实验 影响酶促反应的因素

实验报告 1．结合本次实验，说说影响酶作用的几个因素 2．根据实验结果，正确填写下列各表，并作简 单分析 • (1)温度影响 试管号 实验条件 加碘液后 颜色 冰 浴 结果分析
1 2 3
沸水浴 恒温水浴
(2)pH影响 试管号 实验条件
加碘液后 颜色
结果分析
1 pH5.0 2 pH6.8 3 pH8.0 (3)激动剂与抑制剂影响 试管号 实验条件 1 2 3 蒸馏 水 0.9 ％ NaCL 溶 液 l％CuS04溶液 加碘液后 颜色 结果分析
3．激动剂、抑制剂对酶活性的影响 (1)取试管三支，编号，按下表加入试剂 管号 1 2 3 试剂(滴) 10 蒸馏水 10 0.9％ NaCl溶液 1％CuSO4溶液 10 15 15 15Hale Waihona Puke BaidupH6.8缓冲液 5 5 5 1％淀粉溶液 5 5 5 稀唾液 (2)将各管摇匀，同时置37℃水浴中恒温10分钟 (3)取出各管，各滴加碘液l滴(切忌摇动)，观 察颜色并记录。
2．pH对酶活性的影响 (1)取试管三支，编号，按下表加入试剂 管号 1 2 3 试剂(滴) pH5.0缓冲液 15 pH6.8缓冲液 15 pH8.0缓冲液 15 1％淀粉溶液 5 5 5 稀唾液 5 5 5
(2)将各管摇匀，同时置37℃水浴中恒温10分钟 (3)取出各管，各滴加碘液1滴(切忌摇动)，观 察颜色并记录。
操作 1．温度对酶活性的影响 (1)取试管三支，编号，按下表加入试剂 管号 试剂（滴） pH6.8缓冲液 1％淀粉溶液
1
15 5
2
15 5
3
15 5
(2)混匀后，三支试管分别置于冰浴、沸水浴 、恒温水浴(37℃)中预温5分钟。再向各管加入 稀唾液5滴，继续在原水浴中放置10分钟。 (3)取出各管，各滴加碘液1滴(切忌摇动)，观 察颜色并记录。
思考題
加入碘液观察结果以前，切忌摇动。你 不妨试试在观察后把不起蓝色反应的试管摇 动几下，或再滴加碘液，很可能会变为蓝色。 这是什么缘故?
本实验利用碘与淀粉及其水解产物(大分子 糊精、麦芽糖)的颜色反应，来比较唾液淀粉酶 在不同条件下催化淀粉水解的速度，从而判断 温度、pH、激动剂和抑制剂对酶活性的影响。 淀粉………………→糊精……………→麦芽糖 与碘呈 与碘呈 与碘 蓝色 紫色至红色 不呈色
试剂
1．1％淀粉溶液 2．新鲜配制的稀释唾液 3．不同pH缓冲液 (1)pH6.8缓冲液 (2)pH5.0缓冲液 (3)pH8.0缓冲液 4．0.9％NaCI溶液(即生理盐水) 5．1％CuSO4溶液 6．碘液
影响酶促反应的因素
课堂目标 1．掌握影响酶作用的几个因素及 实验 的原理 2．以严谨的科学态度进行实验操作，准 确记录。并对结果进行讨论分析，完成 实验报告
实验原理 酶促反应在低温时，反应速度较慢甚至停止 。随着温度升高，反应速度逐渐加快。当达到最 适温度时，酶促反应速度达最大值。人体内大多 数酶的最适温度在 37℃左右。如温度过高，反 应速度反而下降，甚至停止。这主要由于酶蛋白 因高温变性失活之故。 酶活性与溶液pH有关，pH既影响酶蛋白本身 构象，也影响底物解离程度，从而改变酶与底物 结合和催化作用。故每种酶都有其最适pH的作用 环境。过酸过碱均可引起酶蛋白变性而降低或失 去活性。唾液淀粉酶的最适pH为6.8。氯离子对 该酶活性有激动作用，铜离子则有抑制作用。