尿素分解菌导学案
高二导学案 选修一《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 》(第一课时)
专题二课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数[学习目标]1.明确培养基对微生物进行选择的原理。
2.学会统计微生物数量的方法。
3.能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析和评价。
知识点一筛选微生物的研究思路【知识梳理】1.菌株筛选(1)自然界中目的菌株的筛选①筛选的依据：根据它对的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：从热泉中筛选出。
热泉70～80 ℃的高温条件淘汰了，而使耐热的脱颖而出。
(2)实验室中微生物的筛选①原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、、等)，同时或其他微生物生长。
②方法：利用筛选。
(3)选择培养基①概念：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时或其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。
②制备原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。
③制备方法：a．在培养基中加入某种化学物质。
例如，加入青霉素可以分离出和；加入高浓度的食盐可以得到。
b．改变培养基中的营养成分。
例如，缺乏氮源时可以分离微生物；石油作为唯一碳源时，可以分离出能消除的微生物；用含无机碳源的培养基分离微生物；作为唯一氮源时，可以分离出能分解尿素的微生物。
c．改变微生物的培养条件。
例如，将培养基放在高温环境中培养可以得到耐的微生物；用普通培养基在无氧条件下分离和微生物。
(4)分离分解尿素的细菌的培养基①从物理性质看此培养基属于培养基，是由于加入了凝固剂。
②从功能上看属于培养基，此培养基的只有尿素，只有能合成的微生物才能分解并利用尿素；缺乏的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长繁殖，受到抑制，所以，用该培养基能够筛选出的微生物。
2．统计菌落数目(1)活菌统计法：。
①原理：当样品的时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的。
通过统计平板上的，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②活菌数计算方法：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M。
C：代表某一稀释度下平板上生长的；V：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)；M：代表。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1导学案.doc
太原二十中问题导学案
使用时间：年月巳
学习过
程
学习过程
【合作探究】（小组讨论、交流、展示）
探究一、筛选菌株的培养基
KH2PO4 1.4g
NaHPOt 2.1g
MgSO.
H2O0. 2g
葡萄糖
10.
0g
尿素 1.0g
琼脂15.
0g
将上述物质溶解后，用蒸馅水定容到lOOOmLo
思考：
1、该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？碳源：氮源：
2、此配方能否筛选出产生腿酶的细菌？为什么？
—。
只有产生服酶的细菌才能利用—作为氮源而生存。
探究二、统计菌落数目：
1、活体计数法一一稀释涂布平板法
（1）操作方法：稀释涂布平板一统计菌落数。
（2）原理：1个菌落一1个活菌。
（3）统计原则
%1、选_坦二3QQ. 土菌落画珑统it.
%1、每仝稀.释度取3企垩板取其主均值
思考：
1、1个菌落1个活菌。
2、统计的菌落数实际活的细菌数。
3、用稀释涂布平板法一定要重复实验，一般至少要涂布3个平板。
4、重复实验结果中小于30菌落的不用
1.尝试“统计菌落数目”。
学
习
过
学习过
程
课后反思基础训练册：将基础知识整理到作业本上；完成该节训练题。
为了使所有学生都能有一个思考的过程，我改进了以往所用的小组合作学习，采用先让学生独立思考，再进行同桌或小组交流的形式，并在学生独立思考时，留给足够的时间。
课堂的时间是有限的，也是宝贵的，但是我们不能因为时间的宝贵而剥夺学生该有的时间
学习过程
板书设计。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案
6、设置对照的主要目的是。
7、对照实验是指除了的条件外，其他条件都的实验。满足该条件的称为，未满足该条件的称为组。
〖思考6〗请设计本实验的对照实验组：。
二、实验设计
1、实验设计的内容包括、、和等。
B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水
C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水
D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水；
2、某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL) ( )
解读目标
仔细研读21的文字和相关图片内容，独立思考
点评：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。
【补充】显微镜直接计数是测定微生物的方法。
细心阅读
慧眼识金用醒目的颜色做出重点标记并能流利回答或者在课本上做好笔记
结合课本图6-3
小组合理分工，抽签,我是最佳演员我是展示之星
高二生物学科导学案班级：姓名：
课题
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
题型
综合课
设计
赵建霞
审核
课时说明
共课2时
使用时间
4月9日星期四
流程及学习内容
学法
一、学习目标
1.利用选择培养基分离细菌
2.运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数
二、学习流程
（一）自主学习(独学)
分解尿素的细菌 导学案1(教师版)
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案1
1．分析培养基对微生物的分离作用。
2.进行土壤中微生物的分离、计数和鉴定。
(重、难点)
知识点一筛选菌株的思路及计数
1．筛选菌株
(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。
(2)选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
2．统计菌落数目
(1)活菌计数法：常用稀释涂布平板法。
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M。
C：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。
V：代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)。
M：代表稀释倍数。
③统计方法：为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取其平均值。
(2)显微镜直接计数法：在显微镜下直接观察和计数微生物的数量。
3．设置对照
(1)对照实验：除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。
(2)主要目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
1．三种筛选方法的特点及举例
生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。
所以通过配制选择培养基，控制培养条件等可以选择目的微生物，如将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物。
高考生物 分解尿素细菌的分离与计数导学案
专题二 课题2 土壤中分解尿素细菌的分离与计数【学习目标】：1、明确培养基对微生物进行选择的原理。
2、学会统计微生物数量的方法3、能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析与评价4、热爱自然，珍爱生命，激情投入，体会微生物分离计数过程的严谨性、科学性。
【使用说明及学法指导】1.先通读教材，理出头绪，划出重点。
明确微生物分离与计数的实验流程、对照设计和培养过程中的操作技术和无菌要求。
完成时间40分钟。
2.本节重难点：学会统计微生物数量的方法，能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析与评价。
进一步形成无菌技术的意识。
预 习 案一、尿素尿素不能 吸收，只有当土壤中的细菌将尿素分解成 ，才被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成 。
二、筛选菌株的思路1、自然界中目的菌株的筛选1）依据：根据它对 的要求，到相应的环境中去寻找。
2）实例：PCR 技术过程中用到的耐高温的 ，就是从 中提取出来的。
2、实验室中目的菌株的筛选1）原理：人为提供有利于 生长的条件（包括 等），同时 或 的生长。
2方法：利用 分离。
○1选择培养基：在微生物学中，将允许 的微生物生长，同时 的培养基，称为选择培养基。
○2选择分解尿素的细菌的培养基的特点： 是唯一氮源，按物理性质归类为 培养基。
三、分离与计数1、筛选菌株的原理微生物的选择培养：在 中，把 作为培养基的唯一 ，原则上只有能够利用尿素的微生物才能生长。
2．统计菌落数目方法：① 。
② 。
理论依据：用稀释涂布平板法进行活菌计数，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的 。
通过统计平板上的 ，就能推测出样品中大约含有多少个活菌。
平板计数公式：M VC C ：代表某一稀释度下平板上生长的 。
V ：代表涂布平板时所用的稀释液的 。
M ：代表稀释 。
四、分离与计数的实验流程土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物的培养→观察并记录结果→细菌计数1、土壤取样1）土壤取样的原因：土壤有“”之称，同其它生物环境相比，土壤中的微生物，数量，种类。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案
2.2 土壤中分解尿素的细菌的别离与计数班级姓名一、【学习目标】培养基对微生物的选择作用二、【学习重点和难点】1.学习重点：〔1〕菌株的筛选与统计〔2〕微生物的别离和测量方法微生物的别离和测量方法2.学习难点：微生物的别离和测量方法三、研究思路：筛选菌株→统计菌落数目→设置对照〔记忆〕阅读教材，完成筛选菌株的根底知识局部。
（一）筛选菌株1、尿素是一种重要的氮肥，但不能直接被农作物吸收利用，只有当土壤中的细菌将尿素分解成之后，才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成。
2、DNA多聚酶链式反响〔PCR技术〕是一种在体外将少量DNA大量的技术。
此项技术的自动化，必须要求使用耐高温〔930C〕的。
3、(两条途径)：〔1〕现实生活中微生物的筛选及发现：1966年美国的微生物学家在美国黄石公园的一个热泉中从一个耐高温的Taq 细菌并从中别离到了耐高温的。
〔2〕实验室中微生物的筛选：原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时或其他微生物生长。
4、选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时和其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
根据这一思路，分析课本旁栏中培养基的配方，答复以下的问题：KH PONaH POMgSO7H O葡萄糖尿素琼脂①从物理性质看此培养基属于哪类？②此培养基中作为碳源、氮源的物质分别是什么？这种培养基对微生物是否有选择作用？如果有，是如何进展选择的？㈡、统计菌落数目：测定微生物的常用方法有两种：、显微镜直接计数法。
前者常用来统计样品中活菌的数目，当样品的稀释度足够高时，培养基外表生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
当菌落数目稳定时，选取菌落数在的平板进展计数。
在同一稀释度下，至少对3个平板进展重复计数，然后求出，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。
思考：统计菌落的数与实际数目有何区别，为什么？。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案一、学习目标1、了解从土壤中分离分解尿素的细菌的原理和方法。
2、学会相关实验操作技能，如制备培养基、无菌操作、涂布平板等。
3、掌握细菌计数的方法和原理。
4、培养科学探究的思维和能力，提高实验设计和数据分析的能力。
二、知识储备1、尿素尿素是一种有机化合物，化学式为 CO(NH₂)₂。
在农业生产中，尿素常被用作氮肥。
2、分解尿素的细菌有些细菌能够产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳。
这些细菌在生态系统的氮循环中起着重要的作用。
3、选择培养基选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需微生物的生长。
对于分离分解尿素的细菌，可以在培养基中加入尿素作为唯一氮源，只有能够分解尿素的细菌才能在这种培养基上生长。
三、实验材料和用具1、土壤样品从富含腐殖质的土壤中采集。
2、试剂尿素、葡萄糖、琼脂、KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、酚红指示剂等。
3、仪器高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、超净工作台、涂布器、移液器、显微镜等。
四、实验步骤1、培养基的制备（1）配制基础培养基：称取一定量的 KH₂PO₄、Na₂HPO₄、MgSO₄·7H₂O、葡萄糖和琼脂，加入蒸馏水，加热溶解后，调节 pH 至 70 72 。
（2）制备选择培养基：在基础培养基中加入尿素，使其成为唯一氮源，最终尿素浓度为 20 g/L 。
加入酚红指示剂，使其在 pH 升高时呈现红色。
（3）将配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌。
2、土壤样品的采集与处理（1）在花园或农田中选择土壤肥沃、植被茂盛的地点，用小铲子去除表层土壤，采集 5 10 cm 深处的土壤样品。
（2）将采集的土壤样品放入无菌袋中，带回实验室。
（3）称取 10 g 土壤样品，加入到装有 90 mL 无菌水的锥形瓶中，振荡摇匀，制成 10⁻¹浓度的土壤悬液。
然后依次进行 10 倍稀释，制成 10⁻²、10⁻³、10⁻⁴、10⁻⁵、10⁻⁶等不同浓度的土壤稀释液。
分解尿素的细菌 导学案2(学生版)
课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案21．分析培养基对微生物的分离作用。
2.进行土壤中微生物的分离、计数和鉴定。
(重、难点)知识点二实验设计1．土壤取样(1)取样原因：土壤有“_________”之称。
同其他生物环境相比，土壤中的微生物，数量最大，种类最多。
(2)土壤要求：富含有机质，pH接近_________且潮湿。
(3)取样部位：距地表约_________的土壤层。
2．样品稀释(1)稀释原因：样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落数目。
(2)稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得的菌落数在_________之间，便于计数。
(3)稀释倍数①测定土壤中细菌的数量，一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养。
②测定放线菌的数量，一般选用_________倍稀释。
③测定真菌的数量，一般选用_________倍稀释。
3．微生物的培养与观察(1)培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养_________和培养_________。
(2)观察：每隔_________统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
4．细菌的计数：当菌落数目稳定时，取同一稀释度下的3个平板进行计数，求出_________，并根据所对应的_________计算出样品中细菌的数目。
5．菌种鉴定(1)原理：分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解为_________，使培养基的碱性增强。
可以通过检测培养基pH 的变化来判断该化学反应是否发生。
(2)方法：在以_________为唯一氮源的培养基中加入_________指示剂培养细菌，若指示剂变_________，可确定该种细菌能够分解尿素。
1．实验结果分析(1)原因：分离分解尿素的细菌的选择培养基上可能生长着以分解尿素的细菌的代谢产物为氮源的其他微生物。
(2)原理：CO(NH 2)2＋H 2O ――→脲酶CO 2＋2NH 3由于NH3的产生，培养基的碱性增强，pH 升高，因此可通过检测培养基pH 的变化来判断该化学反应是否发生。
高中生物 专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案新人教版选修1
高中生物专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案新人教版选修1【自主学习】一、筛选菌株（1）原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时或其他微生物生长。
（2）途径：用培养基筛选。
在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作培养基。
用其培养的目的是从众多微生物中所需的微生物。
2、统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有和。
（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目为了保证结果准确，一般设置个平板，选择菌落数在的平板进行计数。
并取。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目，因此，统计结果一般用，而不是用来表示。
3、设置对照对照试验是指除了以外，其他条件都的实验，其作用是实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起的结果。
设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高的可信度。
例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养该种微生物的培养基作为空白对照。
二、实验设计1、土壤取样（1）取样原因：土壤有“ ”之称。
同其他生物环境相比，土壤的微生物，数量，种类。
（2）土壤要求：富含，pH接近且潮湿。
（3）取样部位：具地表约的土壤层。
2、样品稀释（1）稀释原因：样品的直接影响平板上生长的。
（2）稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在之间，便于计算。
（3）稀释倍数：①测定土壤中细菌的数量，一般选用倍的稀释液进行平板培养；②测定放线菌的数量，一般选用倍稀释；③测定真菌的数量，一般选用倍稀释。
3、微生物的培养与观察（1）培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养和培养。
（2）观察：每隔统计一次数目，最后选取菌落数目时的记录作为结果。
4、细菌的计数当菌落数目稳定时，选同一下的3个计数，然后求出，并根据平板所对应的计算出样品中细菌的数目。
三、操作提示1、无菌操作（1）取土样的用具在使用前都需要。
（2）应在旁称取土样，并在火焰附近将土样倒入锥形瓶中，塞好。
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数导学案
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数【学习目标】1．研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。
2．能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。
【学习重点】对土样的选取和选择培养基的配制。
【学习难点】对分解尿素的细菌的计数。
【预习案】1、选择培养基的概念.2、统计菌落的方法有哪些?3、土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作流程是:4、设置对照实验的目的是什么？【探究案】1、筛选菌株的原理及方法是？2、怎样进行土壤取样？怎样分离样品中的分解尿素的细菌？3、如何对样品中的微生物进行计数？试简述相关的方法以及各自的优缺点。
如何计算每克样品中的菌落数？4、如何判断培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落？怎样对分离出的菌种作进一步的鉴定？5、在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A同学从对应的106倍培养基中筛选出的大约230个菌落，但是其他在同样的稀释度下只选择出大约100个菌落.试分析原因并探究方案，根据结果得出结论。
【当堂检测】1、下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（ )A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水；科目：生物编号：第1 页共2页2、下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方:请根据以上配方，回答下列问题：Array（1）该培养基含有微生物所需要的____类营养物质．其中最主要的碳源是______________，氮源是________________．(2）该培养基按物理性质划分是_____培养基；按培养基的作用划分 _______—培养基，该培养基具有选择作用的原因是______________．（3）在该培养基中,可通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，依据的原理是_____________________________________．（4）若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素,可在培养基中_____________指示剂,尿素被分解后指示剂变 __________色。
土壤中分解尿素的细菌的分离计数导学案
班级，小组名：，姓名
图2－2－1
在直接计数中也需选择恰当的稀释度，也要求计数尽量准确，接近真实值，其方法：一是计数
中格中菌体数求平均值；二是计数每个中格内菌体数目时，遵循“计上不计下，计左不计右”的原则，防止边界个体的重复计数。
(3)计算公式：每毫升原液所含细菌数＝每小格平均细菌数×400
两种计数方法相比较，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活细菌数目低。
原因是：一方面由于两个或
多个细菌连在一起时，稀释涂布培养后只能观察到一个菌落；另一方面统计结果只是活细菌产生的菌落。
《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》导学案答案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数导学案答案一、研究培养基对微生物的选择作用1.筛选菌株(1)自然界中目的菌株的筛选①原理：根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。
②实例：能产生耐高温的Taq DNA聚合酶的Taq细菌就是从热泉中筛选出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
②实例：从土壤中筛选能分解尿素的细菌。
③方法：利用选择培养基进行微生物的筛选。
2.选择培养基(1)概念：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
(2)举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以尿素为唯一氮源，按物理性质归类为固体培养基。
1.筛选分解尿素的细菌的选择培养基下面是本课题使用的培养基的配方，请分析并回答下列问题：KH2PO4 gNa2HPO4 gMgSO4·7H2O g葡萄糖 g尿素 g琼脂 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL(1)该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质答案碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
(2)分离分解尿素的细菌的选择培养基是如何进行选择的答案该选择培养基的配方中，尿素是培养基中的唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
(3)为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长答案分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可将尿素分解成氨，从而为微生物提供氮源。
2.设计对照实验(1)如何设计对照实验验证该选择培养基的确筛选到了能分解尿素的细菌答案增设牛肉膏蛋白胨基础培养基并进行涂布平板操作，如果牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数，则说明选择培养基的确起到了筛选能分解尿素的细菌的作用。
(2)如何设计对照实验验证所用的选择培养基没有受到污染答案设置一个未涂布平板的能筛选分解尿素的细菌的选择培养基。
归纳总结选择培养基的分类(1)利用营养缺陷型选择培养基进行的选择培养：通过控制培养基的营养成分，使营养缺陷型微生物不能正常生长。
土壤中分解尿素的细菌的分离和计数导学案
． 尿素 1.0g
_____________指示剂，尿素被分解后指示剂变 __________色。
琼脂
15.0g
自来水 科目：生物 编号： 第1 页 共2页
定容至 1000mL
6
导
【学习难点】 对分解尿素的细菌的计数。
【预习案】
学
1、选择培养基的概念。 2、统计菌落的方法有哪些？ 3、土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作流程是：
【当堂检测】
1、下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 ( ) A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水
案 装
B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水 4、设置对照实验的目的是什么？ C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水
【探究案】
1、筛选菌株的原理及方法是？
D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水； 2、下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基配方：
阜南一中博雅 1+1 高效课堂导学案
编制人：刘维康 审核人：
领导签字：
编号:
时间：
年
月
日
小组：_____
姓名：______ 组内评价：______
教师评价：_______
课题 2
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
4、 如何判断培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落？怎样对分离出的菌种作进一 步的鉴定？
【学习目标】 1．研究培养基对微生物的选择作用，进行微生物数量的测定。 2．能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术解决生产生活中有关微生物的计数。 【学习重点】 对土样的选取和选择培养基的配制。 5、在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时，A 同学从对应的 10 倍培养基中筛选出 的大约 230 个菌落，但是其他在同样的稀释度下只选择出大约 100 个菌落。试分析原因并探究方案， 根据结果得出结论。
高中生物土壤中分解尿素细菌的分离与计数导学案
土壤中分解尿素细菌的分离与计数一、学习目标：1.研究培养基对微生物的选择作用。
2.进行微生物数量的测定。
二、自主学习一、研究思路1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理人为提供有利于________________生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时________或________其他微生物生长。
(2)选择培养基在微生物学中，将允许__________种类的微生物生长，同时________或________其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。
(3)分离分解尿素的细菌的选择培养基①在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是____________，提供氮源的是________，琼脂的作用是凝固剂。
②该培养基对微生物具有选择作用。
其选择机制是________________________________才能在该培养基上生长。
③土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们体内能合成________，将尿素分解的反应式是______________________________________________________。
Taq细菌能忍受93℃左右的高温，是在美国黄石国家公园的一个热泉中发现的，这说明，在寻找目的菌株时，要根据____________________________________________。
2．统计菌落数目的方法(1)稀释涂布平板法(也叫活菌计数法)①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的____________，通过统计平板上的________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作第一，设置重复组，增强实验的说服力与准确性。
将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择________稀释度的菌液，分别取0.1 mL接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下培养并计算菌落数。
为使结果接近真实值，可将同一稀释度涂布到三个或三个以上的平板上，培养并计算出__________。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、教学目标：1.能按照科学探究的要求，应用稀释涂布平板法和微生物数量测定的方法，设计从土壤中分离分解尿素的细菌并进行计数的方案。
2.依据设计的方案，运用无菌操作技术和微生物分离、培养的方法初步分离出目标菌。
3.尝试解决生产、生活中与微生物选择培养、计数等有关的实际问题。
二、教学重难点：教学重点：实验设计方案的设计与修正，正确进行实验操作教学难点：设计实验方案。
三、教学过程：提出问题（实验目的）：（1）从土壤中分离出能够分解尿素的细菌。
（2）统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌。
基础知识（实验原理）：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。
选择培养基配方： 组分 含量KH 2PO 41.4g Na 2HPO 42.1gMgSO 4·7H 2O0.2g葡萄糖10.0g 尿素1.0g 琼脂 15.0gH 2O定容至1000mL 实验设计：请同学们阅读教材19页资料，思考有关问题，小组合作进行实验设计，写出详细的实验方案，交流修正。
实验步骤：按照方案，选择合适的实验材料，进行实验。
(一）、土壤取样细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3～8cm 的土壤层。
因此，取样时一般要铲去表层土。
将样品装入纸袋。
注意事项：取土样时用的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌。
操作完成后，一定要洗手。
(二）、制备培养基用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照组，用以尿素为唯一氮源的培养基做实验组，用来判断选择培养基是否具有选择作用。
(三）、样品的稀释与涂布平板（稀释涂布平板法）简要回顾操作梯度稀释：在酒精灯火焰旁称取10g土壤，放入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，振荡使土壤与水充分混合，将细菌分散，制成101倍土壤稀释液。
用1支1mL无菌吸管从中吸取1mL土壤悬液注入盛有9mL无菌水的试管中，吹吸三次，充分混匀，制成102倍的土壤稀释液。
高中生物 土壤中分解尿素细菌的分离与计数导学案 新人教版选修1
高中生物土壤中分解尿素细菌的分离与计数导学案新人教版选修1【学习目标】XXXXX：1、巩固培养基对微生物进行选择的原理；巩固统计微生物数量的方法2、能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析与评价3、领悟生物与环境相适应的观点，体会微生物分离计数过程的严谨性、科学性。
【使用说明及学法指导】1、先回忆教材内容，构建知识流程图；通过导学案，完善知识系统。
2、本节重难点：学会统计微生物数量的方法，能进行实验设计与操作，并对实验结果进行分析与评价。
进一步形成无菌技术的意识。
基础回顾一、植物能够利用的氮元素主要以什么形式存在，农田施用尿素能直接被农作物吸收吗？二、筛选菌株的思路。
渗透生物与环境相适应的观点。
1、PCR技术需要什么酶，从什么生物中提取，从哪里获得？这提示我们，到自然界中筛选目的菌株需要怎么做？2、实验室中如何进行目的菌株的筛选？什么是选择培养基？对于尿素分解菌的培养基要注意些什么？三、分离与计数1、要分离微生物你如何选择所用的培养基类型和接种方法2、微生物的计数方法有几种？统计菌落数目是什么方法？菌落计数要注意些什么要求？四、分离与计数的实验流程设计，各步骤中你认为要注意哪些小知识。
五、实验的计划性1、做好标记：2、制定计划：能力提升一、请结合P24的三则资料设计表格，比较与几种微生物有关的数据。
二、如果知道尿素分解菌的稀释倍数为104~6设置对照：你如何设置对照，能达到什么目的，一共需要几个平板？三、（联系课题三）1、土壤中分解尿素细菌的分离与计数实验中如何鉴定分离到的细菌是分解尿素的细菌呢，这与纤维素分解菌的鉴定方法有区别吗？2、本实验中为什么没有使用液体培养基进行选择培养？四、（联系课题一）你认为如何进行无菌操作？课后练习：一、选择题1、可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是()。
A、以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B、以尿素为唯一氮源的培养基中加二苯胺试剂C、以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂D、以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂2、关于微生物的培养,下列叙述错误的是()。
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数学案一、学习目标1、了解从土壤中分离分解尿素的细菌的原理和方法。
2、掌握无菌操作技术和微生物培养的基本操作。
3、学会利用选择培养基分离微生物，并能对其进行计数。
二、学习重难点1、重点（1）从土壤中分离分解尿素的细菌的原理和方法。
（2）微生物培养的基本操作和无菌技术。
2、难点（1）选择培养基的配制和作用原理。
（2）微生物的计数方法和误差分析。
三、知识回顾1、培养基的类型和作用按物理性质可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。
按用途可分为选择培养基和鉴别培养基。
2、无菌技术包括消毒和灭菌。
消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子）；灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
3、微生物的接种方法平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
四、新课导入在农业生产中，尿素是一种常用的氮肥。
但尿素不能直接被农作物吸收利用，需要土壤中的细菌将其分解为氨，才能被植物吸收。
那么，如何从土壤中分离出能够分解尿素的细菌呢？这就是我们今天要学习的内容。
五、实验原理1、土壤中含有大量的微生物，其中就包括能够分解尿素的细菌。
这些细菌能够产生脲酶，将尿素分解为氨和二氧化碳。
2、在以尿素为唯一氮源的培养基上，只有能够产生脲酶的细菌才能生长繁殖，其他微生物则不能生长。
六、实验材料和用具1、实验材料土壤样品：从富含腐殖质的土壤中采集。
培养基：尿素固体培养基（尿素 10g、葡萄糖 05g、NaCl 05g、KH2PO4 02g、琼脂 20g、蒸馏水 100mL）。
2、实验用具无菌操作台、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱、涂布器、移液管、显微镜等。
七、实验步骤1、土壤样品的采集在富含腐殖质的土壤中，用无菌小铲铲取表层土 5~10g，装入无菌信封中。
高中生物教案：土壤中分解尿素细菌的季节变化及其影响
高中生物教案：土壤中分解尿素细菌的季节变化及其影响一、教学背景在高中生物学中，土壤中微生物对生态系统的作用是一个重要的话题。
而其中，分解尿素细菌在土壤中扮演着重要的角色。
本教案将以分解尿素的细菌为例，介绍土壤中微生物季节变化及其对生态系统的影响，以此帮助学生理解生态系统中的重要组成部分，并掌握科学的学习方法和环保意识。
二、教学目标1、知识目标：通过本课学习，学生将能够了解到土壤中生物的分解功能及其季节变化，掌握分解尿素的细菌生命活动的基本规律，理解微生物的生态作用。
2、能力目标：学生将培养科学思维能力，加深对微生物分解功能的认识；掌握合理利用土壤中微生物进行环境保护的方法。
3、情感态度目标：在本节课中，通过对微生物在土壤中分解作用的研究探究，学生将了解到人类与自然之间的关系及其对生态环境的影响。
基础上，将培养学生的环保意识和责任感。
三、教学内容本节课是一个关于高中生物的精品教案，主要涉及以下内容：1、介绍土壤中微生物的种类和功能；2、讲解尿素分解细菌的生命活动和季节变化；3、探究土壤温度等环境因素对分解细菌种群变化的影响；4、引导学生思考分解细菌的生态作用及排除土壤中细菌的方法。
四、教学过程1、介绍土壤中微生物的种类和功能，探究微生物在生态环境中的作用；2、引导学生思考分解细菌的特点及其生命周期；3、运用实验、图像等教学手段，介绍分解细菌的季节变化和土壤温度等因素对分解细菌种群的影响；4、引导学生分析微生物在土壤生态系统中的作用及其生态效益；5、对分解细菌及其生命活动的生态因素进行讨论与总结；6、在讲解过程中，鼓励学生提出各种自己的疑问，并启发学生围绕实际问题展开探究。
五、教学方法1、启发式教学法：通过发散思维和总结输出等方法启发学生的思考，引导学生自主学习和发现。
2、探究式学习法：通过自主探究、相互交流、共同发掘的方式，增强课程理解和学习的深度和广度。
3、实验探究法：设置适当的实验环节，带领学生亲自实践，进一步认识土壤中分解细菌的季节变化，及其时空分布特点。
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课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、筛选菌株
1、筛选微生物的原理：人为提供有利于生长的条件（包
括、温度、等），同时或其他种类微生物生长的培养基。
2、选择培养基：允许的微生物生长，同时或其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
3、欲得到分离分解尿素的细菌可以用以唯一氮源的培养基进行选择培养，因为该细菌可以产生，将尿素分解成，使培养基的PH ，所以若作进一步的鉴定可向该培养基长加入。
二、统计菌落数目
1、微生物活菌计数的常用方法是，其原理是：当样品的稀释度足够时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约有多少活菌。
利用公式：进行计算。
（C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积，M代表稀释倍数）
2、为了确保结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数，每个稀释度下至少涂布个平板，取菌落数的，且这三个平板的菌落数差异过大，
3、用这种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目，因为，因此统计结果一般用数而不是活菌数来表示。
4、也是测定微生物数量的常用方法。
三、设置对照
设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。
四、实验设计
1、土壤取样：细菌适宜在酸碱度接近的土壤中生长，绝大多数细菌在距地表约的土壤层。
2、样品稀释：测定土壤中细菌的数量，一般选用、
、的稀释液进行平板培养；测定放线菌的数量，一般选用、、的稀释液进行平板培养；测定真菌的数量，一般选用、、的稀释液进行平板培养。
3、微生物的培养与观察：细菌一般在的温度下培养
；放线菌一般在的温度下培养；真菌一般在的温度下培养。
4、菌落的特征包括菌落的、、和等方面。
五、操作提示
无菌操作：取土样的小铲子和盛土样的信封使用前都需要；应在取土样；在土壤稀释过程中，每一步都要在操作。
练习题
1.分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是( )。
①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖
⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐
A.①③⑤⑦
B.②④⑥⑧
C.①③⑤⑧
D.①④⑥⑦
2.下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。
据图分析正确的是
A．3号试管中的菌落稀释倍数为103倍
B．4号中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为5号的10倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个
D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
3.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是
A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
4.在农田土壤的表层自生固氮菌较多，用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上
培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是
①加抗生素②不加抗生素③加氮素④不加氮素
⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦37℃恒温箱中培养
⑧28～30℃温度下培养
A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦
5.从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的
A．将土壤用无菌水稀释，制备10－5～10－3土壤稀释液
B．将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上
C．用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌
D．从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株
6.关于对分解尿素的细菌进行分离、计数的实验叙述，错误的是
A．统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
B．统计菌落数目时，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少活菌。
C．设置对照的目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的干扰
D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，通过检测培养基的pH的变化，还不能准确鉴定培养基中的细菌就是能够分解尿素的那种。
7.下列关于从土壤中分离细菌的操作步骤中，正确的是( )
①土壤取样②称取10g土壤取出加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中
③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度
A．①→②→③→④ B．①→③→②→④ C．①→②→④→③ D．①→④→②→③8.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 ( )
A．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂、水
B．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、葡萄糖、琼脂、水
C．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、尿素、琼脂、水
D．KH2PO4、Na2HP04、MgS04·7H20、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水；
9.幽门螺杆菌简称Hp，主要寄生在胃幽门、胃窦等附近的黏膜上，是人类至21世纪
初唯一的已知胃部细菌． Hp可产生高活性的尿素酶．
（1）制备幽门螺杆菌培养基时，需将培养基的pH调至性．培养皿进行灭菌的常用方法是．倒平板时要待平板冷凝后，将平板
倒置，其主要原因是．
（2）图①表示的是用法接种培养后得到的结
果．图②是在纯化过程中通过法分离培养的结果，
在培养基上接种时接种环需通过灼烧灭菌，完成图中划线操作，至少需要灼烧接种环次．
（3）为检测某人体内是否感染了Hp，可让其服用14C标记的，定时收集呼出的
气体，通过分析呼气中14C标记的CO2的含量即可判断．该检测方法和卡尔文研究光合作用的方法一样可称为法．
10.尿素是一种重要的农业氮肥。
但是，尿素[CO（NH2）2]并不能直接被农作物吸收。
只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。
下图为从土壤中分离出能够分解尿素的细菌的主要步骤。
（1）本实验所需培养基按功能划分，属于培养基，唯一氮源应为。
（2）在配制该培养基时，依次进行如下操作：配制培养液、、分装、包扎、、搁置斜面。
（3）使用法可以获得如上图⑤中的单个菌落，用该方法统计菌落数目时，最好选择菌落数在间的平板进行计数。
在某一稀释度下平板上的平均菌落数为50个，所用稀释液的体积为0.2 ml，稀释倍数为105时，则每毫升样品中的菌落数为。
（4）采用固体平板培养细菌时，要将培养皿（正放或倒置），其目的是。