，要将营养土用自来水混匀后，121℃灭菌30min，待土冷却后，装入种植拟南芥的方盒中，再将方盒放入红色托盘中。

2.将要点的种子平铺在称量纸上，用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记，以免遗种某个盒子。

（每个小盒子种5粒种子，每个大方盒子种9粒种子）3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室，并用一个干净的托盘盖在上面，大约两天后就可以打开上面的托盘，待植物长出4片叶子时，可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。

4.植株生长条件的控制幼苗移植后将花盆置于温室内，保证温室温度恒定在22℃，空气湿度70—80%，光照强度100—150μmol/m2/s，每天浇两次纯净水，上午9点左右一次，下午5点左右一次；一周浇一次营养液（1平匙溶于1L水中），营养液要灌在盆底。

浇水注意事项：1）水不可以浇的过多或过少，用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿；2）水要浇均匀，托盘四个角的方向如果喷壶喷不到，可以用挤瓶均匀地喷一些水；3）用喷壶浇水时，喷壶的水柱不可以太大，以免把植物连根拔起；4）当植株出现花芽时，一定要保证水分的供应，促进果实的发育。

当植株结有豆荚时，可以适当的减少供水量，每两三天浇一次水便可，以利于种子的成熟。

开花后的植物不能再用喷壶浇水，要从盆底灌水，但不可以一次性灌太多水；5）在盆底灌水后，待植物吸收完水后，可以将盆底多余的水分倒出来；6）拟南芥受到胁迫判断标准：叶柄发紫，叶片发黄，开花期提前等；7）如果做生理实验，植物一旦受到胁迫，需要把植物丢弃，重新种植，以免实验数据不准确。

拟南芥

拟南芥种植花序浸染法转化拟南芥（1）种植：选择吸水性好，土质松软的蛭石配合营养土（1：1/2）作为拟南芥种植土壤。

直径9cm的花盆，每盆播种20-30颗。

播种以后在花盆上罩上薄膜，给植株的生长提供一个湿润的环境。

（2）去顶：在拟南芥初次开花时将花蕾剪掉，可以促进侧枝更多的花枝的增生。

适合转化植株的花卉并没有成熟，也没有产生已受精的角果。

（3）配制浸染液：在5%的蔗糖溶液中重悬农杆菌使OD=0.8，为了保持蔗糖溶液的新鲜，可以现配现用，无需灭菌。

100-200ml浸染2-3个小盆植株，400-500ml浸染，2-3个花盆（9cm）植株。

在浸染之前加入表面活性剂至浓度0.05%（500ul/L），如果产生表面活性剂的毒性现象（浸过部分发黄或死亡），将浓度降至0.02%。

（4）浸染：将盛花期拟南芥的花表面部分浸泡在农杆菌悬浮液中2-3s，同时轻轻旋转。

（5）暗培养：将浸染后植株套袋保持高度的湿润状态暗室培养24h。

（6）浸染后培养：隔天浇水，保证水分充足即可。

（7）种子收集：种子成熟，角果自然开裂后可以收种子。

（8）转基因种子筛选：在含有Kan抗生素的平板上培养浸染后所得种子。

40mg的种子大约200颗于含kan 10-50μg/ml 的0.5×MS培养基上春化2天，之后在持续光照条件下培养7-10天。

根据生长状况判断是否为转基因种子。

成功转入重组质粒的种子能够在抗性培养及上正常生长出4片以上真叶。

非转基因种子不能正常生长，仅能长出2片子叶，根的生长也受到严重抑制，一般萌发10天以后死亡。

（9）转基因植株转土栽培。

转基因种子在MS+kan平板上萌发2周以后，将阳性植株转入土壤继续培养。

转基因拟南芥纯合子筛选由于农杆菌介导的花序浸染法只能将目标片段整合到一条DNA单链上，为后续生理性状实验需要，将T0代转基因种子培育至T2代，利用抗性筛选得到纯合子。

根据杂合子在发生性状分离时会产生野生型后代，而野生型种子不能在MS+Kanr（50μg/ml）平板上正常生长，进行转基因植株纯合子的筛选。

培养基上点种子：1.种子处理1.1种子消毒处理在培养基中点样前，必须对种子进行消毒，防止感菌，具体方法为：先将种子倒在干净的纸上，挑去大的杂质，再将种子倒入EP管中，加入1mL70%酒精，振荡10min，将种子放在超净台中吹干。

1.2点样将消毒处理后的种子，可以利用牙签点到培养基上，每次仅点一粒种子，根据培养皿的大小，确定一个里面能够点多少个种子，每个90mm培养皿上大约种30粒种子，防止植株长大后影响根与子叶的发育。

1.3春化种子点样完毕后，将培养基密封，置于4℃冰箱里放置72h后，放回温室。

土培法：1.种种子前，要将营养土用自来水混匀后，121℃灭菌30min，待土冷却后，装入种植拟南芥的方盒中，再将方盒放入红色托盘中。

2.将要点的种子平铺在称量纸上，用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记，以免遗种某个盒子。

（每个小盒子种5粒种子，每个大方盒子种9粒种子）3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室，并用一个干净的托盘盖在上面，大约两天后就可以打开上面的托盘，待植物长出4片叶子时，可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。

4.植株生长条件的控制幼苗移植后将花盆置于温室内，保证温室温度恒定在22℃，空气湿度70—80%，光照强度100—150μmol/m2/s，每天浇两次纯净水，上午9点左右一次，下午5点左右一次；一周浇一次营养液（1平匙溶于1L水中），营养液要灌在盆底。

浇水注意事项：1）水不可以浇的过多或过少，用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿；2）水要浇均匀，托盘四个角的方向如果喷壶喷不到，可以用挤瓶均匀地喷一些水；3）用喷壶浇水时，喷壶的水柱不可以太大，以免把植物连根拔起；4）当植株出现花芽时，一定要保证水分的供应，促进果实的发育。

当植株结有豆荚时，可以适当的减少供水量，每两三天浇一次水便可，以利于种子的成熟。

开花后的植物不能再用喷壶浇水，要从盆底灌水，但不可以一次性灌太多水；5）在盆底灌水后，待植物吸收完水后，可以将盆底多余的水分倒出来；6）拟南芥受到胁迫判断标准：叶柄发紫，叶片发黄，开花期提前等；7）如果做生理实验，植物一旦受到胁迫，需要把植物丢弃，重新种植，以免实验数据不准确。

拟南芥种植到培养基中的方法

拟南芥种植到培养基中的
方法
It was last revised on January 2, 2021
拟南芥种植到培养基中的方法
材料：1/2MS培养基、植物组织培养专用琼脂、1ml吸头（灭菌）、0.1%琼脂糖、水（灭菌）、75%酒精
种植过程在超净工作台内进行，具体方法为：
1、种植前先将实验过程中用到的物品放到超净工作台，紫外线灭菌15分钟左右，提供一个相对无菌的环境。

注：种子不能放在紫外灯下照射，以免引起损伤和变异。

2、用75%酒精棉球将暴露于实验台内的手及其他部分擦拭一遍，起消毒作用，种植过程中最好不要在上风向放东西，手也最好不要在上风向经过。

3、在放有种子的离心管中加入75%的酒精，消毒5分钟左右，时间不宜过长以免影响种子的活性。

酒精的量大约为离心管体积的2/3，上下颠倒离心管使种子与酒精充分接触。

种子不宜过多（超过50ul），否则消毒效果不好。

4、消毒完后，将离心管中的酒精吸出，用灭菌的ddH2O漂洗3-5遍，注意有一些种子会漂浮在水中。

在洗的过程中用移液器慢慢吹打，注意更换吸头，避免交叉污染。

5、种子漂洗完后将适量0.1%琼脂糖加入离心管中。

之所以用琼脂糖而不是水是因为琼脂糖有粘性，种子会悬浮在其中，而在水中种子一般都沉在底部不便于种植。

将种子均匀滴到1/2MS培养基中，每个平皿大约种植30粒左右，在培养皿的盖和底部最好都要写上种植的拟南芥的名称以及日期，最后用胶条将培养皿封口。

6、将培养皿放到4℃冰箱中（主要是让种子均匀发芽），2-3天后便可拿到培养间中。

拟南芥种植方法

培养基上点种子：1.种子处理1.1 种子消毒处理在培养基中点样前，必须对种子进行消毒，防止感菌，具体方法为：先将种子倒在干净的纸上，挑去大的杂质，再将种子倒入EP管中，加入1mL70%酒精，振荡10min，将种子放在超净台中吹干。

1.2 点样将消毒处理后的种子，可以利用牙签点到培养基上，每次仅点一粒种子，根据培养皿的大小，确定一个里面能够点多少个种子，每个90mm培养皿上大约种30粒种子，防止植株长大后影响根与子叶的发育。

1.3 春化种子点样完毕后，将培养基密封，置于4℃冰箱里放置72h后，放回温室。

土培法：1.种种子前，要将营养土用自来水混匀后，121℃灭菌30min，待土冷却后，装入种植拟南芥的方盒中，再将方盒放入红色托盘中。

2.将要点的种子平铺在称量纸上，用牙签蘸取一粒种子点在营养土上,每点一个小盒时都用牙签做标记，以免遗种某个盒子。

（每个小盒子种5粒种子，每个大方盒子种9粒种子）3.将点了拟南芥种子的托盘置于22℃温室，并用一个干净的托盘盖在上面，大约两天后就可以打开上面的托盘，待植物长出4片叶子时，可以根据自己的实验需求对植物的幼苗进行取舍。

4.植株生长条件的控制幼苗移植后将花盆置于温室内，保证温室温度恒定在22℃，空气湿度70—80%，光照强度100—150μmol/m2/s，每天浇两次纯净水，上午9点左右一次，下午5点左右一次；一周浇一次营养液（1平匙溶于1L水中），营养液要灌在盆底。

浇水注意事项：1）水不可以浇的过多或过少，用手捏起一些土能挤出水来说明就有点太湿；2）水要浇均匀，托盘四个角的方向如果喷壶喷不到，可以用挤瓶均匀地喷一些水；3）用喷壶浇水时，喷壶的水柱不可以太大，以免把植物连根拔起；4）当植株出现花芽时，一定要保证水分的供应，促进果实的发育。

当植株结有豆荚时，可以适当的减少供水量，每两三天浇一次水便可，以利于种子的成熟。

开花后的植物不能再用喷壶浇水，要从盆底灌水，但不可以一次性灌太多水；5）在盆底灌水后，待植物吸收完水后，可以将盆底多余的水分倒出来；6）拟南芥受到胁迫判断标准：叶柄发紫，叶片发黄，开花期提前等；7）如果做生理实验，植物一旦受到胁迫，需要把植物丢弃，重新种植，以免实验数据不准确。

拟南芥种植

拟南芥种植方法
一．拟南芥生长条件
拟南芥生长的适宜温度白天为22-24℃左右，夜温最好比日温低2℃。

拟南芥在日照长于12小时下才会开花，一般拟南芥生长室的日照长度定于14-16h为佳，土壤湿度70%—80%，营养土：蛭石=1：1，3—4天浇一次营养液，从底盘浸入。

二．种子处理
1.取适量种子置于标记好的1.5ml离心管中，加入1 ml 70％乙醇轻微振1 min；
2.去乙醇，加入1 ml体积分数为10％的NaClO (次氯酸钠), 消毒5~10 min；
3.吸去NaClO, 用无菌水冲洗种子5次后, 加入600μl无菌水；
4.取适量拟南芥种子至10 ml 离心管中，加入0.05%的琼脂悬浮，置于4℃冰箱低温春化处理2-3 天。

三．土壤培养
将已春化处理的拟南芥种子，用消过毒的牙签或者移液枪将种子，点播在土壤中，一盆2—3颗即可，将花盆放入有水的底盘中,框中的水就会通过花盆底部的孔渗上来，待花盆中的基质湿透后即可点播。

用保鲜膜覆盖1-2天后揭膜，如果苗很弱，则在此基础上还需多覆盖1天。

当到4叶期时，要适当移苗，每盆一株。

小心轻轻用镊子拨开周围土壤，连根取出小苗（注意不要伤害根部）。

苗期不使用营养液，移栽后3-4天使用一次营养液，期间视情况浇水，但不要在底盘中始终保持水层。

在开始收籽期,不再需要过多的水分，可保持底盘干燥，此时每隔7-10天加一次水即可。

在种荚变黄，变干时可以收籽。

将种子抖落在纸上，用金属滤网过一下以除去杂质，将种子装入写了标记的小纸袋中，放于干燥的环境中让种子进一步干燥后，封存于1.5ml试管中，切记越干越好，长期保存的种子必需要干燥保存到4℃。

拟南芥栽培方法

拟南芥栽培方法
1．装土：泥炭（tref型号705#）和蛭石的配比为2：1，混匀装在盆里压实，用1倍的MS 大量浸盆，基质一定要完全湿润。

2．泡种子：取适量拟南芥种子装在2 ml的离心管中，加入1 ml 水放在4度冰箱3 d，打破种子休眠。

3．播种：播种前，土面喷水至湿润。

将种子到在滤纸上，用牙签或竹签挑起种子放在土面上，建议一个花盆中播5颗。

播种完毕盖上透明盖子，放在培养箱中，一般2d就可以发芽。

4．待长至20 d左右，即可揭盖，再浇一次MS大量。

生长期间应每隔2-3 d观察一次生长状况，补充水分。

5．主要虫害是蚜虫和一种小飞蝇（幼虫在土壤中以拟南芥的根为食），一般用吡呀酮，灭蝇胺防治。

大叶万年青的养殖方法和注意事项

大叶万年青的养殖方法和注意事项大叶万年青，又名大花万年青、大花拟南芥，是一种常见的多年生草本植物，其叶片宽大且肉质，深受人们喜爱。

在家庭养殖中，大叶万年青也是一种比较容易养护的植物，只要掌握了正确的养殖方法和注意事项，就能够让它茁壮成长。

接下来，我们将详细介绍大叶万年青的养殖方法和注意事项。

首先，选择合适的种植容器和土壤是养殖大叶万年青的关键。

种植容器可以选择花盆或花盆托，确保容器有良好的排水性能。

土壤方面，大叶万年青喜欢疏松、排水良好的土壤，可以选择腐殖土和珍珠岩混合的土壤，或者添加适量的蛭石、腐叶土和珍珠岩等材料来改良土壤。

其次，光照是大叶万年青生长的重要因素。

大叶万年青喜欢充足的阳光，但是在夏季高温时需要避免强烈的阳光直射，可以选择半阴环境进行养殖。

保持充足的光照有利于大叶万年青的健康生长。

再次，适当的浇水和施肥也是大叶万年青养殖的关键。

大叶万年青喜欢湿润的环境，但是要避免积水，因此在浇水时要注意控制水量，保持土壤微湿即可。

施肥方面，可以选择有机肥或者复合肥，每月施肥一次，但要遂量，避免过量施肥导致植株生长过旺。

此外，注意防治病虫害也是大叶万年青养殖的重要环节。

定期检查植株，发现病虫害要及时采取防治措施，可以选择有机农药进行喷洒，或者采取物理方法进行防治，如剪除受害部位等。

最后，注意适当修剪和翻盆换土也是养殖大叶万年青的重要工作。

定期对植株进行修剪，促进新梢的生长，保持植株的形态美观。

同时，每年春季可以进行翻盆换土，更新土壤，促进植株的生长。

总之，养殖大叶万年青并不困难，只要掌握了正确的养殖方法和注意事项，就能够让它在家庭中茁壮成长。

希望以上内容对您有所帮助，祝您在养殖大叶万年青的过程中取得丰硕的成果！。

拟南芥培育方法

拟南芥培育方法—通用指南一、原理拟南芥作为高等植物的模式生物被全世界的植物生物学实验室广泛研究。

然而，照顾好这种小植物可能不是那么容易。

这里介绍一个马里兰大学帕克学院的HevenSze实验室的通用指南。

Sze实验室及其他实验室的成员为建立这个在实验室培育拟南芥的通用指南做出了许多努力。

二、步骤1. 准备种植用土我们使用Miracle-Gro混合土（2立方英尺一袋）与Miracle-Gro珍珠岩（8夸脱一袋）来培养拟南芥，在一个可以放下2袋混合土的大容器中和土，1袋混合土（2立方英尺）混入半袋珍珠岩（4夸脱）。

注意：Sze实验室在装土之前经常将土灭菌！（方法如下）（1）将干土放入灭菌容器中，直至与顶部相差一英寸，将土拍实。

（2）用铝箔纸将容器封住，在每一个容器上放一张灭菌用胶带，缠好。

确保容器外没有土，放入灭菌锅。

（3）用常规/秒速/快速模式灭菌30~50 min，灭菌模式及时间取决于灭菌的容器数量。

（4）当温度降至室温，将土放入花盆，轻轻压实。

记住将灭菌土保存好，避免种子或菌类污染。

灭过菌的土至少可以使用两星期，如无需要请不要多次灭菌。

（5）将花盆用去离子水浸没（不要超过土表面）用humidomes覆盖，使其吸水3-6小时或过夜。

吸水后应该还保存约1英寸高的水，如果没有请添水。

（6）此时的土可以用于种植拟南芥。

2. 种子消毒方法A（1）取适量种子（野生型、突变体或互补株系）置于一个EP管中，加1 ml 消毒溶液。

消毒溶液：20%Chlorox消毒液0.05%Tween-20用新灭过菌的无菌水配制。

（2）用振荡器以最大速度震荡20-30秒。

（3）放置7-10 min，偶尔震荡一下。

（4）8 000 rpm 离心5秒。

（5）仔细将水倒出。

（6）加1 ml 无菌水，震荡重旋种子。

（7）8 000 rpm 离心5秒，倒去上清。

（8）重复步骤6-7，重复四次。

（9）将灭菌的种子移到底部铺有无菌滤纸的小Fisher盘（100×15 mm）中。

拟南芥的种植

一、拟南芥播种种子装入dorf管内，20μl种子加1ml 75% 乙醇消毒1分钟；吸去乙醇，加入1ml 50%次氯酸钠：50%无菌水：0.05%吐温（or 5%漂白粉），震荡洗涤15-20分钟；稍离心使种子沉于下部，吸去次氯酸钠或漂白粉，加入无菌蒸馏水清洗（清洗3次，每次洗完后稍离心，吸净水分）；将种子用接种环均匀铺于MS培养基上，用封口膜封口，放入4℃冰箱内冷处理2-3天（春化）。

MS培养基的用量：直径为9cm的培养皿用25ml，直径为6cm的培养皿用12.5ml。

二、MS固体培养基制备1．培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。

这样每次使用时，取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液。

现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。

大量元素(母液Ⅰ，20×) mg／LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ，200×) mg／LKI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5 CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ，200×) mg／LFeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ，200×) mg／L ⅣA肌醇20 000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸400上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。

吊冬瓜的栽培与种植技术

吊冬瓜的栽培与种植技术吊冬瓜，又称为拟南芥，是一种常见的蔬菜。

它原产于中南半岛地区，具有浓郁的芳香味道和独特的口感，深受人们喜爱。

本文将为您介绍吊冬瓜的栽培与种植技术，帮助您在家中成功种植出美味的吊冬瓜。

一、环境要求吊冬瓜喜欢光照充足、温暖湿润的环境，最适宜生长温度为20-25℃。

在种植吊冬瓜时，需要选择阳光充足、排水良好、土壤肥沃的地方进行种植。

如果土壤过于干燥或缺乏养分，可以在种植前进行肥料施用和土壤改良。

二、育苗吊冬瓜的育苗期为3-4周，一般在春季进行。

育苗时需要选用透气性好、保水能力强的培养土，并在温室内进行育苗。

在育苗期间，需要注意保持土壤湿润，避免过度干燥或过度湿润。

三、移栽吊冬瓜的移栽期为育苗期结束后，一般在5-6周时进行。

移栽时需要选择天气晴朗、气温适宜的日子进行。

将育苗好的吊冬瓜移植到事先准备好的土坑中，每株吊冬瓜之间保持50cm的距离。

移栽后，需要及时浇水，保持土壤湿润。

四、管理吊冬瓜在生长过程中需要定期浇水、施肥和除草。

在浇水时，需要注意避免过量浇水，以免导致根部腐烂。

在施肥时，可以选择有机肥或复合肥，每隔10天左右进行一次施肥。

在除草时，需要注意不要伤及吊冬瓜的根部。

五、病虫害防治吊冬瓜容易受到白粉病、炭疽病、蚜虫和螨虫等病虫害的侵袭。

为了防治病虫害，可以在移栽后每隔10天左右进行一次喷药。

在喷药时，需要选择有效的农药，并注意保护好自己的身体健康。

六、采收吊冬瓜的采收期一般在种植后60-70天左右。

采收时需要注意不要损伤吊冬瓜的果皮，以免影响口感。

采收后，可以将吊冬瓜放置在通风干燥的地方进行保存。

总之，吊冬瓜的栽培与种植技术并不复杂，只要注意环境要求、育苗、移栽、管理、病虫害防治和采收等方面，就可以在家中成功种植出美味的吊冬瓜。

希望本文能够对您有所帮助。

拟南芥的种植

拟南芥的种植1 拟南芥的种植试剂配制人工土：3份蛭石，1份珍珠岩和1份黑土混合PNS营养液：每升含5ml 1M KNO3，2ml 1M Ca(NO3)2˙4H2O，2ml 1M MgSO4˙7H2O，2.5ml 20mM Fe.EDTA，2.5ml 1M磷酸缓冲液（pH5.5），1ml MS 微量元素。

PNS营养液母液配方①1M KNO3101.1g②1M Ca(NO3)2˙4H2O 236.15 g③1M MgSO4˙7H2O，246.48 g④20mM Fe.EDTA：FeSO4 5.57gEDTA 7.45g注意先各自配成溶液，在混合。

⑤1M磷酸缓冲液（pH5.5）：磷酸二氢钾130.4g磷酸氢二钾9.12g⑥MS 微量元素硼酸0.434g硫酸锰（MnSO4 H2O） 1.7626gCuSO4˙H2O 0.0798gZnSO4˙7H2O 0.172gNaMoO4˙2H2O 0.0432gNaCl 0.585gCoCl˙6H2O 0.00129g以上母液均配至1L种植步骤将春化过的拟南芥种子种于浇过饱和PNS营养液的人工土中，并用保鲜膜罩上。

两天后光照，三天后揭膜。

人工培养室条件：相对湿度80%，恒温20-240C，光照强度80-200umol/M2/S，光照周期为8 h黑暗﹑16 h光照培养。

2 拟南芥的转化试剂配制渗透培养基（一升中）：1/2xMurashige-Skoog；5% 蔗糖；0.5克MES；用KOH调至pH5.7；再加：10微升1mg/ml的6-BA 母液；200微升Silwet L-77）注意：6-BA 母液配制时用乙醇溶解。

1/2xMurashige-Skoog是用MS的基本组分配制，但大量元素减半。

另：经转化的拟南芥，种子收获后需在相应的抗性平板上筛选转化子转化步骤(1) 制备好已转化了相应质粒的农杆菌菌液10ml，在转化前一天晚上，转入大瓶培养过夜，第二天取出使用时农杆菌液O.D600当在1.2到1.6之间。

拟南芥种植及处理基本方法

.'1培养基MS培养基（ Sigma公司）B5培养基（ pH 5.5）Content mg/L Content mg/L Content mg/LKNO2500. 2.0Nicotinic1 3ZnSO4 7H2O.150H3BO3 3.0Thiamine HCl10CaCl 2H O22.250KI0.75Pyrindoxine1 MgSO4 7H2O.150.NaH2PO4 H2O Na2MoO4 2H2O.27.8.FeSO4 7H2O CoCl 2 6H2O.10Na2EDTAMnSO4 H2O.0.025CuSO 5H O42改良的 1/4 Hoagland 培养液（ mM, pH6.0 ）：Content mM ContentKNO 31.25ZnSO40.25m-Inositol1000.025Glycine20037.3Kinetin0.1IAA0.1-1mM0.002Ca(NO3)21.500.050H3BO3MgSO40.75KCl0.050KH 2PO40.5(NH 4)6Mo0.0757O24FeSO40.0720.0015CuSO4Na2EDTA 0.0720.1Na2SiO32植物材料的常规种植拟南芥种子均匀地播撒于1/3 B5液体培养基浸润的蛭石上，塑料膜遮盖至种子萌o 发，揭开膜，让其自然生长，适当间苗，烤苗至蛭石表面干燥后加水。

置于 23 C，16/8 h的光照培养间中生长。

3拟南芥种子的表面灭菌处理1）拟南芥种子在 4 C 下春化 3-5 天。

2）在超净台上用 70%酒精处理种子 2-5 分钟。

3）弃去酒精，用无菌水洗1-2 次。

4）将种子用 15% Bleach （KAO 公司）处理15分钟，间歇振荡。

5）用无菌水洗 4-6 次，每次充分振荡混匀。

6）将种子悬浮在灭菌的0.1% Agar 中。

7）均匀地将种子播撒在B5 培养基平皿中。

4植物材料的水培体系拟南芥种子经表面灭菌处理后均匀播撒于1/2 MS固体培养基上，10-15粒 /皿，生长 2周后，小心地将其转入水培体系中。

拟南芥培育方法

拟南芥培育方法—通用指南一、原理拟南芥作为高等植物的模式生物被全世界的植物生物学实验室广泛研究。

然而，照顾好这种小植物可能不是那么容易。

这里介绍一个马里兰大学帕克学院的HevenSze实验室的通用指南。

Sze实验室及其他实验室的成员为建立这个在实验室培育拟南芥的通用指南做出了许多努力。

二、步骤1. 准备种植用土我们使用Miracle-Gro混合土（2立方英尺一袋）与Miracle-Gro珍珠岩（8夸脱一袋）来培养拟南芥，在一个可以放下2袋混合土的大容器中和土，1袋混合土（2立方英尺）混入半袋珍珠岩（4夸脱）。

注意：Sze实验室在装土之前经常将土灭菌！（方法如下）（1）将干土放入灭菌容器中，直至与顶部相差一英寸，将土拍实。

（2）用铝箔纸将容器封住，在每一个容器上放一张灭菌用胶带，缠好。

确保容器外没有土，放入灭菌锅。

（3）用常规/秒速/快速模式灭菌30~50 min，灭菌模式及时间取决于灭菌的容器数量。

（4）当温度降至室温，将土放入花盆，轻轻压实。

记住将灭菌土保存好，避免种子或菌类污染。

灭过菌的土至少可以使用两星期，如无需要请不要多次灭菌。

（5）将花盆用去离子水浸没（不要超过土表面）用humidomes覆盖，使其吸水3-6小时或过夜。

吸水后应该还保存约1英寸高的水，如果没有请添水。

（6）此时的土可以用于种植拟南芥。

2. 种子消毒方法A（1）取适量种子（野生型、突变体或互补株系）置于一个EP管中，加1 ml 消毒溶液。

消毒溶液：20%Chlorox消毒液0.05%Tween-20用新灭过菌的无菌水配制。

（2）用振荡器以最大速度震荡20-30秒。

（3）放置7-10 min，偶尔震荡一下。

（4）8 000 rpm 离心5秒。

（5）仔细将水倒出。

（6）加1 ml 无菌水，震荡重旋种子。

（7）8 000 rpm 离心5秒，倒去上清。

（8）重复步骤6-7，重复四次。

（9）将灭菌的种子移到底部铺有无菌滤纸的小Fisher盘（100×15 mm）中。