区分野生型和突变体果蝇实验
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区分野生型和突变体果蝇实验
一、【目的】
1、熟悉野生型和突变体果蝇的各种性状特征。
2、能够区分野生型和突变体果蝇。
3、区分几种常见的突变性状;白眼(w)、残翅(vgvg)、黑檀体(ee)。
二、【原理】
1、果蝇的各种类型及特点:
野生型灰身红眼直刚毛长翅圆眼
残翅灰身红眼直刚毛残翅圆眼
三隐形灰身白眼卷刚毛小翅圆眼
黑檀体黑身红眼直刚毛长翅圆眼
2、野生型果蝇为红眼、灰体、长翅、直刚毛。
”+”
突变体与野生型有明显差别:
白眼其他形状与野生一样。
”W”
乌身又叫黑檀体,”e”
残翅翅膀显著退化,部分残存,不能飞“vg”
野生型
突变体
三、【材料】
黑腹果蝇
四、【方法】
1、培养基的配制
⑴.
保存,因培养基较稀,可延长培养时间.两种培养基也可都用苯甲酸而不用丙酸.
2、果蝇的饲养
25度是其最适宜的生长温度。
3、果蝇的麻醉
果蝇麻醉方法
1.取下培养瓶塞,将培养瓶与麻醉瓶紧密对接;
2.左手握紧两瓶接口处,倒转使培养瓶向上;
3.右手轻拍培养瓶将果蝇震落到麻醉瓶中;
4.分开两瓶,将瓶盖各自盖好;
5.将麻醉瓶的果蝇轻拍到瓶底,迅速拔出塞子,滴上几滴乙醚,重新塞上麻醉瓶;
6.一段时间后,观察果蝇,不再爬动,并在瓶壁上站不稳,麻醉完成。
注意不能麻醉过度,如果果蝇的翅膀与身体呈45度角翘起,表明麻醉过度,不能复苏而死亡。
7.将麻醉好的果蝇倒出,在一张滤纸上,观察果蝇的性状。
8.将需要的果蝇用毛笔转移到一个新的培养瓶中,注意先将培养瓶平放,待果蝇苏醒后再将培养瓶直立起来,以防果蝇被新配制的略带粘稠的培养基粘住。
4、果蝇的转移
5、果蝇的杂交
(1).选处女蝇
选白眼焦刚毛小翅处女蝇8只,同时选野生型处女蝇8只。
方法:将野生型和白眼焦刚毛小翅果蝇培养瓶内的成蝇全部赶去,12小时内将重新孵化出的雌雄果蝇分开,即可得所需处女蝇和雄蝇。
(2).杂交
将白眼焦刚毛小翅处女蝇麻醉,并挑取野生型♂蝇8只麻醉后放入培养瓶,此杂交组合可用作伴性遗传和基因定位的观察统计。
将野生型处女蝇8只麻醉,同时将同样数量的白眼焦刚毛小翅雄蝇麻醉,放入培养瓶,此组合用于分离定律和伴性遗传实验的反交。
贴好标签。
注明杂交组合和日期,学生姓名。
3. 25℃条件下培养
7~8天后,赶去亲本蝇。
(3).观察F
1
11~13天后,F
1代羽化,用放大镜对正交组合的F
1
进行观察,看F
1
雌蝇是否为
野生型,雄蝇是否全为三隐性,若不是,表明处女蝇是非处女蝇,实验失败。
(4).F
1
正交
选8对F
1
雌雄蝇麻醉,转入新的培养瓶,进行正交,贴好标签。
(5).放飞F
1
8天后赶去F
1。
(6).观察F
2
12天后,F
2
羽化,将其麻醉后于白瓷板上用放大镜观察,或用解剖镜、显微镜观察各种表型的果蝇并统计数目,每隔2天观察一次,连续4次。
统计后的果蝇倒入死蝇盛留器中。
6、取亲本(处女蝇亲本)
7、F1带自交
8、再取亲本(F1亲本)
9、根据突变性状记录结果
一些常见的突变性状
野生型:灰身、长翅(长度约为腹部长度的两倍)、红眼、直刚毛(头胸部以及复眼的周围具有平直,先端略弯的长型粗黑硬毛);
突变体1:黑檀体、红眼、残翅、直刚毛
突变体2:白眼、灰身、长翅、直刚毛
突变体3:小翅(长度与身体相等)、白眼、焦刚毛
五、【讨论与结论】
六、【作业和文献】
作业
1.如何鉴别果蝇的雌雄?
2、如何区分野生型和突变体的要点?。