胰腺癌中14_3_3蛋白各亚型的表达及其临床意义

胰 腺 导 管 腺 癌 （ pancreatic
ductal
γ、 ε、 ζ、 η、 θ 和 σ 。 已有研究表明， 此类蛋白的某些 结肠癌和头颈部恶性肿瘤的发生 、 转移 亚型与胃癌、 有关
［ 2］
adenocarcinoma，PDAC ） 是一种恶性程度极高的消 化系统肿瘤， 患者 5 年生存率只有 3% ～ 5% ， 在过 去的 30 年中， 这一数据也没有任何提高
2 析。根据资料性质采用 Pearson χ 检验或 Fisher 确切概率
注：β、 γ、 ζ、 η 和 δ 型两组间比较有显著差异 P < 0. 05 ， ε 和 θ 型无显 著差异。
1433 蛋白与临床病理参数之间的关系 在 10 例胰腺高分化腺癌中， 1433 蛋白各亚型的阳性 2. 2 率在 20% ～ 80% 之间； 在 16 例中分化腺癌中阳性 率介于 31. 25% ～ 93. 75% 之间；4 例低分化腺癌在 0 ～ 50% 之间。1433 蛋白亚型在肿瘤不同分化程 度间的表达率无明显差异（ P > 0. 05 ） 。13 例有淋巴 结 转 移 的 胰 腺 癌 组 织 中， 阳 性 率 为 23. 08% ～ 92. 31% ；17 例无淋巴结转移的胰腺癌组织中， 阳性 其余 6 个亚 率为 23. 53% ～ 76. 47% ； 除 η 亚型外， 型的阳性 率 两 组 比 较 有 增 高 趋 势， 但差异不显著
mail：zengx@ pumch. cn 通讯作者：曾瑄。E-
诊断病理学杂志 2010 年 8 月第 17 卷第 4 期
· 295· 蛋白 7 个（ β 、 γ、 ε、 ζ、 η、 θ、 δ） 亚型均表达于肿瘤细胞 胞质 （ 图 1 ～ 8 ） ， 在 30 例胰腺癌组织中呈现不同程 度的 表 达 状 态， 其 阳 性 率 分 别 为 70% （ 21 /30 ） 、 83. 33% （ 25 /30 ） 、 26. 67 （ 8 /30 ） 、 73. 33% （ 22 /30 ） 、 33. 33 （ 10 /30 ） 、 30 （ 9 /30 ） 和 43. 33 （ 13 /30 ） ； 而在 19 例胰腺癌旁正常组织中总体上呈现低表达 ， 阳性率 5. 26% （ 1 /19 ） 、 15. 79% （ 3 /19 ） 、 42. 11% （8 / 分别为 19 ） 、 5. 26% （ 1 /19 ） 、 5. 26% （ 1 /19 ） 、 21. 05% （ 4 /19 ） 1433 蛋白 和 5. 26% （ 1 /19 ） 。两组比较分析表明， β、 γ、 ζ、 η 和 σ 5 种亚型具有显著差异 （ P < 0. 05 ） （ 表 1） 。
［ 1］
， 但在胰腺癌中的研究还非常少。 本研究采
。1433
33 蛋白各亚型在 用免疫组化 EnVision 法检测 14胰腺癌及癌旁正常胰腺组织中的表达， 初步探讨其 与胰腺癌的病理特点以及与临床预后的关系 ， 以期 对胰腺癌的发病机制能有更进一步的认识 。
蛋白是一组高度保守的蛋白质家族。 自 1965 年首 次被发现以来， 已经陆续找到许多此种蛋白的亚型 ， 目前， 在人类组织中主要发现 7 个亚型， 分别为 β 、
表1 30 例胰腺癌和 19 例癌旁组织中 1433 蛋白阳性表达率的比较
分组 胰腺癌 癌旁组织 n 30 19 1433 阳性率（ % ） β 21 1 γ 25 3 ε 8 8 ζ 22 1 η 10 1 θ 9 4 σ 13 1
1
1. 1
材料与方法
材料 01—200903 间胰 随机选取北京协和医院 2000-
腺癌手术切除标本 30 例， 其中男性 13 例， 女性 17 例；年龄 26 ～ 78 岁， 中位年龄 50. 06 岁。30 例的诊断均经病理证实为导 管腺癌， 其中高分化癌 10 例， 中分化癌 16 例， 低分化癌 4 例； 有淋巴结转移者 13 例。19 例癌旁正常胰腺组织作对照。 1. 2 方法 33 蛋白各个 免疫组化采用 EnVision 法检测 1433 γ、 亚型在胰腺癌中的表达 。兔抗人 14ζ 和 θ 蛋白多克隆 33 ε、 鼠抗人 14σ 和 β 单克隆抗体均购自 Santa Cruz 抗体、 33 η 多克隆抗体购自艾碧康（ Abcam） 公司。 公司；兔抗人 141433 蛋白各亚型抗体按 1 抗原修复采用 99. 9℃ 热修复法， ∶ 100 稀释， 室温下孵育 70 min， 辣根过氧化物酶（ HRP ） 标记 DAB 显色， 二抗结合， 苏木精复染， 树胶封固。 用 PBS 双蒸 水稀释液代替一抗作为阴性对照 。 1. 3 结果判定 1433 蛋白定位于细胞质， 免疫组化染色 呈棕黄色或棕褐色均质颗粒状 。 采用 Friedrich 等的免疫反 IRS 应评分（ immunoreactivity score，IRS ） 进 行 半 定 量 评 定， 积分为阳性细胞的百分数（ percent of positive cells，PP ） 与染 PP 判 色强度（ staining intensity，SI） 计分两者的乘积。其中， 断方法：选取染色均匀的肿瘤区， 在 400 倍视野下计数着色 0 ～ 25% 为 细胞占视野细胞总数的百分比， 无细胞染色为 0 ， 1， 26% ～ 50% 为 2 ， 51% ～ 75% 为 3 ，> 75% 为 4 。 SI 判断标 准：无染色为 0 ， 浅黄色为 1 ， 棕黄色为 2 ， 黄褐色为 3 。 染色 结果分级标准：0 为（ － ） ；1 ～ 3 为（ + ） ；4 ～ 6 为（ ） ；8 ～ 12 为（ ） ；（ ） 及以上作为阳性标本。 1. 4 统计学分析 采用 SPSS v17. 0 软件包进行统计学分
Expressions of 1433 protein isoforms and their significance in pancreatic ductal adenocarcinoma
YIN Yufenɡ1 ，ZENG Xuɑn1 ，TAO Liɑnyuɑn2 ，WANG Ke1 ，LIANG Zhiyonɡ1 Peking Union Medical College Hospital，Beijinɡ 100730 ，China） Correspoding author： ZENG Xuan （ Email： zengx@ pumch. cn） Abstract： Objective To investigate the expression of 1433 proteins and their clinical significance in pancreatic ductal Seven 1433 protein isoforms （ β，γ，ε，ζ，η，θ and σ ） were examined in 30 pancreatic Results The adenocarcinoma. Methods （ 1 . Department of Pathology，Peking Union Medical College Hospital，Chinese Academy of Medical Science，Beijinɡ 100730 ，China； 2 . Department of Surgery，
（ 1. 中国ห้องสมุดไป่ตู้学科学院 北京协和医学院 北京协和医院病理科，北京 100730 ） ［ 摘要］ 目的
100730 ； 2. 北京协和医院 基本外科，北京
33 蛋白各亚型在人胰腺导管腺癌组织中的表达情况及其临床意义 。方法 探讨 14-
采用石蜡包
33 蛋白各亚型在 30 例胰腺癌和 19 例胰腺癌旁正常组织中的表达状态， 埋组织进行免疫组化染色， 分析 14探讨 33 蛋白 β、 其与胰腺癌临床病理参数之间的关系 。结果 14γ、 ε、 ζ、 η、 θ 和 σ 7 个亚型在胰腺癌组织原发灶中表 83. 33% （ 25 /30 ） 、 26. 67% （ 8 /30 ） 、 73. 33% （ 22 /30 ） 、 33. 33% （ 10 /30 ） 、 30% （ 9 /30 ） 达阳性率分别为 70% （ 21 /30 ） 、 和 43. 33% （ 13 /30 ） 。其中癌旁正常胰腺组织的 β、 γ、 ζ、 η 和 σ 亚型阳性率与胰腺癌组织比较差异显著（ P < 0. 05 ） ， 33 蛋白阳性表达率与胰腺癌的分化程度 、 ε 和 θ 亚型阳性率比较差异不显著（ P > 0. 05 ） ；14恶性级别及淋巴结转 33 蛋白 7 个亚型中有 5 个在胰腺癌组织中高表达， 表明该蛋白在胰腺癌 移均无明显关系（ P > 0. 05 ） 。结论 14的发生过程中具有重要作用， 并且有可能成为胰腺癌基因治疗新的靶点 。 ［ 关键词］ 胰腺； 33 蛋白； 导管腺癌； 14免疫组化 ［ 1007 － 8096 （ 2010 ） 04 － 0294 － 04 中图分类号］ R735. 9 ［ 文献标识码］ A ［ 文章编号］
· 294·
doi：10. 3969 / j. issn. 10078096. 2010. 04. 020
J Diag Pathol， August 2010 ， Vol. 17 ， No. 4
33 蛋白各亚型的表达及其临床意义 胰腺癌中 141 尹玉峰 ，曾 1 2 瑄 ，陶连元 ，王 1 1 可 ，梁智勇
cancer tissues and 19 adjacent normal pancreatic tissues by immunohistochemical EnVision method.
positive rate of protein 1433 β，γ，ε，ζ，η，θ and σ isoforms in pancreatic cancer tissues was 70. 00% （ 21 /30 ） ， 83. 33% （ 25 /30 ） ， 26. 67 （ 8 /30 ） ， 73. 33% （ 22 /30 ） ， 33. 33 （ 10 /30 ） ， 30. 00 （ 9 /30 ） and 43. 33 （ 13 /30 ） ，and those in adjacent normal pancreatic tissues was 5. 26% （ 1 /19 ） ，15. 79% （ 3 /19 ） ，42. 11% （ 8 /19 ） ，5. 26% （ 1 /19 ） ， 5. 26% % （ 1 /19 ） ， 21. 05% （ 4 /19 ） and 5. 26% （ 1 /19 ） ，respectively. A significant difference was found between the two groups in the expression of β，γ，ζ，η and σ isoforms. But no relationship was found between 1433 proteins overexpression and differentiation，malignant degree，or lymph node metastasis. important role in the tumorigenesis of pancreatic ductal adenocarcinoma. Key words： Pancreatic； Adenocarcinoma； 1433 protein； Immunohistochemistry Conclusions The expression of 1433 β，γ，ζ，η and σ protein is higher in pancreatic cancer than adjacent normal pancreatic tissues. They may play an